莽草酸生物合成进展

莽草酸是自然界中存在的一种重要的有机酸,是抗禽流感药物磷酸奥司他韦(达菲)合成的关键原料。概述了莽草酸的天然分布,对莽草酸的生物合成方法进行了综述。     

莽草酸前体化合物的合成

莽草酸是合成(禽)流感治疗药物达菲的主要原料.以甘露糖为原料,工业化生产为目标,设计新颖、合理的路线化学合成了莽草酸前体,通过对路线的可行性进行了实验验证,得到了一系列全新的甘露糖衍生物.     

基因工程菌发酵液中多种成分快速检测方法的建立

目的建立一种快速检测基因工程菌发酵液中葡萄糖、甘油、甲醇和乙酸含量的方法。方法采用HPLC法检测基因工程菌发酵液中葡萄糖、甘油、甲醇、乙酸的含量:使用Aminex誖HPX-87H column(300 mm×7.8 mm,9μm),以5 mmol/L H2SO4溶液作为流动相,在柱温35℃、流速0.60 ml/min的条件下,用示差折光检测器进行检测,采用外标法定量。对方法进行系统适用性、专属性、检测限、定量限、线性范围、准确性、精密性验证及初步应用。结果各物质色谱峰理论塔板数均大于8 500,各峰之间的分离度均大于4.5,阴性对照在相应位置处未见色谱峰;在标准曲线线性范围内,乙酸、葡萄糖、甘油、甲醇浓度与峰面积均呈良好的线性关系,相关系数在0.999 97⁰.999 98之间;该方法检测葡萄糖、甘油、甲醇、乙酸的平均加样回收率分别为102.18%、103.84%、105.16%、102.82%;该方法重复6次检测发酵液,其中葡萄糖、甘油、甲醇、乙酸峰面积的RSD分别为0.15%、0.21%、0.23%、0.23%。该方法对重组大肠埃希菌和毕赤酵母发酵过程中葡萄糖、甘油、甲醇、乙酸的含量进行检测,结果能够满足发酵操作的要求。结论建立的HPLC法系统适用性和专属性良好,加样回收率和精密性较高,不受培养基中蛋白胨、酵母粉和其他代谢产物的影响,可应用于基因工程菌发酵过程中3种碳源和乙酸含量的检测。     

生物发酵液中氨苷霉素的快速分离柱高效液相色谱法测定

研究了用快速分离柱高效液相色谱法测定生物发酵液中的氨苷霉素。生物发酵液中的氨苷霉素用ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm,1.8 μm) C18 快速分离柱为固定相,甲醇- 0.01 mol/L的磷酸(10:90) 为流动相分离,流速为2.0 ml/min;在该色谱条件下,氨苷霉素在1.0 min内可达到基线分离;用紫外二极管矩阵检测器检测。方法标准回收率为98%～102%,相对标准偏差为0.64%～0.87%。方法用于几种生物发酵液样品中氨苷霉素的测定,取得满意结果。     

八角茴香中莽草酸提取工艺及抗氧化性研究

通过回流提取法、超声提取法、微波提取法对八角茴香中莽草酸的提取工艺进行优化。经过单因素与正交试验获得最佳提取工艺为微波提取方法下提取时间4 min、微波功率400 W、料液比1：20（g/mL）,莽草酸得率4.92％。用DPPH自由基捕获分光光度法对提取液莽草酸进行了研究,发现其对自由基清除率可达到12.71％,具有一定的抗氧化性。     

活性炭对八角茴香中莽草酸吸附分离性能的研究

研究了活性炭对八角茴香提取液中莽草酸的吸附过程,开展了莽草酸的吸附平衡和吸附动力学研究,并采用Freundlich和Langmuir公式拟合了303 K、313 K和323 K温度下的吸附等温线.结果表明,两者拟合效果均较好,以Langmuir公式拟合更为理想.探讨了相应的吸附动力学过程以及莽草酸浓度对活性炭吸附性能的影响.     

莽草酸在聚乳酸非织造布上的接枝研究

将莽草酸接枝固定在聚乳酸(PLA)非织造布上,旨在开发可应用于医疗卫生领域的新型多功能保健材料。莽草酸接枝处理中,选用交联剂PC-100与IPDI进行架桥试验。通过调整反应温度、浓度等参数,优化反应条件,测试了PLA非织造布的透气性、导湿性、硬挺度及抗菌性。试验得出的接枝最佳工艺是:PC-100用量0.2 g,莽草酸质量浓度为9 g/L,浸渍温度60℃,120℃焙烘3 min,之后用乙醇和蒸馏水进行润洗。处理后的PLA非织造布具有良好的抗菌性,对大肠埃希菌和金黄葡萄球菌的抗菌率分别达到了77.3%和72.7%。     

超声辅助提取银杏叶莽草酸工艺优化

采用超声辅助稀酸提取银杏叶中莽草酸,基于响应面试验设计,考察了料液比、超声温度、超声时间、提取次数对银杏叶中莽草酸提取得率的影响。结果表明：超声辅助稀盐酸提取银杏叶莽草酸的最佳工艺为：料液比1∶200(g/mL),超声温度40℃,超声时间18 min/次,提取次数3次。银杏叶莽草酸得率为2.981 mg/g。影响莽草酸得率的程度由高到低的顺序为：料液比、提取次数、超声温度、超声时间。     

高效液相色谱法测定发酵液中色氨酸和酪氨酸含量的研究

建立了高效液相色谱法测定发酵液中色氨酸和酪氨酸含量的方法。采用Agilent C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.1mol/L醋酸钠(pH 4.0±0.05)-甲醇(90∶10)为流动相,流速为1.0mL·min-1,紫外检测器的检测波长为280nm,柱温30℃,结果显示,色氨酸的线性范围为50~500μg·mL-1,相关系数为r=0.9985,平均回收率为99.3%(n=4);酪氨酸的线性范围为20~2000μg·mL-1,相关系数为r=0.9991,平均回收率为100.2%(n=4)。该方法无需衍生,直接测定,简便,准确,用于发酵液中色氨酸和酪氨酸含量的测定,结果令人满意。     

高效液相色谱法测定发酵液中生物素含量

采用高效液相色谱法测定发酵液中生物素的含量.结果表明,样品浓度在5～150 μg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为0.01 μg·mL-1,精密度实验的RSD为0.21%,稳定性实验的RSD为6.6%,发酵液在15 h内检测结果无明显差别,加样回收率在95%～102%之间.该方法简便、快捷、准确、重现性好,可用于发酵液中生物素的含量测定.     

莽草酸的生物活性及其提取工艺的研究进展

综述了莽草酸的生物活性及其提取工艺的研究进展,重点探讨了提取工艺的研究热点问题及目前存在的问题,展望了莽草酸提取工艺今后的发展方向.     

大肠杆菌莽草酸生产菌株培养条件的优化

为了降低实验培养环节所引入的误差,对前期构建的一系列莽草酸生产菌株进行培养条件的优化.通过对培养环境的控制,消除了由摇床局部环境不同所引入的误差,在二次培养7.5h时加入终浓度为0.167 mg·mL-1的IPTG进行诱导,可将pTrc-aroG-tktA/JDL02的莽草酸摇瓶产量由原来的94.33mg· L-1提高...     

高效液相色谱法测定柠檬酸的含量

建立了一种准确对发酵液中柠檬酸含量测定的仪器方法,在检测范围6-16 mg/mL之间成线性,R=0.999 7,RSD为±0.8%-1.2%(n=6),最低检测浓度为0.02 mg/mL.此方法简单、灵敏、重现性好,避免了由于化学转化所引起的测定误差,以及发酵液中色素的影响.     

玉米浆为有机氮源的L-乳酸发酵的研究

利用细菌厌氧发酵生产L-乳酸,以降低L-乳酸生产成本为主要目的,实验以玉米浆为有机氮源,以硫酸铵为主要无机氮源,研究了不同接种量对发酵过程的影响;并就以玉米浆替代酵母粉、豆粕水解液、生物素为有机氮源的L-乳酸发酵进行了对比研究实验,实验证明了玉米浆做为有机氮源用于L-乳酸发酵的可行性。在保证生产能力的同时,使用玉米浆为有机氮源对进一步降低L-乳酸生产成本,减少玉米浆对环境的污染进行了探索。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定百合中的氨基酸含量

建立了反相高效液相色谱法测定百合中氨基酸含量的方法。采用HypersilODS2C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相A乙酸钠+四氢呋喃+三乙胺;流动相B:乙酸钠+甲醇+乙腈,柱温35℃,检测波长330nm。梯度洗脱程序为(t(梯度洗脱时间),B(流动相B)%)为(22,40);(23,60);(23.6,60);(26,65);(26.1,70);(26.6,80);(31.9,90);(32,95);(39,100);(40,0)。测定结果表明,在此实验条件下能使百合中13种氨基酸在40min内得到较好的分离,特别是脯氨酸能得到很好的分离。除trp、gly外,其他氨基酸具有较好的线性(相关系数为0.8985～0.9997)和重复性(相对标准偏差≤5.0%)。该方法简便实用,实际样品分析结果令人满意。     

发酵法生产医药用透明质酸

山东临朐华元生物工程有限公司通过对菌株的筛选培育、发酵原料配方和工艺的改进、提纯工艺和设备的优化、制粉工艺和设备的改进、生产环境的改造,利用生物工程技术发酵法研制生产出医药用透明质酸,并形成1.5t/a的生产规模。产品应用于眼科手术、滴眼液、手术防粘连等方面,改变了国内医药用透明质酸依赖进口或动物器官提取法微量生产自用的局面,为国内以透明质酸为基质的制剂产品发展打下了基础。     

BI废液氧化法回收己二酸的研究

采用硝酸分解氧化的方法将BI废液中己酸过氧化氢转化为己二酸，考察了相关因素对分解反应和氧化反应的影响。结果表明：选用硝酸作为分解氧化剂，在HNO。与已酸过氧化氢的摩尔比为4：1、分解温度为85-90℃、分解时间为2．0h时，己酸过氧化氢转化为羟基己酸的转化率达到98％以上；在真空度为0．061MPa、氧化温度为90℃、氧化时间为2．0h、连续滴加的方式下，控制产物最终含水量在40％，羟基己酸氧化生成己二酸的转化率达到95％以上。     

苏云金芽孢杆菌发酵液后处理工艺研究进展

介绍了苏云金芽孢杆菌发酵液后处理工艺研究进展.超滤法和沉淀法可以实现苏云金芽孢杆菌发酵液的浓缩,喷雾干燥法、碱溶-超滤法、膜过滤技术可以回收发酵液杀虫活性成分.