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柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸的含量 总被引:1,自引:0,他引:1
建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、牛磺酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸)的分析方法.采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测饮料中16种氨基酸的含量.使用DiamonsilTMCl8色谱柱(250 min×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 moL/L乙酸钠,B为乙腈;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温40 ℃;进样量20"L.在各氨基酸的线性范围内,16种氨基酸的线性相关系数r在0.9996~0.9999,平均回收率为96.0%~104.0%.日内精密度RSD为0.51%~1.87%,日间精密度RSD为0.52%~1.89%.结果表明本方法专属性强.操作方便,灵敏度高,可用于饮料中氨基酸的含量检测. 相似文献
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目的确定反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC)测定稻米氨基酸含量最适柱前衍生化时间。方法以氨基酸标准品以及稻米氨基酸提取物为对象,对柱前衍生化时间与氨基酸检测结果之间的关系进行研究。结果邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde, OPA)和3-巯基丙酸与氨基酸的衍生化反应进行到15 min时,氨基酸的峰面积达到最大值,不同OPA-氨基酸衍生化产物的稳定性存在很大的差异。在15~300min的衍生化反应中,酪氨酸和苯丙氨酸衍生物的峰面积保持在非常稳定的水平上;而侧链含有羟基的丝氨酸和苏氨酸对衍生化时间特别敏感,衍生化时间超过15min后,其衍生物的峰面积开始快速下降;当衍生化时间在15~60min之内时,15种氨基酸中,只有酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和丙氨酸9种氨基酸的衍生物峰的面积下降幅度小于5%。结论柱前衍生化时间对稻米氨基酸衍生物峰面积的检测值较为敏感,衍生化时间控制在15 min之内能有效减小实验误差。 相似文献
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PITC柱前衍生反相高效液相色谱法测定维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量 总被引:1,自引:0,他引:1
建立反相高效液相色谱法检测维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量的分析方法。维生素功能性饮料中的L-赖氨酸和牛磺酸通过苯异硫氰酸酯(PITC)柱前衍生,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯胺基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经RP-HPLC梯度洗脱后检测维生素功能饮料中L-赖氨酸盐酸盐和牛磺酸的含量。使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150mm 5-Micron),流动相A为0.1mol/L的乙酸钠溶液,流动相B为乙腈;流速为1.0mL/min;检测波长为254nm;柱温27℃;进样量20μL。牛磺酸和L-赖氨酸在线性范围内相关系数r0.999,回收率大于97.6,日内RSD分别为0.54%和0.46%(n=6)。结果表明本方法操作性强、灵敏度高,适用于维生素功能饮料中牛磺酸和L-赖氨酸的检测。 相似文献
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研究了高效液相色谱法测定酶法制备L-色氨酸的最佳参数。结果表明,流动相分配比V(磷酸二氢钾溶液)∶V(甲醇)=30∶70,流量1 m L/min,C_(18)柱分离,柱温38℃,检测波长265 nm时为高效液相色谱法检测L-色氨酸的最佳参数。回收率在92.00%~110.00%,外加丝氨酸没有干扰发酵液中L-色氨酸含量测定。此方法用于样品中的L-色氨酸的测定,分离效果良好。 相似文献
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《食品科技》2015,(1)
目的:采用柱前衍生超高效液相色谱法,建立黄秋葵种子及种皮中游离氨基酸含量的检测。方法:以Acc Q-Fluor衍生化试剂盒对黄秋葵种子及种皮中的氨基酸进行柱前衍生,衍生化反应后,采用超高效液相色谱检测,根据17种标准氨基酸对照品的保留时间定性,采用峰面积外标法定量计算含量。结果:17种氨基酸在0.003~0.18 mg/m L内有良好的线性关系(r20.9990),平均回收率(n=6)为98.5%。该方法10 min内17种氨基酸能够完全分离。此外,黄秋葵种子中含有17种氨基酸,总游离氨基酸含量为126.70 mg/g,其中必需氨基酸约42.16 mg/g,非必需氨基酸约84.53 mg/g。种皮中含有15种氨基酸,总游离氨基酸含量为51.9 mg/g,必需氨基酸约18.48 mg/g,非必需氨基酸约33.47 mg/g。结论:黄秋葵种子及种皮中主要以亮氨酸、缬氨酸、谷氨酸和天冬氨酸为主,可以作为营养功能食品进一步开发。 相似文献
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分析奇亚籽中脂溶性成分并建立一种柱前衍生-反相高效液相色谱法检测奇亚籽中游离氨基酸及总氨基酸的含量。采用气质联用的方法对奇亚籽中脂溶性成分进行分析,采用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生,采用梯度洗脱,于254 nm波长处检测21种氨基酸含量。挥发油中鉴定出化学成分14个,其中亚麻酸的含量最高可达83.41%。21种氨基酸在0.005 0 mmol/L~3.250 0 mmol/L内呈良好的线性关系(R2≥0.999 0)。21种游离氨基酸的平均加样回收率在93.68%~102.36%之间,RSD在0.91%~2.76%之间(n=6);水解氨基酸的平均加样回收率在94.86%~105.73%之间,RSD在0.75%~2.83%之间(n=6)。奇亚籽脂溶性成分主要为脂肪酸,其中含量最高的为O-mega3多不饱和脂肪酸α-亚麻酸,柱前衍生反向高效液相色谱法经方法学验证具有良好的重复性和稳定性,适用于奇亚籽中氨基酸含量的测定。 相似文献