现代生物质谱及其应用

80年代以来,有机质谱获得突破性进展,其应用已跨入了生物大分子的研究领域,并迅速形成了一个新的分支学科生长点——生物质谱学。已经诞生的生物质谱计已在生命科学的研究中发挥着非常重要的作用。本文主要介绍基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱(MALDI/TOF MS)的构造、原理、功能及主要应用。     

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱在糖类化合物研究中的应用

综述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的发展、在糖类化合物结构研究时常选用的基质,以及在不同类型糖化合物分析中的应用。MALDI-TOF-MS在糖类分析中通常采用的是N2激光源,基质多为有机小分子如2,5-二羟基苯甲酸、2,4,5-三羟基苯乙酮、1-羟基异喹啉或2-羟基-5-甲氧基苯甲酸、α-氰基-4-羟基-苯丙烯酸等,基质类型的选择则要取决于糖类的存在形式。糖类化合物如中性糖、酸性糖、硫酸化糖、糖蛋白、蛋白聚糖及糖脂等均可利用适合的基质而进行MALDI-TOF-MS分析。     

三苯胺偶氮化合物的MALDI-TOF质

利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法分析三苯胺偶氮化合物。在正、负离子检测模式下,考察了基质、离子化试剂、样品浓度对分析结果的影响。结果表明:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征三苯胺偶氮化合物时,用咔啉作基质,负离子检测,可以得到较好的质谱图。     

利用MALDI-TOF质谱技术研究胰岛素水解和酶切过程

利用海牛卵制备的模拟微量混合内切酶体系,用基质辅助激光解吸电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术研究了胰岛素在不同酸碱度和还原条件下的水解和酶解过程。实验结果为研制具有高生物利用度的胰岛素纳米粒口服制剂及选择具有适当耐酸碱及还原特性的包装材料提供了科学依据。     

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱在高分子研究中的应用

在质谱学的发展过程中,如何获得大分子物质的质谱信息一直是最具有挑战性的课题。在过去的20年里,大分子的质谱研究取得了很大进展,发展出快原子轰击（FAB）、液质联用（LC-MS）、基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF）以及质谱/质谱串联（MALDI-TOF/TOF）等技术,并在生物大分子的结构测定、高聚物的结构及端基测定、共聚物的序列结构及组成等方面对高分子科学的发展作出了突出贡献。本文结合具体实例着重介绍了MALDI-TOF MS在大分子分析中的技术优势及应用     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在蛇毒组分分析中的应用

本文用MALDI－TOFMS对江浙蝮蛇毒混合物及其几个分离样品的组分进行了分析和比较，表明MALDI－TOFMS灵敏度高，且可以直接分析混合物的组分，同时还比较了不同基质对混合物分析结果的影响．     

激光解吸电离飞行时间质谱技术及应用

本文简述了激光解吸电离飞行时间质谱(NALDI-TOF-MS)技术及其应用,同时介绍了MALDI-TOF-MS的构造、原理及特点。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在聚合物表征中的应用

综述了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）的基本原理,基质选择和样品制备方法、分析离子化试剂等因素对实验结果的影响,以及造成质量歧视的原因。并阐述了MALDI技术在确定聚合物相对分子质量分布,聚合物末端基团,共聚物组成和推断反应及降解机理上的应用。     

生物质谱作为SNP分型检测方法的研究

利用改良的 Miller法从人血中提取人类基因组 DNA。采用聚合酶链式反应 ( Polymerase chain reac-tion,PCR) ,对含有单核苷酸多态性 ( SNP)点的 DNA片段进行扩增 ,然后用 CIP和 Eox I去除掉 PCR体系中剩余的脱氧核糖核苷三磷酸 ( d NTP)和引物 ,最后用单碱基延伸反应获得 SNP位点处碱基类型。用基质辅助激光解吸电离 -飞行时间质谱 ( MALDI-TOFMS)或电喷雾电离 -四极杆飞行时间质谱 ( ESI-Qq TOFMS)检测延伸产物与未延伸引物间的分子量差异 ,确定该点处碱基。对不同的生物质谱检方法以及生物质谱检测方法与其它检测方法的优缺点进行了分析比较     

MALDI-TOF质谱法检测人血清中沙林-丁酰胆碱酯酶加合物

对生物医学样品进行化学毒剂分析检测是禁止化学武器组织（OPCW）核查小组在毒剂指称使用调查中收集事实的方法之一。丁酰胆碱酯酶（BChE）作为有机磷毒剂在体内的作用靶点,是有机磷毒剂染毒检测的最佳生物指示物之一。利用亲和固相萃取（SPE）技术进一步发展了样品预处理方法,建立了血液样品中染毒BChE的分析方法;利用胰蛋白酶酶解方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）比较了血液中BChE在沙林染毒前后的肽指纹谱变化。该方法灵敏度高、快速简便,可用于OPCW生物医学样品中毒剂暴露染毒的追溯性检测。     

糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测

以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和ωfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行...     

分子印迹聚合物薄膜用于蛋白质的MALDI-TOFMS检测

The lysozyme-imprinted polymer thin films were prepared by mirco-contact printing technique. These thin films showed special binding to lysozyme and were able to be analyzed by MALDI-TOF MS directly. Therefore, this method may open a new avenue for efficient, convenient and fast determination of proteins.     

金属离子与钙调蛋白相互作用的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究

Calmodulin is a ubiquitous calcium-binding protein in eukaryote cells and engages in various important biological pathways. In the present study, binding interactions between several metal ions and calmodulin were investigated by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). The results revealed that the specific binding of metal ions with the protein could be detected using MALDI-TOF MS.     

MALDI质谱成像技术在非小细胞肺

采用基质辅助激光解吸电离时间飞行质谱成像技术分析组织切片已在基础与临床医学研究中迅速发展。质谱成像技术通过对冰冻组织切片表面的质谱扫描可以快速直观地得到组织中的分子,如蛋白、多肽等分布信息。采用质谱成像技术对人的非小细胞肺癌组织切片及癌旁组织切片进行研究,对基质覆盖方式和质谱条件进行了优化,初步建立了以质谱成像法寻找非小细胞肺癌中生物标志物的方法。在-20℃制备10μm的冰冻组织切片,用15g.L-1的α-腈基-4-羟基肉桂酸(含0.1%三氟乙酸)的50%乙腈水溶液,以气流辅助喷洒的方式覆盖在组织切片表面,循环10次,置于干燥器中待干后,用正离子反射式和线性模式分别进行质谱扫描。通过对来自3位患者的10对肺癌/癌旁组织研究,结果表明,癌组织中有m/z3000~3500范围内的特征性簇峰出现。质谱成像技术用于非小细胞肺癌能够直观地在分子水平上反映出癌组织和正常组织间的差异,有望进一步提高肺癌临床诊断的准确度。     

MALDI-TOF MS分析研究合成高分子的综述

扼要介绍了基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱,在分析合成高分子中的发展历程、基本原理、主要优点及存在的困难;详细分析了基质、溶剂、盐（阳离子）和样品制样方法等关键因素对实验结果的影响及造成质量歧视的原因;阐明了这一分析技术在均聚物、混合物、共聚物等合成高分子研究中的应用及展望。     

以低浓度异甘草素为基质的MALDI-TOF MS用于小分子的检测研究

以低浓度异甘草素(ISL,0.05 mmol/L)为基质,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对精氨酸、甘露醇和苏氨酸-亮氨酸二肽等小分子物质进行分析检测。实验结果表明,以低浓度异甘草素作为MALDI-TOF MS分析小分子物质的有机基质,所获得的斑点均匀性和重复性、耐盐能力、分辨率等均显著优于常用基质2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)。本实验可为有机基质在小分子分析中的应用开辟新的窗口。     

三聚氰胺的基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析

Oxidized carbon nanotubes are tested as the matrix for analysis of the melamine by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOFMS). Traditional MALDI matrix are not suit for analysis of the low molecular compounds due to the interference associated to the matrix clusters. Oxidized carbon nanotubes can transfer energy to the analyte under the laser irradiation, which makes analyte well ionized or desorbed. Moreover, the interference of the intrinsic matrix ions can be eliminated. Melamine as the a toxic additive which had been added in the milk powder, then it is necessary to establish a new method for detection of the melamine rapid and sensitive.     

GC/HRMS在兴奋剂检测中的应用研究

本文着重介绍了GC HRMS在兴奋剂低浓度样品检测中的应用 ,使用了高灵敏度的GC HRMS后 ,检测限由原来的 1 0ng mL降低到 1～ 2ng mL。     

MALDI-TOFMS快速筛选蛋白激酶抑制剂的方法初探

A MALDI-TOF mass spectrometric method for rapid screening of protein tyrosine kinase(PTK) inhibitors was developed. Due to the low abundance and low ionization efficiency of phosphopeptides, a separation and enrichment process was carried out by using a house-made TiO2 nanoparticle-coated capillary column prior to the MS analysis. With a synthetic phosphopeptide, of which the sequence is similar to that of the substrate peptide, as the internal standard, the ratios of signal intensities of the standard to the substrate are linear to the molar ratios of the two phosphopeptides over the range of 0.3 to 3. The proposed method will be applied to screen PTK inhibitors synthesized in our laboratory.