凡纳滨对虾3种主要病毒和虾肝肠胞虫在辽宁地区的流行情况分析

为解决近年来辽宁地区凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei病害频发的问题,于2015年8月从辽宁省盘锦、营口地区26个发病的凡纳滨对虾养殖池塘中随机采集病虾样本,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)和对虾桃拉综合征病毒(TSV),并用环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplication,LAMP)技术检测虾肝肠胞虫Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)的感染情况。结果表明:IHHNV和EHP的检出率较高,分别为65.4%和34.6%,WSSV和TSV的检出率分别为19.2%和7.7%;EHP的检出率与对虾体型大小密切相关,在小虾样本中检出的阳性率高达100%,而大虾样本中均未检出;26份对虾样本中有7份样本同时携带EHP和IHHNV。研究表明,IHHNV和EHP是2015年8月辽宁地区凡纳滨对虾的主要流行病原,发病率可能与对虾生长缓慢、个体大小差异明显相关。     

辽宁一例凡纳滨对虾大规模死亡的病原研究

为对辽宁省盘锦地区2014年出现的大规模死亡凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei展开病原研究,对死虾进行了白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血组织坏死病病毒(IHHNV)和嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila的分析鉴定,提取病虾鳃组织DNA/RNA后,以特异性引物进行WSSV、TSV和IHHNV病毒检测,通过16S r DNA测序及嗜水气单胞菌特异性引物和气溶素基因的双重PCR对分离菌株QD1进行分类鉴定,并对病虾的鳃、胃、肝胰腺和附肢进行了组织病理切片观察。结果表明:患病对虾WSSV和TSV检测呈阳性;菌株QD1为嗜水气单胞菌,其人工回归感染试验结果显示,分离菌株能使健康凡纳滨对虾致病死亡;组织病理学观察显示,病虾鳃及胃组织出现大量WSSV特征性的病变核,肝胰腺上皮细胞出现严重萎缩,肝胰腺管腔变大,部分肝细胞坏死,肝胰腺管之间结缔组织中血细胞明显增多。研究表明,此次凡纳滨对虾大量死亡为WSSV和TSV两种病毒与嗜水气单胞菌混合感染所致。     

白斑综合征病毒单克隆抗体的制备及BA-ELISA方法的建立

白斑综合征病毒(white spot syndrom virus,WSSV)是甲壳类动物的重要病原,作者采用提纯的WSSV免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,共得到3株能特异分泌抗WSSV的单克隆抗体(Mab)的杂交瘤细胞(1E9、1E10、4F5)。将3株杂交瘤细胞注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1∶104¹05。1E9、4F5的抗体亚型均为IgG1,1E10的抗体亚型为IgG2b。特异性实验表明:3株单抗与虾类病原桃拉综合征病毒(TSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)、哈维氏弧菌(V.harveyi)均无交叉反应。Western bolt分析表明:单抗1E9与病毒28kD外膜蛋白特异性结合。采用生物素标记纯化后的单抗1E9,并建立了生物素-亲和素酶联免疫吸附法(Biotin-Adivin ELISA,BA-ELISA)用于WSSV的检测,该方法对提纯病毒的检测灵敏度约为4 ng,对病虾血淋巴的检测灵敏度达1∶25000。     

不同温度下哈维氏弧菌和白斑综合症病毒对凡纳滨对虾的致病性

在不同温度[(19±1)、(25±1)、(31±1)℃]条件下,研究了不同浓度哈维氏弧菌Vibrio harveyi和白斑综合症病毒(WSSV)对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei(体长8.12 cm±0.83 cm)的致病性。结果表明:温度为(19±1)℃时,整个试验过程中对虾死亡率均低于8.9%,各组病毒携带量低于3.9×104copy/g;温度为(25±1)℃时,病毒单独感染组对虾的死亡率和病毒携带量(最大值71.1%,1.9×105copy/g)和高浓度继发感染组的死亡率和病毒携带量(最大值77.8%,3.2×106copy/g)从试验中期开始明显高于其他组,死亡加快,病毒携带量迅速增加,单独感染细菌组死亡率随感染浓度的升高而升高(最大值为21.1%);温度为(31±1)℃时,病毒单独感染组的死亡率和病毒携带量(最大值47.8%,2.2×104copy/g)从试验中期开始明显低于继发感染组(最大值80.0%,6.1×106copy/g),单独感染细菌组的累积死亡率随细菌浓度的升高而升高(最大值24.4%)。研究表明,温度对WSSV和哈维氏弧菌的致病力影响显著,继发感染和细菌单独感染随温度的升高致病力升高,高温和低温对WSSV的致病力有抑制作用。     

低盐度下凡纳滨对虾饲料中蛋白质适宜含量的研究

研究了饲料中不同蛋白质水平对较低盐度(20)下养殖的凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei(平均体质量为0.35 g)生长性能和血液生化指标的影响,并探讨了该盐度下凡纳滨对虾饲料中适宜的蛋白质含量。试验设置25%、30%、35%、40%和45%(均为质量分数)5个饲料蛋白质水平,分别记为CP25、CP30、CP35、CP40、CP45组,每组设3个重复,每个重复放40尾虾。试验在300 L玻璃钢桶中进行,试验共进行56 d。结果表明:凡纳滨对虾的增重率和特定生长率随饲料蛋白质水平的增加均呈先升高后降低的趋势,其中CP40组对虾的增重率和特定生长率均最高,且CP35、CP40、CP45组的增重率和特定生长率均显著高于CP25组(P<0.05);凡纳滨对虾血清总蛋白(TP)、总胆固醇(CHOL)和甘油三酯(TG)含量随饲料蛋白质水平的增加呈先升高后降低的趋势,其中CP35组对虾的血清TP、CHOL和TG含量均最高,CP35组对虾的血清TP和CHOL含量均显著高于CP25组(P<0.05);凡纳滨对虾鳃丝的Na+/K+-ATP酶活性随饲料蛋白质水平的增加呈先升高后降低的趋势,其中CP30、CP35组对虾鳃丝的Na+/K+-ATP酶活性最高,且显著高于其他3组(P<0.05)。将饲料蛋白质水平与对虾增重率进行二次回归分析得出,在盐度为20的水体中养殖凡纳滨对虾获得最大增重率时,饲料中蛋白质的适宜含量为39.74%。     

凡纳滨对虾气泡病的组织病理学观察

为研究土塘养殖自然发病凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei(体长6.3 cm±1.5 cm)的气泡病,采用现场镜检、细菌分离培养、PCR检测及石蜡组织切片等方法,研究了患气泡病凡纳滨对虾在组织病理方面的变化。结果表明:患气泡病的凡纳滨对虾体色泛红,腹部肌肉体节间发白,镜检可在附肢、鳃、触角、头胸甲肌肉等部位观察到气柱、气泡;凡纳滨对虾组织病变特征中,其肌肉、眼、鳃、肝胰腺、触角、心等组织器官均可见气泡印迹,肌肉组织中气泡印迹集中于中、后段肌肉,背腹血管、鳃轴血管内亦可见气泡印迹;临床可见体内有气泡的凡纳滨对虾比未见气泡的虾气泡印迹严重;取样池塘水体溶解氧范围为4.15～15.06 mg/L,溶解氧饱和度为56%～293%,随着溶解氧浓度的升高,凡纳滨对虾鳃组织气泡有增多、变大的趋势;眼组织均可见空泡化,溶解氧较低时,常一侧眼组织病变稍重,随着溶解氧浓度的升高,空泡化渐趋严重,高溶解氧时两侧眼组织空泡化均较严重。研究表明,当凡纳滨对虾出现上述临床现象或病变特征时可确诊其发生了气泡病。     

黄粉虫替代蛋白质饲料对太平洋白虾(凡纳滨对虾)消化性能的影响

试验旨在评估黄粉虫粉(MM)作为凡纳滨对虾养殖中蛋白质来源的可行性。饲料分为正常饲料和试验饲粮,试验饲料中包含正常饲料85%和MM 15%,两种饲料中均含有氧化铬0.5%作为惰性标记,试验采用表观消化率系数(ADC)对两种饲料进行检测。为评估MM消化价值,对虾饲料中采用鱼粉替代MM,替代比例分别为0%、25%、50%、75%和100%,在清水中饲养6周后,对生长参数和整个虾体成分进行评估。干物质ADC为45.9%,能量ADC为66.5%,粗蛋白质ADC为76.1%,必须氨基酸ADC为72%~86%。MM中蛋氨酸为第一限制性氨基酸。饲料中添加MM后,各组间对虾的体增重、特定生长率、采食量、饲料转化率、存活率和蛋白质合成率均无显著变化(P>0.05),虾体蛋白质含量无显著差异(P>0.05)。而随着鱼粉替代比例上升,虾体脂含量从1.13%升至1.88%。结果表明,黄粉虫粉可作为凡纳滨对虾饲料中的替代蛋白质饲料,但添加时应注意补充蛋氨酸。     

致病性副溶血弧菌VP0630株的分离鉴定及其对凡纳滨对虾免疫酶活力的影响

为分析天津地区养殖凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei暴发性死亡的原因,采用生理生化法、16S rRNA基因序列分析及AP4套式PCR方法对从患病凡纳滨对虾(体长5～6 cm)肝胰腺中分离得到的优势菌VP0630进行了病原菌分离鉴定和致病性研究,采用注射感染法对凡纳滨对虾进行攻毒试验,试验设对照组和感染组,每组设3个平行,每个平行各30尾对虾,感染组每尾虾注射3×10⁷ CFU/mL的副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus 25μL,分别于注射后3、6、9、12、24、48、72、96 h时,检测凡纳滨对虾体内免疫酶活力的变化情况。结果表明:经鉴定,优势菌株VP0630属于致病性副溶血弧菌,理化特性鉴定概率为99%,pir毒力基因检测呈阳性;注射感染试验显示,对虾96 h时的累积死亡率达78.37%;酶活力检测显示,对照组对虾血清和肝胰腺中溶菌酶(LYS)、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)和总抗氧化能力(T-AOC)6种酶活力在0～96 h时无显著性变化(P>0.05),而感染组对虾6种酶活力均呈现先升高后降低趋势,血清和肝胰腺中6种酶活力均在6～12 h时显著升高(P<0.05),大部分酶活力在72～96 h时降低至对照组水平,仅个别酶活力显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,副溶血弧菌VP0630株具有较强的致病性,对凡纳滨对虾免疫防御系统有较强的破坏作用。     

2015-2017年营口市诺如病毒腹泻病例检测结果分析

目的:了解2015-2017年营口市腹泻患者中诺如病毒的感染情况和流行趋势。方法:收集2015-2017年每年的5-10月份营口市54家食源性疾病哨点医院腹泻患者的粪便标本363份,采用实时荧光PCR方法进行核酸检测。结果:共检出阳性标本29份,阳性率为7.99%;检出GⅠ型诺如病毒4份,检出率为1.10%,GⅡ型诺如病毒28份,检出率为7.71%;不同性别、年龄患者的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);可疑原因食品中,粮食类及其制品的病例阳性率最高(11.11%),其次是果蔬及其制品(10.61%)、肉与肉制品(10.53%)、水产品动物及其制品(8.85%)、混合食品(5.71%),乳制品阳性率最低(5.00%)。结论:营口市食源性疾病中存在诺如病毒的感染,以GⅡ型为主,3年检测提示诺如病毒已成为营口病毒性腹泻的病原之一,相关部门应及早应对,加强监测,以减少疾病的暴发与流行。     

饲料中用花生粕替代鱼粉对凡纳对虾生长和氨基酸组成的影响

以饲料中鱼粉添加量为36%(质量分数)作为对照组(A组,粗蛋白质的质量分数为40%),用花生粕分别替代饲料配方中10%、20%、30%、40%、50%的鱼粉,配成5种等氮对虾试验饲料(B^F组),饲喂凡纳对虾Litopeaneus vannam ei56 d,研究了不同饲料对凡纳对虾生长性能和虾体氨基酸组成的影响。结果表明:饲养28 d时,各饲料组凡纳对虾的增重率、成活率、饲料系数、蛋白质效率均无显著差异(P>0.05)。饲养56 d时,随着用花生粕替代鱼粉比例的增加,对虾的增重率呈现下降趋势,F组对虾增重率仅为1932.4%,显著低于其他饲料组(P<0.05);对虾成活率也呈现降低的趋势,但组间并无显著差异;各组饲料系数亦无显著差异(P>0.05);当用花生粕替代鱼粉超过30%时,D、E、F组蛋白质效率均显著低于对照组(P<0.05);随着用花生粕替代鱼粉比例的增加,虾体的蛋氨酸呈现与饲料蛋氨酸含量同步降低,而精氨酸呈现同步增加的变化趋势。综合各项指标,说明凡纳对虾饲料中用花生粕替代20%鱼粉是完全可行的。     

浅析高速公路工程招投标中的最低评标价法

结合目前高速公路施工项目招投标活动的实际情况,阐述了最低评标价法的概念,归纳了其优点及存在问题,对完善最低评标价法提出几点策略,以期促进招标投标市场更加规范有序。     

Place-Making in Megaprojects in Melbourne

This article analyses state-led place-making practices in Melbourne. The two levels of government that influence planning in Melbourne make much of the city as ‘culturally vibrant’ and ‘creative’, and have incorporated creative city-inspired place-making principles into many layers of the planning system. An examination of the development of two mixed-use megaprojects in central Melbourne reveals however that ideals of culturally engaging public places, and indeed of creative landscapes for middle-class consumption, wither in the face of more basic imperatives for economic development. In these case studies the ‘creative city’, no matter how the idea is interpreted, has little traction either as a set of inclusive place-making principles or as a gentrification strategy. The article concludes that the creative city-inspired place-making objectives in the planning system at both state and local levels are ambiguous in their overall intents and completely unsupported by statutory controls. Such place-making objectives as are realised are the compromised results of the interplay of uncoordinated decisions, delivered at the pleasure of the developer.     

Pathogens in septage in Vietnam

Septage is widely acknowledged as a major source of infectious pathogens while disposal of septage, and the operation and maintenance of septic tanks, is not regulated in many developing countries. Twenty untreated septage and septage sludge samples were taken from Can Tho City, Vietnam to examine their pathogen content, and indicator micro-organisms. Escherichia coli and Enterococcus spp. were detected in all samples, regardless of sludge storage time. Phages were detected in 80% of samples. Salmonella spp. were detected in 70% of the untreated septage and 60% of septage sludge samples. Concentrations of phages and bacteria tested in septage sludge after many years of tank storage were much higher than the expected levels. Helminth ova were present in 95% of untreated septage samples with an average of 450 ova l^− 1, and were detected in all septage sludge samples with an average of 16,000 ova l^− 1. Twelve varieties of helminth ova were identified. More helminth ova varieties in higher concentrations were found in septage than those reported from stool samples. The varieties' frequency ranged from 10% to 50% and Ascaris lumbricoides predominated. Results show that pathogens and indicator micro-organisms, especially helminth ova, accumulate in sludge. Thus helminth ova should be considered when septage sludge is treated and used for agriculture. Proper health protection measures must be applied for people handling septage.     

在市场中实践在实践中学习在学习中进步--工程公司市场化进程的回顾与展望

近两年来，工程公司在提高市场竞争意识、推动市场化进程中做了大量工作，其中坚持走出去的方针是我们自我加压、推行加快市场化步伐的一个重要战略步骤。     

新时期广东城市化的新特点

新时期广东城市化出现以下特点:知识源导向、城市由单体向群体化发展、产业集群推动、政府主导自上而下的集约化发展、城镇化向城市化转变、由重“数量”发展向重“质量”发展的转变。     

新形势下高校强化基建财务管理的探讨

在市场条件下高校基建财务人员在加强日常财务管理的同时,必须树立起高度的工作责任心,抓好事前监督、事中监督、事后监督三个环节,全面理解、贯彻执行《高等学校财务制度》,管好用好各项基本建设资金,提高基建财务管理水平,更好地完成高校各项基建任务,以有限的投资,最快的建设速度,获得最大的投资效益。     

2005年北京办公物业市场七大趋势

趋势一:CBD区域写字楼集中放量从各区域规划方案上看,CBD区域多数项目在03～04年处于项目的报批手续及拆阶段,预计2005年正式推向市场,因此2005年CBD区域将成为北京市场供应集中的域,区域即将供应的项目有北京财富中心(二期)、金地国际花园、万达广场、SOHO尚都、万通中心、世纪财富中心、怡禾国际中心、光华国际等。除去未知项目,2005CBD写字楼办公面积的供应量为60万平方米左右。中关村区域经过一段时间的集中供后开始逐步放缓,2005年供应的体量相对较大的项目有中关村金融中心、新中关。金街区域可能开盘的项目只有2个:英蓝国际中…     

浅谈我国工程项目建设成本控制存在的问题

结合目前我国施工企业工程项目成本管理现状,对工程项目成本管理过程中存在的问题进行了较详细的分析,并提出了一些解决问题的办法,以做好项目成本控制工作,进而增强企业经济实力。     

Variation in property taxation in Tulsa

Conclusions It may be reasonably concluded from this study that the range of variation in these ratios of assessed to actual value are of a reasonable size for the great majority of cases. The frequency distribution of these sample ratios was not normal, however, as was assumed a process of this type would produce. On the other hand, the failure of the regression analysis to identify any significant variables which would explain these variations would tend to re-enforce the assumption that the fluctuations were indeed of a random nature.To sum it up in one paragraph, aside from a few extreme cases, the assessing process appears to give estimates which are more consistent than would be expected under the assumption that any errors would be of a random nature, but the regression analysis was unable to isolate any particular socioeconomic characteristics which would explain the variation which was present.Financial support for this research project was furnished by the University of Tulsa.