一种利用反相高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中苯乳酸的方法及其评价

为建立一种反相高效液相色谱法(Reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)检测乳酸菌发酵液中苯乳酸含量的方法,系统考察了3种固定相、2种流动相有机相、5种水相及其比例对苯乳酸RP-HPLC检测的影响并对方法进行了评价。确定了以双封端C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,0.05%三氟乙酸(Trifluoroacetic acid,TFA)-乙腈,体积比75∶25,等度洗脱,流速1 mL/min,检测波长210 nm,柱温30 ℃。在0.2~5.0 mg/L内线性良好,r=0.9998,回收率99.88%~101.08%,检出限0.1400 mg/L,定量限0.4600 mg/L,1 d精密度和重复性相对标准偏差(Relative standard deviation,RSD)为0.30%和0.64%,30 d精密度和重复性RSD为0.59%和0.79%,30 d内苯乳酸标准储备液稳定性RSD为2.45%,乳酸菌发酵液中苯乳酸合成量为0.1400 mg/L时,其扩展不确定度为0.0046,95%的置信区间,包含因子k=2。选用短乳杆菌P3(Lactobacillus brevis)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ATCC8014发酵液为检测对象,培养120 h苯乳酸合成量分别为77.58和62.60 mg/L。结果表明,在该方法下苯乳酸能够稳定出峰,检测效率高,检测成本低,操作简单,结果准确可靠,适合检测大批量样品,可为苯乳酸的相关研究提供理论依据。     

黄酒发酵过程中乳酸含量分析及变化规律的研究

用反相高效液相色谱法对机械化干黄酒生产过程中乳酸含量进行了测定,得到乳酸的变化曲线:y=0.4661Ln(x)+1.4302,R2=0.9904.     

反相高效液相色谱法测定青果中的氨基酸

应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了广东产15种青果(赤钟仔、冬节圆、长穗赤、香种、土纳甜种、八枝香、甘种、正纳种、红心榄、东孙种、流黄种、一枝香、豆仁种、白鸡心和小鸡心种)千果肉中水解氨基酸含量.色谱柱为爱尔兰产150mm×4.6mm,5μm RP18柱.流动相A为0.04moL/L的KH2PO4(pH7.2±0.05),B为水,C为乙腈,流速0.65mL/min,梯度洗脱,检测波长360nm,柱温40℃.结果:15种青果果实中氨基酸的含量为44.5～114mg/g干粉.氨基酸含量在品种之间存在很大的差异,氨基酸的种类和含量可能与青果的药食特性有关.     

苯乳酸的快速检测研究

苯乳酸是一种新型生物防腐剂。文中研究了苯乳酸的薄层层析快速检测方法、反相高效液相色谱分析检测法,并利用手性柱高效液相色谱分析检测D-型和L-型苯乳酸。     

高效液相色谱法测定浓香窖泥中乳酸含量

建立了采用高效液相快速准确的检测窖泥中乳酸的含量的方法。此方法特征在于在样品前处理过程中加入磁力搅拌能很大程度的减少因窖泥结团而导致浸泡不均匀。由于窖泥中物质比较复杂,因此采用减压蒸馏的方法来处理样品能祛除大部分低沸点酯类化合物杂质,从而能使乳酸更好的分离。采用Agilent Polaris C18-A(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇和磷酸二氢钾为流动相,体积比为5∶95,流速为0.5 mL/min,检测波长为210 nm。在此色谱条件下,乳酸在标准品和样品中出峰时间一致（出峰时间18.5 min）,峰型较好,且加标回收率达到了98.7%～101.93%。     

反相HPLC双检测器法同时测定米根霉乳酸发酵液中的有机酸与葡萄糖

提出了用高效液相色谱法同时测定米根霉乳酸发酵液中的有机酸和葡萄糖。用Wakosil Ⅱ 5C18RS(4 6mm× 150mm ,5μm)色谱柱 ,以 0 0 1mol/L磷酸水溶液 (pH2 5)为流动相 ,流速 1mL/min ,利用有机酸及葡萄糖对紫外光吸收强弱的差异 ,采用双检测器系统 ,以示差折光检测器检测葡萄糖 ,以可变波长检测器检测有机酸 ,一次进样可同时定性及定量分析待测样中的有机酸及葡萄糖 ,每一样品的分析过程不超过 10min ,对于分析数量较多的样品 ,可及时了解乳酸发酵过程的变化 ,方法的优越性尤为突出     

RP-HPLC法分离和定量测定未变性的乳清蛋白成分

建立了一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)来分离并定量测定脱脂乳、加热脱脂乳及脱脂乳粉中未变性的乳清蛋白的分析方法。采用Venusil ASB-C8色谱柱;流速0.8 mL/min;检测波长215 nm;柱温30℃;流动相A为体积分数0.1%的三氟乙酸水溶液;流动相B为体积分数0.1%的三氟乙酸乙腈溶液;洗脱方式:流动相B开始在38%下等度洗脱2 min,然后在5 min内上升到43%,最后在43%下等度洗脱13 min。此方法在20 min内将4种乳清蛋白组分分离且各蛋白线性关系良好,适合定性和定量检测未变性的乳清蛋白组分。     

手性柱色谱法测定酸奶及乳酸饮料中的L-乳酸及D-乳酸

采用手性柱高效液相色谱法测定部分市售酸奶和乳酸饮料中L-乳酸和D-乳酸的质量浓度.结果表明,酸奶中L-乳酸质量浓度为25～100.00 g/L之间.D-乳酸质量浓度为0.00～2.00 g/L之间,绝大多数的酸奶中L一乳酸的质量分数超过98.00%,D-乳酸质量浓度较低;乳酸饮料中L-乳酸质量浓度在10.00～30.00g/L之间,D-乳酸质量浓度为1.00-3.00 g/L之间.     

高效液相色谱法测定亚油酸甲酯含量

建立一种高效液相色谱测定亚油酸甲酯含量的方法。采用IntertsilO D S-SP柱,紫外检测器,检测波长为243 nm ,流动相为甲醇－水（体积比为95∶5）混合液,流速为0.8 m L/m in,进样体积为20μL,柱温为30℃。结果可知,亚油酸甲酯质量浓度和峰面积的线性回归方程是y=（2E＋06）x-43628,R 2=0.9999,线性范围是0～4.16 g/L,平均加样回收率为99.92%。     

反相液相色谱法测定迷迭香中鼠尾草酸的含量

建立反相高效液相色谱法分离和测定迷迭香中鼠尾草酸的含量。以Hil sil C18反相键合硅胶色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈 甲醇(85:15)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长为210nm,外标法定量。鼠尾草酸在20～200μg/ml范围有良好的线性关系,r=0.9998,回收率为98.6%。本方法准确、可靠、简便,可用于迷迭香中鼠尾草酸的含量测定。     

浓香型白酒与乳酸菌、乳酸、乳酸乙酯

介绍了浓香型白酒生产中乳酸菌的来源、乳酸菌和乳酸降解菌在白酒发酵中的作用及乳酸、乳酸乙酯在白酒中的功能。并建议通过浓香型白酒生产过程中乳酸菌、乳酸、乳酸乙酯的变化等情况来调整生产工艺。     

乳酸及其代谢工程生产

乳酸是一种具有重要工业价值的有机酸。在体内,乳酸不仅是一种能源物质,而且可能作为一种信号分子,对维持机体代谢网络的平衡起到了重要作用。本文分析了目前乳酸生产存在的主要问题,介绍了近年来应用代谢工程改进乳酸生产的一些实践,并展望了代谢工程用于乳酸生产的潜能及发展趋势。     

乳酸乙酯水解动力学研究

在间歇反应器内,对乳酸乙酯在353～368K下水解生成乳酸的反应动力学进行了研究,采用最小二乘法回归模型参数,得到乳酸乙酯水解反应速率方程。对模型显著性进行残差检验、F检验和Arrhenius检验。结果表明建立的动力学模型残差分布合理,参数回归显著,模型能较好地表达反应特性。     

RP-HPLC法测定东北地区6 种红树莓果实中有机酸组成

建立一种反相高效液相色谱法分离和测定6 种红树莓果实中草酸、酒石酸、柠檬酸、DL-苹果酸和乳酸5 种有机酸的方法。色谱条件为：采用SinoChrom DS-BP C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.01 mol/L KH2PO4溶液（pH 2.60,97∶3,V/V）,流速0.6 mL/min,柱温30 ℃,检测波长210 nm。结果表明：在此条件下5 种有机酸都被有效地分离,各种有机酸的质量浓度与峰面积在测定范围内呈良好的线性关系,标准曲线相关系数在0.999 3～0.999 9之间;精密度实验相对标准偏差在0.20%～1.53%（n=5）范围内;回收率为98.83%～105.42%,相对标准偏差为0.06%～1.00%。测得6 种红树莓果实中有机酸以柠檬酸为主,含量为1 058.41～1 825.45 mg/100 g,草酸、乳酸、DL-苹果酸含量较低,未检测到酒石酸。该方法简单、高效、准确、重复性好,可用于红树莓果实中有机酸的分离测定。     

RP-HPLC法同时检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的条件优化

建立了一种结合紫外检测器同时检测果汁中的乳酸、富马酸、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)和展青霉素的反相高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离方法.考察了柱温、pH值、流速以及乙腈浓度对各组分保留时间和峰高的影响,最终采用pH为2.5的磷酸水溶液和乙腈的混合液作用于反相C18柱,以进行乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的色谱分析.在流速为1100ml/min,温度为30℃的整个分析过程中,流动相为含有5%乙腈的磷酸水溶液.前10min内,两种有机酸被在210nm处分离和检测.而5-HMF和展青霉素则被接下来的10min内于276nm处分离和检测.89.96%到102%的平均回收率证实了方法的准确度.该方法被成功地用于同时定量苹果浓缩汁中的乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素.     

钛胶RP-HPLC法同时测定5 种维生素

采用钛胶反相色谱柱,建立高效液相色谱法同时测定5 种维生素：烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素含量的检测方法。研究5 种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐pH值、缓冲盐类型及浓度、柱温和流速的关系,得出了最优色谱条件：于波长210 nm处检测生物素和钴胺素,于波长270 nm处检测烟酸、烟酰胺和叶酸,磷酸盐pH 7.0,浓度5.0 mmol/L,柱温50 ℃,流速0.8 mL/min。分析5 种维生素保留的热力学参数焓、熵和吉布斯自由能。烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素标准曲线线性良好（R2＞0.999 0）;烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素的检出限分别为6、10、20、22、8 ng/mL;5 种物质的相对标准偏差均低于1.36%;加标回收率范围为92.30%～107.20%。方法的精密度和准确度均可满足高效液相色谱法的测定要求。     

高效液相色谱法测定羊乳中的乳铁蛋白

为开发羊乳中乳铁蛋白的高效液相色谱测定方法及报告羊乳中乳铁蛋白的分布规律。本研究采集哈尔滨地区羊乳样品(n=24)和经过巴氏杀菌的羊乳样品(n=24),采用高效液相色谱测定其乳铁蛋白质量浓度。样品脱脂后,调整pH沉淀酪蛋白,采用C8色谱柱分离,二极管阵列检测器210nm检测,以水、乙腈、三氟乙酸为流动相进行线性梯度洗脱。方法回收率94.2%,线性范围50~300μg/mL,检出限12μg/mL,定量限40μg/mL。原料羊乳中乳铁蛋白的质量浓度的平均值122.1μg/mL,巴氏杀菌后羊乳中乳铁蛋白的平均值103.9μg/mL。巴氏杀菌对羊乳中乳铁蛋白浓度无影响。      

反相高效液相色谱法测定土豆羧肽酶抑制剂

建立土豆羧肽酶抑制剂的反相高效液相色谱测定方法。采用80％乙醇进行样品前处理，上C8柱，以乙腈-水为流动相作梯度洗脱，检测波长280nm。土豆羧肽酶抑制剂在35％-40％的乙腈区间内被洗脱下来，在10～1000mg／L时，其峰面积与浓度呈良好的线性关系，R^2=0．9982，加标回收率101．3％。该方法适用于土豆及其它植物粗提液中土豆羧肽酶抑制剂的定量分析及分离纯化过程的监控。