宁夏贺兰山东麓酿酒酵母分离筛选及菌株鉴定

为进一步探究宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄酵母菌的多样性,更好开发利用葡萄产区酵母菌资源。从宁夏贺兰山东麓的西夏王陵、红寺堡、玉泉营、青铜峡、张裕十五世酒庄地区的葡萄园土壤、葡萄浆果表皮以及葡萄自然发酵过程中进行酵母菌的分离筛选,对得到的122株酵母菌株运用WL营养琼脂培养基进行初步分类,同时结合26S r DNA D1/D2区序列分析。共鉴定出克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)、美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)、葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、大隐球酵母(Cryptococcus magnus)共5种酵母菌。进而初步确定宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄产区酵母菌的主要种类,为地方特色葡萄酒酵母菌的筛选和选育提供理论基础和研究依据。     

酿酒葡萄中内生酵母菌的分离与初步鉴定

采用组织块培养法,从优质酿酒葡萄品种"赤霞珠"中分离出12株内生酵母菌,其中春季4株,夏季3株,秋季5株;从酿酒葡萄的不同组织部位均分离到了内生酵母菌,其中根部6株、茎部2株、叶部1株、果实3株。经形态、培养特征、子囊孢子和假菌丝的观察及生理生化实验,初步鉴定出这些菌株分别为瓶形酵母和克勒克酵母,其中瓶形酵母6株,克勒克酵母6株。     

酿酒葡萄引种筛选试验报告

本试验针对河北省及京津地区酿酒葡萄品种单一、缺少良种等急待解决的问题,有选择地引进德国、法国、意大利等国优良酿酒葡萄品种,进行国外品种的区域适应性试验、比较试验及单品种酿酒试验,筛选出适宜华北地区推广种植的酿酒葡萄品种,以丰富河北省的葡萄品种资源,推动京、津、冀及华北地区葡萄种植业和酿酒业的发展。     

宁夏甜瓜酒优良酵母菌的筛选及鉴定

在宁夏黄甜瓜自然发酵醪中分离得到56株具有典型性状的酵母菌,经过WL营养琼脂培养基初筛和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色法、杜氏管发酵法及感官评定复筛出1株产酒精能力和发酵能力强,产果香酒香浓郁,典型性强的优良菌株NT13,通过耐受试验结果表明其符合果酒发酵对葡萄糖、乙醇、SO_2、p H值的条件要求。采用密度瓶法测其能够自然发酵产乙醇10.9%vol,生长曲线测定实验表明菌量在2 h后以指数级增加,10 h后趋于稳定。经生理生化初步鉴定及26S r DNA D1/D2序列鉴定NT13为酵母属酿酒酵母。     

葡萄表面所得酵母菌的筛选及其鉴定

从市售葡萄表面分离出两株酵母菌,经形态、培养特征、酵母菌假菌丝和酵母菌子囊孢子的观察和生理生化实验及发酵特性的研究,鉴定出这两株酵母菌分别为布鲁塞尔德克酵母(Brettanomyces bruxellensis)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive).     

葡萄表面所得酵母菌的筛选及其鉴定

从市售葡萄表面分离出两株酵母菌,经形态、培养特征、酵母菌假菌丝和酵母菌子囊孢子的观察和生理生化实验及发酵特性的研究,鉴定出这两株酵母菌分别为布鲁塞尔德克酵母(Brettanomyces bruxellensis)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive)。      

新疆酿酒葡萄表皮乳酸菌的分离鉴定及耐受性分析

以新疆酿酒葡萄表皮为原料,经分离、鉴定和耐受性分析,筛选适合新疆葡萄发酵的乳酸菌。结果表明,使用MRS培养基从新疆酿酒葡萄表皮中共分离纯化出37株乳酸菌,主要分为4类。通过形态观察及16S rDNA基因序列分析,其中菌株axb81、axb80、axb79均被鉴定为柠檬明串珠菌（Leuconostoc citreum）,菌株axb74被鉴定为乳酸乳球菌乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp. lactis）。菌株axb74和axb79的pH、乙醇、SO2、盐的耐受性分析结果表明,菌株axb74最高耐受12%乙醇、pH 3.5、80 mg/L SO2、8%氯化钠,菌株axb79最高耐受11%乙醇、pH 3.0、80 mg/L SO2、9%氯化钠。     

水晶葡萄酿酒酵母菌的分离筛选及酿酒性能研究

以水晶葡萄为原料,通过杜氏管产气试验、耐受性试验分离筛选优良酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,采用分子生物学技术对其进行鉴定,并研究其酿酒性能。结果表明,筛选出两株优良酵母,分别命名为SJJM-7和SJJM-18;两株菌对糖、低pH值、乙醇和SO2的耐受性较强,均能在50%糖度、12%vol乙醇及200 mg/L SO2的培养基中生长并发酵产气;在pH值2.0的培养基中培养2 d,菌体存活率均＞20%;菌株SJJM-7和SJJM-18均被鉴定为酿酒酵母（S. cerevisiae）;利用这两株菌株发酵水晶葡萄汁后,菌株SJJM-7和SJJM-18的酿酒性能（澄清度、挥发酸含量、残糖量及酒精度）优于进口商品酵母菌株LA-PE,在生产水晶葡萄酒方面具有一定的研究意义和应用价值。     

酿酒葡萄中内生霉菌的分离与初步鉴定

采用组织块培养法,对新疆优质酿酒葡萄“赤霞珠”中的内生霉菌进行分离、纯化,共得到24株不同的内生霉菌,其中秋天得到的菌数最多,为11株,春天次之,为8株,夏天最少,为5株;从酿酒葡萄的根、茎、叶、果实部位均分离得到了内生真菌,分别为7、5、9和3株.通过对其中两株产多酚能力较强的内生霉菌C-2-J-6和C-1-G-3的形态鉴定,初步确定这两株菌分别属于星珠毒属和青霉属.     

酿酒葡萄中内生霉菌的分离与初步鉴定

采用组织块培养法,对新疆优质酿酒葡萄\     

宁夏产区酿酒葡萄酵母菌初步分类鉴定及多样性研究

通过对从宁夏产区的葡萄园土壤、葡萄果实表皮以及葡萄酒发酵过程中获得的729株野生酵母菌株进行初步分离、形态学鉴定,并运用显微镜摄像技术和利用WL营养琼脂培养基对酵母菌进行聚类分析,最终确定为16个酵母类型。进而确定宁夏产区的葡萄酒相关酵母菌的生物多样性,为地方特色葡萄酒酵母菌的筛选和选育提供理论基础和研究依据。     

宁夏贺兰山东麓降L-苹果酸葡萄酒酵母的筛选

为了筛选得到降L-苹果酸的酵母菌株,采用L-苹果酸降解指示培养基显色法和高效液相色谱（HPLC）对来自宁夏贺兰山东麓赤霞珠葡萄自然发酵汁中分离的7个种共299株酵母进行L-苹果酸降解能力的分析。结果显示：共有13株酵母具有降解L-苹果酸的能力,且不同酵母菌株降解L-苹果酸的能力差异显著。降酸能力强（降解率≥90%）的菌株多属于美极梅齐酵母（Metschnikowia pulcherrima）和库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）,少数葡萄有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）可微弱降解L-苹果酸,而星形假丝酵母（Candida zemplinina）、戴尔有孢圆酵母（Torulaspora delbrueckii）、加利福尼亚假丝酵母（Candida californica）和酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）都不能降解L-苹果酸。降L-苹果酸酵母菌株的获得为葡萄酒降酸提供新的菌种资源,为酵母菌开发利用提供借鉴。     

冬果梨果酒酵母的筛选及鉴定

以冬果梨作为富集培养基,对野生酵母菌株进行收集、分离,得到980株;采用TTC平板法、耐乙醇性能测定以及产乙醇性能测定共三级筛选,最终筛得一株可耐受18%vol乙醇、乙醇产量达7.79%vol、发酵过程中糖利用率92.75%的菌株L-0301。通过对筛选所得菌株L-0301的形态特征观察、26S rDNA D1/D2区序列分析方法对菌株进行分类鉴定,结果显示,菌株L-0301为酵母亚科酵母属酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。     

木枣产香酵母的分离筛选和应用

为了解决枣酒残糖较高、缺少风味等共性问题,从红枣产区野生酵母中分离、筛选适宜的产香酵母并用于枣酒酿造。该研究从不同自然发酵时期的木枣中分离产香酵母菌,对其进行分子生物学鉴定,并采用顶空固相微萃取-气质联用（HS-SPME-GC-MS）技术分析其发酵枣汁的香气成分。结果表明,共分离出232株产香酵母菌株,筛选出一株产香特性最好的菌株Z228,被鉴定为季也蒙毕赤酵母（Meyerozyma guilliermondii）,其单独发酵枣汁酒精度为6.2%vol,酸度为1.6 g/L,香气浓,发酵枣汁中共测得46种香气成分,主要为醇类、酸类和酚类;菌株Z228与酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）协同发酵,枣酒酒精度为13.3%vol,残糖含量为5.6%,香气清香明显、协调,香气成分有层次感。     

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定

从自然发酵酸马奶中分离出25株酵母菌,并对酵母菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定。鉴定结果为:12株为克鲁维酵母属Kluyveromyces(8株为马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus,4株为乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis)、1株为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、1株为白地霉Galactomyces geotrichum,其他菌株无法推断出。再利用5.8S rDNA序列同源性分析,对25株酵母菌进行分子生物学鉴定,同时对1、2、18、25、27、28号菌株进行系统发育树分析。鉴定结果为:10株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora、8株马克思克鲁维酵母K.marxianus、4株乳酸克鲁维酵母K.lactis、1株酿酒酵母S.cerevisiae、1株白地霉G.geotrichum、菌株27疑似新种。     

传统发酵蓝莓饮料中酵母菌的分离鉴定及筛选

该研究从传统发酵蓝莓饮料中分离、筛选出发酵性能优异的酵母菌,旨在为蓝莓相关产业的深加工提供理论依据。采用Ion S5 XL测序平台对样品中真菌ITS 1区进行高通量测序,发现德克酵母（Dekkera）为主要发酵菌属,相对丰度为89.3%。通过分离鉴定共得到30株酵母菌,与ITS数据库比对,其中5株菌株与相对丰度排名前10的酵母菌的操作分类单元（OTU）代表序列相似度为100%。进一步根据产气、产乙醇能力测试及在发酵蓝莓果汁中生长状态最终筛选得到2株酵母菌,菌株编号为YA1和YB8,适用于蓝莓发酵产品的开发。     

陕西稠酒小曲中高产酒精酵母的筛选和鉴定

从陕西糯米稠酒小曲中分离得到11株酵母菌,经过产气性能实验、TTC显色实验,初筛得到4株酵母,再通过发酵实验复筛,最终筛选出1株高产酒精酵母Y11。该菌株在28℃条件下,静止发酵96h后酒精体积分数可达10.5。通过形态分析和生理生化实验鉴定为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。     

浓香型大曲中功能性酵母菌的筛选、鉴定及发酵特性研究

以浓香型大曲为研究对象,采用稀释涂布平板法从中分离酵母菌,对其形态特征进行观察;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）显色法初筛,通过发酵力、产酒能力、耐高温、耐酒精能力实验进行复筛,筛选一株优良的功能性酵母菌,利用Biolog微生物自动分析系统对其进行鉴定,并利用顶空固相微萃取气质联用（HS-SPME-GC-MS）法对其液态发酵产物进行分析。结果表明,从浓香型大曲中共分离出9株酵母菌,其中菌株NDY-06性能最突出,可耐受42 ℃的高温,16%vol的酒精度,且具有一定的发酵产酒能力;该菌株被鉴定为产香酵母Zygosaccharomyces cidri,从其液态发酵产物中共检测到35种挥发性风味物质,包括醇类物质7种,酯类物质13种,酸类物质7种,吡嗪类物质3种,对白酒香气成分有一定的贡献。     

高温酵母的分离及其特性研究

从来源不同的基质中共分离得到227株耐高温酵母菌，经初筛、复筛和酒精发酵试验，获得一株耐高温的酵母菌株h-1，在42℃发酵72h，酒精产率为5.5％。研究了h-1菌株的形态和生理生化特性，经镜检观察和发酵糖类，同化碳源、同化氮源及无维生素生长试验，鉴定h-1菌株属于土星汉逊酵母（Hansenula Saturnus）。