免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中游离叶酸含量

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中游离叶酸的方法。该方法样品处理为样品用磷酸盐缓冲液溶解后,样液通过叶酸免疫亲和柱净化、甲醇洗脱液洗脱、浓缩富集后直接测定。色谱条件为:Waters C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,以20mg己烷磺酸钠+10mL冰乙酸+1.3mL三乙胺定容1L,pH3.2):甲醇（80∶20,V/V）作为流动相;流速为1mL/min;检测波长为280nm。标准曲线回归方程y=-185.68+290.29x,相关系数R2=0.9997;回收率为88.2%;RSD为1.99%。本方法检出限为40μg/kg。该法较国标方法具有样品处理简单方便、灵敏度高、重现性好、分析时间短等优点,可以满足调制乳粉及婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的测定。      

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中的生物素含量

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中生物素的方法。该方法样品处理为样品用磷酸盐缓冲液溶解后,样液通过生物素免疫亲和柱净化、甲醇洗脱液洗脱、浓缩富集后直接测定。采用紫外检测器,波长为215 nm;C18色谱柱,柱温为35 ℃,流动相为50 mmol/L磷酸缓冲盐,PH=3.5:甲醇(85:15,v/v),流速为1.0 mL／min。标准曲线回归方程y=343.2+20.797x,相关系数r=0.9958;回收率为90.7%;RSD%为2.62。本方法检出限为1.0 μg/kg。该法较国标方法具有样品处理简单方便,灵敏度高,重现性好,分析时间短等优点,可以满足调制乳粉及婴幼儿配方乳粉中生物素含量的测定。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定红曲制品中桔霉素的含量

目的建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定红曲制品中桔霉素含量的分析方法。方法试样经甲醇-水提取,稀释过滤后经含桔霉素特异性抗体的免疫亲和柱净化,洗脱液经Merk Hibar RP-18e色谱柱分离,以乙腈:0.1%磷酸水溶液作为流动相,采用荧光检测器测定(激发波长350 nm,发射波长500 nm),以外标法定量。结果桔霉素在1~50 ng/m L范围内有良好的线性关系,相关系数为0.99991,方法检测限为50μg/kg,在50、100和200μg/kg 3个水平的加标回收率为67.55%~89.12%,相对标准偏差为5.43%~11.25%。结论该方法操作简便、准确,可适用于红曲制品中桔霉素的测定。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测两种饮料中双酚A含量

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱荧光检测法(IAC-HPLC-FL)检测豆奶及橙汁饮料中的双酚A含量。采用甲醇提取、离心、磷酸缓冲溶液稀释后,经免疫亲和柱纯化,用1 mL甲醇-水(80:20,体积/体积)洗脱,应用高效液相色谱法检测。以C₁₈柱为分离色谱柱,甲醇-水(60:40,v/v)溶液为流动相洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30℃,进样量10 μL,荧光检测器检测,激发波长228 nm,发射波长310 nm。结果表明:在1.0~300.0 ng/mL的浓度范围内,双酚A的浓度与峰面积呈良好的线性关系(相关系数R²=0.9998),检出限定为1 ng/mL。平均回收率为82.5%~104.6%,相对标准差为2.3%~6.4%。分别选取玻璃瓶装和塑料瓶装的豆奶和橙汁饮料进行双酚A含量检测,玻璃瓶装的豆奶和橙汁饮料中双酚A含量均小于检出限1 ng/mL,而某款塑料瓶装的豆奶和橙汁饮料检测出极其微量的双酚A,其双酚A含量分别为1.44、1.57 ng/mL,处于可接受水平。该方法简单快速、灵敏度高、重复性好,能够有效地分离和检测饮料中的双酚A,适用于豆奶和橙汁等饮料中的双酚A的测定。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定食品中玉米赤霉烯酮的含量

本文建立了食品中玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-高效液相色谱法定量检测方法。结果表明,玉米赤霉烯酮在5.00～50.00 ng/mL线性关系良好,相关系数为0.999 91,样品回收率为83.9%～95.9%,相对标准偏差为0.2%～8.7%。该方法准确性度高,精密度好,可用于食品中玉米赤霉烯酮含量的检测。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定玉米油中F-2毒素含量的研究

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定玉米油中F-2毒素的方法。样品经前处理后通过免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱仪-荧光检测器进行检测。该方法最佳测定条件为:选用IAC-AZ型免疫亲和柱,柱吸附容量4μg;流动相乙腈-甲醇-水(体积比46∶46∶8),流速1.0m L/min;提取溶剂乙腈-水(体积比90∶10)。F-2毒素的质量浓度在0~250 ng/m L的范围内与峰面积呈良好的线性关系,方法检出限为0.06μg/kg,平均回收率为92.46%,RSD为0.942%~1.758%。该方法操作简便快捷、准确度高、重现性好,适用于玉米油中F-2毒素的测定。     

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定牛乳中黄曲霉毒素M1

研究了单克隆免疫亲和柱－高效液相色谱法测定牛乳中黄曲霉毒素M1的方法。样品通过离心脱脂,脱脂乳用免疫亲和柱净化,SpherisorM C18色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量。对添加不同含量水平的黄曲霉毒素M1 5次重复实验的平均回收率为80．4％－88．7％。变异系数（CV）为7．7％－8．9％。检测低限为0．05μg/kg。     

单克隆免疫亲和柱—高效液相色谱法测定小麦中致呕毒素

研究了单克隆免疫亲和柱－高效液相色谱法测定小麦中致呕毒素的方法。样品通过水提取,提取液用免疫亲和柱净化,Spherisorb C18色谱柱分离,紫外检测器检测,外标法定量。对添加不同含量不平的致呕毒素,5次重复实验的平均回收率为69.6%-81.8%。变异系数（CV）为5.7%-8.3%。检测低限为0.02mg/kg。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定大米、玉米、辣椒中的橘霉素

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定农产品中橘霉素的方法。试样经甲醇-水提取,稀释、过滤后通过含有橘霉素特异性抗体的免疫亲和柱净化,洗脱液用C18色谱柱、乙腈-三氟乙酸溶液(60:40,V/V)分离,荧光检测器测定(激发波长331nm,发射波长500nm),外标法定量。结果表明：色谱峰面积与橘霉素含量之间有良好的线性关系,方法的检出限为10μg/kg,定量限为30μg/kg,加标回收率为61%～96.6%,相对标准偏差为3.72%～6.40%。该方法操作简便、准确,回收率高、精密度良好、重现性好,可用于大米、玉米、辣椒中橘霉素的测定。     

复合免疫亲和柱净化高效液相色谱法同时测定小麦中的4种真菌毒素

建立了一种复合免疫亲和柱净化高效液相色谱法同时测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B,和赭曲霉毒素A 4种真菌毒素的分析方法.样品利用80％的乙腈水溶液(v/v)提取后,采用复合免疫亲和柱净化,并通过高效液相色谱仪进行分离.色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6...     

反相高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中叶酸的含量

目的:建立了快速、灵敏地检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的方法.方法:在配方乳粉中加入60%的高氯酸溶液去蛋白,取一定量的滤液经过舍有C18填料的固相萃取小柱进行除杂,再经过高锰酸钾衍生后利用反相高效液相色谱测定叶酸的含量.流动相选用pH5.0的浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液,流动相流速为1.0mL/min,经BDS C18色谱柱进行分离(柱温为30℃).结果:方法在0.005～1.5μg/mL范围内线性良好,方法的回收率为91.7%-98.3%,RSD为2.5%.结论:应用本方法检测婴幼儿配方乳粉中的叶酸,具有操作简单、精密度高、重现性好、容易推广等优点.     

Determination of folic acid in milk, milk powder and energy drink by an indirect immunoassay

BACKGROUND: Folic acid (FA) is essential for healthy people (reference daily intake 400 µg day^?1) and pregnant women (600 µg day^?1). Insufficient intake of FA will increase the risk of neural tube defects in newborns. In this study an indirect enzyme‐linked immunosorbent assay was developed for rapid and convenient detection of FA in vitamin‐fortified foods. RESULTS: A carbodiimide‐modified active ester method was used to synthesise the immunogen (FA–bovine serum albumin (BSA) conjugate) to raise polyclonal antibodies for FA. The coupling ratio of FA with BSA was determined to be 14:1 (molar ratio). The detection limit of the immunoassay was 3.0 ng mL^?1 in buffer, 3.52 ng mL^?1 in energy drink, 11.91 ng mL^?1 in milk and 16.50 ng mL^?1 in milk powder. Intra‐ and inter‐assay variability ranged from 6.6 to 15.1%. Analytical recoveries of FA‐spiked samples were 88.3–108.9%. CONCLUSION: The immunoassay developed in this study can be used as a simple, rapid and accurate method for fast semi‐quantitative and quantitative on‐site analysis of FA in food products. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

高压液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中叶酸

研究了高效液相色谱法测定乳粉中叶酸的方法。利用荧光检测器柱后衍生的办法，用ODS3色谱柱分离，外标定量。本方法回收率为91．1％，变异系数为2．28％，最低检出限为0．096μg／g。     

氨基酸分析仪检测婴幼儿奶粉中牛磺酸含量

目的建立一种氨基酸分析仪测定婴幼儿奶粉中牛磺酸含量的分析方法。方法样品经0.01mol/L盐酸溶液溶解并用106 g/L亚铁氰化钾溶液和219 g/L乙酸锌沉淀蛋白质后10000 r/min离心10 min取出,精密取上清液置20mL量瓶中,用上样溶液(pH2.2)定容后,采用氨基酸分析仪钠系统进行程序洗脱,LCA K06/Na色谱柱进行分离,茚三酮溶液衍生显色,在570nm波长下测得牛磺酸色谱峰,用外标法峰面积定量,保留时间定性。结果牛磺酸在5.544～110.880μg/mL浓度范围内有良好的线性关系(r=1.0000),回收率为101.47%,相对标准偏差为1.6%(n=9)。结论该方法简单、便捷、准确性高,适合于婴幼儿奶粉中牛磺酸的定量分析。     

紫外分光光度法测定含乳饮料中游离氨基酸含量

牛奶中游离氨基酸主要是谷氨酸、甘氨酸,其含量在一定的范围内;笔者对含乳饮料中游离氨基酸的含量的试验条件进行了研究,建立了紫外分光光度法测定游离氨基酸含量的测定方法。结果表明乙酸锌和亚铁氰化钾溶液作沉淀剂,沉淀效果较好,用乙二醇作茚三酮的溶剂比乙二醇独甲醚的稳定性好,方法具有良好的回收率和重复性。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法检测乳制品中氯霉素

建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法快速测定牛奶和奶粉中氯霉素残留物。样品用乙酸乙酯提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱-紫外法检测。结果表明,牛奶和奶粉添加氯霉素,回收率为79.6%~108.6%,变异系数小于10%;方法检测灵敏度0.1μg/L。该方法能够特异性的纯化牛奶和奶粉样品中的氯霉素,免疫亲和柱(IAC)净化是一种简单,快速,准确的方法。     

微孔板式微生物法测定婴幼儿配方乳粉中泛酸含量

目的 采用微孔板式微生物法对婴幼儿配方乳粉中泛酸含量进行测定.方法 采用微孔板法将合适浓度的植物乳杆菌液接种至含有试样液与培养液的无菌微孔板中,培养一定时间后测定吸光度值,根据泛酸含量与吸光度值的标准曲线计算出试样中泛酸的含量.通过精密度实验、准确度实验、加标回收实验对此方法进行评价.结果 微孔板式微生物法的标准曲线线...     

奶粉中低聚肽质量浓度测定方法

以四肽Gly—Gly—Tyr—Arg为标样做标准曲线，用质量浓度为100g／L的三氯乙酸沉淀奶粉中的大分子蛋白质，经离心过滤后，在上清液中加入双缩脲试剂，于540nm下测定其OD值，查标准曲线计算出样品中的肽质量浓度。     

利用不确定度比对乳粉中叶酸含量的快速检测方法

目的 利用不确定度比对乳粉中叶酸含量的快速检测方法。方法 分别用进口和国产的微生物法和酶联免疫法的试剂盒对代表性乳粉样品进行3 d 3平行检测, 对检测数据做正态分布分析及不确定度计算。结果 各方法检测结果正态分布检验值(anderson-darling, AD)均小于临界值0.725(95%置信区间), 服从正态分布; 微生物快速检测方法不确定度范围为13.3%~27.4%; 酶联免疫方法不确定度范围为9.6%~ 31.3%。结论 微生物试剂盒快速检测方法, 具有稳定性较好, 品牌差异较小的特点, 适合质控品的长期监测, 质控图的建立。酶联免疫检测方法, 具有简单、快速的特点, 适合样品中叶酸的快速检测。