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携带人白细胞介素-2 cDA序列的E1区缺陷的腺病毒载体pAdl2/RSV-IL2-bpA与pJM17质粒,通过磷酸钙沉地共转染293细胞,经同源重组,获得了一个腺病毒噬斑。抽提腺病毒DNA,运用PCR扩增及XbaI酶切检测,证实这一噬斑为带有人IL-2 cDNA序列的重组腺病毒。受其感染的293细胞和人黑素瘤A375细胞上清中,都能够测出IL-2的活性,表明制备的重组腺病毒是能表达人IL-2的。 相似文献
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报告了重组融合蛋白TGFα-PE40的分离纯化方法及稳定性研究,采用对原生质体进行超声破碎,抽得纯度为80%的内涵体。包涵体用8M尿素变性后,再对pH9.0的缓冲液进行透析复性,最后经过MonoQ柱及Superdex-75柱进行分离,可得到纯度为98%的高活性TGFα-PE40。经测定性测试,纯化的TGFα-PE40在4℃中可存放半年以上,并在50℃以下活力稳定。 相似文献
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以硅藻土-莫来石陶瓷膜管为支撑体,以TiO2为过渡层,通过溶胶凝胶法利用具有大量支链的聚酰亚胺和TiO2溶胶制备了系列不同TiO2含量的聚酰亚胺/TiO2杂化膜.聚酰亚胺是利用4,4'-六氟亚异丙基-邻苯二甲酸酐(6FDA)、2,4,6-三甲基-1,3-苯二胺(TMPDA)和3,5-二氨基苯甲酸(DABA)在溶液中进行亚胺化完成的.采用FTIR、TG/DTA、DSC、TEM、BET和气体渗透测定对系列膜进行了表征和测试.结果表明:聚酰亚胺通过支链上的羧酸基和TiO2相键连织构成了具有规则孔道的空间网状结构,并且随着TiO2含量的增加孔径逐渐减小;杂化膜具有较高的热稳定性和有机无机兼容性;相对于聚酰亚胺膜,杂化膜对H2、CO2和H2O相对于N2具有较高的分离性,TiO2含量为25%(质量分数)的杂化膜对H2/N2、CO2/N2和H2O/N2的分离因子分别达到56.6、31.3和55.3. 相似文献
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分别将IL-6和HIV-1gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠血清抗体水平和特异性CTL杀伤活性。结果获得的重组鸡痘病毒可同时表达HIV-1核心蛋白和IL-6,并在感染细胞内形成病毒样粒子。重组病毒具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。 相似文献
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表达rAPC大肠杆菌的高密度发酵及纯化产物的抑瘤活性 总被引:9,自引:1,他引:9
重组菌的高密度发酵技术是高效表达异源蛋白的一项重要技术。本文研究了培养基组成。培养条件以及诱导条件等对最终的菌体密度和rAPC表达量的影响,确立了最优的高密度发酵条件。此外,还探讨了不同补料流加方式对菌体生长和rAPC表达的影响,结果表明DO-stat补料流加方式具有显著增加菌体量和重组蛋白表达量的作用。发酵16小时后,菌体密度可达OD600106,每升发酵液中rAPC含量可达3.52g,用纯化好的rAPC对皮下接种S180的小鼠灌胃或腹腔注射,剂量为每天3.4mg/kg-13.4mg/kg,共10天。结果表明rAPC对小鼠S180肉瘤有显著的抑制作用,瘤重抑瘤率分别在45%-64%之间,且对荷瘤小鼠的白细胞数量和胸腺指数均无明显影响。 相似文献
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Engineering Globular Protein Vesicles through Tunable Self‐Assembly of Recombinant Fusion Proteins 下载免费PDF全文
Yeongseon Jang Won Tae Choi William T. Heller Zunlong Ke Elizabeth R. Wright Julie A. Champion 《Small (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)》2017,13(36)
Vesicles assembled from folded, globular proteins have potential for functions different from traditional lipid or polymeric vesicles. However, they also present challenges in understanding the assembly process and controlling vesicle properties. From detailed investigation of the assembly behavior of recombinant fusion proteins, this work reports a simple strategy to engineer protein vesicles containing functional, globular domains. This is achieved through tunable self‐assembly of recombinant globular fusion proteins containing leucine zippers and elastin‐like polypeptides. The fusion proteins form complexes in solution via high affinity binding of the zippers, and transition through dynamic coacervates to stable hollow vesicles upon warming. The thermal driving force, which can be tuned by protein concentration or temperature, controls both vesicle size and whether vesicles are single or bi‐layered. These results provide critical information to engineer globular protein vesicles via self‐assembly with desired size and membrane structure. 相似文献
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为探索适于昆虫表达体系重组蛋白质的分离、纯化方法,对家蚕细胞表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的纯化工艺进行了研究。利用离子交换色谱、凝胶过滤色谱及旋转等电聚焦电泳等技术,建立了从家蚕血淋巴液中分离、纯化rhGM-CSF的工艺路线。经过三步分离,获得了纯度为97.24%的目标产品,总回收率达33.59%。此法可有效地去除动、植物色素且简单、经济、高效,适于进行规模放大,为rhGM-CSF的大规模制备及临床应用打下了基础。 相似文献
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水稻中一种抗真菌蛋白的分离与特性分析 总被引:4,自引:0,他引:4
从萌发的水稻种子中分离并纯化了一种能抑制多种病原真菌生长的蛋白(简称为RAFPI),在马铃薯葡糖琼脂培养基上,20μgRAFPI可明显抑制木霉(Trichodermareesei)菌丝的生长,此蛋白还具有较广的抗真菌菌谱,其分子量为16.59KD,等电点为8.7,组成成分中富含Pro、GlX和Asx,经测序得到了其N端20个氨基酸序列。 相似文献
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Abhinanda Sengupta Ajit Kumar Gayatree Barik Aakash Ahuja Jit Ghosh Harshita Lohani Pratima Kumari Tanmay K. Bhandakkar Sagar Mitra 《Small (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)》2023,19(12):2206248
P2-type Na2/3Ni1/3Mn1/2Ti1/6O2 (NMTNO) cathode is a preeminent electrode material for Na-ion batteries owing to its open prismatic framework, air-moisture stability, inexpensiveness, appealing capacity, environmental benignity, and Co-free composition. However, the poor cycling stability, sluggish Na-ion kinetics induced in bulk-sized cathode particles, cracking, and exfoliation in the crystallites remain a setback. To outmaneuver these, a designing strategy of a mechanically robust, hexagonal nano-crystallites of P2-type Na2/3Ni1/3Mn1/2Ti1/6O2 (NMTNOnano) electrode via quick, energy-efficient, and low-cost microwave-irradiated synthesis is proposed. For the first time, employing a unified experimental and theoretical approach with fracture mechanics analysis, the mechanism behind the enhanced performance, better structural stability, and lower diffusion-induced stress of NMTNOnano compared to micro-sized Na2/3Ni1/3Mn1/2Ti1/6O2 is unveiled and the electrochemical shock map is predicted. The NMTNOnano cathode provides 94.8% capacity retention after 100 cycles at 0.1 C with prolonged performance for 1000 cycles at 0.5 C. The practical viability of this cathode, tested in a full cell against a hard carbon anode delivered 85.48% capacity retention at 0.14 mA cm−2 after 200 cycles. This work bridges the gap in correlating the microstructural and electrochemical properties through experimental, theoretical (DFT), and fracture mechanics analysis, thereby tailoring efficient cathode with lower diffusion-induced stress for high-energy Na-ion batteries. 相似文献
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TiO2/Bi2WO6异质结是当前最具潜力的一种可见光响应半导体光催化剂。以富含缺陷的TiO2纳米带为基体,采用水热法,诱导Bi2WO6在基体缺陷位点进行异质生长,从而合成具有异质结构的TiO2/Bi2WO6复合材料。利用XRD、SEM、UV-Vis等技术,分析了基体表面缺陷、Bi2WO6负载量对TiO2/Bi2WO6复合材料微观结构和性能的影响。结果表明,在基体表面引入缺陷,可以使TiO2/Bi2WO6复合材料在可见光下对有机污染物Rh B的降解速率提高约50%。Bi2WO6负载量为0.12时的TiO2/Bi2WO6复合材料,在可见光下,辐照6 min后对Rh B的降解率达99.3%,辐照30 min后对MB的降解率达99.7%,辐照15 min后对TC-HCl的降解率达87.7%。 相似文献
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SrNb2O6/Nb2O5复合物光催化降解甲基橙的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
光催化剂SrNb2O6采用传统固相反应分别在合成温度为950℃(低温)和1400℃(高温)进行制备.通过XRD粉末衍射和UV-Vis吸收光谱分析,表征了样品的物相和光谱吸收特性.通过对高低温样品的测试和分析表明,高温样品具有单一的物相,而低温样品反应并不完全,是一个混合物.在SrNb2O6光催化活性研究中,常用的甲基橙被选作染料光降解模型,对比试验表明低温样品的光催化活性远高于纯相样品SrNb2O6或Nb2O5.经过讨论和分析,推断出低温产物中存在的异质结(SrNb2O6/Nb2O6)是提高光催化性能的根本原因. 相似文献