茶渣中蛋白质提取方法研究进展

中国是茶叶生产与消费大国,每年在生产茶多酚、茶饮料、速溶茶等产品的同时,产生大量的剩余残渣,这些茶渣中残留多种营养成分,其中蛋白质含量高达20%左右,绝大部分是非水溶性蛋白质的谷蛋白和醇溶性蛋白,同时研究发现茶蛋白具备降血脂、抗氧化、消除自由基及预防辐射等积极的作用;但茶蛋白结构复杂,对茶渣中茶蛋白的提取、纯化等均有一定的技术难度,本文主要针对茶蛋白提取方法(碱法提取、酶法提取、复合提取法)、茶蛋白纯化及茶蛋白的特性等进行阐述,并对存在的问题进行了讨论,以期为茶渣中蛋白质的研究提供参考。     

胶体金读数仪在快速检测中的应用研究进展

胶体金免疫层析技术以其成本低、操作简单、灵敏度高等优点在微生物、重金属和真菌毒素检测等方面应用广泛。胶体金读数仪作为胶体金免疫层析技术与现代自动化检测技术交叉得到的新产物,以其检测迅速、可定量、直观反映检测结果等特点在食品安全快速检测中备受关注。本文详细介绍了胶体金读数仪中信号采集模块、信号处理模块、人机交互模块和附加模块4部分的功能结构,及其在农兽药、食品添加剂、真菌毒素、微生物和综合检测等方面的应用,并分析了胶体金读数仪在可追溯系统方面的应用潜力和在智能化和多功能化方面的未来发展方向,为胶体金读数仪的进一步研究提供借鉴。     

酶联免疫法检测复合调味料中黄曲霉毒素B1含量

目的酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)快速检测复合调味料中黄曲霉毒素B_1的含量。方法用70%甲醇水溶液提取非含油型复合调味料中的黄曲霉毒素B_1待测液,含油型复合调味料则首先加入石油醚将油萃取出来,后加入70%甲醇水溶液抽提。使用酶联免疫法进行定量限、回收率与重复性等实验。结果使用不同前处理的检测结果的定量限为3μg/kg,相对标准偏差分别为2.06%和2.73%;回收率范围在90%～110%之间;重复性平均值分别为10.77μg/kg和10.84μg/kg,相对标准偏差分别为3.89%和2.44%。结论复合调味料通过不同的前处理方法,后使用酶联免疫法检测复合调味料中黄曲霉毒素B_1结果准确,重复性较好。     

胶体金免疫层析法快速检测动物源性食品中土霉素残留

目的 建立用于快速检测动物源性食品中土霉素残留的胶体金免疫层析试纸条.方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,胶体金粒径选用20 nm,将经鉴定制备成功的胶体金溶液与土霉素多克隆抗体结合得到金标抗体.优化金标抗体的制备条件,将包被抗原(1.0 mg/mL)和羊抗鼠二抗(0.75 mg/mL)分别作为检测线和质控线包被在硝...     

胶体金免疫层析法定量检测猪肉中克伦特罗

建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简便提取方法,其中采用0.02 mol/L,含2.8%NaCl的HCl溶液抽提猪肉样品2次的提取方案,克伦特罗的平均回收率达到76.7%,变异系数为7.4%。实际样本加标回收实验显示,加标量为0.5、1.0、2.0及3.0 ng/g时,胶体金试纸条检测回收率分别为(60.4±12.8)%,(70.24±4.2)%,(75.9±4.9)%,(71.1±5.0)%。与传统ELISA方法比对,结果显示2种方法具有较好的相关性(R2=0.9136)。以上实验结果证实,基于T/C比值法的胶体金免疫层析试纸条可用于猪肉组织样品中克伦特罗的快速及定量检测。     

基于单克隆抗体的胶体金免疫层析法快速检测丁香酚

目的 采用免疫层析技术对丁香酚残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条的制备开展研究。方法 用柠檬酸三钠还原法制备胶体金纳米颗粒, 标记丁香酚单克隆抗体得到胶体金-丁香酚单克隆抗体复合物。以硝化纤维素膜为固相载体, 包被丁香酚-BSA偶联物为检测带(T带), 羊抗鼠IgG为质控带(C带), 建立了丁香酚的胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果 胶体金免疫层析试纸条具有较高的灵敏度和特异性, 检出限为2.0 mg/L。结论 本研究所开发的胶体金免疫层析试纸条可作为快速测定丁香酚的可靠、低成本的方法。     

胶体金免疫层析法快速测定玉米和小麦中玉米赤霉烯酮

采用高效液相色谱法对玉米赤霉烯酮阳性样品进行定值,将阳性样品制备为不同毒素含量的验证样品,对胶体金免疫层析法的准确性、重复性、稳定性、最低检出限、误差范围进行了验证试验,并且完成了对实际样品的检测,同时采用酶联免疫法（ELISA）进行对比,试验结果为：最低检出限为60μg/kg,其检测结果与酶联免疫法基本一致,方法具有...     

胶体金免疫层析法快速检测果蔬中的三唑酮及其代谢物残留

目的 建立胶体金免疫层析法快速检测蔬菜水果中三唑酮及其代谢物农药残留的分析方法。方法 采用胶体金标记三唑酮单克隆抗体, 利用胶体金的可视化及抗体与抗原的特异性结合, 实现对果蔬中三唑酮农药残留的定性和半定量检测。结果 本方法对黄瓜和香蕉中三唑酮及其代谢物的总残留量检出限分别为0.05和0.85 mg/kg, 均低于国家标准食品中三唑酮农药最大残留限量(0.1~1 mg/kg), 该试纸条对其他农药无交叉反应, 重复性良好。结论 该方法具有高灵敏度、高特异性, 可快速准确的检测大批量样品中的三唑酮及其代谢物农药残留, 能够满足应急超标事件的现场检测需求。     

胶体金快速试纸条法测定小麦及其制品中呕吐毒素

用胶体金快速试纸条法测定小麦及其制品中呕吐毒素,方法快速,定量结果较为准确,回收率在86.67%~120%。与高效液相法进行比较,结果表明这2种方法对呕吐毒素的检测没有显著的差异,其回收率略高于高效液相法,但变异系数大。在较低浓度(1 500μg/kg)时,快速法与高效液相法有一定的线性关系Y=1.077 3X+83.786(Y为胶体金快速法测得值,X为高效液相法测得值,R~2=0.963 7)。     

不同品牌胶体金免疫层析法试剂检测原料乳中氟苯尼考的研究

目的 采用一种新型快速的免疫学检测技术, 胶体金免疫层析法试剂检测原料乳中氟苯尼考药物残留量。方法 选用阴性原料乳为研究样本, 向其中加入不同浓度水平的氟苯尼考标准物质, 制成不同浓度水平的样本, 样本不需要前处理, 直接进行检测, 按照所购买的5种不同品牌氟苯尼考快速检测试纸条的操作方法进行验证比对。结果 选用5种不同品牌试剂检测时, 发现品牌C、D试剂检出限均达到了0.05 μg/kg; 20组样本重复检测阳性率均为100%; 检测时间较短, 均在10 min之内; 检测交叉反应率均为0%; 检测无干扰。在检出限、重复性、特异性、干扰性等方面, 品牌C、D试剂方法较好, 满足检测要求。结论 品牌C、D试剂具有简单快速、灵敏度高、特异性强等特点, 能够作为乳制品企业一种快速初筛原料乳中氟苯尼考药物残留的定性检测方法。     

硝苯地平免疫胶体金探针的制备

目的优化硝苯地平药物的免疫胶体金探针的制备条件。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,采用紫外分光光度法在400~700 nm处测定胶体金溶液吸光度,判断胶体金颗粒大小。调整标记胶体金溶液p H、抗体蛋白量以及复溶液等因素,试制试纸条并进行加标验证实验,确定制备免疫胶体金探针的最优条件。结果实验制备胶体金颗粒大小在20~40 nm;最佳制备条件为:单抗标记p H为9.0,单抗标记量为5.0μL,复溶液为0.5 mol/L Tris(p H 9.0,含0.5%Tween20)。经加标实验验证,试纸条的检测灵敏度可以达到设计要求。结论硝苯地平免疫胶体金探针的制备条件优化,可为下一步制作高质量的免疫胶体金试纸条提供技术准备,可应用于对食品中非法添加硝苯地平的快速检测。     

胶体金免疫层析法快速检测烟草中吡虫啉残留

目的建立胶体金免疫层析法快速检测烟草中残留的吡虫啉。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,并用它标记吡虫啉单克隆抗体,建立并优化胶体金免疫层析法。结果本方法对烟草中吡虫啉的检测限为5μg/mL,重复性较高,有假阳性情况出现,但假阳性率较低,与烟草中其他常用药物没有交叉反应,特异性良好,且与气相色谱检测法所得的结果差异较小。结论该方法快速、高效、可靠,可满足现场快速检测烟草中吡虫啉残留的需要,实现生物技术在烟草流通、消费领域的方便、快速检测。     

胶体金免疫层析法测定牛羊肉中掺杂鸡肉

目的 建立胶体金免疫层析法快速检测牛羊肉中掺杂鸡肉的方法.方法 采用柠檬酸三钠制备胶体金溶液,以真空干燥的方式制备有金标抗体的微孔试剂,将鸡IgY包被于硝酸纤维素膜(NC膜)的检测线(T线),兔抗羊抗体包被于硝酸纤维素膜(NC膜)的质控线(C线),向硝酸纤维素膜依次贴上吸水纸和样品垫,切条组装成试纸条.样品经磷酸盐处理...