烤烟不同间作对烟草黑胫病防控效果的影响

为选择适宜的烤烟间作防控烟草黑胫病,通过田间试验研究了烤烟间作花生、黑麦草、大蒜对土壤烟草黑胫病菌数量、病情指数和防治效果的影响。结果表明,烤烟不同间作的土壤烟草黑胫病菌数量和病情指数趋势相同,均表现为烤烟间作大蒜<烤烟间作黑麦草<烤烟间作花生<烤烟单作,对烟草黑胫病的防控效果表现为烤烟间作大蒜>烤烟间作黑麦草>烤烟间作花生。烤烟间作大蒜对烟草黑胫病的防控效果显著较好。     

大蒜与烤烟轮作对烟草黑胫病的防治效果及作用机理初探

为探讨大蒜和烤烟轮作对烟草黑胫病的防治效果,本试验研究了大蒜根系分泌物及主要成分对烟草黑胫病菌的影响。结果表明,大蒜根系分泌物能显著抑制游动孢子的游动及休止孢的萌发;大蒜根系分泌物中的苯并噻唑和2种含硫化合物二烯丙基二硫醚、烯丙基甲基二硫醚对烟草黑胫病菌菌丝生长均具有较强的抑菌活性,其抑制活性均随着供试浓度增加而增强。从而证实:大蒜和烤烟轮作可以通过大蒜的根系分泌抑菌物降低烟草黑胫病的发生和危害,实现病害的生态防控。     

烤烟与花生间作行比对烟草黑胫病防治效果的影响

为选择合理的烤烟间作作物,有效防治烟草黑胫病,通过田间病害调查及实时荧光定量PCR方法研究了烤烟间作花生不同行比(1:6、1:4、1:2和1:0)对烟草黑胫病防治效果的影响。结果表明,随着间作行比的增大,烟草黑胫病的病情指数降低,土壤中病原菌数量减少,对烟草黑胫病的防治效果提高。烤烟、花生间作行比1:4和1:6对烟草黑胫病的防治效果较好,且两者间的差异不显著。从烟草黑胫病的防治效果及以烟草为主的栽培制度方面综合考虑,烤烟、花生间作的最佳行比推荐为1:4。     

大蒜粗提物对烟草黑胫病菌的室内抑制作用

采用平板抑菌法测定了大蒜乙醇和水提取物对烟草黑胫病菌的抑菌效果.结果表明:大蒜提取物对烟草黑胫病菌有显著抑制作用,且随大蒜提取物浓度的增大而增强;大蒜乙醇提取物对烟草黑胫病菌的抑制作用优于水提取物.0.2 g/mL和0.3 g/mL浓度大蒜乙醇提取物对烟草黑胫病菌的抑制率均为100.00%;而0.3 g/mL浓度的大蒜水提取物的抑制率亦为100.00%;大蒜水提取物与乙醇提取物的有效抑制中浓度分别为0.04 g/mL和0.03 g/mL.因此,可尝试以大蒜为原料研制植物保护剂来防治烟草黑胫病.     

一种植物源复配剂对烟草黑胫病的抑制及土壤特性的影响

为明确植物(青蒿、苦参、蕲艾、广藿香、金银花)复配剂水提取物对黑胫病的抑制及对土壤特性的作用,采用平板培养和盆栽试验方法,研究了不同浓度提取物对黑胫病病菌的抑制率、烤烟黑胫病发病率及土壤特性的影响。结果表明,2.5、5、10 mg/mL的提取物溶液均能抑制黑胫病病原物生长,降低烤烟黑胫病的发病率和病情指数。结果还表明,复配剂水提取物能够提高土壤中阳离子交换量和电导率,增加土壤中脲酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性,使土壤中NH_4~+、NO_3~-、有效磷、速效钾含量不同程度提高,有机质含量降低。低浓度(2.5 mg/mL)处理提高了土壤中真菌及放线菌数量。可见,植物提取物溶液对黑胫病的防治有较好效果,同时能够改良土壤性状。浓度为10 mg/mL时作用效果较好。     

套种大蒜对烟田土壤微生物群落及烟叶品质的影响

为探明烟田套种大蒜后土壤微生物群落变化,特别是烟田土壤中烟草根茎病菌的数量及对烟叶内在品质影响,在龙岩烟区开展了套种大蒜对烟田土壤微生物及烟叶品质影响试验。结果表明,烟田套种大蒜能明显减少烟田土壤中细菌、真菌数量,特别是减少烟草青枯菌和黑胫病菌数量,而增加烟田放线菌数量。套种大蒜对烟叶内在化学成分及烟叶评吸质量无明显负面影响。在烟草根茎病严重的局部烟田可通过套种大蒜控制该类病害的发生与危害,从而减少化学农药的使用,提高烟叶安全性,减少环境污染。     

氮素形态对烟草黑胫病发生的影响

为寻找控制烟草黑胫病发生的有效措施,研究了硝态氮、铵态氮及其配比液对烟草黑胫病菌孢子萌发、菌丝生长以及烟株次生代谢物和抗病性的影响。结果表明,硝态氮、铵态氮及其混合液均可以加速烟草黑胫病游动孢子的萌发,二者混合溶液更有利于黑胫病菌丝的生长。随着溶液中铵态氮浓度的升高,烟株根系木质素、纤维素和MDA含量以及SOD、POD、PAL活性显著升高,增强了烟株的抗病性,从而使其发病率和病情指数显著下降。相关性分析表明,烟株黑胫病发病率和病情指数与其根系木质素、MDA含量和SOD、POD、PAL活性均极显著负相关,黑胫病发病率与纤维素含量显著负相关。因此,烟株黑胫病发病率和病情指数与其次生代谢物密切相关,铵态氮可以显著降低烟草黑胫病发病率和病情指数,但硝态氮和铵态氮最适配比及田间抗病效果还需进行大量相关田间试验研究。     

基于锁核苷酸(LNA)增敏的植烟土壤中烟草黑胫病菌定量PCR检测方法

为了快速有效地检测植烟土壤中的烟草黑胫病菌的定殖数量,以一种锁核苷酸(LNA)引物为基础,进行了植烟土壤中烟草黑胫病菌数量的定量PCR 检测方法研究。结果表明:①与普通DNA引物相比,LNA 引物提高了PCR 反应的退火温度,减少了引物二聚体和非特异性产物的形成,提高了烟草黑胫病菌分子检测的灵敏度与特异性;②定量分析检测出14 个烟草-大蒜轮作土样中烟草黑胫病菌的定殖数量为2.76×103～5.20×104个/g,且在4～5 h 内完成检测,具有较高的灵敏度和检测效率。      

皖南烟田三种土传病原物分子检测

为检测皖南烟田土传病害的分布,2011-2012年从皖南烟区烟田共采集土样51份,采用分子生物学方法对烟田土壤进行了烟草黑胫病、根黑腐病和青枯病检测。结果显示,烟田土壤中烟草黑胫病菌、根黑腐病菌和青枯病菌的阳性率分别为19.6%、41.2%和56.9%,3种烟草土传病原菌在皖南烟区多数烟田均有分布,其中青枯病菌检出率最高。本研究证明了应用分子生物学方法检测土传病原菌的可能性,生产上可为烟草种植提供理论依据。     

二氢茉莉酸丙酯对烟草黑胫病的控制作用及对osmotin基因表达的影响

二氢茉莉酸丙酯(PDJ)对烟草黑胫病的控制及其对osmotin基因表达有影响。PDJ处理可显著减轻烟草幼苗黑胫病的病情,用量为100mg/L时,控制效果可达69.57%,持续时间大约在15d;另外,PDJ诱导了烟草幼苗osmotin基因的表达,接种烟草黑胫病菌也可以诱导此基因表达,和不处理接种烟草比较,PDJ处理后接种的烟草osmotin基因表达强烈且时间长。      

青霉菌QMYCS-2菌株的分离鉴定及其对烟草黑胫病的防治作用

为了寻找烟草黑胫病生物防治的有效途径,采用平板涂布法从健康烟株根际土壤中分离筛选出1株对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)具有较强拮抗作用的青霉菌株(QMYCS-2),根据其形态学特征和ITS-r DNA序列分析,鉴定为马德里青霉菌(Penicillium madriti)。QMYCS-2菌株与黑胫病菌对峙培养抑菌结果表明,该菌株对烟草黑胫病菌的生长具有良好的抑制作用,抑制率达到71.76%。选取5种真菌培养液培养QMYCS-2菌株,获得不同的发酵滤液,测定其对烟草黑胫病菌的抑制作用,结果发现马铃薯葡萄糖液体培养基效果最好。比较QMYCS-2菌株发酵滤液与青霉素对黑胫病菌生长的抑制效果发现,二者抑菌效果差异很大,前者抑制率为64.89%~100.00%,后者最高为7.33%。温室测试QMYCS-2菌株发酵滤液对烟草黑胫病的防治效果(防效)达到73.25%,与常规药剂对照甲霜灵锰锌的防效(71.50%)相近。     

不同前作对烟田土壤养分、酶活性及烤烟生长的影响

为明确不同前茬作物对土壤和烤烟生产的影响,采用田间试验研究了冬闲、绿肥和大蒜3种前茬处理对土壤养分、土壤酶活性、烤烟生长和烟叶质量的影响。结果表明：（1）与冬闲处理相比较,烤烟移栽时,前作种植大蒜与种植绿肥处理的土壤pH分别降低了0.48和0.46个单位;土壤速效钾分别增加了108.80和217.39 mg/kg;采收结束后,前作大蒜和绿肥处理的土壤有效磷、速效钾及可溶性有机碳含量显著升高,且绿肥效果显著大于大蒜;前作大蒜和绿肥处理提高了土壤蔗糖酶、脲酶活性,且绿肥效果大于大蒜处理。（2）前作大蒜处理烤烟生物产量移栽后30 d与冬闲处理相当,移栽后60 d显著高于冬闲处理;前作绿肥处理在移栽后30 d生物产量显著低于冬闲处理,但移栽后60 d显著高于冬闲处理;不同前作处理对烤烟氮素和钾素吸收的影响与对生物产量影响的趋势相一致。（3）前作种植大蒜和绿肥可以提高烟叶产量和产值,且绿肥效果高于大蒜,但需要注意的是种植绿肥导致烟叶氮含量增加,烟叶感官评吸质量明显下降。综上所述,前茬种植大蒜与绿肥均能在一定程度上改善烟田土壤条件、提高烟叶产量,绿肥还田后烤烟要适当减少施肥量。     

大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性测定

采用含药平板法建立烟草黑胫病菌对杀菌剂烯酰吗啉的敏感基线,并测定了2013年从云南省大理州各烟区分离纯化的烟草黑胫病菌菌株对烯酰吗啉的敏感性。结果显示,烟草黑胫病菌的敏感基线为1.4656 μg/mL;68个田间菌株对烯酰吗啉的EC₅₀值在0.5857~2.5254 μg/mL之间,平均为1.1118 μg/mL。表明烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的活性较高,大理州烟草黑胫病菌的抗药性风险较低。烯酰吗啉可用于大理州烟草黑胫病的有效防控,但应与其他杀菌剂进行合理的轮换使用。     

烟草黑胫病菌分子生物学研究进展

烟草黑胫病是烟草主要病害之一,每年给烟草生产造成巨大损失。烟草黑胫病菌隶属于卵菌纲疫霉属。近十几年来随着分子生物学技术的迅猛发展,烟草黑胫病菌的分子生物学研究有了较大进步。本文总结了烟草黑胫病菌在病原菌起源和分类命名、全基因组序列、线粒体基因组序列和功能基因等方面的研究进展,并分析了烟草黑胫病菌在分子生物学研究方面的未来发展方向,以期为烟草黑胫病菌致病机理研究和烟草分子抗黑胫病育种提供一定的参考。     

恩施烟区烤烟黑胫病菌致病力测定及抗性品种差异鉴定

为有效进行恩施烟区烟草黑胫病的防控,本研究采用菌丝块茎基部创伤接种法鉴定了恩施烟区烟草黑胫病菌的致病力。根据黑胫病菌菌株接种K326、红花大金元、云烟202后的AUDPC （病害流行曲线下面积）数值进行了聚类分析,将恩施烟区烟草黑胫病菌划分为I、Ⅱ、Ⅲ 3种致病型。3种致病型病原菌没有表现出典型的强、中、弱致病特性。7个抗性烟草品种对不同致病型黑胫病菌表现出抗性差异,革新3号对3种致病型菌株均表现出较好的抗性。     

烟草黑胫病拮抗菌XF10的筛选与鉴定

为丰富烟草黑胫病拮抗细菌菌株资源,有效利用生物防治方法控制烟草黑胫病,在烟草黑胫病发病严重地块的健株根际周围选取土壤样品300份,通过喷施病原指示菌快速初筛、平板对峙培养复筛等方法获得了对烟草黑胫病菌有明显拮抗作用的生防菌株XF10。该菌株菌落为圆形,表面光滑凸起,边缘整齐,可产生橙色色素。经形态特征观察、生理生化特性观察、BIOLOG自动微生物鉴定系统鉴定和16S rDNA序列分析,结果显示:该菌株与假单孢菌属的多个绿针假单胞菌序列的同源性达到99%,为假单孢菌属绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)。XF10菌株的菌液以及胞外代谢产物粗提液对烟草黑胫病菌的抑制率均达80%以上,且该菌株的挥发性代谢产物能有效抑制烟草黑胫病菌菌丝生长,抑制率为86%。     

寡雄腐霉发酵液对烤烟的促生及防黑胫病效应分析

为了研制高效、无毒、成本低廉的生物农药,安全有效地防治烟草黑胫病,利用自主分离的寡雄腐霉生防菌株(Pythium oligandrum CQ2010)制备发酵液(Pythium oligandrum broth,POB),通过拮抗、盆栽和田间试验研究了POB对烤烟生长和黑胫病的防治效果,以及对小鼠的急性毒性。拮抗试验表明,POB能显著抑制离体烟草黑胫病菌的菌丝生长和孢子萌发。在盆栽试验中,POB能显著提高烟草叶片叶绿素含量(质量分数),增强烟株根系活力,增加烤烟对氮、磷、钾的吸收,促进烟苗生长,生物量比对照提高58.91%,效果优于寡雄腐霉卵孢子制剂。POB还能激活烟草叶片中与抗病性相关酶如过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,诱导烟株产生抗病性反应,有利于消除活性氧和过氧化氢,使病害减轻。烤烟幼苗接种黑胫病菌后,施用POB使烟株发病率下降42.95%~65.77%,相对防治效果达到46.99%~57.32%,并显著降低烟草叶片中丙二醛含量,减轻病原菌对细胞膜的伤害。在田间试验中,POB对烟草黑胫病的防治效果达47.91%,烟叶产量提高44.47%,产值增加36.33%。小鼠急性毒性试验表明,用POB大剂量灌胃给药对小鼠体质量无显著影响,供试小鼠外观和行为均无异常,心、肝、肾、肺等器官未见病理改变。因此,POB能有效防治烟草黑胫病,促进烟株生长,提高烟叶产量和产值,且对动物安全无毒。     

嫁接对烤烟生长发育及黑胫病抗性的影响

为了明确嫁接对烤烟生长发育、产量、化学成分及黑胫病抗性的影响,探讨嫁接技术在烟叶生产中应用的可行性,选取抗逆性强的品种为砧木与优质品种接穗嫁接,对嫁接处理的烤烟大田生长发育和产量品质等指标进行调查和测定;采用不同黑胫病抗性的品种相互嫁接,对嫁接处理的烤烟黑胫病抗性进行病圃鉴定。结果表明,嫁接处理的烟苗移栽后有一个明显的愈合期,现蕾期长势与接穗对照相当,植物学性状和大田生育期与接穗对照差异不明显;嫁接处理的烟叶产量、化学成分指标介于砧木和接穗对照之间,个别嫁接组合表现出超亲优势。病圃鉴定结果表明,将高抗黑胫病的品种作砧木或接穗与感病品种嫁接,嫁接处理的烤烟黑胫病发病率均显著降低,以抗病品种作砧木效果最好。因此,合理选取砧木和接穗嫁接组合,可以有效控制烟草黑胫病的发生。     

云南省烟草疫霉生理小种的初步鉴定

病菌生理小种在不同地区的分布有各自特点, 研究各地的生理小种特点可有的放矢安排品种, 达到防病、抗病的目的。就云南省烟草黑胫病病原进行了分离纯化, 采用根部创伤接种法对部分病原进行了致病性测定与生理小种鉴定。结果表明, 2004年分离的39株烟草黑胫病菌株致病率为22.22%~100.00%, 平均发病率为93.73%, 病情指数2.8~86.1。2005年分离的45株烟草黑胫病菌株致病率为66.67%~100.00%, 平均发病率为96.05%, 病情指数16.7~97.2。2006-2008年对55个地方代表菌株进行生理小种鉴别, 发现55个菌株在不同烟草品种上存在致病力分化, 对同一品种致病力存在差异;确定有50个菌株为0号生理小种, 占供试菌系的90.91%, 说明云南省烟草黑胫病菌优势菌为0号生理小种, 在本次鉴定的供试菌株中未发现1、2、3号生理小种。     

40种中药材提取物对烟草黑胫病菌的抑制作用

测定了崂山40种常见中药材提取液对烟草黑胫病菌的抑菌活性。结果表明,10 g/L乙醇提取物浓度下,有11种植物(占27.5%)提取物对烟草黑胫病菌抑制率达100%,有28种(占70%)抑菌率达80%以上。对公丁香提取液相对含量较高的4种组分的抑菌效果进行了进一步测定,结果表明,丁香酚和乙酸丁香酚酯10倍稀释液对黑胫病菌抑制率高,分别为100%和60.19%,说明丁香酚和乙酸丁香酚酯为公丁香的主要抑菌活性成分。本研究表明,公丁香提取物中活性成分丁香酚具有防治烟草黑胫病的良好应用潜力。