酶法合成咖啡酸叶黄素酯的研究

以叶黄素和咖啡酸为原料,在脂肪酶Novo435的催化下,首次合成了咖啡酸叶黄素酯。研究了脂肪酶催化叶黄素与咖啡酸合成咖啡酸叶黄素酯的影响因素,考察了酶量、溶剂、体系水分、温度、时间等因素对酯化反应的影响。结果表明,适宜的工艺条件是:酶量10mg/mL,溶剂为氯仿,水含量10mg/g,温度40℃,反应时间24h,在上述条件下咖啡酸转化率可达88%。采用IR对目标产物的结构进行了表征。     

离子液体-甲苯溶剂体系中酶催化合成阿魏酰丁酸酯

以三丁酸甘油酯和阿魏酸乙酯为原料,采用酶催化方法合成阿魏酰丁酸酯,通过单因素实验和正交实验研究溶剂体系、脂肪酶种类、溶剂配比、底物(三丁酸甘油酯与阿魏酸乙酯)摩尔比、反应温度、反应时间对阿魏酰丁酸酯转化率的影响,优化反应条件。结果表明:合成阿魏酰丁酸酯的最佳反应条件为脂肪酶Novozym 435为催化剂,酶添加量50 mg/m L,[EMIM][TF2N]-甲苯溶剂体系,[EMIM][TF2N]与甲苯质量体积比1∶1,反应温度50℃,底物摩尔比3∶1,反应时间6 d。在最佳反应条件下,阿魏酰丁酸酯转化率达76.24%。     

没食子酸植物甾醇酯合成工艺的研究

研究了酶法催化合成没食子酸植物甾醇酯的最佳工艺条件。采用单因素实验考察了溶剂类型、脂肪酶添加量、反应温度、分子筛、反应时间、酸醇摩尔比、底物浓度对酯化率的影响,并利用高效液相色谱、红外光谱对产物进行了鉴定。结果表明:当使用正己烷作溶剂、Lipozyme 435脂肪酶添加量25 g/L、除水剂3分子筛添加量90 g/L、没食子酸与植物甾醇摩尔比1∶2.5、底物浓度150mmol/L、55℃水浴振荡反应72 h时,酯化率最高,可达79.7%;液相色谱分析结果可知没食子酸植物甾醇酯纯度大于95%。     

有机相中脂肪酶催化阿魏酸油醇酯合成的研究

在有机相双溶剂体系中,用南极假丝酵母脂肪酶B(Novozym 435)催化合成阿魏酸油醇酯,研究了溶剂(10g P)、底物分子比、分子筛加量、酶的用量以及反应温度等因素对反应的影响.结果表明溶剂亲脂性越强,底物转化率越高,最适的溶剂为异辛烷/丁酮,最适反应条件为:酸醇比为1:8(n/n),分子筛和酶加量分别为100rag和30mg/mL.反应温度为65%,反应8d底物转化率最高可达99%.产物阿魏酸油醇酯具有一定抗DPPH自由基的能力,201xmol/L阿魏酸酯的DPPH自由基清除率为34%.     

非水相中脂肪酶催化合成乙酸薄荷酯

研究了脂肪酶(candida rugosa lipase,CRL)在有机溶剂中催化薄荷醇与乙酸进行酯化反应的条件.探讨了脂肪酶加入量、溶剂、薄荷醇与乙酸摩尔比、底物浓度、温度等因素对脂肪酶催化合成乙酸薄荷酯的影响,并利用红外光谱、GC-MS、气相色谱等方法对合成的产物进行了表征.结果显示,合成的产物为乙酸薄荷酯.当溶剂为正己烷、脂肪酶量为1.2%(脂肪酶在薄荷醇和乙酸体系中的质量分数)、薄荷醇与乙酸的摩尔比为1:1、薄荷醇与乙酸的底物浓度均为0.1moL/L、温度为40℃、反应48h时,乙酸薄荷酯的酯合成转化率达92.4%.产物乙酸薄荷酯的色泽好、气味纯正.     

非水相中脂肪酶催化合成乙酸正己酯

研究了用海藻酸钠固定化的脂肪酶在有机溶剂中催化乙酸与正己醇之间的酯化反应。探讨了溶剂、醇酸摩尔比、温度、底物浓度等多种因素对脂肪酶催化乙酸正己酯合成反应的影响规律。研究结果显示,在优化的条件下,即溶剂为正庚烷、醇酸摩尔比为1∶1、底物浓度为0.15mol/L、温度为70℃、pH为7.5、酶湿度为8.9%、吸水剂用量为0.20g/mL时,反应5h后,乙酸正己酯的转化率达88%。     

木糖醇月桂酸单酯的酶法制备工艺研究

研究了以木糖醇和月桂酸为原料,在固定化脂肪酶Novozym 435的催化下合成木糖醇月桂酸单酯。考察了酸醇摩尔比、脂肪酶添加量、溶剂添加量、分子筛添加量、反应时间、反应温度对反应的影响。结果表明:最佳反应条件为反应溶剂为叔丁醇、酸醇摩尔比1∶2、溶剂添加量20 m L/mmol(以月桂酸物质的量计)、脂肪酶添加量10 g/L、分子筛添加量80 g/L、反应温度85℃、反应时间4 h,在此条件下月桂酸转化率为91.8%。通过红外光谱和质谱进行结构鉴定,产物为木糖醇月桂酸单酯。     

有机相脂肪酶催化合成肉桂酸肉桂酯的研究

肉桂酸肉桂酯是一种重要的花香型香精定香剂。本实验对有机相中脂肪酶催化合成肉桂酸肉桂酯进行研究,对酶催化条件进行了优化研究。实验结果表明:Candida anatarctic脂肪酶(Novozyme 435)有较好的催化活性。通过单因素实验考察各反应参数(反应溶剂、温度、底物摩尔比、底物浓度等)对脂肪酶Novozyme 435合成肉桂酸肉桂酯反应的影响,确定了反应最优工艺条件:在5 mL甲基叔丁基醚溶剂(分子筛脱水)体系中,肉桂醇100 mmol/L,n(肉桂醇):n(肉桂酸乙酯)=2:1,反应温度50℃,Novozyme 435脂肪酶添加量1%(质量体积比),反应36 h后反应转化率可达到55%,产物结构经气相质谱(GC/MS)鉴定。     

非水相介质酶法转化制备乙酸3- 甲硫基丙醇酯工艺

研究脂肪酶催化合成天然乙酸3-甲硫基丙醇酯的关键因素及条件。结果表明：固定化脂肪酶Novozym 435是无溶剂体系和正己烷体系中最佳催化剂,加酶量、分子筛用量、乙酸加入次数、反应温度、反应时间等因素对乙酸3-甲硫基丙醇酯合成有重要影响。在无溶剂体系体系,加有1.06g 3-甲硫基丙醇、0.6g乙酸的反应中正交试验设计优化的条件为：加酶量50mg、分子筛加入量2g、反应温度42℃、反应总时间30h,乙酸分3次加入,间隔时间为2h,摇床转速为150r/min,乙酸3-甲硫基丙醇酯产率达42.4%。     

N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的非水相催化合成及其抗菌性的初探

研究了非水相酶催化合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的反应条件,并对其抑菌性进行了探索.对影响合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯反应的因素(DMF的含量、温度、反应时间、底物摩尔比、加酶量)进行了探讨.结果显示,N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯合成反应的最佳溶剂为叔丁醇和DMF的混合溶荆,摩尔比为叔丁醇:DMF=7:3,在此溶剂条件下,在酸糖摩尔比为3:1,糖浓度为lmmol/L,反应温度为60℃,反应时间为48h,加酶量为20mg/mL时,产率达到最高.N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯抑茵性的研究结果显示,该物质对革兰氏阳性茵的抑制性稍强,而对酵母基本无抑制作用.     

微藻DHA油脂的酶法脱胶工艺研究

采用嗜热真菌(Thermomyces lanuginosus)产磷脂酶A1对裂殖壶菌产DHA毛油进行脱胶处理,以脱胶油磷含量、酸价为考查指标,先对脱胶时间、反应温度、加酶量和加水量等因素进行单因素实验,然后通过正交实验得出微藻DHA油脂的最佳脱胶条件为:脱胶时间3h,反应温度45℃,加酶量0.6mL/100g油,加水量为2mL/100g油;此条件下油脂中磷脂含量从158.1mg/kg降到4.6mg/kg,酸价变化较小。与传统的脱胶工艺相比,新型酶法脱胶优势明显,具有良好的应用前景。     

偏甘油酯脂肪酶Lipase G50催化酯化法制备甘油二酯

利用偏甘油酯脂肪酶Lipase G50催化甘油和脂肪酸酯化反应合成甘油二酯.探讨了酶加量、底物摩尔比、反应温度及加水量对酯化反应的影响.结果表明最佳反应条件为:脂肪酶Lipase G50加量为350 U/g,甘油和脂肪酸的摩尔比5∶1,加水量为底物总质量的5％,反应温度30℃,反应时间24h.在最佳反应条件下脂肪酸的酯化率为75.02％,甘油二酯的含量达到44.74％,产物中没有甘油三酯生成.     

酶法制备花生油甘油二酯研究

以花生油为原料,采用脂肪酶不完全水解甘油三酯制备甘油二酯,研究脂肪酶添加量、反应温度、反应时间及水添加量对制备甘油二酯影响。通过正交试验得出脂肪酶不完全水解制备甘油二酯最佳条件为:酶添加量20 U/g(占油重)、水添加量15%(占油重)、反应时间2.5 h、反应温度40℃,在此条件下制备甘油二酯,其含量可达57.84%。     

Folin-Ciocalteu比色法测定核桃青皮果蔬酵素总多酚含量

以没食子酸为标准品,探究福林-酚（Folin-Ciocalteu）比色法检测核桃青皮果蔬酵素总多酚含量的最优条件,对检测波长、碳酸钠和Folin-Ciocalteu试剂用量、显色温度及显色时间进行了优化,并对该分析方法进行了评价。结果表明,总多酚含量测定的最优条件为检测波长696 nm、样品液1 mL、10% Folin-Ciocalteu试剂2.5 mL、12%碳酸钠溶液1 mL、显色温度45 ℃,显色时间0.5 h。多酚含量在0～6 μg/mL范围内与吸光值呈良好的线性关系（y = 0.072 43x-0.000 91,R2 = 0.999 67）,该法平均回收率为102.2%（RSD=2.35%）。该方法准确度高、重复性好,适于核桃青皮果蔬酵素总多酚含量的测定,此条件下测得核桃青皮果蔬酵素总多酚含量为3.26 mg/mL。     

没食子酸对猪胰α-淀粉酶和蛋白酶的抑制作用

以没食子酸为材料,通过考察酶质量浓度、反应体系中底物和酶及没食子酸添加顺序、不同反应时间、不同没食子酸质量浓度对猪胰α-淀粉酶、蛋白酶的活性影响,研究没食子酸对两种酶的抑制作用。结果表明,在底物质量浓度为1g/100mL、体系添加顺序为酶液与抑制剂没食子酸溶液37℃预温5min后加入底物溶液的条件下,没食子酸抑制猪胰α-淀粉酶活性最优条件为:α-淀粉酶质量浓度0.64mg/mL,反应时间15min,没食子酸对α-淀粉酶的最大抑制率为95.52%;在体系添加顺序为酶液与抑制剂没食子酸溶液40℃预温5min后加入底物溶液的条件下,没食子酸抑制猪胰蛋白酶活性的最优条件为:胰蛋白酶质量浓度0.63mg/mL,反应时间30min,没食子酸对胰蛋白酶的最大抑制率为99.24%。没食子酸对两种酶的抑制效果均随没食子酸质量浓度的增大而增强。     

Enzyme-Catalyzed Production and Chemical Composition of Diacylglycerols from Corn Oil Deodorizer Distillate

Diacylglycerols (DAG) were enzymatically synthesized by lipase-catalyzed esterification of glycerol with fatty acids from corn oil deodorizer distillate (CrODD). Effects of reaction parameters such as reaction time, temperature, enzyme type, enzyme load, substrate mole ratio, and water content, as well as the effect of molecular sieves as a water adsorbent were investigated. Rhizomucor miehei lipase (Lipozyme RM IM) was found to be most effective among the lipases screened. The following conditions yielded 70.0% (w/w) DAG: 5 h reaction time, 65°C reaction temperature, 10% (w/w) Lipozyme RM IM, 2.5:1 fatty acid to glycerol molar ratio, and 30% (w/w) molecular sieves. DAG synthesis of 12.4% (w/w) was still observed at 10% (w/w) water content. 84.2% (w/w) of DAG was obtained after purification. The DAG oil comprised predominantly of 1-oleoyl-3-linoleoyl-glycerol (28.5%), 1,3-diolein (22.7%), 1-oleoyl-2-linoleoyl-glycerol (17.9%), and 1,2-diolein (10.9%). Fatty acid profile was similar to that of refined, bleached and deodorised (RBD) corn oil. The ratio of 1,3- to 1,2-positional isomers of DAG was at 1.82:1.     

果胶酶对甜菜渗出汁清净效果的影响

甜菜制糖中渗出汁中的果胶含量对生产有较大的影响.采用果胶酶对甜菜渗出汁进行清净效果研究,考察果胶酶的用量、酶解pH、酶解温度、酶解时间对渗出汁的过滤速度和果胶去除率的影响.单因素实验结果表明:果胶酶用量为5 - 15mg/kg,温度为50 - 60℃,pH值为4.0 -5.5,酶解时间10-15min条件下,果胶酶对渗出汁澄清处理的效果较好.在单因素的基础上,采用正交实验优化工艺,得到最佳的工艺条件为:果胶酶用量为15mg/kg,酶解pH 5.0,酶解温度50C,酶解时间15 min.此时果胶去除率为44.38％.     

Production of palm oil-based diacylglycerol using Lecitase Ultra-catalyzed glycerolysis and molecular distillation

Diacylglycerol (DAG) was prepared via glycerolysis of palm oil catalyzed by Lecitase Ultra (LU), a novel phospholipase from the fusion of lipase genes from Thermomyces lanuginose and phospholipase genes from Fusarium oxysporum. Glycerolysis was performed in a solvent-free system. The optimized reaction conditions were: a glycerol/palm oil mole ratio of 7.5:1, initial substrate water content of 5%, substrate enzyme load of 2%, reaction temperature of 40°C, and reaction time of 8 h. In a scale-up reaction, a DAG content of 59.5% in the lipid layer was achieved. Through a two-step molecular distillation, the composition of the target product was 88.1% DAG, 2.8% TAG, 9.0% MAG, and 0.1% FFA. The fatty acid composition of the DAG oil, determined using GC-MS, was enriched compared with the original palm oil.     

酶法合成共轭亚油酸单甘酯的研究

采用脂肪酶G50(来源于Penicillium camembertii)作为生物催化剂,催化共轭亚油酸(CLA)和甘油酯化生成共轭亚油酸单甘酯(MAG)。研究了在无溶剂体系中,底物摩尔比、酶加量、体系含水量、反应温度和反应时间对产物中MAG含量和CLA酯化率的影响。结果表明,最佳反应条件为:底物摩尔比n(甘油)∶n(CLA)=4∶1,加酶量300U/g(基于反应底物总质量),体系含水量1%,反应温度15℃,反应时间24h。在最佳反应条件下,CLA的酯化率达到84.98%,MAG的含量为68.40%,共轭亚油酸双甘酯(DAG)含量为16.58%。通过分析产物的脂肪酸组成,发现Penicillium脂肪酶G50对CLA异构体没有拆分效果。     

大孔树脂固定化磷脂酶A1及其用于菜籽油脱胶工艺的优化

选择8种大孔树脂对磷脂酶A1进行固定化,结果表明,离子交换树脂D001的固定化效果最好,其优化的最佳条件为缓冲液pH5.0、酶添加量1.5mL/g、固定化时间4h,在该条件下获得的固定化酶活力为665.8U/g。将固定化酶用于菜籽油脱胶实验,经响应面优化确定最优脱胶条件为固定化酶添加量1.8g/kg、反应时间3.6h、反应温度51℃、反应pH5.5,在此条件下得到的脱胶油中磷含量为5.82mg/kg。将固定化酶重复脱胶5次后,仍保留初始酶活力的47.9%,脱胶油中磷含量为9.78mg/kg。