丹参酮对肝癌细胞在体内外生长的抑制作用

目的:探讨丹参酮在细胞水平和动物体内对肝癌细胞的抑制作用。方法:采用体外抑瘤实验培养人肝癌细胞Bel-7402,通过MTT法检测其体外抑瘤率;体内实验采用肝癌H22移植瘤法,以抑瘤率、胸腺指数和脾指数为指标,探讨丹参酮的抑瘤作用。结果:细胞实验表明,丹参酮在100μg/m L时抑瘤效果最佳,抑瘤率为(81.95±1.33)%。丹参酮在40、80、120 mg/kg时,对H22实体瘤的抑制率分别为29.70%、45.09%和49.13%。丹参酮在120 mg/kg时小鼠的脾指数和胸腺指数明显高于模型组(P<0.05)。结论:丹参酮对肝癌细胞在体内外均有一定的抑制作用。     

海湾扇贝多肽对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制机制研究

探讨海湾扇贝多肽(polypeptide from bay scallop,PBS)对小鼠H22肝癌移植瘤的抑瘤作用及机制。将50只KM小鼠随机分为正常对照组、H22肝癌模型组和PBS低、中、高剂量组共5组,按试验设计进行体内灌胃试验。结果显示,低、中、高剂量组的抑瘤率分别为28.16%、41.93%和84.00%,具有量效依赖趋势。与模型组相比,三剂量组小鼠血清中突变型p53、Survivin、8-iso-PGF2α和MDA的水平均有所降低,而IL-2、GSH-Px、SOD和TNF-α的水平均有所升高,且中剂量组较其他两组效果更明显;三剂量组小鼠肝脏组织提取液呈现相同变化趋势。肿瘤组织病理学观察也表明PBS有较好的抗肿瘤生物学效应。PBS对小鼠肝癌H22细胞具有明显的抑制作用。     

海带多糖对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨不同质量浓度的海带多糖对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用。方法：分别以质量浓度为5、10、20、30 mg/mL的海带多糖处理Bel-7402细胞,48 h后观察海带多糖对细胞增殖的抑制情况,Annexin V-FITC试剂盒检测细胞凋亡状况,酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测Caspase-3活性,Western blotting法检测细胞内Caspase-3和甲胎球蛋白（alpha-fetoprotein,AFP）表达量。结果：海带多糖对Bel-7402细胞的增殖有明显抑制作用,最佳抑制剂量为30 mg/mL;随着海带多糖质量浓度的升高,细胞凋亡率明显增加（P＜0.05）,海带多糖处理组Bel-7402细胞内的Caspase-3表达水平同正常对照组细胞相比呈上升趋势,差异具有统计学意义（P＜0.05）;AFP蛋白表达水平呈下降趋势。结论：海带多糖对人肝癌细胞Bel-7402增殖具有抑制作用,其机制可能是激活Caspase-3,引起细胞凋亡和AFP蛋白表达水平下降所致。     

山慈菇多糖对荷H22肝癌小鼠的抗肿瘤机制研究

研究山慈菇多糖对H22肝癌实体瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制。制作小鼠H22实体瘤肝癌模型,通过脾脏指数、胸腺指数分析其对小鼠免疫器官的影响,Elisa检测血清白介素-2(IL-2)含量、肿瘤坏死因子(TNFα)含量,免疫组化法观察(Bcl-2)表达水平。山慈菇多糖的低、中、高剂量组抑瘤率分别为43.74%、37.57%、30.76%,;能增强血清中IL2、TNFα活性;抗凋亡因子Bcl-2的表达量不同程度地减少。山慈菇多糖对H22肝癌小鼠具有一定的肿瘤抑制作用,本次实验不体现剂量依赖性,显示山慈菇多糖无毒副作用,能增强机体的抗肿瘤能力,降低肿瘤的持续增殖能力。     

超声辅助提取兖州卷柏生物碱及其对H22肝癌细胞增殖抑制影响

目的:研究超声波辅助兖州卷柏生物碱提取工艺,以及兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞的增殖抑制作用。方法:采用超声辅助乙醇浸提法对兖州卷柏生物碱进行提取,并设计正交实验对提取工艺进行优化。采用MTT法研究兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制活性。结果:超声辅助兖州卷柏提取最佳工艺为:乙醇浓度70%、固液比1:40、超声时间60min、超声功率400W和超声温度60℃。最高提取率达1.18%。兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制效果随浓度增大和培养时间增长而增加,其中细胞培养48h,生物碱浓度为8mg/mL时,对肝癌细胞增殖抑制率达53.25%。结论:超声辅助法是兖州卷柏生物碱提取的有效方法,兖州卷柏生物碱对肝癌H22细胞有明显抑制作用。      

鱼头中糖脂类活性物质的提取分离及抗肿瘤活性研究

以鲤鱼头为原料,研究其中糖脂类活性物质的提取、分离、鉴定及抗肿瘤活性。用乙醇提取粗脂,进一步用大孔吸附树脂HP-20、薄层色谱(TLC)及红外光谱对鱼头粗糖脂进行分离和初步鉴定。红外光谱分析结果初步表明,其为含有脂肪酸侧链的糖环类分子,符合糖脂的一般结构特征;细胞毒性检测(MTT 法)糖脂的抗肿瘤活性结果表明：10～400μg/ml 的鱼头糖脂作用24、48、72h 后,能显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7 和人肝癌细胞Bel-7402 的生长。苏木精- 伊红(HE)染色结果表明,鱼头糖脂作用72h,MCF-7 和Bel-7402 细胞均产生明显的凋亡形态学变化。细胞周期分析结果表明,鱼头糖脂作用后,MCF-7 和Bel-7402 细胞被阻遏于细胞周期的S 期,且这种S 期积累具有明显的时间依赖性。     

松口蘑糖蛋白联合5-Fu体外对人肝癌细胞Bel-7402的影响及作用机理初探

采用MTT法研究了松口蘑抗肿瘤糖蛋白MTS03与化疗药物5-Fu单独及联合使用对人肝癌细胞Bel-7402的影响及对人正常肝细胞L-02的毒性作用，观察不同浓度配比及不同作用时间对细胞是否具有增效减毒的作用；采用扫描电镜观察MTS03作用后的Bel-7402细胞形态．结果表明，MTS03与5-Fu在较低浓度单独使用对肿瘤细胞无显著差异，但两者联合使用增强了对肿瘤细胞的杀伤作用，而对正常细胞的作用较小，联合使用的q值均大于0．85，说明不存在拮抗作用．扫描电镜观察到凋亡小体的形成，随着剂量升高，凋亡小体增多．这一结果说明两者合用后MTS03增加了5-Fu对肝癌细胞的敏感性，同时降低了两者单一高剂量使用时引起的毒副作用，同时MTS03能诱导Bel-7402细胞膜皱缩和凋亡小体的形成．     

螺旋藻多糖抗H22肿瘤作用研究

以螺旋藻多糖为研究对象,探讨其体内抗H22肿瘤作用及机理。采用双酶方法提取螺旋藻多糖。小鼠腋下接种H22肝癌细胞建立动物模型,以1 000 mg/kg/d灌胃给药。通过瘤重及抑瘤率测定、胸腺指数(TI)及脾脏指数(SI)测定、脾细胞增殖能力测定、NK细胞杀伤活性测定、吞噬细胞吞噬能力测定、小鼠血清TNF-α和IFN-γ测定等研究其抗H22肿瘤作用和机理。给药组抑瘤率达74.53%,提高了胸腺、脾脏指数、NK细胞杀伤活性及巨噬细胞的吞噬能力,增加了血清中TNF-α和IFN-γ的含量,小鼠免疫系统得到有效保护,加强了抗H22肿瘤作用。螺旋藻多糖抗H22肿瘤效果明显,在保护免疫系统及提高免疫力方面起到了很好的作用。     

玛咖生物碱通过调节小鼠免疫力抑制结肠癌细胞的成瘤能力

研究观察玛咖生物碱对小鼠结肠癌CT-26细胞成瘤能力的影响并初步探讨其可能机制。构建BALB/c小鼠CT-26细胞移植瘤动物模型,随机分为玛咖生物碱高剂量组、玛咖生物碱低剂量组及生理盐水模型对照组。连续灌胃用药27 d,绘制小鼠体重增长曲线及移植瘤体积增长曲线。第28 d处死小鼠,计算抑瘤率、相对肿瘤增殖率、脾脏指数;ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ水平;HE切片观察移植瘤、脾脏、肝脏及肾脏组织学形态变化。结果表明,与对照组比较,实验组移植瘤重量明显降低（p<0.05）,抑瘤率分别为43.37%和45.26%,组织学观察实验组移植瘤坏死面积较对照组明显增大。实验组小鼠脾脏指数明显高于对照组（p<0.05）,且实验组脾脏白髓增生较显著。同时,血清IL-2及IFN-γ水平均明显高于对照组（p<0.05）。可见,玛咖生物碱可以通过提高小鼠免疫力抑制CT-26细胞的成瘤。     

鹰嘴豆肽抑制肿瘤作用和对免疫功能的影响

目的：探讨鹰嘴豆肽抑制肝癌H22细胞移植瘤的效果及对免疫功能的影响。方法：将小鼠随机分为正常对照组、阳性对照组、肿瘤对照组和鹰嘴豆肽低、中、高剂量组(50、100、200mg/(kg·d)),除正常组外,其余各组小鼠均在皮下接种肝癌H22细胞,建立肝癌小鼠模型。建模后第2天开始灌胃给药,连续给药10d。末次给药24h后拉托颈椎处死小鼠,测体质量、肿瘤大小、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬能力、脾细胞吞噬能力等。 结果：鹰嘴豆肽低、中、高3个剂量均可抑制H22肿瘤的生长,且没有阻碍小鼠体质量和免疫器官的增长。与肿瘤对照组相比,鹰嘴豆高剂量组可以显著提高小鼠迟发型超敏反应(DTH)的能力、淋巴细胞和巨噬细胞吞噬能力(P＜0.05),鹰嘴豆低、中剂量组对其也有一定的改善作用,但是没有表现出剂量依赖效应。 讨论：鹰嘴豆肽可能是通过增强H22肝癌小鼠的免疫功能来抑制肿瘤的生长,具体的作用机制还需要更深入的研究。     

桐油甘油三酯对体外培养的人体肿瘤细胞的毒性

以纯度为96%的α-桐酸作为对照,考察了从桐油中经NARP-HPLC分离得到的3组含共轭亚麻酸的甘油三酯对人体肿瘤细胞株ECA-109 (食管癌)、SGC-7901(胃癌)、Bel-7402(肝癌)、LS-174-T(结肠癌)、KB(口腔癌)和正常细胞株 L02(肝细胞)的细胞毒性.结果发现α-桐酸对KB、Bel-7402和SGC-7901细胞的毒性明显弱于3组含共轭亚麻酸的甘油三酯.结果提示,除了α-桐酸的共轭三烯结构是桐油甘油三酯的细胞毒性的物质基础之外,含共轭亚麻酸的甘油三酯的分子结构对其抗肿瘤功效也有重要贡献.     

基于网络药理学和文献探讨异喹啉类生物碱抗肝癌研究进展

探索五种异喹啉类生物碱抗肝癌的作用机制。借助TCMSP、String、venny数据库与WebGestalt在线分析软件获取靶点并进行蛋白互作网络（PPI）、基因本体（GO）、基因相互作用（KEGG）功能富集分析,利用Cytoscape软件构建网络。同时查阅文献并进行归纳、整理和分析得到小檗碱型中的小檗碱、双苄基类生物碱的粉防己碱、苯菲啶喹啉类的血根碱、吗啡烷类中的青藤碱和吡咯菲里啶中的石蒜碱等几种常见的生物碱,根据结构作用机制阐述每一类代表性异喹啉类生物碱治疗肝癌的潜力及抗肝癌作用机制。五个活性成分共筛选得到52个作用靶标如p53（抑癌基因）、NCOA2（核受体共激活剂2）、IL-2（白介素2）,主要涉及钙离子信号通路、雌激素受体信号通路和PI3K/Akt信号传导途径等通路。通过网络药理学和文献收集证实异喹啉类生物碱可能参与调控PI3K-Akt通路等,可以通过多靶点、多通路对肝癌产生治疗作用,为进一步研究异喹啉类生物碱抗肝癌的临床研究提供参考和依据。     

Chemical composition,cytotoxic and antioxidant activity of the leaf essential oil of Photinia serrulata

The leaf essential oil of Photinia serrulata was obtained by hydrodistillation and analyzed by GC and GC-MS. Seventy-one components were identified in the essential oil and the main components of the oil were 10-epi-γ-eudesmol (12.72%), pinene (6.85%), sabinene (5.93%), α-humulene (5.87%) and α-thujene (5.47%). The in vitro cytotoxicity of the oil on human cancer cell lines Hela, A-549 and Bel-7402 was examined. The oil was found to be very active against all the three human tumor cell lines tested with low IC₅₀ of 0.0427 μl/ml (Hela), 0.0219 μl/ml (A-549) and 0.0301 μl/ml (Bel-7402). The oil was also found to possess antioxidant activity as demonstrated by the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical method.     

甘油三酯体外抗肿瘤活性

经非水反相高效液相色谱(NARP-HPLC)纯化,从癞葡萄籽油(MCVO)中分离得到了6 个含共轭亚麻酸(CLns)的甘油三酯(TGs)组分。以纯度为96% 的α- 桐酸(α-ESA)为对照,考察甘油三酯组分对5 个人体肿瘤细胞株(ECA-109、SGC-7901、Bel-7402、LS-174-T、KB)和1 个人体正常细胞株(L02)的生长抑制效果。结果显示含CLn 的TG组分对人体肿瘤细胞的抑制作用远强于α-ESA,而且由3 个CLns 组成的TG 是TG 组分中效果最弱的。结果表明：TG 的脂肪酸组成和TG 的分子结构(可使CLn 稳定性提高)对含CLn 的TG组分抑制人体肿瘤细胞的生长具有重要影响。     

辣木生物碱抑制宫颈癌Hela细胞增殖和诱导其凋亡的作用

研究辣木(Moringa Oleifera. Lam)叶生物碱对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。通过采用MTT法、克隆形成法、流式细胞术和western blot法检测经不同浓度辣木生物碱(20~320μg/mL)处理48 h后的Hela细胞增殖、凋亡情况和蛋白表达水平。研究结果表明,随着辣木生物碱浓度的增加,Hela细胞的存活率逐渐下降,当辣木生物碱浓度为160μg/m L时,细胞的存活率为35.87%(p<0.001),人正常结肠细胞NCW460的存活率为91.91%;克隆形成实验表明,辣木生物碱(40~160μg/mL)显著抑制Hela细胞克隆形成,抑制率分别为26.04%(p<0.05)、37.19%(p<0.01)和67.77%(p<0.001);当浓度为80μg/m L时,Hela细胞形态发生明显变化;进一步流式细胞术分析得知,Hela细胞内的凋亡细胞数随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当细胞经160μg/mL辣木生物碱处理48 h后,其细胞内凋亡细胞数为42.10%(p<0.001),通过对凋亡蛋白表达水平检测发现,Bax/Bcl-2比率和Caspase9表达水平随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当辣木生物碱浓度达到80μg/mL时,与对照相比有显著性差异。此外,辣木生物碱显著降低Stat3蛋白磷酸化水平和Cyclin D1蛋白表达水平,当辣木生物碱浓度达到160μg/m L时,与对照相比有显著性差异。以上实验结果表明,辣木生物碱具有抑制Hela细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制Stat3信号通路活化相关。