用16S rDNA克隆文库法分析患病刺参幼苗的菌群结构

采用16S rDNA克隆文库法对某刺参养殖场患病刺参Apostichopus japonicus幼苗(体长为3⁵ cm)表皮的菌群结构进行分析。结果表明:化皮参苗病灶组织和未明显化皮参苗表皮菌群均由γ-变形菌纲、β-变形菌纲和α-变形菌纲组成,优势菌为γ-变形菌纲,主要包括志贺氏菌Shigella sp.、不动杆菌Acinetobacter sp.和假单胞菌Pseudomonas sp.;化皮参苗病灶组织中志贺氏菌、不动杆菌和假单胞菌比例分别为49%、17%和5%,未明显化皮参苗表皮中3类菌的比例分别为20%、26%、9%。将该养殖场育苗池海水作为对照并进行菌群结构分析,结果显示,水中菌群同样由γ-变形菌纲、β-变形菌纲和α-变形菌纲组成,优势菌也为γ-变形菌纲,主要包含弧菌Vibrio sp.(75%)与志贺氏菌(12%)。此外,对化皮参苗病灶处进行细菌分离培养,得到一株优势菌,经16S rDNA初步鉴定为弧菌。研究表明,采用16S rDNA克隆文库法所得结果与传统的病原分离培养法存在差异。     

基于16S rRNA高通量测序的鳢肠道微生物群落结构研究

为探究鳢肠道微生物与鳢健康养殖间的关系,采用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术对不同养殖环境中成年健康乌斑杂交鳢Channa argus♀×Channa maculata♂(体质量100～150 g)及野生斑鳢(体质量50～100 g)肠道内容物进行微生物测序及信息分析。结果表明:不同环境(珠海斗门DM,佛山南海BRCT、BRSNC,佛山顺德杏坛XT,阳江YJ)鳢肠道内容物共31个样品间OTU数具有一定差别,总数达585,表明不同环境下鳢肠道内容物中优势菌群较为丰富;采集的样品中优势菌群主要为红球菌属Rhodococcus、梭菌属Clostridium、微杆菌Microbacterium、弧菌属Vibrio、气单胞菌属Aeromonas和邻单胞菌属Plesiomonas等,其中,梭菌属、红球菌属在所有样品中均存在,但不同环境所占的比例不同;热图分析显示,鳢肠道微生物群落中还包含变形杆菌属Proteus、肠球菌属Enterococcus、乳杆菌属Lactobacillus、拟杆菌属Bacteroides、棒杆菌属Corynebacterium等其他菌属,但占比不高,说明菌群数量不多;PCA分析显示,人工养殖杂交鳢(DM、BRCT、BRSIVC、XT)的肠道微生物群落结构比较接近,但与野生鳢(YJ)的群落结构具有一定差异。研究表明,相同环境下鳢肠道内容物中微生物群落菌属有所相似,不同环境条件下的鳢肠道微生物类群数量和优势菌群均存在显著差异。     

不同养殖时期刺参肠道内菌群结构的分析

为研究不同养殖时期刺参Apostichopus japonicus肠道内的细菌菌群结构,采用PCR-DGGE技术对DGGE凝胶中的主要条带进行切割、回收、克隆、测序。结果表明:3、4、5、6、9、10月,大连瓦房店海区养殖刺参肠道内细菌16S r DNA-V3可变区序列经PCR扩增及DGGE电泳后分别获得49、49、54、53、52、51个条带;3月与9月的菌群结构相似度最高,为67.9%,4月与10月次之,为63.8%;经条带序列分析得到43个主要条带对应的核酸序列,11个与未培养菌相似,32个与归属为7个细菌类群的细菌序列相似,包括α-变形菌纲、γ-变形菌纲、δ-变形菌纲、黄杆菌纲、蓝藻纲、绿弯菌门、疣微菌门;α-变形菌纲、γ-变形菌纲、黄杆菌纲是不同养殖时期刺参肠道内的主要细菌群落,其中γ-变形菌纲所占比例最高,达25.00%³5.71%,除3月和9月外,黄杆菌纲的相对含量均高于α-变形菌纲。研究表明,春秋两季刺参肠道内菌群结构呈现类似的演替变化规律,α-变形菌纲所占比例下降,而γ-变形菌纲与黄杆菌纲所占比例上升。     

凝结芽孢杆菌对养殖水质及青虾肠道菌群、非特异性免疫指标和抗病力的影响

为研究凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans对养殖水质及青虾Macrobrachium nipponense肠道菌群、血清非特异性免疫指标和抗病力的影响,在养殖水体中分别添加浓度为0、10~5、10~6、10~7 CFU/mL的凝结芽孢杆菌(分别记为A0、A1、A2、A3组),在室内循环水养殖系统中养殖体质量为(2.50±0.32)g的青虾28 d后,测定青虾肠道菌群数量、血清非特异性免疫指标和抗病力。结果表明:添加凝结芽孢杆菌的各试验组水体氮磷指标总体上低于对照组,且A3组最低;A2组对虾肠道总菌数和双歧杆菌Bifidobacterium数量均显著高于对照组(P<0.05),A2和A3组弧菌Vibrio数量显著低于对照组(P<0.05),各试验组乳酸杆菌Lactobacillus数量较对照组略有所增加(P>0.05);除A1组溶菌酶外,各试验组对虾血清碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),而酸性磷酸酶(ACP)活性较对照组略有所提高(P>0.05);经嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila攻毒后,各试验组青虾成活率显著高于对照组(P<0.05),且A3组青虾成活率最高(60%)。研究表明,养殖水体中添加凝结芽孢杆菌可改善养殖水质和青虾肠道菌群数量,提高青虾非特异性免疫力和抗病力,最佳添加浓度为10~7 CFU/mL。     

凝结芽孢杆菌对养殖水质及青虾肠道菌群、非特异性免疫指标和抗病力的影响

为研究凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans对养殖水质及青虾Macrobrachium nipponense肠道菌群、血清非特异性免疫指标和抗病力的影响,在养殖水体中分别添加浓度为0、10⁵、105、10⁶、106、10⁷ CFU/mL的凝结芽孢杆菌(分别记为A0、A1、A2、A3组),在室内循环水养殖系统中养殖体质量为(2.50±0.32)g的青虾28 d后,测定青虾肠道菌群数量、血清非特异性免疫指标和抗病力。结果表明:添加凝结芽孢杆菌的各试验组水体氮磷指标总体上低于对照组,且A3组最低;A2组对虾肠道总菌数和双歧杆菌Bifidobacterium数量均显著高于对照组(P<0.05),A2和A3组弧菌Vibrio数量显著低于对照组(P<0.05),各试验组乳酸杆菌Lactobacillus数量较对照组略有所增加(P>0.05);除A1组溶菌酶外,各试验组对虾血清碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),而酸性磷酸酶(ACP)活性较对照组略有所提高(P>0.05);经嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila攻毒后,各试验组青虾成活率显著高于对照组(P<0.05),且A3组青虾成活率最高(60%)。研究表明,养殖水体中添加凝结芽孢杆菌可改善养殖水质和青虾肠道菌群数量,提高青虾非特异性免疫力和抗病力,最佳添加浓度为107 CFU/mL的凝结芽孢杆菌(分别记为A0、A1、A2、A3组),在室内循环水养殖系统中养殖体质量为(2.50±0.32)g的青虾28 d后,测定青虾肠道菌群数量、血清非特异性免疫指标和抗病力。结果表明:添加凝结芽孢杆菌的各试验组水体氮磷指标总体上低于对照组,且A3组最低;A2组对虾肠道总菌数和双歧杆菌Bifidobacterium数量均显著高于对照组(P<0.05),A2和A3组弧菌Vibrio数量显著低于对照组(P<0.05),各试验组乳酸杆菌Lactobacillus数量较对照组略有所增加(P>0.05);除A1组溶菌酶外,各试验组对虾血清碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),而酸性磷酸酶(ACP)活性较对照组略有所提高(P>0.05);经嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila攻毒后,各试验组青虾成活率显著高于对照组(P<0.05),且A3组青虾成活率最高(60%)。研究表明,养殖水体中添加凝结芽孢杆菌可改善养殖水质和青虾肠道菌群数量,提高青虾非特异性免疫力和抗病力,最佳添加浓度为10⁷ CFU/mL。     

枯草芽孢杆菌抑制水体微生物及对克氏原螯虾生存状态的影响

通过设计不同浓度枯草芽孢杆菌的投放梯度,检测水体中大肠菌群、金黄色葡萄球菌数量的变化以及对克氏原螯虾的体重增长率、存活率、抗逆性的影响。设计一个对照组(A0),五个实验组(A1、A2、A3、A4、A5),投放浓度分别为1×102、1×103、1×104、1×105、1×106cfu/m L。结果表明,投放了枯草芽孢杆菌的实验组与空白组相比,能明显提高克氏原螯虾的体重增长率(比对照组提高38.1%)、存活率(比对照组提高25.5%),以及具备一定的抗逆性(比对照组提高36.6%);并且证明枯草芽孢杆菌能抑制水体中的大肠菌群和金黄色葡萄球菌等有害致病菌,一定程度上提高了克氏原螯虾食用的安全性。实验结果分析表明枯草芽孢杆菌的最佳投放浓度为1×104cfu/m L。     

大连典型娱乐海水浴场重要病原细菌筛选及其在不同介质中的分布

为研究海水浴场环境中病原细菌的种类及其分布,以大连金石滩浴场和傅家庄浴场为研究区域,通过可培养、基因芯片、高通量测序等技术对其表层海水、沉积物、湿砂、干砂中病原细菌进行筛选,并分析指示细菌和常见病原细菌的空间分布特征。结果表明:不论金石滩还是傅家庄浴场,优势菌属皆为弧菌Vibrio、芽孢杆菌Bacillus、假单胞菌Pseudomonas等,可能的病原菌属为弧菌、假单胞菌、克雷伯氏菌Klebsiella等菌属中的某些种类;基因芯片检测结果显示,两浴场的主要病原细菌为溶藻弧菌V.alginolyticus、副溶血弧菌V.parahaemolyticus、哈维氏弧菌V.harveyi、鳗弧菌V.anguillarum、粪肠球菌Enterococcus faecalis、气单胞菌属Aeromonas、志贺氏菌属Shigella和大肠杆菌Escherichia coli等,会对游客身体健康造成巨大的潜在威胁;空间分布特征分析显示,粪便污染指示细菌粪大肠菌群和肠球菌主要分布在海水和干砂中,其中,排污口处细菌浓度最高,潜在病原细菌金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus主要分布在海水和干砂中,可培养弧菌主要分布在海水中。研究表明,排污口是大连金石滩和付家庄海水浴场病原细菌主要的污染来源,海滩是其重要的非点源污染来源,建议海滩管理者在泳季高峰期定期监测海滩与排污口周围病原细菌的污染情况,本研究结果可为海水浴场环境管理和保护提供重要参考依据。     

大连典型娱乐海水浴场重要病原细菌筛选及其在不同介质中的分布

为研究海水浴场环境中病原细菌的种类及其分布,以大连金石滩浴场和傅家庄浴场为研究区域,通过可培养、基因芯片、高通量测序等技术对其表层海水、沉积物、湿砂、干砂中病原细菌进行筛选,并分析指示细菌和常见病原细菌的空间分布特征。结果表明:不论金石滩还是傅家庄浴场,优势菌属皆为弧菌Vibrio、芽孢杆菌Bacillus、假单胞菌Pseudomonas等,可能的病原菌属为弧菌、假单胞菌、克雷伯氏菌Klebsiella等菌属中的某些种类;基因芯片检测结果显示,两浴场的主要病原细菌为溶藻弧菌V.alginolyticus、副溶血弧菌V.parahaemolyticus、哈维氏弧菌V.harveyi、鳗弧菌V.anguillarum、粪肠球菌Enterococcus faecalis、气单胞菌属Aeromonas、志贺氏菌属Shigella和大肠杆菌Escherichia coli等,会对游客身体健康造成巨大的潜在威胁;空间分布特征分析显示,粪便污染指示细菌粪大肠菌群和肠球菌主要分布在海水和干砂中,其中,排污口处细菌浓度最高,潜在病原细菌金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus主要分布在海水和干砂中,可培养弧菌主要分布在海水中。研究表明,排污口是大连金石滩和付家庄海水浴场病原细菌主要的污染来源,海滩是其重要的非点源污染来源,建议海滩管理者在泳季高峰期定期监测海滩与排污口周围病原细菌的污染情况,本研究结果可为海水浴场环境管理和保护提供重要参考依据。     

25种中草药及其联合用药配伍对5种水产养殖常见致病菌的抑菌作用

为探究25种中草药及其联合用药配伍对水产养殖中常见5种细菌致病菌的抑制作用,采用琼脂扩散法(纸片法)测定了夏枯草、石榴皮、黄连、白头翁、乌梅等25种中草药对嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus、荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens和弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii的抑制作用,用二倍稀释法测定了抑菌效果较强的4种中草药对5种致病菌的最小抑菌(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用正交试验法对这5种致病菌具有较强抑制作用的中草药配伍进行了研究。结果表明:25种中草药对这5种致病菌均有抑制作用,乌梅、石榴皮、黄连、白头翁的抑菌作用最强,其抑菌圈直径达10～30 mm,MIC<62.5 mg/mL,MBC<125 mg/mL,其中对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌抑菌作用最明显的是乌梅,MIC均为15.63 mg/mL,对副溶血弧菌抑菌作用最明显的是黄连,MIC为15.63 mg/mL,对蜡样芽孢杆菌抑菌作用最明显的是乌梅,MIC为7.81 mg/mL;正交试验结果表明,对嗜水气单胞菌、副溶血弧菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+石榴皮,对蜡样芽孢杆菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+白头翁、石榴皮+白头翁,对荧光假单胞菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+白头翁,对弗氏柠檬酸杆菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+石榴皮、乌梅+白头翁。研究表明,针对水产养殖中常见的5种致病菌,乌梅+石榴皮、乌梅+白头翁为最佳抑菌中药配伍组合,中草药配伍效果好于单一用药。     

25种中草药及其联合用药配伍对5种水产养殖常见致病菌的抑菌作用

为探究25种中草药及其联合用药配伍对水产养殖中常见5种细菌致病菌的抑制作用,采用琼脂扩散法(纸片法)测定了夏枯草、石榴皮、黄连、白头翁、乌梅等25种中草药对嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus、荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens和弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii的抑制作用,用二倍稀释法测定了抑菌效果较强的4种中草药对5种致病菌的最小抑菌(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用正交试验法对这5种致病菌具有较强抑制作用的中草药配伍进行了研究。结果表明:25种中草药对这5种致病菌均有抑制作用,乌梅、石榴皮、黄连、白头翁的抑菌作用最强,其抑菌圈直径达10～30 mm,MIC<62.5 mg/mL,MBC<125 mg/mL,其中对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌抑菌作用最明显的是乌梅,MIC均为15.63 mg/mL,对副溶血弧菌抑菌作用最明显的是黄连,MIC为15.63 mg/mL,对蜡样芽孢杆菌抑菌作用最明显的是乌梅,MIC为7.81 mg/mL;正交试验结果表明,对嗜水气单胞菌、副溶血弧菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+石榴皮,对蜡样芽孢杆菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+白头翁、石榴皮+白头翁,对荧光假单胞菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+白头翁,对弗氏柠檬酸杆菌具有最佳抑菌作用的组合为乌梅+石榴皮、乌梅+白头翁。研究表明,针对水产养殖中常见的5种致病菌,乌梅+石榴皮、乌梅+白头翁为最佳抑菌中药配伍组合,中草药配伍效果好于单一用药。     

浅析高速公路工程招投标中的最低评标价法

结合目前高速公路施工项目招投标活动的实际情况,阐述了最低评标价法的概念,归纳了其优点及存在问题,对完善最低评标价法提出几点策略,以期促进招标投标市场更加规范有序。     

Place-Making in Megaprojects in Melbourne

This article analyses state-led place-making practices in Melbourne. The two levels of government that influence planning in Melbourne make much of the city as ‘culturally vibrant’ and ‘creative’, and have incorporated creative city-inspired place-making principles into many layers of the planning system. An examination of the development of two mixed-use megaprojects in central Melbourne reveals however that ideals of culturally engaging public places, and indeed of creative landscapes for middle-class consumption, wither in the face of more basic imperatives for economic development. In these case studies the ‘creative city’, no matter how the idea is interpreted, has little traction either as a set of inclusive place-making principles or as a gentrification strategy. The article concludes that the creative city-inspired place-making objectives in the planning system at both state and local levels are ambiguous in their overall intents and completely unsupported by statutory controls. Such place-making objectives as are realised are the compromised results of the interplay of uncoordinated decisions, delivered at the pleasure of the developer.     

Pathogens in septage in Vietnam

Septage is widely acknowledged as a major source of infectious pathogens while disposal of septage, and the operation and maintenance of septic tanks, is not regulated in many developing countries. Twenty untreated septage and septage sludge samples were taken from Can Tho City, Vietnam to examine their pathogen content, and indicator micro-organisms. Escherichia coli and Enterococcus spp. were detected in all samples, regardless of sludge storage time. Phages were detected in 80% of samples. Salmonella spp. were detected in 70% of the untreated septage and 60% of septage sludge samples. Concentrations of phages and bacteria tested in septage sludge after many years of tank storage were much higher than the expected levels. Helminth ova were present in 95% of untreated septage samples with an average of 450 ova l^− 1, and were detected in all septage sludge samples with an average of 16,000 ova l^− 1. Twelve varieties of helminth ova were identified. More helminth ova varieties in higher concentrations were found in septage than those reported from stool samples. The varieties' frequency ranged from 10% to 50% and Ascaris lumbricoides predominated. Results show that pathogens and indicator micro-organisms, especially helminth ova, accumulate in sludge. Thus helminth ova should be considered when septage sludge is treated and used for agriculture. Proper health protection measures must be applied for people handling septage.     

在市场中实践在实践中学习在学习中进步--工程公司市场化进程的回顾与展望

近两年来，工程公司在提高市场竞争意识、推动市场化进程中做了大量工作，其中坚持走出去的方针是我们自我加压、推行加快市场化步伐的一个重要战略步骤。     

新时期广东城市化的新特点

新时期广东城市化出现以下特点:知识源导向、城市由单体向群体化发展、产业集群推动、政府主导自上而下的集约化发展、城镇化向城市化转变、由重“数量”发展向重“质量”发展的转变。     

新形势下高校强化基建财务管理的探讨

在市场条件下高校基建财务人员在加强日常财务管理的同时,必须树立起高度的工作责任心,抓好事前监督、事中监督、事后监督三个环节,全面理解、贯彻执行《高等学校财务制度》,管好用好各项基本建设资金,提高基建财务管理水平,更好地完成高校各项基建任务,以有限的投资,最快的建设速度,获得最大的投资效益。     

2005年北京办公物业市场七大趋势

趋势一:CBD区域写字楼集中放量从各区域规划方案上看,CBD区域多数项目在03～04年处于项目的报批手续及拆阶段,预计2005年正式推向市场,因此2005年CBD区域将成为北京市场供应集中的域,区域即将供应的项目有北京财富中心(二期)、金地国际花园、万达广场、SOHO尚都、万通中心、世纪财富中心、怡禾国际中心、光华国际等。除去未知项目,2005CBD写字楼办公面积的供应量为60万平方米左右。中关村区域经过一段时间的集中供后开始逐步放缓,2005年供应的体量相对较大的项目有中关村金融中心、新中关。金街区域可能开盘的项目只有2个:英蓝国际中…     

浅谈我国工程项目建设成本控制存在的问题

结合目前我国施工企业工程项目成本管理现状,对工程项目成本管理过程中存在的问题进行了较详细的分析,并提出了一些解决问题的办法,以做好项目成本控制工作,进而增强企业经济实力。     

Variation in property taxation in Tulsa

Conclusions It may be reasonably concluded from this study that the range of variation in these ratios of assessed to actual value are of a reasonable size for the great majority of cases. The frequency distribution of these sample ratios was not normal, however, as was assumed a process of this type would produce. On the other hand, the failure of the regression analysis to identify any significant variables which would explain these variations would tend to re-enforce the assumption that the fluctuations were indeed of a random nature.To sum it up in one paragraph, aside from a few extreme cases, the assessing process appears to give estimates which are more consistent than would be expected under the assumption that any errors would be of a random nature, but the regression analysis was unable to isolate any particular socioeconomic characteristics which would explain the variation which was present.Financial support for this research project was furnished by the University of Tulsa.