产共轭亚油酸乳酸菌的选育及培养基的确定

共轭亚油酸(conjugatedlinoleicacid简称CLA)是一种具有多种生理活性的天然脂肪酸。用气相色谱法对十八株乳酸菌产共轭亚油酸的能力进行比较,发现十四株乳酸菌具有明显的产共轭亚油酸的能力,其中德氏乳杆菌保加利亚亚种(L.delbrueckiisubsp.bulgaricus)a2的产量最高,为4.06μg/mL,并且在MRS培养基的基础上确定了乳酸菌产共轭亚油酸的最佳碳源为果糖,氮源为硫酸铵。     

植物乳杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸条件的研究

研究了植物乳杆菌AS1.555转化亚油酸为共轭亚油酸的条件。该菌株在MRS培养基中经0.1%(v/v)的亚油酸诱导培养后,所得的洗涤细胞具有很强的转化能力。通过单因素实验和正交实验得到植物乳杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸的优化反应条件:反应温度30℃、反应时间48h、游离亚油酸浓度1.5%(v/v)、0.1mol/L磷酸缓冲液pH7.0。     

氮源对解脂耶氏酵母合成共轭亚油酸的影响

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株合成反-10,顺-12-共轭亚油酸的产量,以YNBDSa为发酵培养基进行摇瓶发酵,研究氮限制策略及氮源种类对菌株合成脂肪酶Lip2、亚油酸异构酶PAI及反-10,顺-12-共轭亚油酸产量的影响。结果表明:高氮培养基更利于菌体生长以及产物的合成,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量达到4.3 g/L,是低氮培养基对应结果的8.6倍;采用有机氮为氮源时,Lip2酶活及PAI表达量显著高于无机氮的结果,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量最高达到4.6 g/L,是无机氮结果的46倍。     

一株嗜酸乳杆菌产共轭亚油酸条件的优化

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是具有抗癌、减肥等许多生理功能的天然脂肪酸.生物法合成共轭亚油酸无毒且异构体单一,但目前产量较低.为提高CLA产量,以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为出发菌株,优化其培养条件.结果表明:发酵液初始pH为6.5,红花油添加量为0.15%,接种量5%,发酵温度为37°C,发酵时间为60h时最有利于共轭亚油酸的合成,此时CLA的合成最为94.7μg/mL.     

田口设计优化保加利亚乳杆菌静息细胞转化合成共轭亚油酸

应用田口设计对保加利亚乳杆菌静息细胞转化合成共轭亚油酸进行优化。在单因素试验基础上,应用Minitab设计2水平4因素正交试验,采用田口设计方法分析正交试验结果。结果表明,静息细胞浓度、pH值、温度、亚油酸浓度对共轭亚油酸产量影响均不显著。软件预测产共轭亚油酸的最佳工艺为静息细胞浓度7%、pH值为5.7、温度32℃、亚油酸浓度1.7g/L,此时共轭亚油酸产量为142.3mg/L,与软件预测值140.63mg/L相吻合,表明优化方案达到了预期效果,且具有良好的稳定性。     

产共轭亚油酸乳酸菌的筛选及生产条件的研究

从分离到的乳酸菌中筛选到1株共轭亚油酸高产菌株,乳杆菌L1(Lactobacillus sp.),在MRS培养基上,乳杆菌L1产生共轭亚油酸的最适亚油酸的浓度是0.1%(v/v),最适培养时间是42h,参与共轭亚油酸形成的酶是胞内酶,并且可能是由多种酶共同作用的结果.建立了共轭亚油酸的紫外光谱扫描和高效液相色谱检测方法.     

响应面法优化重组亚油酸异构酶产酶条件

共轭亚油酸(CLA)广泛存在于多种食物中,具有减肥、抗癌、抗动脉粥状硬化和抗糖尿病等诸多生理活性。为了获得活性CLA高产,本文将突变的亚油酸异构酶克隆到大肠杆菌中表达,单因素试验确定最优产酶条件为发酵时间18 h、IPTG诱导浓度0.2mmol/L、20%装液、培养基初始p H7、诱导前菌体生物量OD_(600)=0.4、LA浓度0.5mg/m L、离子浓度0.02%;在此基础上采用响应曲面法优化重组大肠杆菌培养条件提高生产亚油酸异构酶的能力,根据响应面法实验结果分析显示,发酵时间、诱导前生物量和LA浓度对重组亚油酸异构酶的表达有显著影响且均为正效应。三个影响因素最佳组合为发酵时间19.5h、诱导前生物量OD600=0.47和LA浓度0.57 mg/mL,此时预测亚油酸异构酶催化LA转化为CLA最大量为143.33μg/m L。验证显示,发酵CLA的产量为141.75±0.14μg/m L,与预测产量相符;通过优化设计,提高了107.5%。     

微生物发酵制备富含共轭亚油酸酸豆乳的研究

将乳酸菌发酵应用于豆浆产品深加工,将豆浆中亚油酸转化成共轭亚油酸。首先探讨豆浆生产的最佳工艺,通过单因素和正交试验确定最佳工艺为:泡豆15 h、水豆比例10∶1(mL/g)、加热沸腾时间8 min,在此条件下,豆浆中蛋白质含量为3.96%。其次,将植物乳杆菌接种在不同比例组成的豆浆和牛奶复配培养基中驯化,并且观察生长特性,在豆浆含量80%时不仅菌种生长较好且能提高豆浆营养价值。最后对产共轭亚油酸培养条件进行优化,通过单因素和正交试验确定产共轭亚油酸的最佳发酵条件是:蔗糖添加量6%、琼脂添加量0.7%、接种量4%、培养时间30 h,其共轭亚油酸产量为29.83μg/mL。     

产共轭亚油酸干酪乳杆菌的诱变选育

共轭亚油酸(CLA)是世界公认的具有抗癌、减肥和抗动脉硬化作用的脂肪酸.以共轭亚油酸的生成菌株干酪乳杆菌为出发菌株,经紫外诱变处理,筛选出一株高产共轭亚油酸的菌株,并优化其培养条件,在亚油酸添加量0.05%,乳糖添加量2%,接种量4%,初始pH6.5,37℃发酵36 h时,共轭亚油酸生物合成量可达394.1μg/mL.     

中心组合设计优化保加利亚乳杆菌产亚油酸异构酶发酵培养基

首先应用部分析因设计法试验得出影响保加利亚乳杆菌产亚油酸异构酶的主要因素为亚油酸、蛋白胨和葡萄糖添加量,在此基础上根据中心组合设计原理,选取亚油酸添加量、蛋白胨和葡萄糖为影响因子,采用响应面法进行3因素5水平的试验设计,以亚油酸异构酶酶活作为响应值,对其产酶培养基进行进一步优化.结果表明,保加利亚乳杆菌产亚油酸异构酶的最佳培养基组成为蛋白胨13.6g/L、LA 添加量为1.99‰和葡萄糖25.4g/L、其余条件不变时,亚油酸异构酶酶活可达33.55U/mL.     

亚油酸的微胶囊化研究

研究了喷雾干燥法微胶囊化亚油酸的工艺。选用HI-CAP100为主要壁材,并以微胶囊化效率为响应值,用响应面分析法(RSA)对亚油酸微胶囊化工艺进行了优化,确定的最优工艺参数为:溶液固形物含量为40%,经一级均质(压力为26.5 MPa),在进风温度为190℃,出风温度为90℃的条件下进行喷雾干燥,产品中亚油酸的载量可达50%,微胶囊化效率为92.11%。     

共轭亚油酸转化菌株的筛选

针对性地从特定环境采集土样,筛选出了2株能够将亚油酸转化为共轭亚油酸的菌株,并对菌株的形态学、生长规律和转化条件进行了初步研究.这两株菌株形态差异较大.但是在MRS培养基中,转化亚油酸为共轭亚油酸的最佳条件类似:最适亚油酸的浓度是0.51%(v/v),最适培养时间是36～48h.     

Conjugated linoleic acid concentration as affected by lactic cultures and added linoleic acid

Six lactic cultures: Lactobacillus acidophilus (CCRC14079), L. delbrueckii subsp. bulgaricus (CCRC14009), L. delbrueckii subsp. lactis (CCRC14078), Lactococcus lactis subsp. cremoris (CCRC12586), Lc. lactis subsp. lactis (CCRC10791), and Streptococcus salivarius subsp. thermophlius (CCRC12257) were tested for the effects of addition of 1000 and 5000 μg/ml linoleic acid, and incubation time from 0 to 48 h. The levels of conjugated linoleic acid (CLA) formation were determined by gas chromatography. A sharp increase in CLA level was observed in linoleic acid added cultures. Incubation of L. acidophilus in 1000 μg/ml linoleic acid added-skim milk medium for 24 h was most effective in promoting CLA formation. Increasing linoleic acid addition from 1000 to 5000 μg/ml and prolonging incubation from 24 to 48 h did not appear to enhance CLA formation.     

一株植物乳杆菌转化生成共轭亚油酸的特性研究

报道了一株植物乳杆菌(L.plantarumLT2-6)发酵转化亚油酸(LA)生成共轭亚油酸(CLA)的特性研究。微氧环境有利于CLA的生成;温度为37℃、初始pH为7.0、底物LA浓度为0.075%时,菌体生长及CLA生成量较高。时间曲线结果表明,接种后8h,CLA开始生成;发酵24h时,CLA生成量达到最高(0.29g/L),LA转化率为387%。生成的CLA产物主要为cis9,trans11/trans9,cis11-CLA。     

Decomposition of linoleic acid hydroperoxides

Summary Methyl 13-hydroperoxy-cis-9-trans-11-octadecadienoate (13-HPODMe) was incubated with ditert-butyl peroxyoxalate or copper(II)palmitate for 3 h at 38 °C. Numerous products were identified and quantitatively analysed. The chemical structures and the amount of products resulting from the 13-HPODMe/Cu(pal)₂ system were influenced by both the presence of oxygen and the addition of some antioxidants (-,-,-tocopherols, ascorbyl palmitate).

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Abbau von LinolsäurehydroperoxidenII. Abbau des 13-Hydroperoxy-cis-9,trans-11-octadecadiensäuremethylesters durch Radikale oder Kupferionen

Zusammenfassung 13-Hydroperoxy-cis-9,trans-11-octadecadiensäuremethylester (13-HPODMe) wurde mit di-tert-Butylperoxyoxalat oder Kupfer(II)palmitat 3 Std bei 38 °C inkubiert. Zahlreiche Produkte wurden identifiziert und quantitativ analysiert. Die chemischen Strukturen und die Mengen der Produkte, die aus dem 13-HPODMe/Cu(pal)₂-System hervorgingen, wurden becinflußt durch die Anwesenheit von Sauerstoff und durch die Zugabe einiger Antioxidantien (-,-,-Tocopherol, Ascorbylpalmitat).

     

超临界CO2体系中固定化亚油酸异构酶催化合成共轭亚油酸

以固定化亚油酸异构酶和亚油酸(LA)为原料,在考察超临界CO2(SC-CO2)处理对酶稳定性影响的基础上,采用单因素试验和响应面法研究SC-CO2中LA质量浓度、反应温度、压力、反应时间对共轭亚油酸(CLA)合成的影响。结果表明:固定化亚油酸异构酶在SC-CO2压力小于30MPa,处理温度低于40℃,处理时间小于2 h时,相对酶活较高,具有较好的稳定性;响应面法优化CLA合成条件为LA质量浓度0.05 g/mL,反应温度36℃,压力30 MPa,反应时间1.5 h;在此条件下,CLA的含量为60.58 mg/g;固定化亚油酸异构酶重复使用3次,CLA保持较高的含量。     

新型功能性油脂-共轭亚油酸

共轭亚油酸是天然存在于食品中的亚油酸异构体,具有抑制癌症和肿瘤的形成、减肥、抗动脉粥样硬化、改善免疫功能、降低胆固醇、促进生长等多种功能,是一种新型功能性油脂。本文综述了共轭亚油酸的生理功能、来源、合成及纯化方面的研究进展。