不同种植地区蓝莓果中花色苷的分布

目的:探究不同种植地区的蓝莓果实中花色苷含量与海拔高度、纬度等环境因素之间的关系。方法:选取不同海拔高度和纬度的10个种植地区“灿烂”品种的兔眼蓝莓果实为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)定性和定量分析蓝莓果中花色苷的组成成分,比较不同种植地区的蓝莓果中花色苷苷元、糖基组成与含量的差异。结果:从蓝莓果中检测到5类花青素苷元,共13种花色苷,苷元含量组成由高到低为锦葵色素>矢车菊素>飞燕草素>矮牵牛素>芍药素;糖基组成由高到低为半乳糖苷>阿拉伯糖苷>葡萄糖苷,其中从芍药素中仅检测到半乳糖苷。蓝莓果中锦葵色素-3-O-半乳糖苷和矢车菊素-3-O-半乳糖苷的含量最高,而飞燕草素-3-O-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷含量低,在部分地区的蓝莓果中缺失或未检测到。不同种植地区蓝莓果中花色苷组成虽基本一致但含量存在差异。云南龙朋代表的低纬度、高海拔地区种植的蓝莓果中花色苷总含量最高,高纬度、低海拔地区的浙江草塔的蓝莓果中花色苷总含量最低。结论:不同种植地区的地理环境影响蓝莓果中花色苷的分布,高海拔地区的环境条件更利于蓝莓果实中花色苷的合成和积累。     

基于液相色谱-质谱联用技术定性定量分析黑豆种皮中可溶型和结合型花青素

以超声波辅助有机溶剂提取法获得黑豆种皮可溶型花青素提取物,再进一步对不含可溶型花青素的黑豆种皮残渣使用酸水解和碱水解以及酸碱/碱酸轮提水解,获得黑豆种皮结合型花青素提取物。采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱联用仪分析鉴定各黑豆种皮提取物中所含有的共17 种花青素成分,包括11 种花青素糖苷类：飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-半乳糖苷、矮牵牛花素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛花素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-芸香糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-己糖苷、芍药花素-3-O-己糖苷、天竺葵素-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷)和芹菜定-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷);6 种花青素苷元：飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛花素、天竺葵素、芹菜定和芍药花素。采用高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱联用仪精确定量各类黑豆种皮提取物中的花青素含量,结果表明,酸性结合型花青素提取物中结合型花青素的总含量最高。此外,在黑豆种皮的可溶型花青素提取物中,花青素主要以花青素糖苷类形式存在,苷元含量相对极少;而在结合型花青素提取物中,则主要以花青素苷元为主,糖苷类化合物相对少见。     

HPLC测定不同溶剂提取蓝莓花青素中C3G含量

建立以高效液相色谱法测定3种不同溶剂提取蓝莓花青素中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量。采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(150 mm×4.60 mm, 5μm);流动相, A相为乙腈, B相为1.5%甲酸。流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长520 nm,进样量10μL。结果表明,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷在9.756～48.78μg/mL范围内(R2=0.999 1)线性关系良好,最低检出限为0.06 mg/kg,精密度n为6组, RSD=1.36%。3种不同溶剂平均回收率分别为101.67%, RSD=3.97%; 96.55%, RSD=1.05%; 98.28%, RSD=2.58%。不同溶剂提取蓝莓花青素中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量不同。该方法简便、快速、重复性好,可用于蓝莓花青素的质量控制。     

樱桃汁饮料中花青素的快速测定方法

建立一种快速、有效的高效液相色谱法,测定樱桃汁饮料中芍药素-3-葡萄糖苷、锦葵定-3-葡萄糖苷的方法。样品经0.5%盐酸乙醇提取后,采用C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,以乙腈-5%磷酸梯度洗脱的条件下,用PDA检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,芍药素-3-葡萄糖苷、锦葵定-3-葡萄糖苷标液在20.0μg/mL~200.0μg/mL浓度范围内线性良好,相关系数r~2为0.999,芍药素-3-葡萄糖苷检出限为40 mg/kg,定量限为120 mg/kg,锦葵定-3-葡萄糖苷检出限为50 mg/kg,定量限为150 mg/kg,两个目标物的加标回收率为88.4%~92.6%。该方法具有前处理简单、检测速度快的优点,适用于樱桃汁饮料中芍药素-3-葡萄糖苷、锦葵定-3-葡萄糖苷的定量检测。     

HPLC法对比分析不同的蓝莓提取物

采用高效液相色谱法对两个不同厂家的蓝莓提取物和新鲜蓝莓中花青素的含量和种类进行对比,结果显示,A蓝莓提取物的花色苷种类单一,以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为主,花青素含量40.96%;B蓝莓提取物的花色苷种类丰富,花青素含量43.15%;新鲜蓝莓花青素含量4.45mg/g。虽然两个样品均达到了产品规格(花青素含量≥25%),但A蓝莓提取物的色谱图与新鲜蓝莓果的的色谱图不符,该方法能明显对比出不同厂家蓝莓提取物的差异。     

蓝莓果实中花色苷单体的色谱分离纯化

为充分开发蓝莓果实的潜在应用价值,主要采用柱色谱法及半制备高效液相色谱法系统研究蓝莓果实中花色苷(花青素的糖苷形式)单体的制备技术。蓝莓花色苷粗提液经超声辅助浸提、乙酸乙酯萃取2次,能够促进花色苷类物质的溶出,并有效去除溶液中的黄酮类杂质。经Amberlite XAD-7HP大孔树脂层析、Sep-Pak C18固相萃取,所得蓝莓花色苷粗品的纯度为62.49%。经Sephadex LH-20凝胶色谱柱分离,获得的3种花色苷纯化组分纯度在65%~75%之间。运用半制备型高效液相色谱技术从3种花色苷纯化组分中制备出两种蓝莓果实中含量较低的半乳糖苷化的花色苷单体,经分析型高效液相色谱鉴定为飞燕草素-3-O-半乳糖苷和锦葵色素-3-O-半乳糖苷,纯度分别为96.98%和95.63%。本研究为花色苷单体的规模化生产提供了技术参考,同时为实现蓝莓花青素高附加值产品的生产提供良好理论依据。     

葡萄酒中外源性天然色素掺伪检测

研究确定了葡萄酒中可能添加的天然色素种类是花青素类物质,并建立了葡萄酒中花色苷的检测方法,样品经SPE提取后高效液相色谱荧光法进行定性、定量分析。确定了葡萄酒中6种主要呈色物质:锦葵素-3-葡萄糖苷;锦葵素-3-乙酰葡萄糖苷;锦葵素-3-p-香豆酰葡萄糖苷;芍药素-3-葡萄糖苷;飞燕草素-3-葡萄糖苷;矮牵牛色素-3-葡萄糖苷,比例分别为5∶1.5∶1∶0.5∶0.4∶0.4,当酒中原有花色苷种类和比例出现剧烈变化时,即可判定添加了外源花色苷,方法可以有效判定酒中是否添加外源花色苷。     

UPLC-Q-Tof/MS同时测定桑葚保健酒中五种花色苷含量

目的:建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-Tof/MS)法测定桑葚保健酒中五种花色苷(天竺葵-3-O葡萄糖苷、氯化芍药素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊-3-O芸香葡萄糖苷、锦葵色素-3-5-二葡萄糖苷、矢车菊-3-O葡萄糖)含量。方法:色谱柱:ACQUITY UPLC Ben C18 Column (2.1mm×100mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸,进样量为2μL,流速为0.5mL/min,梯度洗脱,柱温为40℃,ESI+电离模式。结果:五种花色苷在100～800ng/mL范围内线性关系、回收率良好。桑葚保健酒中矢车菊-3-O-芸香葡萄糖苷、矢车菊-3-O-葡萄糖苷含量丰富,达到398.0ng/mL以及532.8ng/mL。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定蓝莓中六种花色素含量

本文建立了一种高效液相色谱-质谱仪联用测定蓝莓中车菊素、飞燕草素、矮牵牛素、花葵素、芍药素、锦葵色素的方法。采用蠕动泵直接进样,利用Tune软件在ESI+模式下获得前体离子和产物离子,并对结果进行数据分析。结果表明：蓝莓样品在2.5～100 ng/mL范围内具有良好线性关系,线性相关系数均在0.99以上,回收率为80.41%～103.57%,RSD为4.16%～9.21%,检出限在0.1～2 ng/mL。该方法可完成蓝莓中6种花色素物质含量测定,具有快速高效,定量准确,灵敏度高,重复性好。     

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术定性分析黑豆皮中花青苷类物质

利用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术(UPLC MS/MS),对黑豆皮中花青苷类物质进行定性分析。黑豆皮经石油醚索氏提取和6%甲酸水溶液回流提取,取上清液,超滤后用UPLC MS/MS、ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以6%甲酸和乙腈为流动相,进行梯度洗脱,在电喷雾(ESI)正离子模式下,用MRM模式监测。在黑豆皮中检测出矢车菊素类、芍药素类、天竺葵素类、锦葵素类、矮牵牛素类和飞燕草素类这6类共15种花青苷类物质,矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、芍药素-3,5-双葡萄糖苷、芍药素-3-半乳糖苷、锦葵素-3-半乳糖苷、锦葵素-3-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-半乳糖苷、矮牵牛素这8种花青苷在黑豆皮花青苷类物质研究中未见报道。通过对黑豆皮花青苷类物质的分析,建立了UPLC MS/MS检测黑豆皮中花青苷类物质方法,该方法具有操作简便、准确、快速、选择性强的特点。     

云南丽江和吉林靖宇11种越橘果实花色苷组分的分析

采用高效液相色谱法对云南丽江、吉林靖宇11种越橘果实花色苷组分进行测定。通过标准品的分析,建立了飞燕草素-3-半乳糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、锦葵色素-3-半乳糖苷、锦葵色素-3-葡萄糖苷的回归方程,相关系数为0.9939~0.9968,精密度RSD为2.00%~3.73%,回收率在98.90%~100.99%,方法准确可行。通过6种标准品的对比,供试的15个样品中,所有越橘品种均有飞燕草素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-半乳糖苷、锦葵色素-3-半乳糖苷3种花色苷,飞燕草素-3-半乳糖苷平均含量为223.99 μg/g、锦葵色素-3-半乳糖苷平均含量为153.34 μg/g,二者占总花色苷的65%。采用欧氏距离聚类分析表明,集群1为飞燕草素-3-半乳糖苷含量较高的三种越橘,代表品种为丽江雷戈西、丽江奥尼尔、靖宇杜克;集群2为6种花色苷总含量较高的越橘品种,代表品种为丽江北陆与靖宇早蓝,说明飞燕草素-3-半乳糖苷含量与花色苷总含量是评价越橘花色苷特点的重要因子。     

Electrochemical behaviour and antioxidant capacity of anthocyanins from Chilean red wine,grape and raspberry

The anthocyanin fractions were extracted from Cabernet Sauvignon red wine, skins of Vitis vinifera grapes and raspberry fruits (Rubus idaeus). In red wine extract, 16 anthocyanins were identified, malvidin-3-O-glucoside being the main anthocyanin, which comprised 53.6% of the total anthocyanin in grape extract. Raspberry extract contained mainly delphinidin-3-O-glucoside and cyanidin-3-O-glucoside. The antioxidant capacity of the extracts was assayed by electrochemical methods. Best resolution of the oxidation peaks for the extracts and diluted wine was obtained by pulse differential voltammetry. The wine diluted 20× presented values of P1 (443 mV) and P2 (676 mV) similar to those corresponding to wine extract, and to the anthocyanin malvidin-3-O-glucoside. The antioxidant capacity of anthocyanins in extracts of wine, grape skin and raspberry fruit was also determined by the Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) method.     

赤霞珠葡萄酒酿造过程中花色苷及颜色参数变化规律

为分析葡萄酒酿造过程中颜色品质变化规律,在葡萄酒酿造过程和贮藏期阶段性采集样品,监测了6种花色苷：矢车菊色素（Cy）、芍药色素（Pn）、飞燕草色素（Dp）、矮牵牛色素 （Pt）、锦葵色素（Mv）、天竺葵色素（Pg）以及花色苷总含量（ACY）、色度、色调、聚合色素（PPC）、葡萄酒颜色（WC）、总色素（WCA）的变化规律。结果表明,在葡萄酒酿制和贮藏阶段,不同品种葡萄酒花色苷各组分均呈现先上升,在苹果酸乳酸发酵阶段结束前达到最高而后开始呈下降趋势,在贮藏阶段后期趋于稳定。Dp、Cy、Pg、Pn、Mv、ACY、色度、WCA、WC之间均呈显著正相关（P＜0.05）,与色调不相关。PPC与色调和WC呈显著正相关（P＜0.05）。Dp、Cy占ACY的比例均呈波浪形递增趋势,Pt、Pg、Mv占ACY的比例变化不明显,维持动态稳定的趋势,Pn占ACY的比例均呈波浪形递减趋势。     

高速逆流色谱法分离红葡萄皮中的花色苷

建立高速逆流色谱(HSCCC)法分离制备红葡萄皮中花色苷单体的方法。以乙腈-正丁醇-甲基叔丁基醚-水-三氟乙酸(1∶40∶1∶50∶0.01, V/V)为溶剂体系,上相（有机相）为固定相,下相（水相）为流动相,流速为2.0 mL/min,转速为950 r/min,进样量为200 mg,分离得到的组分利用紫外-可见（UV）光谱和液质联用（HPLC-MS）技术进行定性分析。结果表明,经过一次高速逆流分离即可得到3种花色苷单体,分别为飞燕草色素-3-O-葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-葡萄糖苷和芍药色素-3-O-葡萄糖苷,高效液相色谱（HPLC）峰面积归一法计算其纯度分别为93.7%、95.2%、91.6%。采用高速逆流色谱法成功从红葡萄皮中一次性分离得到3种高纯度的花色苷单体,其中芍药色素-3-O-葡萄糖苷为首次分离得到。     

超高压提取蓝莓渣花色苷的工艺优化及其抗氧化活性

本文旨在优化蓝莓渣花色苷的超高压提取工艺并考察其抗氧化活力。本文以蓝莓渣为原料,采用单因素实验和Box-Behnken响应面分析法对蓝莓渣花色苷的提取工艺进行优化,以维生素C（V_C）为阳性对照,通过DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率和FRAP铁离子还原能力的测定,评估蓝莓渣花色苷的体外抗氧化活性,并采用高效液相色谱法（HPLC）对蓝莓渣花色苷组分进行分析。结果表明:蓝莓渣花色苷的最佳提取工艺条件为:提取压力400 MPa,提取时间9 min,乙醇浓度60%,料液比1:20 g/mL,此条件下花色苷的提取量为5.93±0.06 mg/g,与传统溶剂浸提法（CSE）、超声波辅助提取法（USE）相比,超高压辅助提取（UPE）法的提取效果更好,花色苷提取量分别提高25.11%、10.02%;蓝莓渣花色苷对DPPH?清除能力最强,与同浓度的V_C相比,无显著性差异（P>0.05）;其对?OH的清除率以及FRAP铁离子还原能力则显著弱于同浓度V_C（P<0.05）;HPLC分析结果表明,蓝莓渣花色苷包含13种花色苷单体,其中锦葵色素-3-半乳糖苷含量最高。因此,超高压辅助提取是一种高效的蓝莓渣花色苷提取方法,且蓝莓渣花色苷因其较强的抗氧化活性具有较好的应用价值。     

Characterisation and preliminary bioactivity determination of Berberis boliviana Lechler fruit anthocyanins

Berberis boliviana Lechler is a member of the Berberidaceae family that has a small edible red-purple berry. The plant is native to the Peruvian Andes and contains high amounts of anthocyanin pigments. The monomeric anthocyanin content, determined by a pH-differential method, was 7/100 g of seedless berries. Pigments were characterised by HPLC coupled to a photodiode array (PDA) and mass spectrophotometer (MS) detectors. Five aglycones and ten anthocyanins were found and identified as petunidin-3-glucoside (24.4%), delphinidin-3-glucoside (24.1%), malvidin-3-glucoside (22.1%), cyanidin-3-glucoside (10.2%), petunidin-3-rutinoside (7.15%), malvidin-3-rutinoside (4.9%), cyanidin-3-rutinoside (3.8%), delphinidin-3-rutinoside (2.6%), peonidin-3-glucoside (1.1%), and peonidin-3-rutinoside (0.9%).     

野生蓝莓酒皮渣花色苷及其抗氧化活性研究

该研究比较了蒸馏前后野生蓝莓酒皮渣中的总酚及花色苷含量、花色苷单体的组成和抗氧化活性。结果表明,蓝莓酒皮渣中总花色苷含量为（8.64±0.13） mg/g,总酚含量为（77.24±1.42） mg/g,抗氧化活性为Trolox当量浓度（3.59±0.11） μmol/g;单体花色苷含量较多的是二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷（29.90%）、3′-甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷（21.31%）和花翠素-3-O-葡萄糖苷（20.44%）。蒸馏后,皮渣中的总酚及花色苷含量分别下降为（68.11±1.20） mg/g和（5.05±0.09） mg/g,其单体降解率变化在21.64%～43.47%。其中,二甲花翠素-3,5-O-二葡萄糖苷稳定性最差,降解率为43.47%;花青素-3-O-葡萄糖苷较为稳定,降解率为21.64%;Trolox当量浓度下降为（3.07±0.07） μmol/g,皮渣抗氧化能力也降低了14.64%。因此,野生蓝莓果酒发酵产生的皮渣具有较高的利用价值,开发时应尽量避免高温处理。     

High performance liquid chromatography analysis of anthocyanins in bilberries (Vaccinium myrtillus L.), blueberries (Vaccinium corymbosum L.), and corresponding juices

In the present study the anthocyanin content of commercially available bilberry juices and fresh fruits were quantified by using 15 authentic anthocyanin standards via high performance liquid chromatography with an ultra-violet detector (HPLC-UV/VIS). Delphinidin-3-O-glucopyranoside, delphinidin-3-O-galactopyranoside, and cyanidin-3-O-arabinopyranoside were the major anthocyanins found in juices, nectar, and fresh bilberries. In contrast, fresh blueberries had higher concentrations of malvidin-3-O-arabinopyranoside and petunidin-3-O-galactopyranoside. Up to 438 mg anthocyanins per 100 g fresh weight (2762 mg/100 g dry weight (DW)) were detected in blueberries from various sources, whereas bilberries contained a maximum of 1017 mg anthocyanins per 100 g fresh weight (7465 mg/100 g DW). Commercially available bilberry and blueberry juices (n= 9) as well as nectars (n= 4) were also analyzed. Anthocyanin concentrations of juices (1610 mg/L to 5963 mg/L) and nectar from bilberries (656 mg/L to 1529 mg/L) were higher than those of blueberry juices (417 mg/L) and nectar (258 mg/L to 386 mg/L). We conclude that using several authentic anthocyanin references to quantify anthocyanin contents indicated them to be up to 53% and 64% higher in fresh bilberries and blueberries, respectively, than previously reported using cyanidin-3-O-glucoside. This study has also demonstrated that commercially available juices produced from bilberries contain much higher anthocyanin concentrations than those from blueberries. PRACTICAL APPLICATION: We have investigated the contents of a special class of antioxidants, namely anthocyanins in blueberry and billberry fruits and juices commercially available in Germany. To achieve reliable data we have used authentic standards for the first time. We think that our results are important in the field of nutritional intake of this important class of polyphenols and fruit juice companies get a closer insight in the occurrence of these antioxidants in market samples to be used in food composition databases and for nutritional survey.     

ANTHOCYANINS OF BEAUTY SEEDLESS GRAPES

Beauty Seedless grape pigments were isolated and identified by chromatographic, spectral and chemical properties. The pigments were identified as delphinidin-3-glucoside, petunidin-3-glucoside, malvidin-3-glucoside, peonidin-3-glucoside, malvidin-3-glucoside acylated with caffeic acid and malvidin-3-glucoside acylated with p-coumaric acid. Beauty Seedless grapes contained 62 mg anthocyanins per 100g fresh grapes and malvidin derivatives accounted for 73% of the total anthocyanins.