榛蘑多糖的分离鉴定及其清除氧自由基作用研究

榛蘑烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevag法除蛋白后上DEAE-纤维素(OH-)柱层析,分离得到五种多糖组分Am-I、Am-II、Am-III、Am-IV和Am-V,SepharoseCL-4B测得Am-I分子量为1.46×104,红外光谱和NMR波普分析表明Am-I为含有葡萄糖醛酸的主要以β(1,3)糖苷键和β(1,6)糖苷键连接的D-吡喃葡聚糖。邻苯三酚自氧化法测定榛蘑粗多糖和Am-I均具有清除氧自由基的作用。     

胀果甘草酸性多糖的分离纯化、结构分析及免疫活性测定

目的分离纯化胀果甘草多糖,并对得到的3种酸性多糖组分结构及免疫活性进行分析。方法采用水提醇沉法提取胀果甘草粗多糖,经离子交换柱层析和凝胶柱层析分离纯化,高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、红外光谱法(infrared spectroscopy,IR)、气相色谱法(gas chromatography,GC)和气相-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析其结构,采用H~3-胸腺嘧啶核苷掺入法(H~3-Td R)测定其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果胀果甘草根及根茎经水提醇沉、离子交换柱层析和凝胶柱层析分离纯化后,得到3种相对分子量大于2.0×10~6 Da的均一酸性多糖组分Gi P-B1、Gi P-C1和Gi P-D1。结构和免疫活性的研究结果表明,这3种多糖组分均是由阿拉伯糖(Ara)、鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、半乳糖醛酸(Gal A)以不同摩尔比组成的酸性杂多糖,多糖的主链均由1,4-Galp A和1,2-Rhap残基构成,支链由1,5-连接的Araf和1,3-连接的Galp构成,支链分支点位于Rhap残基的O-4位。3种多糖在体外对小鼠脾细胞增殖均有促进作用,与空白对照组均有显著性差异(P0.05),其中糖醛酸含量最高的Gi P-D1促脾细胞增殖作用最高。结论从胀果甘草中分离纯化的3种酸性多糖为均一组分,具有一定的免疫增强活性。     

双孢菇菇柄多糖柱层析纯化及单糖组成

以双孢菇菇柄为试材,首先对经超声提取得到的菇柄多糖进行柱层析分离纯化,然后对柱层析得到的多糖组分别采用紫外光谱和柱层析进行纯度分析,并进行红外光谱分析和单糖组成分析。结果表明,脱蛋白双孢菇菇柄多糖经DEAE Sephadex A-25柱层析纯化共得到4个组分,收集其中两个较多的组分(蒸馏水和0.1 mol/L NaCl洗脱组分),经紫外光谱扫描无核酸和蛋白质,经Sephadex G-200柱层析鉴定均为单一峰。所得两种多糖组分经FT-IR红外光谱分析,均含有多糖特征吸收峰,且均为吡喃糖环β-异构体的多糖。菇柄蒸馏水洗脱多糖组分由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖组成,0.1 mol/L NaCl洗脱组分是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖组成。     

蜜环菌多糖Am -Ⅰ的部分理化性质及结构研究

液体培养的蜜环菌水溶性胞外粗多糖经纯化得Am-Ⅰ,再经Sephadex G-200柱层析和醋酸纤维薄膜电泳鉴定Am-Ⅰ为均一性组分。采用凝胶色谱法得Am-Ⅰ相对分子量约为6.65×105Dal,旋光法得[α]D25为+100°,苯酚-硫酸法、Folin-酚法、Dische反应法测其糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量分别为91.51%、4.78%和2.81%。气相色谱分析表明:Am-I的单糖组成为D-葡萄糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-鼠李糖、D半乳糖、摩尔比为:17.05:0.33:0.36:1:0.42:13.67。红外光谱、纸色谱、Smith降解分析表明:Am-I是一种含半乳糖醛酸的酸性多糖,其结构主要由吡喃型单糖通过β(1→4)键和β(1→6)键连接而成。β-消去反应表明这种糖蛋白是非O-型糖肽键。     

蛹虫草多糖的纯化及其分子量的测定

以蛹虫草子实体为材料,对水提醇沉、硫酸锌盐去蛋白后获得蛹虫草粗多糖（CP）进行分离纯化。采用膜分离技术、DEAE．52柱层析及SephadexG-100柱层析对CP进行分离纯化,并使用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定各组分多糖分子量,以表征不同路径所得多糖的分子量分布。结果表明：CP经膜过滤、DEAE-52柱层析及SephadexG-100进一步柱层析得到多糖组分CP2-c2-s2,经HPGPC法鉴定,CP2-c2-s2为均一多糖组分,其平均分子量为20200Da。     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

黄伞菌丝体多糖的分离鉴定及其抗氧化性研究

黄伞菌丝体烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevag 法除蛋白后DEAE- 纤维素柱层析,分离得到两种多糖组分PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ。红外光谱分析表明PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ均为含有葡萄糖醛酸的β-D-吡喃葡聚糖。采用化学比色法测定黄伞菌丝体多糖在体外的总抗氧化能力、抑制活性超氧阴离子自由基的能力、清除羟自由基的能力及对小鼠肝组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的的影响。结果表明：一定浓度范围内不同纯度的黄伞菌丝体多糖均有总抗氧化能力,能清除O2·和·OH 及抑制MDA 的生成,且呈现一定剂量关系。表明黄伞菌丝体多糖在一定浓度范围内具有抗氧化作用。     

枇杷叶多糖的分离纯化及组分鉴定

提取纯化枇杷叶多糖,并对其组分进行研究。枇杷叶多糖提取液经大孔树脂除杂,醇沉后干燥即得枇杷叶可溶性总多糖。经DEAE-52纤维素柱层析及Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化后多糖,并采用Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱测定多糖的分子量,水解多糖后采用薄层层析对枇杷叶多糖进行组分鉴定及单糖的组成比例测定。通过DEAE-52柱层析得3个枇杷叶多糖酸性组分,分别经过Sephadex G-200柱层析得到3个乳白色组分,分别为PSL-1、PSL-2、PSL-3。3个组分的洗脱曲线均为单一对称峰,初步判断3个组分含有单一成分的多糖。PSL-1、PSL-2、PSL-3分子量分别约为700、500、400 k Da。经过薄层层析初步推断出PSL-1含有鼠李糖和葡萄糖,含量之比为1∶0.602;PSL-2含有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖,含量之比为1∶1.415∶1.408;PSL-3含有半乳糖和鼠李糖,含量之比为1∶1.03。     

龙须菜琼胶多糖的提取、纯化与性能表征

龙须菜(Gracilaria Lemaneiformis)的热水提取物,经DE-22和Sephadex G-200柱层析纯化,得到一种含微量硫酸基的琼胶多糖,此多糖经Q-Sepharose柱层析鉴定为单一组分。紫外光谱显示它不含蛋白质、多肽及核酸,红外光谱揭示它含3,6-内醚半乳糖特征吸收以及微量的硫酸基,热学性质表明在其0～700℃升温过程中存在两个失重过程,旋光分析表明随温度的升高,该多糖水溶液存在一个由有序构象(螺旋结构)向无序构象(无规线团)转变的过程。     

红外傅立叶转换光谱研究金丝小枣多糖的酯化度

报道了研究多糖酯化度(DE)的新方法,以金丝小枣为原料,从其水溶性提取物中分离得到金丝小枣粗多糖,经DEAE-SepharoseCL-6B、SepharoseCL-6B和Sephadex G-200柱层析,得到一个均一的金丝小枣多糖组分(ZSP3c).红外傅立叶转换光谱(FT-IR)测定ZSP3c的DE为41.9%,与化学滴定法测定结果之间没有显著性差异(P>0.05),说明FT-IR测定多糖的DE是准确可行的.     

海带中岩藻多糖的分离纯化与结构分析

通过DEAE-纤维素和凝胶过滤色谱反复柱层析,采用苯酚-硫酸法和高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)检测,从提取的海带岩藻多糖中得到了均一多糖TC-1,并结合多种分析手段：包括糖组成分析、甲基化分析、红外光谱(IR)分析等对其化学结构进行测定。结果表明：TC-1重均相对分子质量(Mw)为3.7×105,主要由岩藻糖构成,此外还伴有少量的木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的结构复杂的硫酸酯多糖。其中岩藻糖糖基以1,4-、1,3-连接方式存在;木糖以1,3-连接方式存在;甘露糖以1,3-、1,6-连接方式存在;葡萄糖以1,3,4-、1,2,4,6-连接方式存在;半乳糖以1,6-、1,3,6-、1,3,4,6-连接方式存在。     

黄伞子实体多糖PAP2的分离纯化及其结构初步鉴定

从黄伞子实体中提取出水溶性粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 200柱层析分离纯化得到一种多糖组分PAP2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测其为均一多糖组分,平均分子质量为2.1×106u;经高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ESLD)检测表明PAP2主要由葡萄糖组成;结合红外光谱、核磁共振1H NMR和13C NMR分析表明,黄伞子实体多糖PAP2是一种α-D-吡喃葡聚糖,主链为1-4糖苷键,存在1-6糖苷键的支链。     

鹿蹄橐吾多糖LW21的分离纯化及其结构分析

目的:确定鹿蹄橐吾多糖LW21的结构,为探讨鹿蹄橐吾多糖的药理活性,合理利用鹿蹄橐吾这种植物资源提供依据。方法:水提取醇沉获得鹿蹄橐吾水溶性粗多糖LW,经酸性乙醇分级和DEAE-SephdexA-25纯化得多糖LW21。纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和Sepharose CL-4B柱层析进行纯度鉴定,LW21结构分析采用高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析及IR、NMR、GC和GC-MS等方法。结果表明:LW21为均一多糖,相对分子质量约为1.1×106。其单糖组成为鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal),物质的量比为7.4:11.9:25.7:40.0:14.9。多糖LW21为有分枝结构,主链由Glc和Man构成,其中其中Man主要以β(1→2)和β(1→6)糖苷键连接,β(1→2)糖苷键在3-O处和6-O处有分枝,β(1→6)糖苷键在2-O和4-O处有分枝,Glc也主要以β(1→2)及β(1→6)糖苷键连接,β(1→2)糖苷键在6-O处有分枝,β(1→6)糖苷键连接,在2-O处有分枝。分子支链由Ara、Rha、Gal构成。末端残基为Gal、Ara、Rha、Glc。结论:鹿蹄橐吾多糖LW2 1是一新结构多糖,为首次从鹿蹄橐吾中分离得到。     

Structure analysis of a neutral polysaccharide isolated from green tea

A neutral polysaccharide, coded as NTPS-1, was obtained from the crude tea polysaccharide (NTPS) of green tea (Camellia sinesis) by a DEAE-Sepharose fast flow column. The polysaccharide appeared to be homogenous with the weight of 21,247 Da by the high performance gel permeation chromatography (HPGPC) analysis. The NTPS-1 was found to consist of galactose. The structure of NTPS-1 was characterized by infrared (IR) spectrum, gas chromatography (GC), periodate oxidation, Smith degradation, 1D NMR and 2D NMR spectroscopy. It was found that NTPS-1 was a galactan consisting of β-(1→4)-linked galactopyranosyl units.     

Structural characterisation and bioactivities of hybrid carrageenan-like sulphated galactan from red alga Furcellaria lumbricalis

The red alga, Furcellaria lumbricalis from the coast of the Prince Edward Island (PEI) in Atlantic Canada, was extracted with hot water and fractionated with 0.125 M KCl to obtain a carrageenan-like polysaccharide. The polysaccharide was further purified on ion-exchange and gel-permeation chromatography to yield a fraction (FB1) of uniform size and charge, with an average molecular weight of 428 kD. Oligosaccharides generated with acid hydrolysis of FB1 were sequenced using the electrospray ionisation collision induced dissociation tandem mass spectrometry (ES-CID-MS/MS) technique. On the basis of chemical and spectroscopic analysis, FB1 was characterised to be composed of 1,4-linked 3,6-anhydro-galactose (40%), 1,3-linked 4-sulphated-galactose (30%), 1,3-linked galactose (20%), 1,4-linked galactose (8%) and 1,4-linked 3-O-methyl-galactose (2%), which makes it be a novel sulphated galactan hybrid. The β-secretase (BACE) inhibition and immunomodulation activities of FB1-derived oligosaccharides were evaluated in vitro.     

虾夷扇贝内脏多糖SVP-12的分离纯化及性质研究

采用蛋白酶水解提取法提取虾夷扇贝内脏粗多糖。采用2步蛋白酶-sevag法脱除粗多糖中的蛋白质。粗多糖先后经Sephacryl-S 200凝胶过滤层析柱和DEAE-52阴离子交换层析柱分离得到多糖组分SVP-12。SVP-12经高效液相色谱鉴定为均一的多糖,其分子质量约为170 ku,其中多糖含量为72.05%,蛋白含量为2.74%,硫酸根含量为12.57%,氨基己糖含量为8.46%。气相色谱法检测结果表明,SVP-12含有鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,其摩尔比例约为1.65∶2.54∶4.05∶5.60∶1.48∶4.90∶1.00。     

A neutral polysaccharide from the abalone pleopod<Emphasis Type="Italic">, Haliotis discus hannai</Emphasis> Ino

For the first time, a water-soluble neutral polysaccharide, APP, was obtained from abalone pleopod (Haliotis Discus Hannai Ino) by proteolytic method with papain followed by precipitation with ethanol and purification with gel chromatography. The results of HPLC with TSK-gel column and gel filtration chromatography with Sepharose CL-6B indicated APP was uniform in polarity and its molecular weight (MW) was about 6 kDa. According to chemical methods, IR spectroscopy, and NMR spectroscopy, APP consists of 1-, 1,4-, 1,6-, 1,4,6-linked glucose and 1-, 1,3-, 1,6-, 1,4,6-linked galactose.     

软枣猕猴桃多糖的分离与纯化及其分子质量的测定

对通过水提醇沉法提取、Sevag法脱蛋白得到的软枣猕猴桃多糖进行分离纯化,利用DEAE-纤维素52离子交换层析对软枣猕猴桃多糖进行初步分离,得到4种软枣猕猴桃多糖组分;利用葡聚糖凝胶对软枣猕猴桃多糖组分进一步分离的最佳条件为葡聚糖凝胶型号为Sephadex G-200、层析柱规格为D1.1cm×100cm、多糖质量浓度为10g/L。以此条件分离,得到含量较高的软枣猕猴桃多糖-Ⅱ纯品。通过Sephadex G-200凝胶柱层析鉴定软枣猕猴桃多糖-Ⅱ是均一的纯多糖,通过紫外光谱鉴定软枣猕猴桃多糖-Ⅱ不含核酸及蛋白。同时测得软枣猕猴桃多糖-Ⅱ的分子质量为83733D。     

鹰嘴豆非淀粉多糖的分离纯化及结构表征

提取鹰嘴豆中的粗多糖,通过酶处理和Sevag法除去多糖中的淀粉和蛋白质,经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75凝胶柱分离纯化分别得到鹰嘴豆非淀粉中性多糖和酸性多糖,并通过紫外光谱、气相色谱、红外光谱、扫描电镜测定其性质和单糖组成。结果表明：鹰嘴豆非淀粉多糖在260 nm和280 nm波长处均无吸收峰,表明两种多糖均不含核酸、蛋白质以及肽类等;气相色谱测定表明鹰嘴豆非淀粉中性多糖单糖组成的物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.48∶1∶3.92∶0.87∶32.82∶18.79∶28.06,鹰嘴豆非淀粉酸性多糖单糖组成物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.22∶1∶3.92∶2.10∶5.92∶15.99∶8.57（均以岩藻糖为标准）;红外光谱测定表明二者均有多糖的特征吸收峰;扫描电镜显示鹰嘴豆非淀粉中性多糖呈线形结构而鹰嘴豆非淀粉酸性多糖呈卷曲的片状结构。     

硫酸酯化猴头菌多糖的结构与构象分析

利用碱提醇沉法从猴头菌(Hericium erinaceus)子实体中获得水不溶性多糖HEPFA,氯磺酸-吡啶法对HEPFA进行硫酸化修饰,制得能溶于水的硫酸化猴头菌多糖(S-HEPFA);通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephacryl S-500凝胶柱层析对S-HEPFA进行纯化;运用化学方法和波谱技术对S-HEPFA进行结构分析。碱提醇沉得到相对分子量为5.38×105u,硫酸基含量为19.5%的硫酸酯化的猴头菌多糖(S-HEPFA);红外光谱分析表明,在波数1236cm-1、820cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰;离子色谱检测,该组分只含有葡萄糖,甲基化分析得S-HEPFA糖链主要的葡萄糖残基由1-连接Glcp、1,3-连接Glcp和1,3,6-连接Glcp组成,摩尔比为2.07:1:1.83;刚果红实验分析得S-HEPFA在水溶液中或微碱溶液中为三股螺旋构象。