枸杞多糖对顺铂诱导人胚肾细胞凋亡的影响

目的：研究枸杞多糖(LBP)对顺铂(CDDP)所致人胚肾细胞(HEK293)凋亡的影响,并探讨其可能机理。方法：体外培养HEK293,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法观察LBP对CDDP诱导HEK293细胞生长的影响,流式细胞仪检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡率的变化：Western blotting检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果：LBP能够拮抗CDDP诱发的细胞毒性,并且随着质量浓度的不同而产生变化。 流式细胞仪检测表明随着LBP质量浓度的增加,细胞凋亡率随之减少;Western blotting表明,加入LBP后能够使Bax基因的表达减少而Bcl-2基因的表达增加。结论：LBP对CDDP诱导人胚肾细胞凋亡有抑制的作用,其作用机理可能与其下调Bax及上调Bcl-2蛋白表达有关。     

枸杞子对人宫颈癌Hela细胞生长的影响

目的：体外实验探讨枸杞子对人宫颈癌细胞（Hela）生长的影响。方法：不同浓度的枸杞子水煎液处理Hela细胞．采用细胞贴壁率实验测定细胞的粘附能力,通过细胞划痕实验观察细胞的迁移能力、利用细胞增殖实验检测细胞增殖抑制率,运用流式细胞术分析细胞周期变化。结果：与对照组相比,5．0mg／mL枸杞子水煎液处理后的Hela细胞贴壁率减少（P〈0．01）,细胞迁移能力减弱（JP〈0．01）,对Hela细胞有显著的抑制作用,抑制率最高达84．88％（P〈0．01）,且呈现时效和量效关系;流式细胞术结果表明,枸杞子水煎液组对Hela细胞有一定的S期阻滞作用。结论：枸杞子能有效抑制人宫颈癌细胞的增殖、粘附和迁移能力,并改变细胞的周期分布。     

珠母贝糖胺聚糖PG-Ⅱ诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:探讨珠母贝糖胺聚糖PG-II诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,从而抑制其增殖。方法:MTT法检测珠母贝糖胺聚糖PG-II对人宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用。倒置显微镜、荧光显微镜观察HeLa细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片段,流式细胞仪定量检测细胞凋亡的百分率及对其细胞周期的影响。结果:MTT法显示PG-II可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖。倒置显微镜和荧光显微镜形态学观察可见HeLa细胞凋亡的形态明显变化。琼脂糖凝胶电泳显示PG-II作用HeLa细胞24h,出现分子质量为200bp到2000bp不等的细胞凋亡的特征性DNA梯状条带。流式细胞术测试表明:PG-II可使HeLa细胞阻滞于G1期,剂量为100mg/L作用24h阻滞作用最明显,凋亡指数为42.6%。结论:珠母贝糖胺聚糖PG-II可能通过诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡而抑制其增殖。     

枸杞多糖促进大鼠肝癌组织细胞的凋亡

为探究枸杞多糖对肝癌模型大鼠癌组织细胞凋亡的干预效果及作用机制。选取45只SD健康雄性大鼠,5只作为正常组,其余40只建立肝癌模型,分为模型组、药物对照组、低、高浓度组,并分别进行干预。观察各组大鼠细胞增殖、凋亡、周期分布情况,检测PTEN、p-Akt、m TOR、Bcl-2、Bax、caspase3表达。研究结果显示,高浓度组G1期细胞比例为57.59%,高于模型组、药物对照组、低浓度组(p<0.05)。高浓度组大鼠增殖率为8.53%,凋亡率为47.68%,均优于模型组、药物对照组和低浓度组。高浓度组大鼠PTEN相对表达量为0.98,p-Akt、m TOR相对表达量分别为1.05、1.11,高浓度组大鼠Bcl-2、caspase3相对表达量分别为1.26、1.19,Bax相对表达量为0.98,干预效果均优于药物对照组和低浓度组(p<0.05)。实验结果表明,在枸杞多糖的干预下,肝癌大鼠癌组织肿瘤细胞增殖、凋亡及周期分布受到明显调控,PTEN、p-Akt、m TOR、Bcl-2、caspase3、Bax表达受到明显的调控,说明枸杞多糖能够阻滞肝癌组织细胞周期分布,抑制肝癌组织细胞增殖,促进细胞凋亡,为肝癌的临床治疗提供一定的理论依据。     

金雀异黄素诱导人胃癌细胞凋亡的形态学研究

为研究金雀异黄素对人胃癌细胞凋亡的诱导作用,采用光镜、电镜观察金雀异黄素（Genistein,Gen）抑制人胃癌细胞SGC－7901增殖的形态学改变。结果显示：经Gen 10μg/mL作用48h后,SGC－7901细胞出现典型的凋亡形态。相差显微镜下表现为细胞变圆、体积缩小;荧光显微镜观察凋亡细胞多为核亮染呈致密斑块、碎片状;电镜下可见染色质浓集、核固缩。结果证实：Gen具有诱导人员癌细胞凋亡的作用。     

羊肚菌多糖抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和诱导细胞凋亡研究

以黑脉羊肚菌多糖为原料,研究羊肚菌多糖对人乳腺癌细胞MDA-MB-231（以下简称MDA）增殖和凋亡的影响。结果表明：在无细胞毒性范围内,羊肚菌多糖能显著抑制人乳腺癌细胞MDA的增殖,半数有效浓度（median effective concentration,EC50）值为0.096 mg/mL,同时人乳腺癌细胞MDA表现出多种细胞凋亡的形态学变化。免疫印迹检测实验结果显示,羊肚菌多糖能抑制B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达,促进Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达,同时增加Bax/Bcl-2蛋白表达比值,并呈现出剂量依赖效应。说明羊肚菌多糖能抑制人乳腺癌细胞MDA增殖,促进细胞凋亡。     

白毛藤多糖诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

白毛藤多糖以不同浓度作用于胰腺癌细胞,采用Hoechst33258染色测定凋亡情况,RT-PCR检测caspase-3蛋白的表达。结果表明,白毛藤多糖的抗肿瘤作用可能与细胞凋亡有关。     

辣木生物碱抑制宫颈癌Hela细胞增殖和诱导其凋亡的作用

研究辣木(Moringa Oleifera. Lam)叶生物碱对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。通过采用MTT法、克隆形成法、流式细胞术和western blot法检测经不同浓度辣木生物碱(20~320μg/mL)处理48 h后的Hela细胞增殖、凋亡情况和蛋白表达水平。研究结果表明,随着辣木生物碱浓度的增加,Hela细胞的存活率逐渐下降,当辣木生物碱浓度为160μg/m L时,细胞的存活率为35.87%(p<0.001),人正常结肠细胞NCW460的存活率为91.91%;克隆形成实验表明,辣木生物碱(40~160μg/mL)显著抑制Hela细胞克隆形成,抑制率分别为26.04%(p<0.05)、37.19%(p<0.01)和67.77%(p<0.001);当浓度为80μg/m L时,Hela细胞形态发生明显变化;进一步流式细胞术分析得知,Hela细胞内的凋亡细胞数随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当细胞经160μg/mL辣木生物碱处理48 h后,其细胞内凋亡细胞数为42.10%(p<0.001),通过对凋亡蛋白表达水平检测发现,Bax/Bcl-2比率和Caspase9表达水平随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当辣木生物碱浓度达到80μg/mL时,与对照相比有显著性差异。此外,辣木生物碱显著降低Stat3蛋白磷酸化水平和Cyclin D1蛋白表达水平,当辣木生物碱浓度达到160μg/m L时,与对照相比有显著性差异。以上实验结果表明,辣木生物碱具有抑制Hela细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制Stat3信号通路活化相关。     

香乳菇多糖对Hela细胞凋亡及对RAW264.7细胞免疫活性的影响

为研究香乳菇多糖(LC-1)的抗肿瘤和免疫调控活性,将人的宫颈癌Hela细胞和小鼠巨噬细胞RAW264.7体外培养,分别通过CCK-8法、流式细胞术和ELISA技术检测不同浓度LC-1对Hela细胞增殖和凋亡周期的影响,对RAW264.7细胞增殖、吞噬的影响,及对RAW264.7细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响。结果表明:香乳菇多糖对体外培养的Hela细胞有明显的抑制作用,且影响Hela细胞的形态及凋亡周期,当LC-1浓度为10μg/mL时,Sub峰含量可达19.4%;同时,LC-1能调控巨噬细胞的免疫活性,当LC-1浓度为10μg/mL时,巨噬细胞增值率和吞噬活性分别为67.48%和87.09%,亦能促进巨噬细胞从G0/G1期向G2期和S期转化,同时刺激巨噬细胞产生IL-6和TNF-α,且呈现出明显的剂量依赖性,但对NO生成没有明显的促进作用。综上,在体外试验中,香乳菇多糖LC-1能抑制宫颈癌Hela细胞生长,促进RAW264.7细胞增殖和吞噬活性,刺激巨噬细胞产生免疫因子。     

苦荞茶多糖诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的线粒体机制

目的：从线粒体调控机制的角度探讨苦荞茶多糖（tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP）对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法：应用水提醇沉法结合超声辅助技术提取的TBTP处理A549细胞,分为空白对照组和不同质量浓度TBTP处理组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡水平,采用DHE和Mito SOX染色检测细胞和线粒体活性氧簇水平,采用JC-1染色检测线粒体膜电位变化,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、Bcl-2、剪切型半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、细胞色素c的水平。结果：TBTP呈剂量和时间依赖性抑制A549细胞增殖。TBTP处理A549细胞24 h可呈剂量依赖性地促进细胞凋亡。TBTP处理能够显著增加A549细胞和线粒体内活性氧水平,降低线粒体膜电位;同时,TBTP能够增加促凋亡蛋白Bax和剪切型Caspase-3的表达、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进A549细胞线粒体细胞色素c外流。结论：TBTP能够促进活性氧簇生成、降低线粒体膜电位,进而抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。     

枸杞多糖的硒化及其对人宫颈癌细胞的抑制作用

在硝酸催化作用下,利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行分子修饰,合成硒化枸杞多糖,反应条件为硝酸体积分数0.5%,70℃反应10h,透析24h。采用体外抗肿瘤实验测定硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长的抑制作用。结果显示硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞具有一定的抑制作用,与未硒化的枸杞多糖相比有显著性差异,且呈一定的剂量依赖性。     

菹草类胡萝卜素诱导Hela细胞凋亡的细胞学观察

本文研究了菹草类胡萝卜素提取物(CEPC)对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响,采用体外培养技术,用可见光显微镜、荧光倒置显微镜、透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察Hela细胞的形态变化。结果表明:分别用浓度为2.5、5、10μg/ml的CEPC处理Hela细胞,在可见光、荧光显微镜、电镜和LSCM下观察细胞形态,分别出现了细胞数量明显减少、皱缩变形、体积缩小、触角伸长,显示亮黄色荧光的细胞核呈现“新月状”、条状甚至碎片状,细胞膜表面绒毛减少,胞浆内空泡明显增多,细胞核染色体发生固缩,细胞中RNA的含量明显增加等典型的凋亡细胞形态特征。实验结果表明CEPC对Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用并能有效地诱导Hela细胞凋亡。     

醋酸催化下枸杞多糖的硒化修饰及抗肿瘤活性

制备硒化枸杞多糖,初步了解其结构及体外抗肿瘤活性。利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行修饰,通过将无机硒转化为有机硒,为得到高含硒量的枸杞多糖进行探索,找出最佳反应条件为:2mL冰醋酸作为催化试剂,硒化试剂硒酸钠用量为2g,室温下反应时间48h。通过紫外光谱、红外光谱分析,并进行了体外抗肿瘤的初步试验研究。结果:确定了硒化枸杞多糖的分子结构中存在亚硒酸基团,人宫颈癌细胞抑制率可达到26.1%。硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞存在一定的抑制作用。     

大孔吸附树脂脱除枸杞多糖色素技术研究

以宁夏枸杞为原料提取枸杞多糖,采用9种大孔吸附树脂对多糖提取液中色素脱除技术进行研究。在静态实验的基础上,采用正交实验筛选出色素脱除效果最佳的树脂。以脱色率、多糖保留率和蛋白清除率为指标,衡量树脂脱色效果。结果表明:D318树脂脱除色素的效果最佳,样液质量浓度3mg/mL、树脂用量3g/25mL、pH7、处理3h时D318树脂的脱色率、多糖保留率和蛋白清除率分别为67.32%、85.49%和58.76%。      

枸杞多糖作用于2型糖尿病大鼠的血清代谢组学研究

建立适用于血清代谢物谱研究的气相色谱-飞行时间质谱技术,并用于对照组(NC组)、2型糖尿病模型组(type 2 diabetic model group,DM组)及枸杞多糖干预DM大鼠组(Lycium barbarum polysaccharides,LBP组)大鼠血清代谢物谱的分析。采用主成分分析、正交偏最小二乘判别法等模式识别方法对NC组、DM组及LBP组大鼠血清代谢物谱进行分类,并从血清中寻找与2型糖尿病相关结果部分并未出现显著性分析的潜在生物标志物。结果表明,所建立的方法能将3组大鼠血清代谢物谱分离,DM组大鼠血清中丙氨酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸相对于NC组大鼠降低;LBP干预DM大鼠1个月后,LBP组大鼠血清中丙氨酸、胸腺嘧啶核苷酸含量有所上升。血清中这丙氨酸、胸腺嘧啶核苷酸可能与氨基酸代谢和核苷酸代谢有关,LBP组与DM组大鼠血清中丙氨酸和胸腺嘧啶核苷酸水平的变化体现了大鼠体内氨基酸和核苷酸代谢的改变。本实验可为进一步研究LBP的降糖作用机制提供参考。     

枸杞子多糖通过改善氧化应激延缓疲劳作用的研究

本文研究枸杞子多糖（LBP）对小鼠疲劳的延缓作用及机制。将昆明种小鼠分为空白对照组（给予生理盐水）和高、中、低剂量枸杞子多糖处理组（剂量分别为100、50和25 mg/kg/day）,灌胃给药2周,通过跑步、疲劳转棒和负重游泳实验考察枸杞子多糖对小鼠的抗疲劳作用,并对运动后小鼠体内肝糖原、肌糖原以及血清、肝脏和肌肉中抗氧化指标进行检测。实验结果表明,LBP可以明显延长小鼠的运动时间,增加小鼠肝糖原和肌糖原含量,同时明显提高血清、肝脏和肌肉中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性,显著降低肝脏和肌肉中丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）含量及血清中MDA含量。LBP具有延缓疲劳的作用,其机制可能是减弱氧化应激和提高糖原含量。      

枸杞多糖对HepG2细胞膜表面超微结构变化的影响

目的:研究枸杞多糖对人肝癌HepG2细胞膜表面超微超微结构变化的影响。方法:利用倒置显微镜和原子力显微镜观察不同浓度(0、50、100、200、400μg/mL)和不同作用时间下(24h、48h)枸杞多糖对HepG2细胞膜表面结构变化的影响。结果:随作用时间和多糖浓度的增加,细胞膜表面形态发生了明显的变化,膜表面结构由光滑变得粗糙,细胞膜表面粗糙度由1.451nm变到295.977nm,部分形成孔洞和隆起,表面结构遭到了明显的破坏。结论:枸杞多糖能破坏HepG2细胞膜结构,这可能与枸杞多糖的抗肿瘤作用有关。     

枸杞果多糖对哮喘小鼠炎症损伤影响及作用机制

目的 探究枸杞果多糖对Ⅴ级卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型炎症损伤影响及其作用机制.方法 以OVA诱导的哮喘小鼠为模型,并进行枸杞果多糖干预.肺组织苏木素-伊红(HE)染色、流式细胞术检测肺组织嗜酸性粒细胞水平反映炎症细胞浸润程度;肺组织马松(masson)染色检测肺组织纤维化程度,过碘酸-雪夫(PAS)染色检测支...