活血化瘀汤对大鼠视网膜急性损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察大鼠视网膜急性损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达的变化及活血化瘀汤干预的结果。方法随机将65只大鼠分为3组:对照组(A组)、加压组(B组)、加压+活血化瘀汤组(C组)。用免疫组化法检测3组大鼠视网膜急性损伤后不同时间点Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果A组视网膜神经节细胞层可见一定量的Bcl-2和Bax蛋白表达;B组Bcl-2蛋白表达在2 h开始升高,36 h达峰值,72 h恢复正常,12 h到48 h各时间点与A组的差异有统计学意义(P<0.01);Bax蛋白表达的变化与Bcl-2相近,不同的是达峰值在24 h。C组12 h至48 h与B组相应时间点比较,Bcl-2蛋白表达的差异有统计学意义(P<0.05),Bax蛋白表达与B组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性视网膜损伤后Bcl-2、Bax蛋白表达均升高,活血化瘀汤上调了Bcl-2蛋白表达,未影响Bax蛋白表达。     

染料木黄酮对β淀粉样肽介导的脑血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的研究染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的脑血管内皮细胞损伤的调节作用。方法脑血管内皮细胞(b End.3细胞系)传代48 h后,分为4组(对照组、Aβ组、Gen组、Gen+Aβ组)。Gen预处理2 h后,Aβ25-35染毒建立细胞损伤模型;24 h后收集细胞进行指标检测。采用ELISA法检测脑血管内皮细胞8-OHd G水平;酶法试剂盒检测GSH-Px水平;RT-PCR和Western blot法检测Bcl-2、Bax基因和蛋白表达的改变。结果与对照组比较,Aβ组8-OHd G水平明显升高,GSH-Px活性明显下降,且差异均有统计学意义(P0.05);与Aβ组比较,Gen组和Gen+Aβ组8-OHd G水平明显下降,GSH-Px活性明显升高,且差异均有统计学意义(P0.05);同时,Aβ组Bcl-2基因和蛋白表达水平较对照组明显下调,Bax基因和蛋白表达水平明显上调,且差异均有统计学意义(P0.05);与Aβ组比较,Gen+Aβ组和Gen组Bcl-2基因和蛋白表达水平明显上调,Bax基因和蛋白表达水平明显下调,且差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Gen可能通过拮抗Aβ25-35介导的脑血管内皮细胞氧化损伤,进而发挥对脑血管的保护作用。     

丝瓜提取物对 Aβ25-35诱导的 PC12 细胞损伤的保护性研究

观察丝瓜提取物(Luffa extract,LE)对β-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用。应用Aβ_(25-35)造成神经细胞损伤模型,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应(MTT)比色法检测各剂量组丝瓜提取物对PC12细胞活力的变化,检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)活性水平,通过蛋白印迹试验(Western Blotting)来检测B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。丝瓜提取物剂量组PC12细胞存活率高于模型组,GSHPx活性显著增强,CAT含量显著增加(P0.01或P0.05),Bax表达水平降低,Bcl-2表达增高,与模型组比较,差异显著(P0.05~P0.01)。丝瓜提取物对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用。     

草苁蓉环烯醚萜苷对肝癌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

观察二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌组织的病理变化，探讨草苁蓉环烯醚萜苷（IGBR）对细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。将Wistar大鼠分为对照组、模型组、5-FU组及IGBR组。除对照组，各组大鼠第1天给予200 mg/kg DEN腹腔注射1次，而后给予饮用体积分数0.05%的DEN水溶液；5-FU组大鼠腹腔注射25 mg/kg 5-FU每周3次；IGBR组大鼠灌胃500 mg/kg IGBR每日1次。实验第12、20、28周末，分批处死动物，观察肝脏病理变化及细胞凋亡，免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果表明，与对照组比较，模型组细胞凋亡显著增加，胞质呈棕黄色，凋亡的肝细胞皱缩、核固缩及核仁消失；与模型组比较，5-FU组与IGBR组凋亡显著增多，差异有统计学意义（P <0.05），但两组间无显著差异（P >0.05）；Bax和Bcl-2阳性细胞主要分布于不典型增生灶和癌灶中，表达于胞浆；与模型组比较，5-FU组和IGBR组Bax表达明显增强，而Bcl-2表达明显减弱，差异有统计学意义（P <0.05），两组间无显著差异（P P>0.05）；模型组、5-FU组与IGBR组中Bax表达和Bcl-2表达均呈负相关（P <0.05）。IGBR可诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞增值，其机制可能与Bax蛋白增多和Bcl-2蛋白减少有关。     

芜菁中性多糖对A549荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探究芜菁中性多糖对A549小鼠移植瘤模型肿瘤微环境及凋亡相关蛋白、细胞因子水平的影响。方法 实验采用酶联免疫法、HE染色法、免疫组化法，检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3，caspase-3)、白细胞介素2(interleukin-2，IL-2)、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor，TNF-α)含量及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)相对表达水平，计算免疫器官指数、抑瘤率。结果 芜菁中性多糖能使A549荷瘤小鼠肿瘤组织caspase-3蛋白含量显著增加(P<0.01)；使小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α含量升高(P<0.01)；Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 芜菁中性多糖对人肺腺癌细胞A549生长具有抑制作用，可提高A549荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数，下调Bcl-2蛋白，上调Bax蛋白的表达，减轻荷瘤小鼠脏器病理损伤。     

黄皮果果核挥发油对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞增殖和凋亡的影响

探讨黄皮果果核挥发油(essential oil of kernel,EOK)对诱导小鼠黑色素瘤细胞B16-F10增殖和凋亡的影响。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测不同浓度的EOK处理B16-F10细胞24、48、72 h后的细胞存活率,并用不同浓度EOK处理B16-F10细胞24 h,荧光法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的变化、磷脂酰丝氨酸蛋白抗体/碘化丙啶(Annexin V-FITC/propidiun iodide,Annexin V-FITC/PI)染色检测细胞凋亡、蛋白免疫印迹法检测核转录因子-кB(nuclear factor-кB,NF-кB P65)及其磷酸化的蛋白(phosphorylate nuclear factor-кB,NF-кB P-P65)、Cleavedcaspase 3、Bax及Bcl-2蛋白表达的水平。结果显示,EOK各处理组均能明显抑制B16-F10细胞的增殖(P 0.05或P 0.01),其趋势呈浓度和时间依赖性。Annexin V-FITC/PI检测发现EOK可诱导B16-F10细胞凋亡,免疫印迹法也显示EOK可使B16-F10细胞NF-кB P65及其磷酸化的蛋白表达量明显降低,Cleaved-caspase 3的蛋白表达量增加,Bax/Bcl-2比值增大。结果表明,EOK可诱导B16-F10细胞凋亡,其机制与抑制胞内NF-кB P65蛋白表达,降低其磷酸化水平,激活Bcl-2/Bax/caspase 3信号通路有关。     

绞股蓝多糖保护力竭运动诱导肝细胞凋亡

为研究绞股蓝多糖(GMP)对力竭运动诱导大鼠肝细胞凋亡的影响。采用大鼠力竭运动模型,将32只雄性Wistar大鼠随机分为4组:安静对照组、运动力竭对照组、绞股蓝多糖低剂量组+运动力竭组,绞股蓝多糖高剂量组+运动力竭组;采用免疫组织化学方法检测大鼠肝组织Bax、Bcl-2蛋白的表达,对各组大鼠肝组织Bax/Bcl-2比值与肝组织细胞凋亡情况进行分析;采用以分光光度法检测肝脏主要抗氧化酶活性与丙二醛(MDA)含量。结果发现,绞股蓝多糖后能使力竭运动后大鼠肝组织Bax的表达减弱、Bcl-2的表达增强、Bax/Bcl-2比值降低;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)活性增加;MDA含量降低。绞股蓝多糖对力竭运动诱导肝组织氧化应激及细胞凋亡具有保护作用。     

姜黄素对过度训练所致大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

目的:研究姜黄素缓解过度训练所致的氧化应激,抑制大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。方法:60只7周龄SPF级雄性Wistar大鼠经适应性饲养及训练后随机分为对照组(C组,12只)、过度训练组(OM组,24只)、姜黄素+过度训练组(COM组,24只)。C组不进行任何训练,OM组、COM组大鼠进行8周递增负荷游泳训练。训练期间,COM组以200 mg/(kg·d)剂量姜黄素进行灌胃,灌胃体积5 mL/kg,其余两组灌胃等体积0.5%羧甲基纤维素纳。末次训练后24 h,光镜观察心肌组织病理学改变,检测血清睾酮(T)、皮质酮(Cor)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度,以及心肌组织凋亡水平和核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、B淋巴细胞瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,同时测定心肌组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)浓度。结果:8周递增负荷游泳训练后,光镜下C组大鼠心肌组织结构正常;OM组出现组织病理学改变;COM组较OM组明显减轻。与C组比较,OM组血清Cor、cTnI、心肌细胞凋亡水平和促凋亡蛋白Bax表达水平及心肌MDA浓度均升高(p<0.01),血清T水平、心肌T-AOC和SOD活性(p<0.01)、心肌HO-1及抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平(p<0.05)降低;心肌Nrf2表达水平无显著变化(p>0.05)。与OM组比较,COM组血清Cor、心肌细胞凋亡水平、Bax表达水平(p<0.01)和血清cTnI水平、心肌MDA浓度(p<0.05)降低,血清T水平、心肌Nrf2和Bcl-2表达水平、心肌T-AOC和SOD活性(p<0.01)、心肌HO-1(p<0.05)升高。组间T/Cor比值变化趋势与T变化相一致,Bcl-2/Bax比值变化趋势与Bcl-2变化相一致。结论:姜黄素通过上调Nrf2、HO-1蛋白表达,有效缓解过度训练引发的氧化应激,从而增加Bcl-2表达,减少Bax表达,抑制大鼠心肌细胞凋亡,保护心脏组织结构和功能正常。     

姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的影响

目的:探讨姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:8%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:2%姬松茸多糖组。8周后,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察Bax基因、Survivin基因的表达。结果:与模型组比较,姬松茸多糖组视网膜细胞凋亡明显减少,Survivin表达上调,Bax表达降低。结论:姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜组织保护作用的机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡及上调Survivin基因,降低Bax基因表达有关。     

肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响

目的:讨论远端肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬水平的影响。方法:选取40只大鼠进行分组实验,分别为缺血再灌注组(A组)、肢体缺血预处理组(B组)、假手术组(C组)和3-甲基嘌呤组(D组),四组均进行脑缺血再灌注,肢体缺血预处理与3-MA处理,评价脑缺血再灌注后神经功能缺陷和脑梗死体积变化,并测定Beclin-1、Cathepsin B自噬蛋白的表达结果。结果:B组神经功能缺陷评分和脑梗死体积均低于A组,且B组Beclin-1、Cathepsin B自噬蛋白表达显著减弱,组间比较差异显著,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬水平有保护作用。