驼乳和牛乳乳清蛋白抑菌肽的分离纯化及抑菌活性的比较

本文以驼乳和牛乳的乳清蛋白为原料,经胃蛋白酶水解后,通过超滤及葡聚糖凝胶层析对其水解物进行分离纯化,其后对获得的蛋白肽进行抑菌活性、二喹啉甲酸法(BCA)蛋白浓度、相对分子质量及氨基酸组成的测定。结果表明:经超滤获得的驼乳和牛乳分子量<3 kDa的多肽片段-F3具有最强的抑菌活性,将F3(<3 kDa)组分通过层析处理得到的驼乳G-25-2和牛乳G-25-2抑菌肽纯度较高(BCA蛋白浓度分别为95.60%和95.32%);驼乳G-25-2和牛乳G-25-2组分对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,最小抑菌质量浓度分别均为32.50和65.00 mg/mL;氨基酸分析结果显示,高活性抗菌肽中的总碱性氨基酸和总疏水性氨基酸含量最高,驼乳G-25-2中分别为32.80%和65.76%,牛乳G-25-2中分别为31.77%和58.70%。本研究结果表明,驼乳与牛乳均具有抑菌效果,且其抑菌能力高于牛乳,为今后研究驼乳抑菌肽的深入研究提供理论参考。     

核桃粕蛋白抑菌肽的制备工艺及纯化

为探究具有抑菌作用的核桃粕蛋白酶解抑菌肽的制备工艺,本实验以核桃仁经压榨提油后的副产物-核桃粕为原材料,利用酶解法制备核桃粕蛋白抑菌肽,优化制备工艺,进一步分离纯化,测试抑菌肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑制效果,筛选出具有最佳抑菌效果抑菌肽组分。研究结果表明：响应面优化胃蛋白酶酶解核桃粕工艺最佳条件为：温度54℃,pH3.46,加酶量5475.71 U/g,蛋白质水解度最优,可达13.99%;利用超滤技术对酶解肽分离纯化,得到4种不同分子量的酶解肽,抑菌实验表明H-Ⅱ （分子量为3~10 kDa）范围的酶解肽抑菌效果显著高于其他分子量范围的酶解肽（P<0.05）。本研究为核桃粕的深入研究利用以及新型抑菌肽产品的开发提供了数据支撑。     

一种薏苡抗真菌蛋白的制备及抑菌活性研究

以薏苡(Coix chinensis)种子为实验材料,通过脱脂、水提、Resource S阳离子交换层析和Superdex 75凝胶排阻层析等步骤纯化得到一种新的抗真菌蛋白,并对其抑菌活性进行初步鉴定。SDS-PAGE分析显示该蛋白的分子质量约为28kD。抑菌活性鉴定表明,该蛋白对链格孢霉(Alternaria alternate)、绿色木霉(Trichoderma reesei)和白腐菌(Panus conchatus) 3株丝状真菌具有显著的生长抑制活性,并呈现出剂量依赖的特征。本研究建立分离薏苡28kD抗真菌蛋白的方法,制备方法简单易行,所得产品纯度达到95%以上。     

苦荞活性肽对罗非鱼片的保鲜效果

以p H值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)、挥发性盐基氮(total volatile base nitrogen,TVB-N)、菌落总数和感官评价为指标,研究苦荞活性肽对4℃贮藏的罗非鱼片的保鲜效果。结果表明:随着贮藏时间的增加,罗非鱼片的p H值、TBA值、TVB-N值和菌落总数均呈不同程度的上升趋势,感官得分呈下降趋势。而以苦荞活性肽处理后,罗非鱼片的p H值、TBA值、TVB-N和细菌落总数较对照组低,感官得分高于对照组。其中,6mg/m L苦荞活性肽浸渍液的保鲜效果最好,可以将4℃条件下罗非鱼片的保质期由4 d延长至8 d。     

黑苦荞中黄酮类化合物的稳定性和抑菌活性研究

以黑苦荞为原料,研究黑苦荞中黄酮类化合物的稳定性和抑菌活性。结果表明:温度在20~80℃时黄酮类化合物含量基本不变;在弱酸性(p H 4~7)条件下黄酮类化合物的含量较为稳定;光照对黑苦荞黄酮的稳定性影响不大;加入氧化剂H2O2对黑苦荞黄酮的稳定性影响不大,而加入还原剂Na2SO3对其有强烈破坏作用;K+、Na+、Ca2+、Mg2+四种金属离子对苦荞黄酮稳定性无明显影响,Al3+,Fe2+、Fe3+对其影响较大,保存时应尽量避免与此类物质接触。抑菌实验表明,最小抑菌浓度(MIC)值分别为金黄色葡萄球菌25 mg/m L、枯草芽孢杆菌50 mg/m L、大肠杆菌100 mg/m L,黑苦荞黄酮类化合物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠肝菌均有较好的抑制作用。     

人参肽的分离纯化及活性分析

以粗人参肽为原料,80%乙醇为洗脱溶液,用DA201-C大孔树脂进行纯化,测定纯化前后多肽的抗氧化活性(DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、还原力)、酪氨酸酶抑制能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力等生物活性及分子量分布、氨基酸组成、滋味等指标。在活性方面,粗人参肽具有一定的抗氧化活性,酪氨酸酶抑制活性,α-葡萄糖苷酶抑制活性,纯化后抗氧化活性提高不明显,酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性均有较大提高,尤其是α-葡萄糖苷酶抑制活性提高较显著,在10mg/mL时是纯化前的13.29倍。在分子量方面,粗人参肽中1500Da以上的占比25.37%,纯化后分子量减小,1000Da以下占比85%以上;在氨基酸组成方面,纯化前后人参肽中甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量均较高,分别为73.2%和75.4%;纯化后疏水性氨基酸显著增加,增幅为12.15%。在滋味方面,纯化后苦味较突出,苦味值为8.00。实验结果表明,人参肽的抗氧化活性可能与甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量较高有关;酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性可能与丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸等疏水性氨基酸含量增加且纯化后分子量变小...     

苦荞麸皮黄酮提取物及有效成分的抑菌活性

研究苦荞麸皮总黄酮粗品及精品对病原菌的抑制作用,并初步分析其黄酮类成分,评价不同黄酮单体的抑菌活性。通过平板打孔法及二倍稀释法检测苦荞麸皮总黄酮粗品及精品及其4种黄酮单体的抗菌活性,使用高效液相色谱法定性定量检测苦荞麸皮总黄酮粗品及精品的黄酮成分。结果表明,苦荞麸皮黄酮精品对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、肠球菌、大肠杆菌、志贺氏杆菌、沙门氏菌的抑制效果优于粗品。苦荞麸皮黄酮主要黄酮成分为芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山奈酚,精品的总黄酮含量是粗品总黄酮含量的2.84倍。4种黄酮单体的抑菌能力具有一定的构效关系,其中槲皮素对所有供试菌均表现出较好的抑菌活性。     

猪骨免疫活性肽的分离纯化

为了从猪骨中分离纯化出免疫活性肽,使用超滤、sephadex G-25凝胶层析、SP-sephadex C-25离子交换层析等手段对鲜猪骨的Alcalase碱性蛋白酶的酶解液进行分离纯化,采用MTT法测定各分离产物对小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示:猪骨酶解液经超滤分离获得的分子质量小于2 ku的组分对小鼠脾淋巴细胞增殖率最高;对分子质量小于2 ku的组分采用凝胶过滤层析,对层析后活性最高的组分再进行离子交换层析,最终得到的组分质量浓度为100μg/m L时,对小鼠脾淋巴细胞的增殖率为114.30%。     

苦荞籽粒黄酮的提取纯化及抗氧化活性研究

利用响应面分析法对苦荞籽粒总黄酮提取工艺进行研究。以苦荞粉为原料,通过单因素实验考察液料比、乙醇浓度、提取温度、提取时间4个因素对黄酮提取率的影响,利用Design-Expert8.0.6软件中的Box-Behnken中心组合设计进行响应面试验,建立二次回归方程,得到苦荞籽粒黄酮的较佳提取工艺为:液料比(m L/g)20∶1,乙醇体积分数75%,提取温度70℃,提取时间4 h,此条件下提取率为2.632%。通过测定纯化后苦荞籽粒黄酮对O-2·的清除率、抗脂质过氧化能力、还原力和DPPH自由基清除率,分析其抗氧化能力,并用抗坏血酸做阳性对照,结果显示苦荞籽粒总黄酮具有还原力。通过SPSS软件分析,得到其抗脂质过氧化能力、清除O-2·能力和清除DPPH能力的IC50值分别1.115,0.498,2.235μg/m L,表明苦荞籽粒黄酮具有较强的抗氧化活性。     

乳源活性肽的研究进展

近年来，对肽的作用做了大量的研究工作，证实乳蛋白是许多生物活性肽的重要来源，主要的乳蛋白源生物活性肽有阿片样肽、抗菌肽、免疫刺激肽、抗血栓肽和矿质元素结合肽等。文章对这些活性肽的作用进行了介绍，并根据研究现状，对如何制备、纯化和分析活性肽做了简要的综述。     

磁场对苦荞种子萌发过程中黄酮类物质的诱导效应

研究不同磁场强度诱导下,苦荞种子萌发过程中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)及芦丁降解酶(RDEs)3种关键酶的酶比活力变化规律及与总黄酮含量的关系。结果表明:1)不同磁场强度对同一种酶的诱导效应不同:PAL酶比活力在磁场强度为0.3T时达到最高值;CHI酶比活力最高值出现在磁场强度为0.2T时;当磁场强度为0.3T时,RDEs酶比活力与对照相比无显著性差异;2)相同磁场强度对不同酶的诱导效应不同:强度为0.3T时,PAL酶比活力变化最大;强度为0.2T时,CHI酶比活力变化最大;3)当磁场强度为0.3T时,3种酶的协同作用使苦荞萌发物中总黄酮含量达到最高值(62.90mg/g);实验证实磁场对苦荞种子萌发过程中黄酮类物质的增加具有一定诱导效应。     

苦荞黄酮的测定方法

比较了定量测定苦养黄酮的两种比色方法,通过与HPLC测定结果对照、影响因素的探讨以及方法评价,提出AlCl3比色法比常用的NaNO2-Al(NO3)3法更适于苦荞黄酮的测定.该方法操作简便,结果准确可靠.     

Identification and quantification of aroma compounds of tartary buckwheat (Fagopyrum tataricum Gaertn.) and some of its milling fractions

Tartary buckwheat (Fagopyrum tataricum) seeds have a strong aroma that characteristically differs from the aroma of common buckwheat (Fagopyrum esculentum). Its phytochemical background has only been recently investigated. The aim of this study was to identify and quantify individual compounds responsible for tartary buckwheat aroma. Volatiles from different samples (whole seed, flour, and husks) were extracted with simultaneous extraction and distillation by Likens-Nickerson apparatus and analyzed by GC-MS. A total of 48 compounds were quantified and their odor activity values (OAV) were calculated. OAV of 26 compounds was higher than 10; therefore, they significantly contribute to the overall tartary buckwheat aroma. The compounds with OAV > 500 were: (E,E)-2,4-decadienal, (E)-2-nonenal, 2-phenylethanol, (E,E)-2,4-nonadienal, hexanal, decanal, and nonanal. The most important difference from the aroma of common buckwheat is the absence of salicylaldehyde and presence of naphthalene. Salicylaldehyde could be proposed as a marker to detect contamination/adulteration of tartary buckwheat with common buckwheat. PRACTICAL APPLICATION: Buckwheat is becoming one of important alternative crops. Its products which are rich in proteins, fiber, vitamins, and antioxidants have been associated with healthy nutrition. Although tartary buckwheat is similar to more familiar common buckwheat, their characteristic aromas differ notably. This study expands recent research on aroma of tartary buckwheat tea to seed, flour, and husks, and suggests how products from different species of buckwheat can be distinguished by analysis of aroma compounds.     

苦荞黄酮的纯化及抗氧化活性的研究

利用AB-8大孔吸附树脂对苦荞黄酮提取物样品进行纯化,利用薄层色谱分析了纯化前后苦荞黄酮的成分变化,并以维生素C为参照,比较了纯化前后苦荞黄酮对O2-·和DPPH·体外清除能力。试验结果表明:经过AB-8纯化后,苦荞黄酮提取物2中黄酮的含量由78.42%提高到98.73%,纯化后主要成分为芦丁;其清除O2-·的半数清除浓度IC50由0.099 mg/mL升高到0.123 mg/mL,纯化后清除能力反而降低;清除DPPH·的IC50由0.273 mg/mL降低到0.185 mg/mL,清除能力有所提高。     

苦荞抗氧化肽AFYRW稳定性研究

为研究苦荞抗氧化肽AFYRW在生产加工、胃肠消化中的稳定性以及细胞毒性,以羟自由基(·OH)清除率和DPPH自由基清除率作为评价指标,研究pH值、温度、反复冻融、金属离子以及胃肠消化对苦荞抗氧化肽AFYRW体外抗氧化活性的影响,以红细胞溶血率评价细胞毒性.结果表明:高温、反复冻融、Na+、Mg2+对抗氧化肽AFYRW的...     

Isolation and identification of antioxidant peptides from tartary buckwheat albumin (Fagopyrum tataricum Gaertn.) and their antioxidant activities

Tartary buckwheat (Fagopyrum tataricum Gaertn.) albumin was hydrolyzed by alkaline protease, and three new antioxidant peptides (P1, P2, and P3) were successfully separated from the hydrolysate (TBAH). The sequences of the three antioxidant peptides were Gly-Glu-Val-Pro-Trp (GEVPW), Tyr-Met-Glu-Asn-Phe (YMENF), and Ala-Phe-Tyr-Arg-Trp (AFYRW), and their molecular weights were 586.65, 702.79, and 741.85 Da, respectively. All three peptides have a good antioxidant capacity, and P3 (AFYRW) demonstrates the best antioxidant activity of the three. The IC₅₀ values of AFYRW for scavenging hydroxyl radicals (OH · ) and (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) DPPH · free radicals were 0.65 and 0.64 mM, respectively. In addition, AFYRW exhibits the strongest lipid peroxidation inhibition ability and the highest reducing power. The results of this research indicate that the three isolated peptides can be used in the development of various antioxidant additives in the food and pharmaceutical industries.     

苦荞黄酮类化合物的稳定性研究

目的研究苦荞黄酮类化合物的稳定性。方法用分光光度法研究储存时间、光照、加热、pH值、食品添加剂、氧化剂、还原剂和金属离子等条件对苦荞麸皮中类黄酮化合物的影响;比较了两种提取方法获得的黄酮提取物在上述条件下的稳定性。结果苦荞黄酮溶液在暗处存放60 d无变化,但光照能破坏其结构;苦荞黄酮溶液耐热性强,90℃保温1 h不受影响;在酸性条件下苦荞黄酮溶液稳定,在中性、碱性环境中不稳定,碱性对其有强破坏作用;常用食品添加剂在安全使用量范围内,柠檬酸、苹果酸、抗坏血酸、蔗糖对苦荞黄酮稳定性无影响,苯甲酸钠对其有一定的影响,氧化剂H2O2对其稳定性无明显影响,还原剂Na2SO3对其有强烈破坏作用;金属离子K+、Na+、Ca2+、Mg2+对苦荞黄酮稳定性无明显影响,Cu2+、Fe2+、Al3+对其影响较大,Fe3+影响最大。结论各因素对苦荞黄酮2#提取物的影响较1#提取物大,即1#提取物的稳定性略高于2#提取物。     

苦荞黄酮的提取分离及抗氧化活性研究

采用正交试验研究苦荞黄酮提取过程中的浸提时间、乙醇浓度、料液比、浸提温度,得到最佳的提取条件为:提取时间5h、乙醇浓度70%、料液比1:15、浸提温度70℃。利用最佳提取条件对苦荞粉进行了苦荞黄酮的提取分离,并进行了纯化、成分分析,得到了含量高达72.32%的高纯度苦荞黄酮。以VC、芦丁为对照,研究苦荞黄酮、荞籽醇提物、荞壳醇提物在不同浓度,不同pH值下对DPPH·的清除能力。结果表明,苦荞黄酮的清除DPPH·的能力仅次于VC,大于芦丁和荞籽醇提物,远大于荞壳醇提物,清除DPPH·的能力随着浓度的增大而升高,在pH2～8范围内,随着pH值的增大清除DPPH·的能力先降低后增大,在pH7时最低。     

苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定

采用水提醇沉法获得苦荞多糖,经离子交换柱分离,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)纯度鉴定并测定多糖的相对分子质量。硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱法测定单糖组成。结果表明：苦荞经水提醇沉,用Sevag 法脱蛋白后,获得苦荞多糖(TBP);DEAE-纤维素柱层析获得3个苦荞多糖组分TBP-1、TBP-2和TBP-3,相对分子质量分别为144544、445656和636795。柱前衍生液相色谱分析可知：TBP-1、TBP-2是由葡萄糖组成的均一多糖;TBP-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成的杂多糖,其物质的量比为4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2.02。     

苦荞麦抗肿瘤蛋白的分离纯化及结构分析

本研究采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换色谱、Sephadex G-100凝胶过滤色谱和SephacrylS-200凝胶过滤色谱对苦荞麦水溶性蛋白质(TBWSP)逐步分离纯化,并结合细胞实验,筛选出苦荞麦水溶性蛋白质中体外抗肿瘤活性的有效组分TBWSP31。体外抗肿瘤活性实验表明,TBWSP31对人乳腺癌细胞株Bcap37细胞有明显的增殖抑制作用,并且存在时间效应和剂量效应。SDS-PAGE表明,TBWSP31为单一组分,其亚基的相对分子质量为57000。CD分析表明,TBWSP31的α-螺旋的含量为33.9%,β-折叠的含量为22.8%,β-转角的含量为11.3%,无规卷曲的含量为32.0%。