南瓜中降血糖活性成分的提取及其功能性质的研究

为探寻南瓜中对正常及糖尿病模型小鼠血糖有影响的有效成分 ,本实验采用新的分离工艺从南瓜粉中提取得到南瓜粗多糖 (PP) ,用DEAE分级获得 3个组分 ,收集的主导组分经过SephadexG 10 0柱分级 ,以小白鼠血糖值作为筛选活性成分的指标 ,收集有活性的组分(PP CG)经SephadexG 2 0 0证实为单一峰。气相色谱分析其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及鼠李糖。高效液相色谱证明其为杂多糖 ,分子质量为 1.16× 10 5u。     

南瓜多糖的提取及纯化

南瓜是一种具有药用价值的食品,实验用热水浸提、醇析、Severge法除蛋白,水相透析得到南瓜粗多糖,通过DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱的分离纯化得到2种水溶性多糖,经酸解,纸色谱分析得组分1的单糖组成为D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸,组分2的单糖组成为D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和葡萄糖醛酸。     

南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化及组分分析

目的:从南海鸢乌贼墨汁中分离纯化多糖,并分析其多糖组分。方法:利用水提醇沉法得粗多糖,通过固相萃取层析法除色素对多糖进行纯化,纯化多糖依次经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱分级纯化,按峰收集得单一组分,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化方法,通过超高效液相色谱分析多糖组分。结果:粗多糖经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱后收集得到3个糖组分,分别为SIP1、SIP2、SIP3;通过PMP衍生化方法分析单糖组成,得:SIP1是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖3种单糖缩合而成;SIP2和SIP3分别是由D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及L-(-)-岩藻糖5种单糖按照不同比例缩合而成。     

百合多糖的化学结构及抗肿瘤活性

用水提取百合块茎粗多糖 ,经Sevag脱蛋白质 ,透析后经DEAE cellulose及SephadexG 10 0柱色谱纯化 ,得到百合纯多糖组分LBPS I .经完全酸水解 ,PC ,GC ,IR ,高碘酸氧化 ,Smith降解 ,甲基化分析 ,1H及13C NMR等研究百合多糖的化学结构 ,表明LBPS I的相对分子质量为30 2 0 0 ,比旋光度 [α]2 0D =+192 .3(c 0 .75 ,H2 O) ,特性粘度 [η]=14.0 6× 10 3 mL/ g .LBPS I是由α D (1,4 ) Glcp和α D (1,3) Glcp以 2∶1的比例交替形成主链 ,并有α D (1,6) Glcp侧链的葡聚糖 .小鼠移植性实体瘤研究表明 ,LBPS I对移植性黑色素B16和Lewis肺癌有较强的抑制作用     

红曲霉菌胞外多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性测定

目的:分离纯化红曲霉菌胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS),测定各组分的抗氧化活性并对其结构进行初步表征。方法:红曲霉菌发酵液经乙醇沉淀获得胞外多糖,经精制除杂和DEAE-纤维素柱层析法分离纯化获得多糖组分,再分别用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)、柱前衍生PMP-HPLC法测定相对分子质量(Mw)和单糖组成,测定多糖组分清除DPPH和羟自由基的能力,评价其体外抗氧化活性。结果:EPS经分离得到三个组分EPS-1、EPS-2和EPS-3,相对分子质量分别为8673、143537、238742 Da。EPS-1、EPS-2均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.301∶2.052∶3.614和1∶2.475∶1.950∶1.532,EPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.401∶0.066∶0.307∶2.974。三个多糖组分对DPPH·和羟自由基均有清除能力,并与多糖浓度呈现正相关。当多糖浓度为1 mg/m L时,三个组分对DPPH清除率分别为16.4%、15.9%和14.8%;对清除羟自由基的清除率分别为40.4%、39.6%、63.8%。结论:红曲霉菌胞外多糖各组分的相对分子质量和单糖组成比例均有差异;对羟自由基、DPPH·的清除作用也存在差异,这种活性差异可能与各组分Mw及结构差异相关。     

水溶性蛋白聚糖AP-1的分离纯化和鉴定

利用人工栽培的姬松茸子实体干品 ,经热水提取 ,乙醇沉淀 ,蛋白酶法和Sevag法相结合去蛋白 ,H2 O2 脱色 ,DEAE SephadexA 2 5和SephadexG 2 0 0柱纯化 ,得到姬松茸蛋白聚糖AP 1 .葡聚糖凝胶柱层析分析表明 ,该蛋白聚糖为均一物质 ,相对分子质量为 1 2 4 0 0 0 .紫外扫描表明有核酸和蛋白质的特征吸收峰 .红外扫描显示有典型的多糖吸收峰 .纸层析和气相色谱分析表明 ,其单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖以及核糖 ,其物质的量之比 (摩尔比 )为 1 .1 9∶0 .56∶0 .4 3∶0 .54.     

苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定

采用水提醇沉法获得苦荞多糖,经离子交换柱分离,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)纯度鉴定并测定多糖的相对分子质量。硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱法测定单糖组成。结果表明：苦荞经水提醇沉,用Sevag 法脱蛋白后,获得苦荞多糖(TBP);DEAE-纤维素柱层析获得3个苦荞多糖组分TBP-1、TBP-2和TBP-3,相对分子质量分别为144544、445656和636795。柱前衍生液相色谱分析可知：TBP-1、TBP-2是由葡萄糖组成的均一多糖;TBP-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成的杂多糖,其物质的量比为4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2.02。     

苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮改善HepG2/IR的联合作用研究

探讨苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单一组分及联合使用对胰岛素抵抗的改善作用。建立胰岛素抵抗人肝癌细胞模型,设立正常组、胰岛素抵抗组、盐酸吡格列酮阳性对照组、苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单独干预组,苦瓜皂苷和南瓜多糖、苦瓜皂苷和苦荞黄酮、南瓜多糖和苦荞黄酮联合干预组,测定葡萄糖消耗量、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、谷草转氨酶和谷丙转氨酶的含量,MTT法评价细胞活性,蛋白免疫印迹法检测细胞葡萄糖转运体4的表达。结果表明,多数生理生化指标、细胞活性和GLUT4的表达联合组与单一组分相比有显著性差异(P0.05);采用析因分析,苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮联合在改善葡萄糖消耗量和谷丙转氨酶上具有交互协同作用(P0.05)。     

石花菜多糖的分离纯化及单糖组成分析

以石花菜为原料,对石花菜多糖进行分离纯化,并对纯化后多糖组分的理化性质及单糖组成进行分析。利用复合酶法提取石花菜多糖并采用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52离子交换柱层析及Sephadex G-200凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,按峰收集主要的多糖组分GAP1,对其总糖、蛋白质、糖醛酸及硫酸基质量分数进行测定,并采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)对多糖进行衍生化,通过高效液相色谱法测定其单糖组成。结果表明:石花菜粗多糖经柱层析后收集得到主要多糖组分GAP1,其总糖质量分数为92. 56%,糖醛酸质量分数为44. 53%,硫酸基质量分数为6. 92%,不含蛋白质; PMP柱前衍生高效液相色谱法测得GAP1主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和L-岩藻糖6种单糖按照不同比例缩合而成,各单糖物质的量比为1. 00∶1. 00∶4. 45∶27. 31∶2. 27∶1. 88。     

仙人掌多糖的分子量及单糖组成分析

对仙人掌多糖分子量及其单糖组成进行了研究。采用水提醇沉法提取多糖,DEAE-纤维素离子交换层析柱分离纯化,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定多糖分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。结果表明:此法最终获得三个多糖组分OPS-1、OPS-2、OPS-3,相对分子量分别为124712、197943、43083。OPS-1含葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.5:12.9:1.0;OPS-2含甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.0:15.6:1.0:2.4:8.2:41.6:36.3;OPS-3含鼠李糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.0:2.4:1.4:1.4。为仙人掌多糖的进一步研究及开发提供了科学依据。     

南瓜多糖复合酶法提取及纯化的研究

南瓜中的有效成分南瓜多糖对糖尿病症状有显著的治疗效果,为了开发和利用这一功能成分,本实验采用酶解的方法提取南瓜多糖。首先利用正交试验确定复合酶添加量为纤维素酶1%,果胶酶1.5%,木瓜蛋白酶1%;利用正交试验确定复合酶的最佳反应条件为温度40℃,pH值为5.5,反应时间为30min。在最佳条件下,多糖的提取率为28.8%。将复合酶法制得的南瓜粗多糖经脱色、透析后,上DEAE-纤维素柱层析,得到三种级分。主要级分PPIII经SepharoseCL-4B凝胶柱层析、紫外扫描和冻融分析鉴定为均一组分。     

南瓜AP1多糖结构的分析和原子力显微镜研究

采用热水浸提法提取南瓜粗多糖并对从中分离得到的南瓜AP1 多糖进行结构分析。采用分光光度法,以半乳糖醛酸为对照品测定糖醛酸含量;采用高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子量;采用紫外- 可见光谱法、红外光谱法、气相色谱法及原子力显微镜对其进行化学结构分析。结果显示：南瓜AP1 多糖的糖醛酸含量为38.87%,平均分子量为2 .0 × 105D,不含核酸及蛋白质,由阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、果糖、半乳糖、葡萄糖组成,具有糖类物质的特征吸收峰,同时存在呋喃环和吡喃环,具有高度分枝的结构,并且糖链间形成小环或螺旋结构。     

Chemical Properties of a Polysaccharide Purified From Solid‐State Fermentation of Auricularia Auricular and its Biological Activity as a Hypolipidemic Agent

A water‐soluble crude polysaccharide was extracted by hot water from Auricularia auricular mycelium grown under solid‐state fermentation (SSF). The crude polysaccharide was purified by DEAE Sephadex A‐50 and Sephadex G‐200 chromatography. Fourier transform infrared spectroscopy and nuclear magnetic resonance (¹H NMR) spectroscopy were used to investigate the structure of the purified A. auricular polysaccharide (AAP‐I) and revealed that it is α‐glycosidically linked. After 14 and 28 days of AAP‐I orally administered, the AAP‐I significantly decreased the levels of total cholesterol, triglyceride, and low‐density lipoprotein cholesterol in mice in which hyperlipidemia had been induced by a high fat diet (P < 0.05). The results revealed that AAP‐I from SSF of A. auricular mycelium possesses potent hypolipidemic properties. The polysaccharide may be useful as a functional food additive and a hypolipidemic agent.     

响应面法优化南瓜多糖的提取工艺及其降糖作用研究

实验目的:优化水溶性南瓜多糖(Pumpkin Polysaccharide,PP)提取的最佳工艺条件,并验证所提取的南瓜多糖的降血糖效果。实验方法:实验依次采用加热浸提、有机溶剂分步萃取等工艺技术手段,利用响应面分析法(RSA),通过响应面的等值线分析来寻求浸提的最优工艺参数;并结合动物实验,分别设置南瓜多糖实验组、空白对照组及阴性对照组,实验当天南瓜多糖实验组小鼠腹腔注入南瓜多糖500mg/kg,其余两组小鼠分别腹腔注射生理盐水0.5mL,测试各组小鼠给药前、给药7h及11h时的血糖值。实验结果:提取工艺的最佳参数为:温度55℃、料液比1:30、提取时间130min,在此条件下,南瓜多糖的得率为5.32%,所获得的南瓜多糖具有明显的降血糖效果(P<0.001)。结论:通过响应面法优选的工艺条件适合南瓜多糖的提取。     

A preliminary study of monosaccharide composition and α‐glucosidase inhibitory effect of polysaccharides from pumpkin (Cucurbita moschata) fruit

In this work, crude polysaccharide extracts were extracted from pumpkin (Cucurbita moschata) fruit by hot water. After removal of proteins and purification, polysaccharides of pumpkin fruit (PP1‐1) were subjected to structural identification. Gas chromatography analysis indicated that PP1‐1 comprised of galactose (86.4%), and glucose (13.6%). The molecular weight of PP1‐1 was measured to be 0.87 × 10⁴ Da by gel permeation chromatography. The inhibitory kinetic evaluation showed that it was non‐competitive inhibition of PP1‐1 on the α‐glucosidase‐catalysed hydrolysis of PNPG. The Michaelis–Menten constant (K_m) was 0.106 m , and the inhibitory constants (K_i), 0.435 mg.     

Isolation,Purification, and Structural Features of a Polysaccharide from Phellinus linteus and Its Hypoglycemic Effect in Alloxan‐Induced Diabetic Mice

Phellinus linteus is a medicinal mushroom that has been used in Oriental countries for centuries for its antitumor, antioxidant, immunomodulatory, and biological activity on hyperglycemia. A water‐soluble crude polysaccharide was extracted using hot water from P. linteus mycelia grown under submerged culture. An orthogonal experiment was used to optimize the extraction conditions of P. linteus mycelia polysaccharides (PLP). The crude polysaccharide was purified using DEAE Sephadex A‐50 and Sephadex G‐200 chromatography. Fourier transform infrared (FT‐IR) spectroscopy and nuclear magnetic resonance (¹H NMR) spectroscopy were used to investigate the structure of the purified P. linteus polysaccharide (PLP‐I), revealing that it was mainly a branched‐type glycan with both α‐ and β‐linkages and a pyranoid sugar ring conformation. PLP orally administered at 100 mg/kg body weight/d could significantly reduce the blood glucose level by 35.60% in alloxan‐induced diabetic mice. The results of an oral glucose tolerance test (OGTT) revealed that PLP had an effect on glucose disposal after 28 d of treatment. The result revealed that PLP from a submerged culture of P. linteus mycelia possessed potent hypoglycemic properties. The polysaccharide may be useful as a functional food additive and a hypoglycemic agent.     

麦冬多糖POJ-U1a的结构研究及原子力显微镜观测

用功率超声从麦冬中提取麦冬多糖POJ-U1,通过DEAE-52 cellulose色谱柱和Sephadex G-150凝胶色谱柱进行分离纯化得到POJ-U1a,采用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量,采用红外光谱法、气相色谱法对其化学结构进行研究,原子力显微镜观察其微观形貌。结果表明,麦冬多糖POJ-U1a的平均分子量为4.02×103D,是一种由均一葡萄糖组成的葡聚糖,具有糖类物质的特征吸收峰,同时存在呋喃环,是具有高度分枝的化学结构的多糖。     

蛹虫草胞外多糖的制备、结构分析及其免疫活性

本实验选择蛹虫草菌株CICC 14014液态发酵培养，提取蛹虫草胞外多糖，测定其理化性质及结构，并对其免疫活性进行研究。采用DEAE-Sephacel阴离子交换柱联合Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱纯化蛹虫草胞外多糖；利用高效液相色谱法测定多糖分子质量，利用傅里叶变换红外光谱鉴定多糖结构；选用BALB/c小鼠构建免疫损伤模型，考察其体质量及免疫器官指数变化情况，观察其脾脏组织切片形态，计算其T、B细胞增殖率，测定其血清细胞因子及免疫球蛋白质量浓度。结果表明，蛹虫草发酵液中多糖质量浓度为3.15 mg/mL，经分离纯化后所得单一多糖分子质量为3.67 kDa，纯度可达86.13%。动物实验结果表明，蛹虫草胞外多糖可明显提高免疫器官指数，能够有效促使T细胞（低剂量时）、B细胞增殖和免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G、IgA、IgM、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-2、干扰素（interferon，IFN）-γ的分泌，免疫调节效果显著。研究结果表明蛹虫草胞外多糖可修复环磷酰胺导致的BALB/c小鼠免疫功能损伤，为开发蛹虫草发酵液资源建立了部分理论支撑。