阿里红均一多糖对慢性支气管炎小鼠的治疗作用研究

目的 研究阿里红均一多糖(FOPS1-a和FOPS2-a)对慢性支气管炎小鼠的治疗作用机制。方法 采用气管内注射脂多糖的方法建立慢性支气管炎小鼠模型,分别给予地塞米松、阿里红总多糖、阿里红均一多糖(FOPS1-a和FOPS2-a)进行干预后,HE染色法观察肺组织的形态变化,ELISA法检测血清中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 阿里红各给药组能使小鼠支气管黏膜炎症细胞浸润程度减轻、支气管黏膜上皮细胞脱落明显减轻,可抑制支气管黏膜上皮细胞增生,且阿里红各给药组可剂量依赖性的降低小鼠血清中IFN-γ 、TNF-α的水平(P<0.05),而 IL-4水平明显升高(P<0.05),与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 阿里红均一多糖对慢性支气管炎小鼠有一定的治疗改善作用。     

东革阿里多糖制备工艺研究

在单因素试验中考察提取温度、提取次数、提取时间和液料比对东革阿里多糖提取率的影响,并运用响应面分析方法进行优化,最终确定了东革阿里多糖的最佳提取工艺,液料比30∶1 (mL/g)、提取温度100℃,提取时间2 h、提取次数3次。采用此工艺,多糖提取率达到4.18%。     

响应面法优选新疆红芪多糖提取工艺

响应面法优选新疆红芪多糖提取工艺。以新疆红芪多糖提取率为参考指标,在提取温度、时间、料液比进行单因素实验的基础上,利用响应面法优选提取条件。最佳优化提取工艺为提取温度88.77℃,提取时间2.83 h,料液比1∶30.24(g/mL),在该优化条件下,新疆红芪精制多糖的实际提取率为3.56%。利用响应面法优化新疆红芪多糖提取工艺是合理可行的。     

复合酶法提取红蘑多糖工艺

以野生红蘑为原料,复合酶法浸提红蘑中真菌多糖。在单因素试验的基础上,采用正交试验设计获得最佳多糖提取工艺,即酶解温度60℃、纤维素酶和木瓜蛋白酶的比例为3:1(m/m)、pH5.0、酶解3h,此条件下提取多糖得率为12.0%。与传统方法相比,该工艺具有提取条件温和,提取时间较短,对多糖损伤小等特点。     

阿里红中多糖的分离纯化及其组分分析

目的对阿里红中的多糖进行分离纯化,并对得到的两种多糖组分进行基础结构分析。方法阿里红经水提醇沉法除蛋白后,再经DEAE纤维素-52、Sepharose CL-6B和葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到两种多糖组分FOPS-a和FOPS-b。采用凝胶过滤法分析其纯度和相对分子量,经气相色谱法分析其单糖组成,并对多糖组分进行部分酸水解,高碘酸氧化和Smith降解分析。结果分离纯化得到的阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b的相对分子质量为199 kDa和87 kDa。单糖组成均为甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖。FOPS-a主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖;FOPS-b主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖。结论该研究可为阿里红多糖的开发与利用提供技术参考。     

阿里红多糖组分对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法实验方法选用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测不同质量浓度阿里红多糖组分对小鼠脾脏淋巴细胞增殖率的影响;Griess法测定阿里红多糖组分对NO的释放量的影响;ELISA试剂盒测定阿里红多糖组分对IL-2、IL-4、INF-γ和IGg释放能力的影响。结果一定质量浓度的阿里红多糖组分能促进淋巴细胞的增殖活性,刺激淋巴细胞释放NO,并促进淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、INF-γ和IGg。结论阿里红多糖组分在体外具有一定的免疫活性,能增强小鼠脾脏淋巴细胞免疫功能。     

阿里红多糖中糖醛酸的含量测定

采用间羟基联苯法对阿里红多糖中的半乳糖醛酸进行含量测定,在波长520nm处测定吸光度,实验表明标准半乳糖醛酸浓度在0.01～0.05mg/mL之间呈良好的线性关系,该法简便易行,准确性高,重现性好。探讨了测定过程的影响因素,并通过此法测定阿里红多糖中的半乳糖醛酸平均含量为17.07%。     

复合酶法提取红雪茶粗多糖工艺优化研究

为了获得复合酶法提取红雪茶粗多糖的最佳工艺,采用单因素实验和正交实验,研究了不同料液比、pH、酶解温度、提取时间和不同复合酶配比对红雪茶粗多糖提取率的影响;在此基础上采用L9(34)正交实验研究了各影响因素对红雪茶粗多糖提取率的影响,结果表明复合酶最佳配比为纤维素酶2.0%,果胶酶2.0%,木瓜蛋白酶0.5%;影响红雪茶粗多糖提取率的四个因素的主次顺序为:料液比>酶解温度>pH>酶解时间;最佳提取工艺条件是料液比1:40,pH4.5,酶解温度40℃,酶解时间80min,在此条件下红雪茶多糖提取率达8.91%。本研究确定了复合酶法提取红雪茶多糖的最佳工艺。      

阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide,FOPS)及其组分FOPS-a、FOPS-b对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。方法以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,不同浓度(50~1600μg/m L)FOPS、FOPS-a、FOPS-b干预后,用cck-8试剂盒测定细胞活力,中性红法测定其吞噬活性,NO试剂盒测定NO的含量,ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-1β释放能力。结果 FOPS、FOPS-a、FOPS-b在一定的浓度范围内可以提高RAW264.7巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、一氧化氮以及TNF-α、IL-1β的释放量。结论 FOPS、FOPS-a、FOPS-b一定浓度范围内具有良好的增强RAW264.7巨噬细胞免疫功能的作用。     

响应面法优化桑黄发酵液总多糖的提取工艺

为确定桑黄发酵液多糖提取的最佳工艺条件,以桑黄多糖的含量为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法对主要提取工艺参数进行优化,并得到回归模型。结果表明:桑黄发酵液多糖提取的最优工艺条件参数为提取pH12、提取温度96℃、提取时间1.6h。在此条件下,桑黄多糖含量达到11.67mg/mL。实验证明模型拟合程度良好,误差较小。     

巴戟天药渣中多糖的提取工艺研究

巴戟天废弃药渣含有丰富的多糖,故此研究巴戟天药渣中多糖热水提取的最佳工艺条件,为巴戟天废弃药渣的综合利用提供依据。以多糖得率为指标,通过单因素实验研究4个因素:提取温度、提取时间、料液比、提取次数对巴戟天药渣中多糖提取效率的影响。在单因素实验的基础上,通过正交试验对巴戟天热水提取工艺条件进行优化。结果表明,提取温度及提取次数是影响巴戟天多糖提取效率的关键因素,料液比及提取时间是次要因素。最佳工艺条件为:巴戟天药渣在100℃水浴中用7倍量的蒸馏水提取2次,每次1 h,在此条件下,巴戟天多糖的得率为15.67%。该工艺条件可重复,多糖得率较高。     

虫草菌丝体多糖的提取方法

对虫草属真菌的干燥和新鲜菌丝体中多糖提取方法进行了研究,比较了不同的溶液离子组成和浓度下多糖的溶出情况,并与传统的热水提取方法进行了比较。在菌丝体被烘干,细胞结构被破坏的情况下,离子状态对于多糖溶出的影响相对较小,10%NaCl可以增加10%左右的多糖提取率,10%NaOH作用效果最好,可以提高提取率67.5%。而新鲜菌丝体由于细胞结构的完整性,离子组成和浓度对于多糖提取率的影响十分显著,5%NaOH的多糖提取率最高,虫草菌丝体中碱溶性多糖的含量明显高于酸溶性多糖。     

芦笋中黄酮和多糖的复合提取工艺

以绿芦笋为原料,研究提取次数、乙醇体积分数、温度、料液比及提取时间对黄酮提取效果的影响,以正交试验对连续回流法提取芦笋黄酮的工艺进行探讨,采用三氯乙酸法(TCA)在醇沉前脱蛋白,然后用乙醇沉淀法从芦笋粉浸提液中分离出多糖。结果表明：芦笋中黄酮的最佳提取条件为乙醇体积分数70%、料液比1:25(g/mL)、在80℃条件下提取2h、提取2 次;芦笋粉浸提液TCA 加入量为1.0% 脱蛋白效果较好,离心后上清液加入3 倍体积的95% 乙醇沉淀,沉淀经真空干燥得到粗多糖,多糖得率为1.21%。     

巴戟天多糖的提取及纯化研究

采用纤维素酶水解方法提取巴戟天粗多糖,并通过离子交换和凝胶过滤层析对得到的粗多糖进行了分离纯化。正交试验得到最佳的酶处理条件为：纤维素酶用量8mg／g、pH5．0、水解温度40℃以及水解时间2h。采用阶段梯度洗脱方式,巴戟天多糖在DEAE-SephroseCL．6B柱上被分为三个组分：MOPI-1、MOPI-2和MOPI-3。将离子交换层析得到的MOPI-2和MOPI-3组分进行SephadexG-50凝胶过滤层析,由MOPI-3可得到均一组分MOPI-3a,而MOPI-2被分为MOPI-2a和MOPI-2b两个组分。     

冬虫夏草液体发酵生产多糖和菌丝体的研究

本实验采用液体发酵冬虫夏草生产菌丝体和多糖。通过单因素试验,确定利用蔗糖酵母膏液体培养基发酵生产多糖和菌丝体的最佳条件为：接种量5%、温度26℃、培养时间4d,通气流量1L/min。     

四角蛤蜊多糖分离提取工艺优化

以四角蛤蜊为原料,采用酶法提取多糖,通过单因素和L(934)正交试验确定最佳提取工艺条件为,料液比1∶3,pH7.0,提取时间1.5 h,提取温度50℃。多糖粗提物经Sevag法脱除蛋白,再经DEAE Sepharose F.F离子交换色谱法和SephadexG-200凝胶过滤色谱法进行初步纯化。     

液体深层发酵条件对银耳菌丝体酸性多糖富集的影响

考察液体发酵培养基中不同碳源、碳源用量以及培养基pH 值对银耳菌丝体富集酸性多糖的影响。结果表明：1% 的蔗糖、pH 值为7.0 的培养基有利于银耳菌丝体酸性多糖的富集。并对所得银耳多糖进行DEAE-sepherosefast flow 柱层析,发现菌丝体与子实体相比,多糖组成发生显著改变。