气相色谱- 质谱法测定蜂王浆中的植物甾醇组成

为探明蜂王浆中的植物甾醇组成,蜂王浆样品经冻干、萃取得到王浆脂类物质,再经过皂化、衍生后使用HP-5MS 柱进行分离,采用GC-MS 对蜂王浆中甾醇类物质进行鉴定,并用GC-FID 内标法进行定量分析。结果表明：蜂王浆中除含有少量胆固醇外,还含有25- 羟基-24- 甲基胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β - 谷甾醇、Δ5-燕麦甾醇、Δ7- 燕麦甾醇等植物甾醇;蜂王浆中总甾醇含量在51mg/100g 鲜王浆以上。其中,25- 羟基-24- 甲基胆甾醇、菜油甾醇、β- 谷甾醇和Δ5- 燕麦甾醇含量较高,分别占总甾醇含量的36.79%、6.30%、19.75% 和27.99%。     

气相色谱法测定食用油中的植物甾醇

对食用油进行皂化前处理,以胆甾烷醇为内标,采用气相色谱法测定菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇4种植物甾醇含量。结果表明：该方法测定食用油中植物甾醇的专一性强,方法的检出限和定量限分别为3.00～3.30 mg/100 g和9.00～11.00 mg/100 g,精密度(RSD)为0.89%,回收率为90.51%～110.25%。该方法用于测定食用油中4种植物甾醇有效可靠。     

HPLC-UV法测定植物甾醇中3种甾醇单体的含量

本文建立了一种利用紫外高效液相法(HPLC-UV)测定植物甾醇中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇的方法。采用 Waters Symmetry C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈和水为流动相等度洗脱,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为208 nm。实验结果表明:菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇在38 min内均能实现基线分离,线性范围分别为2.52~50.30、5.08~101.60、5.10~102.00 μg/mL时,甾醇单体的线性关系良好,相关系数r分别为0.9971、0.9989、0.9991,检测限为2.5 μg/mL;日内精密度在0.06%~3.06%范围内,日间精密度介于1.56%~6.61%;加样回收率介于92.74%~106.25%之间。本方法能够准确测定4种植物甾醇中3种甾醇单体的含量,其中大豆甾醇和木甾醇中3种甾醇单体的含量组成差异较大,大豆甾醇中菜油甾醇和豆甾醇的含量分别为163.80~251.23 mg/g和134.89~235.04 mg/g,远高于木甾醇中的菜油甾醇和豆甾醇含量,而木甾醇中β-谷甾醇含量为(685.10±7.55) mg/g,则明显高于β-谷甾醇在大豆甾醇中的含量。相对现有的高效液相方法,本方法实现了对混合甾醇中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇3种甾醇单体的精确定量分析。     

气相色谱法分析不同产地辣木叶中植物甾醇的含量

目的研究西双版纳、韶关、安哥拉、印度和云南辣木叶中菜油甾醇、β谷甾醇和豆甾醇的含量差异。方法样品经50%氢氧化钾皂化后,用乙醚:正己烷(1:1,V:V)萃取游离甾醇并将溶剂蒸干,用N,N-二甲基甲酰胺:六甲基二硅氨烷:三甲基氯硅烷(8:2:1,V:V:V)将游离甾醇硅烷化,然后进行气相色谱分析,并分析各地辣木叶中菜油甾醇、豆甾醇和β谷甾醇含量。结果β谷甾醇在韶关辣木叶中含量为20 mg/100 g左右,在西双版纳辣木叶中含量为40 mg/100 g,在安哥拉、印度和云南辣木叶中含量为30 mg/100 g左右;菜油甾醇在韶关辣木叶中含量为5~7 mg/100 g,在印度辣木叶中含量为8 mg/100 g,在西双版纳、安哥拉和云南辣木叶中均大于10mg/100 g;豆甾醇在各个辣木叶中含量为2~12 mg/100 g。结论西双版纳、云南、安哥拉、印度辣木叶中菜油甾醇、β谷甾醇含量明显高于韶关辣木叶,豆甾醇含量没有明显的地域差异。     

气相色谱法测定小麦胚芽油、大豆油和大蒜油中植物甾醇的组成和含量

目的建立气相色谱法检测小麦胚芽油、大豆油和大蒜油中植物甾醇的组成和含量。方法采用乙醇氢氧化钾-甲基叔丁基醚溶液水浴上皂化,异辛烷萃取,毛细管气相色谱法分离植物甾醇的分析方法。结果植物甾醇各组分在相应的浓度范围内呈现良好的线性关系,方法相关系数为0.9997~0.9999,平均回收率在96.8%~101.3%,相对标准偏差在0.4~1.0%之间。结论小麦胚芽油、大豆油和大蒜油中植物甾醇主要由菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇组成,其中β-谷甾醇含量最高,且小麦胚芽油中植物甾醇的总量最高。     

特种植物油中甾醇总量及组成分析

通过气相色谱法对牡丹籽油、核桃油、南瓜籽油、葡萄籽油四种特种植物油中的甾醇总量及组成进行分析研究。结果表明,牡丹籽油甾醇总量为240.0 mg/100 g,其主要组分是β-谷甾醇、Δ5,23-豆甾二烯醇和Δ5-燕麦甾烯醇;核桃油甾醇总量为100.5 mg/100 g,其主要组分是β-谷甾醇;南瓜籽油甾醇总量为299.6~358.4 mg/100 g,其主要组分是β-谷甾醇、Δ5,24-豆甾二烯醇和Δ7-燕麦甾烯醇;葡萄籽油甾醇总量为222.5~234.9 mg/100 g,其主要组分是β-谷甾醇、菜油(芸薹)甾醇和豆甾醇。分析结果为特种植物油的开发及加工提供了基础数据及技术支撑。     

加工过程对苹果籽油中植物甾醇流向分布影响

采用GC-FIR法对苹果籽加工过程中的植物甾醇进行了成分分析。结果表明,苹果籽油中植物甾醇主要成分为菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇,其中以β-谷甾醇含量最高;压榨法制备的苹果籽油植物甾醇的含量(385mg/100g)高于索氏提取(288mg/100g)和超声提取法(318mg/100g);且随着苹果籽油精炼程度提高,油脂中的有益微量成分植物甾醇损失增大。     

HPLC法同时测定山药中的植物甾醇

建立了一种高效液相色谱法(HPLC)同时测定山药中的3种植物甾醇(菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇)含量的方法。样品使用甲醇提取,经皂化、萃取后用HPLC进行分析。色谱条件:SunFire C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(92.5:7.5),检测波长205 nm。结果表明:山药中3种植物甾醇在一定浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均不小于0.9997,样品检出限为0.50～0.52μg/mL,样品平均加标回收率在93.5%～97.2%,相对标准偏差均小于3.6%。经测定,山药中的植物甾醇含量为菜油甾醇67.1～79.8μg/g,豆甾醇28.8～36.7μg/g,β-谷甾醇129.6～154.5μg/g。该方法操作简便、结果准确度高且重复性好,可作为山药中植物甾醇含量同时测定的方法。     

68种保健食品常用原料植物甾醇含量研究

目的对68种中草药植物甾醇的含量进行检测,为进一步认识和利用中草药中的有效成分提供依据。方法选择目前保健食品原料中批准可用的中草药68种,按照本实验室建立的方法,用气相色谱法分析了β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、谷甾烷醇的含量,并计算各成分占总量的百分比。结果保健食品原料中可用的68种中草药中,植物甾醇的总含量从5.2mg/100g(诃子、鲜白茅根)到321.4mg/100g(蒲黄)。来源于植物的"花"、"种子"、"皮"等部位的样品中植物甾醇的含量较高。本次研究发现所有检测样品中都含有β-谷甾醇,且在绝大多数样品中此成分的含量最多;传统用来降血脂、抗炎的中草药中均含有较高的植物甾醇。结论 68种中草药中均含有一定量的植物甾醇,这可能是中药发挥作用的功能成分之一。     

亚麻籽油中植物甾醇含量的测定

以32种亚麻籽油为原料,采用GC-MS测定其植物甾醇的组成与含量,确定亚麻籽油中含有6种植物甾醇,分别为菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、Δ5-燕麦甾醇、环阿屯醇、2,4-亚甲基环阿屯醇。总甾醇含量范围为321.65~1 028.5 mg/100 g,其中β-谷甾醇含量最高。将植物甾醇各组分含量与亚麻籽油氧化诱导时间进行相关性分析,结果表明豆甾醇含量与亚麻籽油氧化诱导时间有显著正相关性。     

气相色谱法同时测定食品中的胆固醇和植物甾醇

建立气相色谱法同时测定食品中植物甾醇和胆固醇含量的分析方法,测定植物甾醇含量较高的常见植物油和同时含有胆固醇及植物甾醇的样品。采用5α-胆甾烷为内标参照物,样品经皂化后提取,浓缩后正庚烷定容上机进样分析。胆固醇和植物甾醇在0.001～2.5 mg/mL质量浓度范围内线性良好,线性相关系数R2均大于0.99。方法的检出限为0.3 mg/100 g,定量限为1.0 mg/100 g,该方法相较于液相色谱法能有效将胆固醇和植物甾醇进行分离,具有步骤简单、重复性好、准确度和灵敏度高等特点。     

青稞麸皮提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究及成分分析

研究青稞麸皮的正己烷、乙酸乙酯和甲醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明,3种不同极性的提取物均显示抑制效果,其中正己烷提取物和乙酸乙酯提取物的抑制活性强于市售α-葡萄糖苷酶抑制剂——阿卡波糖。进一步采用气相色谱-质谱联用法对正己烷提取物中脂肪酸、不皂化物、甾醇进行定性定量分析。正己烷提取物中的脂肪酸主要为亚油酸、油酸、棕榈酸、α-亚麻酸,占总脂肪酸的96.5%,这几种脂肪酸被证实对α-葡萄糖苷酶具有混合型抑制的活性。从不皂化物中分离得65个质谱峰,鉴定出甾醇类、三萜类、高分子脂肪醇等生物活性成分。同时对已鉴定的几种主要游离甾醇进行含量分析,结果显示β-谷甾醇和菜油甾醇为主要甾醇,两者共占总游离甾醇的83%,提取物中的甾醇、三萜类对α-葡萄糖苷酶抑制活性可能有一定贡献。由此可见,青稞麸皮是筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的优质天然资源。     

A dietary antioxidant supplementation of Jamaican cherries (<Emphasis Type="Italic">Muntingia calabura</Emphasis> L.) attenuates inflammatory related disorders

The polyphenolic extract from Jamaican cherries (Muntingia calabura L.) was screened for its antioxidant and anti-inflammatory activities. The extract contained considerable amounts of vitamin C (33.6 mg AAE/g extract) and E (14.7 mg TE/g extract), total phenolics (121.1 mg GAE/g extract), flavonoids (173.2 mg RE/g extract), and anthocyanins (82.4 mg CGE/g extract) estimated through standard spectrophotometric methods. The extract also revealed the presence of volatile compounds such as phytol (26.26%), n-hexadecanoic acid (11.97%), cyclopropaneoctanoic acid (10.26%), γ-sitosterol (11.15%), stigmasterol (7.20%), and campesterol (4.47%) as main constituents in the extract. The polyphenol extract demonstrated DPPH radical scavenging activity (IC₅₀ 10.6±0.6 μg/mL) and effectively inhibited hydroxyl (IC₅₀ 24.9±3.3 μg/mL), and nitric oxide (IC₅₀ 15.01±1.2 μg/mL) radicals in vitro. The extract also exhibited anti-inflammatory activity in a dose dependent manner by significantly (p<0.01) inhibiting carrageenan induced paw edema and reducing the weight of granuloma in cotton pellet-induced granuloma model in rats. Results indicated that Jamaican cherries could be a potential source of nutrient supplement with anti-inflammatory and antioxidant properties and require promotion of their consumption for public health benefits.     

Phytosterol Determination and Method Validation for Selected Nuts and Seeds

A method involving alkali and/or acid hydrolysis of phytosterols followed by trimethylsilyl ether derivatization coupled with GC-FID analysis was validated and applied in the analysis of major phytosterols (campesterol, stigmasterol, β-sitosterol, and Δ⁵-avenasterol) in nuts (n = 7), seeds (n = 9), legumes (n = 2), and grain (n = 1). The acid-labile Δ⁵-avenasterol was extracted with alkaline hydrolysis only before derivatization. Quantification of all phytosterols was done using the computed relative response factor of 5α-cholestane (internal standard). Analyses of internal and external phytosterol standards showed good linearity for all phytosterols (R ² of 0.999); LOD and LOQ of phytosterols were determined to be 0.01–0.12 and 0.04–0.40 mg/100 g, respectively. Repeatability and reproducibility precision analyses showed acceptable coefficient of variation of less than 3 and 4%, respectively, and satisfactory Horwitz ratio values of <1.0. Excellent accuracy was proved by the high recovery values of 91.4–106.0% for campesterol, β-sitosterol, and stigmasterol. Δ⁵-Avenasterol, the most oxidation-susceptible sterol, showed a recovery of about 60%. The total phytosterol (sum of major phytosterols quantified) contents in the 19 samples varied from 38.8 mg/100 g (white quinoa seed) to 246.2 mg/100 g (sunflower seed). β-Sitosterol was the predominant phytosterol (54–86.0% of total) among all samples except fennel seed in which stigmasterol was predominant. Analytical quality control chart maintained during the study period showed that assays were performed under control. Method validation indicated that the analytical method can be applied for accurate determination of campesterol, β-sitosterol, and stigmasterol in selected food samples.     

HPLC-DAD结合交替三线性分解二阶校正法测定荔枝果肉中游离植物甾醇

为快速测定荔枝果肉中游离植物甾醇含量,建立高效液相色谱-二极管阵列检测器结合基于交替三线性分解算法的二阶校正方法。基本色谱条件：岛津ODS-SP柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相体积分数95%乙腈溶液,检测波长范围为190～340 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,进样量20.0 μL。结果表明,‘兰竹’和‘乌叶’荔枝样品中菜油甾醇含量分别为24.1 μg/g和27.4 μg/g,两种荔枝样品豆甾醇含量分别为25.8 μg/g和26.7 μg/g,菜油甾醇和豆甾醇加标回收率分别为（95.25±0.78）%和（96.83±1.01）%。所建立的方法简单、准确、灵敏度高且可靠,可用于检测荔枝果肉中游离植物甾醇含量。     

Development of a Method for the Analysis of Sterols in Sterol-Enriched Deli-Style Turkey with GC-FID

Plant sterols have been recognised by the European Food Safety Authority for their cholesterol-lowering properties and are currently added to several food formulations. The objective of this study was to develop a method based on formation of sterol trimethylsilyl ether derivatives and separation and quantification by GC for the determination of three phytosterols (β-sitosterol, stigmasterol and campesterol) in sterol-enriched deli-style turkey. The assay was linear (concentration range 4.3–172.1 μg/ml, R ²?≥?0.9868) and accuracy and precision were within the acceptance criteria of the U.S. Food and Drug Administration (USFDA) guidelines for method validation, set at <20 % RSD at the lower limit of quantification (LLOQ) and <15 % RSD for all other standards. Accuracy measured by relative response factor (RRF) also met the USFDA validation criteria. No matrix effects were observed. The response factors (RFs) of the three sterols differed significantly to that of the internal standard (ISTD) used, leading to RRF dissimilar to 1 (campesterol?=?1.0167, stigmasterol?=?1.4458, β-sitosterol?=?0.9029). This method is suitable for quantification in meat matrix, and it has been successfully applied to the determination of sterols in sterol-enriched deli-style turkey (21 mg sterols/0.5 g sample).     

黏红酵母离子注入诱变及其发酵产生β- 胡萝卜素条件的研究

利用低能N+ 注入黏红酵母高压突变株G-39,经筛选获得高产β- 胡萝卜素的离子诱变株GL-5,其β- 胡萝卜素产量由出发菌株的9.64mg/L 提高到17.36mg/L,增加了80.08%。通过均匀设计试验法,初步确定了诱变株GL-5 的β- 胡萝卜素发酵最适条件(葡萄糖40g/L、蛋白胨30g/L、酵母膏10g/L、番茄汁3ml/L、核黄素0.5mg/L、初始pH6.0、摇瓶装量50ml/250ml、接种量50ml/L),使其β- 胡萝卜素产量进一步由17.36mg/L 提高到34.21mg/L,比对照增加了98.09%。这表明,离子诱变株GL-5 是一株优良的高产β- 胡萝卜素突变株,离子注入对该菌种具有良好的诱变效果。