辐射联合p53腺病毒重组体转染对肿瘤细胞的影响

以绿色荧光蛋白腺病毒重组体(Replication deficient adenovirus green fluorescence protein recombinant,AdCMV-GFP)为对照,用p53腺病毒重组体(Replication deficient adenovirus p53 recombinant,AdCMV-p53)转染经0、0.25、0.5、1.0、1.5和2.0Gy γ射线预辐射的HepG2(wtp53)、Hela(wtp53,wtP53低水平表达)和HT-29(mtp53,mtP53过表达)细胞,用克隆形成法检测肿瘤细胞存活,探讨AdCMV-p53转染对p53基因状态与功能不同肿瘤细胞辐射敏感性的影响.结果显示,AdCMV-p53转染不仅明显提高肿瘤细胞辐射敏感性,而且与肿瘤细胞内在p53基因状态与功能有关.     

辐射诱导增强p53重组腺病毒转染对人结直肠癌细胞的抑制

探讨了辐射诱导对p53重组腺病毒载体转染p53突变型结直肠癌细胞(HT-29细胞系)的影响.以复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMV-GFP)为对照,用复制缺陷型p53重组腺病毒载体(AdCMV-p53)转染经0.5、1.0、2.0 Gy γ射线照射的HT-29细胞,用流式细胞分析法检测细胞凋亡和p53蛋白表达,并用克隆形成法测定细胞增殖能力.结果表明,0.5 Gy辐射诱导明显提高了AdCMV-p53转染对HT-29细胞的抑制,促进细胞凋亡.0.5Gy辐射诱导对AdCMV-p53转染HT-29细胞的抑制杀伤的增强作用最强,0.5 Gy辐射诱导及40 MOI和80 MOIAdCMV-p53转染对肿瘤的抑制率比同等剂量下单纯转染组分别提高约50%和20%,比0.5 Gy单纯辐照组提高40%.因此,0.5 Gy辐射诱导可有效增加低于80 MOI AdCMV-p53转染对HT-29细胞的抑制作用.辐射诱导AdCMV-p53转染HT-29细胞以最大辐射剂量不超过1.0 Gy及AdCMV-p53转染量低于80MOI为宜.     

辐射诱导p53腺病毒重组体转染对结直肠癌细胞周期的影响

以复制缺陷型重组腺病毒载体（AdCMV-GFP）为对照,用复制缺陷型p53重组腺病毒载体（AdCMV-p53）转染经0．5、1．0、2．0Gyγ射线照射的HT-29细胞,克隆形成法检测对细胞的抑制作用,流式细胞分析法检测细胞周期和细胞凋亡,探讨辐射诱导对AdCMV-p53转染p53突变型结直肠癌细胞（HT-29细胞系）细胞周期的影响。结果显示,0．5—1．0Gy辐射诱导明显增强40MOIAdCMV-p53转染对HT-29细胞的抑制。与AdCMV-p53转染对照相比,1d后,辐射诱导转染组G0／G1期细胞减少5％-15％,s期细胞增加2％-19％,2．0Gy辐射诱导80MOI AdCMV-p53转染组G2／M期细胞增加12％;3d后,0．5、1．0Gy辐射诱导40MOI AdCMV-p53转染组G2／M期细胞分别增加10%-13％。辐射诱导AdCMV-p53转染组细胞凋亡与辐射诱导剂量和AdCMV-p53转染剂量相关。以上结果表明,辐射诱导加速AdCMV-p53转染细胞由Go／G1期到S期的进程,促进S期阻滞和G2／M期阻滞发生。     

小剂量辐射影响B16黑色素瘤血道肺转移作用机制研究

Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经７．５ｃＧｙＸ线全身照射后２４ｈ静脉注射＾１２５ＩＵｄＲ标记的Ｂ１６黑色素瘤细胞，２４ｈ后测定肺活瘤细胞存留率时发现，照射组小鼠的肺活瘤细胞存瘤率明显降低。与此同时，于照射后２４ｈ检测小鼠的免疫功能发现，照射组小鼠脾脏有核细胞数明显增多，脾细胞ＮＫ细胞毒活性及体内巨噬细胞功能均显著增强，结果提示，小剂量辐射可能通过提高ＮＫ细胞，巨噬细胞功能而加速肺内瘤细胞的清除速率。     

p53通路相关基因表达作为辐射生物剂量计的研究现状

辐射生物剂量计在核事故受照人员剂量估算及辐射生物效应研究中具有重要的作用,被视为"金标准"的染色体畸变分析不能满足大批量快速检测的要求.因此,找到更为快速、简便的生物剂量计成为放射生物剂量学的研究热点.研究发现,电离辐射能够诱导转录调节网络中的基因表达发生变化,有希望成为辐射生物剂量计.涉及较多的是p53通路相关基因,...     

P53基因、Bcl-XL基因表达对淋巴性肿瘤细胞株辐射敏感性的影响

本文运用PCR－SSCP银染法检测人淋巴细胞恶性肿瘤株8226、U266、Raji、Jurkat、Daudi p53基因状态,RT－PCR半定量检测了Bcx-xL的mRNA的相对表达,DNA片段释放法检测细胞受照后24h的细胞DNA链断裂量,探讨了p53基因功能状态及Bcl-xL基因表达对细胞株8226、U266、Raji、Jurkat、Dsaudi辐射敏感性的影响。结果表明,淋巴细胞恶性肿瘤株8226、U266、Raji、Jurkat、Daudi均存在p53基因突变,高表达Bcl-xL基因的细胞株较低表达细胞株有较强的辐射耐性。     

肿瘤乏氧靶向性基因治疗增强放射治疗的实验研究

乏氧是实体肿瘤组织微环境中的一个重要现象,乏氧肿瘤细胞对放射治疗、化学治疗的耐受性增强,乏氧肿瘤细胞的存在是恶性肿瘤患治疗失败、复发和转移的重要原因之一。乏氧细胞的基因表达与正常细胞有着很大的差异,然而,这些差异使针对肿瘤乏氧细胞的靶向性治疗成为可能。本研究利用乏氧细胞自身的特点,构建乏氧依赖性表达的腺病毒载体,借助该载体引导自杀基因BCD(细菌胞苷脱氨酶,     

重组人p53腺病毒注射液联合放射治疗对人淋巴瘤细胞的影响

为探讨重组人p53腺病毒(rAd p53)注射液联合放射治疗对人淋巴瘤细胞的抑制作用及其 辐射增敏性,利用四氮唑盐(MTT)比色法分析rAd p53注射液、放射治疗以及两者联 合应用对人淋巴瘤细胞的抑制作用;应用流式细胞术分析各组细胞的细胞周期和凋亡率;通 过蛋白质的Western印迹分析法(Western blotting)分析各组淋巴瘤细胞内P53蛋白的表达 .结果表明外源性的p53基因虽然有一定程度的转染,但未见高效表达,rAd-p53注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及辐射增敏性均不显著.     

受辐射肝癌细胞所诱导旁效应与 p53的关系

通过检测受照射细胞及与其共培养旁细胞的损伤情况及p53抑制剂对其的影响,研究了肝癌细胞辐射敏感性及辐射诱导的旁效应与p53的关系.发现肝癌细胞的辐射敏感性与p53密切相关:野生型p53辐射敏感性最高,突变型的次之,缺失型的敏感性最低.同时,辐射诱导的旁效应与p53状态亦密切相关,仅野生型p53肝癌细胞(HepG2)对旁细胞(chang氏肝细胞)具有旁效应,且未受照射旁细胞中产生的微核具有明显的剂量效应和时间效应;而突变型(PLC)和缺失型(Hep3B)的肝癌细胞几乎不能诱导辐射旁效应的产生.另外,p53抑制剂可显著抑制辐射旁效应的产生.     

辐射诱导靶向基因治疗与α粒子联合抗肿瘤作用的旁效应

为探索辐射诱导(Egr-1)靶向基因治疗与α粒子照射联合作用对靶区周围肿瘤及正常细胞的影响,将经辐射诱导腺病毒(Ad-ET)处理后的辐照与未受辐照细胞通过共培养体系进行培养,观察受体肿瘤细胞A549和正常细胞MRC-5的生存率和凋亡情况。结果显示,辐射诱导腺病毒Ad-ET联合剂量为0.5 Gy的粒子照射可以对肿瘤细胞A549产生显著的协同抗肿瘤作用,且辐射联合处理组中受体肿瘤细胞的存活率比单独病毒处理组的下降6%,凋亡率显著上升4.9%,而正常细胞中没有此现象发生。结果说明Ad-ET与α粒子照射联合可显著抑制旁区肿瘤细胞生长并引起凋亡,而对正常细胞几乎无影响。证明了辐射诱导的靶向TRAIL基因治疗与辐射联合,可通过特异性增强对靶区周围肿瘤细胞的杀伤进一步提高放射治疗疗效。     

Radioiodide uptake in melanoma cells after transfer of human NaI symporter gene

1 Introduction Radioiodide therapy using 131I is effective for pa-tients who have metastasis from differentiated thyroidcancer. This therapy is based on the uptake of radioac-tive iodide into cancer cells, as is observed in thyroidcells, to …     

腺病毒载体携带HSV1-TK报告基因感染BMSCs后摄取~(131)I-FIAU的实验研究

用内部核糖体进入序列(IRES)将报告基因单纯疱疹I型病毒胸苷激酶(HSV1-TK)和治疗基因脑源性神经营养因子(BDNF)连接,双启动子法将TK-IRES-BDNF与增强绿色荧光蛋白(EGFP)包装到重组腺病毒载体中,得到Ad5-TK-IRES-BDNF-EGFP,扩增、纯化、测定病毒滴度;以感染复数(MOI)为0、50、100、150、200、250感染体外培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs),以重组腺病毒Ad5-EGFP为无效对照病毒。荧光显微镜下观察感染细胞的绿色荧光细胞阳性率。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测感染细胞增殖能力。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)诱导感染细胞向神经元细胞分化,显微镜下观察细胞形态变化。实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)和2-△△CT法分析两目的基因的相对表达量(CT)。观察感染细胞对131I-FIAU的摄取情况。重组腺病毒Ad5-TK-IRES-BDNF-EGFP在MOI为150可高效感染BMSCs,感染细胞存活率98%,且保持良好的神经元细胞诱导分化能力。RQ-PCR检测两目的基因随着腺病毒MOI增加表达增强,且TK和BNDF两基因的表达有良好的线性相关(r=0.973,P0.05,n=3)。在前3h可见感染目的基因组细胞对131I-FIAU的摄取程度与时间呈正相关,3h感染目的基因组对131I-FIAU摄取率可达(31.42±0.46)%(n=3),随后增加不明显。各点感染目的基因组摄取率均显著高于对照组(t=23.06–173.83,P0.05,n=3)。重组腺病毒载体能高效、低毒感染BMSCs,IRES介导两目的基因表达有良好的线性相关。本研究表明感染目的基因细胞可有效介导HSV1-TK摄取131I-FIAU,为后续放射性核素报告基因活体显像示踪转基因BMSCs治疗脑梗死提供了细胞水平依据。     

双基因联合放射提高脑胶质瘤疗效的研究进展

基因方法治疗脑胶质瘤已成为生物学领域研究的热点,而双基因结合治疗研究倍受关注。基因–放射联合成为脑胶质瘤治疗的新思路,它实施放射治疗和基因治疗联合的策略。本工作在综述脑胶质瘤基因治疗研究的基础上,重点阐述双基因与放射联合的特点及最新研究进展。     

电子束高剂量辐照新鲜贻贝肉制品的试验研究

研究了即食鲜贻贝肉制品经电子束高剂量辐照带来的影响和杀菌保存效果.使用NFZ-10/4.0-1000电子直线加速器对密闭罐装鲜贻贝实施15 kGy和25 kGy两种剂量的双向辐照,并作微生物培养试验.主观评价和剂量测试.结果表明,高剂量辐照密闭的罐装鲜贻贝肉,对其食用性和风味没产生明显的影响,但可有效杀灭各类微生物,使...     

电离辐照技术控制生鲜食品病原菌污染的研究进展

综合讨论了世界范围内食源性疾病的发展及食品辐照技术的应用现状,综述了国内外辐照技术控制生鲜食品病原菌的研究进展,并对辐照食品的安全性和受照剂量问题进行了探讨。未来的研究,将继续积累生鲜食品中对电离辐射敏感的病原菌数据,重点探索影响辐照的因素和机理,从辐照组合处理方法入手,建立和完善各种食品辐照的剂量、工艺程序和操作规范。