虎杖中白藜芦醇提取工艺研究进展

白藜芦醇是一种生物性很强的天然多酚类物质,又称为芪三酚,是动脉粥样硬化、心脑血管疾病、肿瘤的化学预防剂,主要来源于花生、葡萄(红葡萄酒)、虎杖、桑椹等植物。本文综述了近十几年来虎杖白藜芦醇提取工艺,并分析比较各种方法的优缺点和发展趋势,以期为虎杖白藜芦醇提取工艺的深入研究提供参考。     

虎杖中白藜芦醇提取工艺研究

白藜芦醇是一种重要的活性天然产物,本研究以虎杖为原料,研究了白藜芦醇的溶剂法和酶解法提取工艺,考察了料液比、提取时间、提取温度、pH、酶加入量等对提取得率的影响．通过正交实验优化了溶剂法和酶解法的最佳工艺参数．实验结果表明：溶剂法优化工艺为：pH 5,料液比1:65,提取温度是60 ℃,提取时间2 h;酶解法优化工艺为：pH 6,料液比1:40,酶解温度是60 ℃,酶解时间2 h,二者得率分别是：0.496%和0.942%。酶解法的得率大约是溶剂法的2倍,可以作为虎杖中白藜芦醇提取的优选方法。     

超声波提取虎杖中白藜芦醇的优化工艺研究

目的:筛选虎杖中白藜芦醇的最佳提取工艺。方法:采用超声波提取,正交实验优化提取条件,高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量。结果:虎杖中白藜芦醇的提取最佳工艺为:液料比6:1,温度70℃,乙醇浓度70%,提取时间20min;各因素的影响依次为:提取液料比、温度、乙醇浓度、提取时间。结论:最佳优选结果经验证实验,具有较好的重现性。      

超声波提取虎杖中白藜芦醇的优化工艺研究

目的:筛选虎杖中白藜芦醇的最佳提取工艺.方法:采用超声波提取,正交实验优化提取条件,高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量.结果:虎杖中白藜芦醇的提取最佳工艺为:液料比6:1,温度70℃,乙醇浓度70%,提取时间20min;各因素的影响依次为:提取液料比、温度、乙醇浓度、提取时间.结论:最佳优选结果经验证实验,具有较好的重现性.     

酶转化虎杖苷制备白藜芦醇

白藜芦醇是一种植物雌激素,具有多种生理功能。文中采用微生物酶对转化虎杖苷制备白藜芦醇,确定了酶转化条件,建立了白藜芦醇的分离纯化方法,获得了纯度高达98%的白藜芦醇样品。采用酶转化法制备白藜芦醇的得率,是虎杖直接提取法的3倍左右,且苷水解酶可循环使用。     

从虎杖中同时提取分离白藜芦醇和蒽醌类工艺研究

以自然发酵后的虎杖为原料,采用甲醇热回流同时提取虎杖中的白藜芦醇和蒽醌类化合物,选择甲醇浓度、料液比、提取次数和提取时间作为考察因素,以白藜芦醇和蒽醌类化合物的含量为指标,通过正交试验,得到白藜芦醇和蒽醌类化合物同时提取的适宜条件为:体积分数98%甲醇,料液比1∶6,提取3次,每次1 h,白藜芦醇的含量1.912%,提取率达90%,蒽醌类化合物的含量为1.504%,提取率达91.15%;粗提物经V(丙酮)∶V(乙醚)=1∶3的混合溶剂纯化,体积分数50%乙醇溶解分离后,分别得到了白藜芦醇和蒽醌粗品,粗品中白藜芦醇的含量达63.72%,蒽醌含量达50.82%。     

复合酶法提取虎杖中白藜芦醇的工艺研究

研究复合酶解法提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺条件。在单因素试验基础上,以水作为溶剂,固液比1∶20（g/mL）,选取酶添加量、酶解pH、温度和时间4个因素,采用L9（34）对酶解法提取白藜芦醇工艺条件进行正交试验,得到最佳提取条件为,复合酶添加量为1.5 mg/g纤维素酶+1.5 mg/g阿魏酸酯酶,温度50℃,pH 5.0,提取时间3.0 h,白藜芦醇提取率为1.513%。与溶剂提取法、纤维素酶酶解法相比较,复合酶解法提取虎杖中白藜芦醇的效率明显提高。     

虎杖中高效转化白藜芦醇苷的内生真菌筛选和鉴定

从虎杖根部分离获得8株内生真菌,经液态培养基发酵后进行HPLC检测,以白藜芦醇苷转化率为指标,从中筛选出具有高效转化能力的2株内生真菌G8和G10,其转化率分别达到64.2%和58.1%,将虎杖中的白藜芦醇含量提高到原来的3.84倍和3.57倍。结合ITS测序与Genback中rDNA同源序列对比,鉴定G8和G10分别为青霉菌RF3(Penicillium sp.RF3)和青霉菌ST008(Penicillium sp.isolate ST008)。     

白藜芦醇和白藜芦醇苷抗氧化作用的研究

采用亚油酸体系、H2O2诱导的红细胞溶血试验研究白藜芦醇、白藜芦醇苷的体外抗氧化作用。研究结果表明:白藜芦醇、白藜芦醇苷能抑制亚油酸的过氧化作用,其抑制率高于VC、BHT、虎杖粗提物。白藜芦醇、白藜芦醇苷均可降低H2O2诱导红细胞氧化性溶血率,其作用效果好于VC、VE和虎杖粗提物,抑制率具有剂量效应。     

激素诱导和非生物胁迫对虎杖根中白藜芦醇含量影响及虎杖根中白藜芦醇闪提工艺优化

用紫外辐射和水杨酸、乙烯利、H2O2溶液对新鲜虎杖根进行处理,探究其对新鲜虎杖根中白藜芦醇含量的影响。采用闪式提取法从虎杖根中提取白藜芦醇,在单因素实验的基础上进行正交实验探究最佳提取工艺条件,用HPLC对白藜芦醇进行定性定量分析。结果表明:紫外辐射15 min,暗处理24 h后虎杖根中白藜芦醇的含量达到最大值,较辐射前提高了72%。10 mmol/L水杨酸溶液浸泡24 h后虎杖根中的白藜芦醇含量提升到原来的4倍多。5%H2O2溶液浸泡24 h后虎杖根中白藜芦醇含量上升了34%。而乙烯利溶液浸泡则会降低白藜芦醇的含量。闪式提取法提取虎杖根中白藜芦醇的最佳工艺条件是:提取温度50℃,提取时间60 s,乙醇浓度80%,料液比例1∶30 g/m L,在此条件下,白藜芦醇得率为0.1877%。      

大孔吸附树脂对虎杖中自藜芦醇吸附性能的研究

本文研究了多种大孔吸附树脂对白藜芦醇的吸附与脱附性能,从中选出H103树脂具有较大吸附量和解吸率.动态吸附实验研究了提取液浓度、pH、流速对H103树脂吸附量的影响,适合的上柱浓度为0.7157mg/ml,上柱液的pH为4.10,上柱液流速为2BV/h.4倍树脂床体积的80%乙醇以1BV/h的流速进行洗脱即可基本将白藜芦醇完全从H103树脂上解吸下来.     

大孔吸附树脂对虎杖中白藜芦醇吸附性能的研究

本文研究了多种大孔吸附树脂对白藜芦醇的吸附与脱附性能，从中选出H103树脂具有较大吸附量和解吸率。动态吸附实验研究了提取液浓度、pH、流速对H103树脂吸附量的影响，适合的上柱浓度为0．7157mg／ml，上柱液的pH为4．10，上柱液流速为2BV／h。4倍树脂床体积的80％乙醇以1BV／h的流速进行洗脱即可基本将白藜芦醇完全从H103树脂上解吸下来。     

微生物酶法从虎杖中提取白藜芦醇的研究

用微生物发酵法酶解虎杖,可以提高从虎杖中获取白藜芦醇的得率.通过对多种含糖甙键水解酶菌株的筛选,获得四株可以直接作用于虎杖的优良菌株.其中用 Aspergillus niger 1分解虎杖,提取白藜芦醇,与传统醇提工艺和自酶解法相比,提取率明显提高.     

转化白藜芦醇苷虎杖内生真菌的分离和鉴定

为提高虎杖中白藜芦醇得率,采用虎杖内生真菌直接发酵虎杖转化白藜芦醇苷为白藜芦醇,通过从虎杖根、茎中初筛得到6株内生真菌,复筛以虎杖煮提液为底物发酵,采用高效液相色谱法定量检测发酵液中白藜芦醇苷和白藜芦醇含量。结果表明：6株内生真菌均具有转化白藜芦醇苷为白藜芦醇能力,其中分离于茎内的J1转化率最高为25.6%。J1经形态学观察及ITS-5.8S rDNA序列分析,鉴定为草酸青霉Penicillium oxalicum,Genbank登录号为HQ732137。     

超声辅助离子液体/阴离子表面活性剂双水相萃取虎杖中的虎杖苷和白藜芦醇

将超声辅助离子液体/阴离子表面活性剂双水相萃取和高效液相色谱法相结合,建立一种简单、绿色、高效的分析方法用于检测虎杖中的虎杖苷和白藜芦醇。本研究以水溶性离子液体为萃取剂,以阴离子表面活性剂为成相盐,在超声的辅助作用下,目标分析物被萃取于离子液体中。实验结果表明,最佳提取条件为:以400μL 1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐为萃取剂,0.16 g十二烷基苯磺酸钠为成相盐,样品溶液pH 7.0,超声时间20 min,超声功率160 W。各化合物在线性范围内都具有良好的线性关系(r0.9995),日内和日间精密度分别低于3.27%和6.31%,检出限和定量限分别为2.8~12.3和9.4~41.1 ng/mL,样品加标回收率在86.88~94.13%之间。本研究采用离子液体代替传统的有机溶剂作为萃取剂,集提取、分离和纯化于一体,具有操作简单、溶剂用量少、提取时间短等优点,可广泛应用于中药活性成分的提取与分析。     

虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取工艺优化及其与3类根茎含量比较

目的：研究虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取工艺,比较其果实与雄株、未结果雌株、结果雌株3 类根茎中白藜芦醇与大黄素得率。方法：采用高效液相色谱法测定其果实与3 类根茎中白藜芦醇与大黄素含量,确定果实中白藜芦醇与大黄素提取的溶剂与方法,采用正交试验法考察微波火力档、溶剂体积分数、料液比及提取时间对提取工艺的影响,确定微波辅助提取的最佳提取工艺,比较虎杖果实、3 类根茎中二者得率。结果：正交试验与方差分析得出果实中白藜芦醇与大黄素的最佳提取条件为乙醇体积分数70%、料液比1∶20（g/mL）、额定功率800 W微波炉先40火力处理3 min冷却后60火力处理3 min、提取时间6 min,高效液相色谱法测得虎杖雄株、未结果雌株根茎中的白藜芦醇与大黄素得率均高于结果雌株根茎及果实,果实及3 类根茎中白藜芦醇与大黄素得率均超过《中国药典》（2010）规定值,提取工艺合理、稳定、可行,虎杖果实具备开发利用的价值。