夏枯草水溶性多糖乙醇分级纯化及其理化性质研究

研究了夏枯草水溶性多糖的理化性质。采用水提醇沉法从夏枯草果穗中得到夏枯草多糖,将所得多糖复溶于水,依次在乙醇体积分数为20%、30%、40%、50%、60%和70%的条件下分级醇沉多糖,得到PVLP-1、PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5和PVLP-6等六个多糖组分。测定各组分的糖含量、糖醛酸含量及蛋白质含量等基本理化指标,并用气相色谱法测定它们的单糖组成,同时对其进行紫外和红外光谱扫描考察其光谱性质。结果表明,PVLP-1、PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5和PVLP-6均为酸性多糖,蛋白质含量较高。六个组分都含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其中木糖和阿拉伯糖含量最高,甘露糖最低,不含核糖和岩藻糖,但各组分中单糖具体摩尔组成比例不同。     

生姜皮多糖的分离纯化及其结构组成分析

以生姜皮为原料,经热水浸提法,乙醇醇沉得到生姜皮粗多糖。再经DEAE-纤维素-52阴离子交换柱和Sephadex?G-100凝胶柱对所得粗多糖进行层析纯化,得到3种水溶性生姜皮多糖(GE-1、GE-2、GE-3)。利用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用测定各多糖组分的分子质量,利用柱前衍生高效液相色谱法分析各多糖组分的单糖组成,通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描进一步分析各组分多糖结构。结果表明3种纯化多糖组分总糖含量分别为(98.06±0.15)%、(97.41±0.42)%、(97.89±0.22)%,分子质量分别为462、194 k D和376 k D。GE-1的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖、木糖,含有微量的半乳糖,其物质的量比为1.25∶6∶1;GE-2的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖和岩藻糖,其物质的量比为2.51∶9.25∶1;GE-3的单糖组成主要为甘露糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖,其物质的量比为17.39∶1∶1.89∶1.23。紫外光谱扫描结果显示3种多糖组分无明显的核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱结果分析得出GE-1、GE-2和GE-3含有多糖类物质的特征吸收峰。     

金花茶多糖理化性质的研究

以金花茶浓缩液为试验材料,通过乙醇沉淀、透析等方法分离得到金花荼粗多糖TPS.采用Cellulose DE-52离子交换柱层析对金花茶粗多糖进行分离纯化,得到TPS0、TPS1、TPS2、TPS3、TPS4和TPS5 6个糖组分,并对各糖组分的理化性质进行初步分析.糖分析结果显示,金花茶粗多糖的半乳糖醛酸约为中性糖的一半,表明金花茶粗多糖中含有相当一部分果胶物质;TPS0、TPS1和TPS2 3个组分以中性糖为主,而TPS3、TPS4和TPS5 3个糖组分则含有较高比例的半乳糖醛酸,表明TPS0、TPS1和TPS2 3个糖组分为中性多糖,TPS3、TPS4和TPS5 3个糖组分为果胶物质.构成糖分析结果显示,金花茶粗多糖中主要的构成糖有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖,它们以不同比例分布于离子交换柱层析并分离纯化得到的各糖组分;TPS3、TPS4和TPS5 3个糖组分中均含有约11％的鼠李糖,说明这3个果胶组分很可能由以半乳糖醛酸与鼠李糖交替连接而成的果胶分子链的毛发区域和由n个半乳糖醛酸连接而成分子链的平滑区域组成.另外,以上3个糖组分中均含有10％左右的葡萄糖,这与文献报道的果胶物质中葡萄糖比例较低有较大差异.     

香加皮多糖的分离纯化、单糖组成及其抗氧化活性研究

目的：分离纯化香加皮多糖(Cortex Periplocae Polysaccharides,CPP)，并对其进行单糖组成和抗氧化活性研究，以期为香加皮多糖在食品领域的开发和应用提供参考。方法：通过水提醇沉和Sevag法除蛋白得到香加皮粗多糖，经DEAE-52纤维素柱分离纯化得到4种多糖组分CPP0、CPP1、CPP2和CPP3，并对其进行化学成分检测、分子量测定、单糖组成分析、红外光谱和抗氧化活性分析。结果：4种多糖的糖含量分别为82.20%、77.13%、75.23%和72.85%，且都含有糖醛酸；相对分子量分别为685、477、411和572 kDa。4种多糖均为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖按照不同摩尔比组成的杂多糖。红外光谱表明4种多糖含有β-糖苷键且具有呋喃环。抗氧化实验结果显示4种多糖均具有一定的抗氧化性，总体抗氧化能力顺序为：CPP0>CPP3>CPP1>CPP2。结论：从香加皮中提取得到的4种酸性多糖，糖含量高、相对分子量大且均具有抗氧化活性，其中CPP0组分抗氧化活性最好。     

草菇多糖VVP-1b的分离纯化及其光谱分析

从草菇子实体中提取水溶性粗多糖,经脱蛋白、脱色、DEAE-Sepharose F.F和Superdex-200柱层析,分离纯化得到一种水溶性草菇多糖组分VVP-1b。采用液相色谱、紫外光谱、红外光谱等光谱方法对其部分理化性质和结构进行测定。结果表明:VVP-1b为均一组分,具有明显的多糖特征峰,含有β-吡喃糖苷键;其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为88.7%、7.8%、27.6%,相对分子质量为5.84×105;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=4.0∶1.0∶1.4∶35.4。因此VVP-1b是一种均一的具有β-吡喃糖苷键的酸性多糖。     

大粒车前子麸壳多糖的分离纯化及部分理化性质

以大粒车前子麸壳为研究对象,提取水溶性多糖组分并对其部分理化性质进行分析。车前子麸壳水提粗多糖经过SephacrylTMS-400 HR葡聚糖凝胶柱得到纯化的多糖组分（polysaccharide from bran of Plantago asiatica L.,PBPL）。结果显示：PBPL为均一多糖,平均分子质量为619 651 D,糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量依次为（71.420±0.007）%、（6.07±0.02）%、（20.74±0.05）%。PBPL含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖5 种单糖,物质的量比为2.24∶1.87∶1.00∶3.24∶3.49,糖醛酸主要是半乳糖醛酸。红外光谱中有多糖、蛋白、糖醛酸以及β-吡喃糖环特征吸收峰。     

莲藕渣多糖的单糖组分测定

目的:利用气相色谱法测定莲藕渣中多糖的单糖组分。方法:通过水提醇沉法从莲藕渣中提取多糖,将提取的多糖经纯化、水解、衍生化后,利用气相色谱对其单糖组分进行分析。结果:水提醇沉法得到莲藕渣粗多糖LRP,得率为2.68%;经分离纯化得莲藕渣多糖LRP1和LRP2,其单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、木糖、半乳糖和岩藻糖,且其摩尔比为5.32∶16.03∶5.14∶1.02∶25.98∶2.32。结论:莲藕渣多糖主要由半乳糖和阿拉伯糖组成,其中半乳糖的含量最高,为25.98%。     

柱前衍生化HPLC法分析真菌多糖的单糖组成

通过柱前衍生化HPLC法分析了6种真菌多糖的单糖组成。将6种真菌的胞外粗多糖及其菌体用1mol/L的硫酸水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,利用高效液相色谱法检测各单糖。结果表明,灵芝、树舌类真菌胞外多糖的产率均较高,胞外多糖产率在0.0921～0.1528g/100mL之间。胞外多糖主要以甘露糖为主,其次含有葡萄糖和半乳糖,并且一般含有少量的阿拉伯糖。胞内多糖中葡萄糖含量最高,其次含有甘露糖和半乳糖,个别菌种还含有少量的阿拉伯糖和葡萄糖醛酸。而虫草胞外多糖的组成依次为半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,胞内多糖同样是主要含有葡萄糖,其次含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖醛酸。     

坛紫菜多糖的分离纯化及其组成分析

采用热水提取坛紫菜多糖,经分离纯化得到3个多糖组分(分别命名为SP1、SP2及SP3).通过红外光谱和气相色谱对多糖组分进行分析,并用化学法测定多糖组分中的硫酸根、糖醛酸、半乳糖及3,6-内醚半乳糖含量.测定结果表明,SP1的单糖组成中含半乳糖96.53%、鼠李糖1.225%、岩藻糖0.85%、阿拉伯糖1.37%、木糖1.16%;SP2、SP3的单糖组分为半乳糖,而无其它单糖.3种多糖的硫酸基含量分别为(8.54±0.44)%、(10.24±0.23)%及(12.35±0.58)%,糖醛酸含量分别为(15.00±0.23)%、(10.46±0.55)%及(11.50±0.35)%,3,6-内醚半乳糖含量分别为(6.84±0.43)%、(4.99±0.24)%及(4.56±0.36)%.     

轮叶党参多糖的分离纯化及结构研究

目的:确定轮叶党参多糖组分1(CLPS1)结构,为轮叶党参多糖活性研究和天然植物多糖的开发提供依据。方法:经提取、分离纯化后获得组分CLPS1,利用气相色谱、红外光谱、核磁共振、高碘酸氧化、Smith降解和甲基化分析方法等确定CLPS1结构。结果:CLPS1比旋光度为右旋44°,总糖含量为97.6%,糖醛酸为13.18%;相对分子质量为91.7,CLPS1单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、甘露糖,摩尔比为2.7∶3.4∶2.3∶1.1∶0.5。CLPS1中存在葡萄糖醛酸,分子中含有吡喃糖并且存在α-和β-构型。主链主要由阿拉伯糖和半乳糖组成,半乳糖和葡萄糖构成支链和主链的末端残基;半乳糖分支点糖残基是葡萄糖(1→4,6)、半乳糖(1→3,6);半乳糖有1→6、1→3,6、1→、1→3、1→4键型;葡萄糖有1→、1→4、1→4,6键型;阿拉伯糖为1→5键型,半乳糖醛酸为1→3键型。结论:CLPS1为一种结构复杂的酸性多糖。     

金针菇锌多糖分离纯化及其结构特征

目的：以金针菇为原料,经过逐步分离纯化得到两个锌多糖组分并研究其理化性质、光谱学特性及结构特征。方法：金针菇锌多糖采用热水浸提的方法提取,经DEAE纤维素-52和Sephadex G-100凝胶色谱柱逐步分离纯化后通过火焰原子吸收法测定多糖中锌的含量,高效凝胶过滤色谱法鉴定组分的均一性,并测定其分子质量及单糖组成,采用紫外光谱、红外光谱和刚果红实验对锌多糖的结构特征进行相关研究。结果：通过分离纯化得到两个锌多糖组分CF1、CF2,纯品提取率分别为20.97%与12.25%,其中锌含量分别为191、429 μg/g,平均分子质量分别为890、1 244 kD。CF1组分由葡萄糖、半乳糖等6 种单糖组成;CF2组分主要由甘露糖、葡萄糖、岩藻糖等8 种单糖组成,且两个多糖组分均具有三股螺旋分子结构。     

阿里红中多糖的分离纯化及其组分分析

目的对阿里红中的多糖进行分离纯化,并对得到的两种多糖组分进行基础结构分析。方法阿里红经水提醇沉法除蛋白后,再经DEAE纤维素-52、Sepharose CL-6B和葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到两种多糖组分FOPS-a和FOPS-b。采用凝胶过滤法分析其纯度和相对分子量,经气相色谱法分析其单糖组成,并对多糖组分进行部分酸水解,高碘酸氧化和Smith降解分析。结果分离纯化得到的阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b的相对分子质量为199 kDa和87 kDa。单糖组成均为甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖。FOPS-a主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖;FOPS-b主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖。结论该研究可为阿里红多糖的开发与利用提供技术参考。     

A sensitive analytical method for the component monosaccharides of the polysaccharides from a Tibetan herb Potentilla anserine L. by capillary zone electrophoresis with UV detector

A rapid and sensitive method was optimized and validated for the separation and quantification of derivatized monosaccharides in polysaccharide from Potentilla anserine L. using 1-naphthyl-3-methyl-5-pyrazolone (NMP) as precolumn derivatization reagent by capillary zone electrophoresis (CZE). On the basis of the optimum conditions, nine NMP-derivatized monosaccharides achieve baseline resolution within 16 min. The developed method has been successfully applied to analyze component monosaccharides of three Potentilla anserine L. samples, which were obtained by gradational precipitation with 50, 70, and 90% aqueous ethanol, respectively. The polysaccharide precipitated from 50% ethanol solvent was composed of fucose, mannose, xylose, glucuronic acid, glucose, rhamnose, galacturonic acid, galactose, arabinose in molar proportion of 1:1.65:1.99:5.08:7.38:8.14:13.05:27.41:39.02; the corresponding molar proportions for polysaccharide obtained from 70% ethanol solvent were 1:1.64:1.65:4.52:13.96:9.13:26.30:10.52:18.00; fucose and galacturonic acid were not found in the polysaccharide precipitated from 90% ethanol solvent, and mannose, xylose, glucuronic acid, glucose, rhamnose, galactose and arabinose were determined with molar proportion of 1:0.87:1.77:2.78:1.69:2.58:2.49. Quantitative recoveries of the component monosaccharides in the polysaccharide were in the range of 93.3–105.1% and the relative standard deviation (RSD) values fell within 3.4–6.3%, respectively. The results demonstrated that the proposed CZE method was precise and sensitive for the analysis of the composition of polysaccharide.     

响应面试验优化木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白工艺

为确定木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的最佳工艺,以酶液-样液体积比、酶解时间、酶解温度及pH值为影响因素,以马齿苋多糖损失率与蛋白去除率为指标,通过响应面试验优化木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的工艺条件。结果表明,木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的最佳工艺为酶液-样液体积比0.2∶1、酶解温度60?℃、酶解时间3?h、pH?6,在此条件下蛋白去除率为78.22%,多糖损失率为10.39%。马齿苋粗多糖溶液经分离纯化、高效液相色谱分析,结果表明马齿苋多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖单糖组成,其组成比例为5.3∶5.9∶1.3∶27.6∶1∶18.8∶14.6。     

菊花蜂花粉多糖的分离纯化及抗肿瘤活性研究

本文对蜂花粉多糖进行了分离纯化和组成分析,并初步分析了各多糖级分对肿瘤细胞增殖的抑制作用。选取菊花蜂花粉为原料,通过水提、醇沉得到总多糖WDPP,再通过离子交换层析得到一个中性糖（WDPP-N）和两个酸性糖级分（WDPP-1,WDPP-2）。通过高效液相色谱法测定各级分的单糖组成,通过对肿瘤细胞增殖作用的影响探讨各级分的抗肿瘤活性。结果表明,WDPP-N主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成,比例为30.3∶31.6∶32.7;WDPP-1和WDPP-2都主要由半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,还含有少量的鼠李糖、葡萄糖等。WDPP-N和WDPP-2浓度为5 mg/m L时对肿瘤细胞HCT116增殖的抑制率分别为38%和32%,对HT-29增殖的抑制率为42%和47%,WDPP-1对肿瘤细胞增殖作用的影响不显著（p>0.05）,而WDPP在浓度为5 mg/m L时对HCT116和HT-29肿瘤细胞增殖的抑制率分别为61%和81%。因此,菊花蜂花粉总多糖WDPP抑制肿瘤细胞增殖的活性优于中性糖和酸性糖。      

方格星虫多糖的分离纯化及单糖组成

方格星虫多糖经碱法提取、三氯乙酸脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex G-100凝胶柱层析纯化得到精制方格星虫多糖（Sipunculus nudus polysaccharide,SNPS）。测定SNPS的理化性质和单糖组成,结果表明：SNPS为白色粉末状单一组分;经理化性质测定和紫外光谱分析,表明SNPS的多糖质量分数为99.35%,糖醛酸质量分数为22.21%,不含蛋白质和核酸,不含硫酸根;气相色谱分析结果表明方格星虫多糖SNPS主要由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.16∶9.54∶1。本研究表明SNPS是从方格星虫中得到的均一组分纯多糖。     

蓝靛果硒多糖的理化性质、结构表征及红细胞氧化损伤保护活性

以蓝靛果果实多糖为原料,采用微波辅助HNO₃-Na₂SeO₃法制备蓝靛果硒多糖,后经柱色谱分离后得到高含量蓝靛果硒多糖。高含量蓝靛果硒多糖中硒含量为(0.184±0.03) mg/g,重均分子质量为5 88 2 8.3k D a,由半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖6种单糖组成,其物质的量比为1∶3.06∶6.18∶0.29∶1.78∶13.01。核磁分析表明高含量硒多糖中存在6种糖苷键,分别为：→3)-β-D-半乳糖(1→、→4)-β-D-甘露糖-(1→、→6)-α-D-葡萄糖-(1→、→4)-α-D-半乳糖醛酸-(1→、→2,4)-α-L-鼠李糖-(1→、α-L-阿拉伯糖-(1→。红细胞氧化损伤保护实验结果表明：同H₂O₂处理红细胞损伤组相比,保护组高含量蓝靛果硒多糖质量浓度为10.0 mg/mL时,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血率降低了32.52%;活性氧水平降低了44.93%;丙二醛含量减少了17.04 nmo...     

高效阴离子交换色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成

选用CarboPacPA20分析柱(3mmi.d.×150mm),以H2O-250mmol/LNaOH-1mol/LNaAc为流动相,建立了三元梯度洗脱分离、积分脉冲安培检测多糖中常见的8种中性单糖和2种糖醛酸的高效阴离子交换色谱分析方法;利用离子交换色谱柱(DEAESepharoseCL6Bfastflow,3.5cm×30cm)和凝胶过滤色谱柱(SepharoseCL6B,2.6cm×100cm)从提取出β-胡萝卜素的杜氏盐藻残渣中分离出PD1、PD2、PD3、PD4a和PD4b共5个多糖级分,选用适当的条件水解后,利用高效阴离子交换色谱法测定了各多糖级分的单糖组成。其中具有显著生物活性的多糖级分PD4a中主要含有半乳糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、盐藻糖及鼠李糖6种中性糖,还含有少量糖醛酸;PD4b中主要含有核糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖5种中性糖,不含糖醛酸。该结果与PMP柱前衍生化反相高效液相色谱法测定的单糖摩尔比基本一致。10种单糖的离子色谱法的检出限为0.76～2.92nmol/L(以3倍信噪比计),峰面积相对标淮偏差RSD为0.72%～3.25%。     

紫苏籽多糖分离纯化及抗肿瘤活性

为了探究紫苏籽多糖（Perilla frutescens seed polysaccharide,PFSP）的抗肿瘤活性,利用传统方法从紫苏籽中提取粗多糖,利用DEAE-52纤维素和葡聚糖G-100柱层析分离纯化获得紫苏籽多糖,并测定该多糖对H22荷瘤小鼠免疫系统的影响。结果表明,紫苏籽粗多糖得率为8.38%,分离纯化后得到3个组分,分别命名为PFSP-1、PFSP-2和PFSP-3。PFSP-1由甘露糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.01∶0.06∶0.11∶0.81）组成,PFSP-2由甘露糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.28∶0.28∶0.41）组成,PFSP-3由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.013∶0.024∶0.040∶0.080∶0.120∶0.700）组成;3个组分均具有多糖特征吸收峰,为吡喃环型多聚糖。抗肿瘤实验表明,PFSP-2抑瘤率显著高于PFSP-1和PFSP-3(P<0.05);对PFSP-2进一步研究发现,与模型组相比,PFSP-2可显著降低乳酸脱氢酶、醛缩酶和白细胞介素（interleukin...