枯草芽孢杆菌BA015对无乳链球菌的拮抗作用及其物质分析

为了从微生态防控的角度寻找水生动物无乳链球菌Streptococcus agalactiae病的防治方法,以21株芽孢杆菌Baciclus作为来源菌株,采用双层平板点种法筛选出19株对无乳链球菌有拮抗作用的菌株,经琼脂平板扩散抑菌试验获得一株对无乳链球菌有较强抑制作用的菌株BA015,并对该菌株进行了进一步研究。结果表明:经生理生化及16S rDNA序列分析确定其为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis;BA015去菌体发酵液(CFS)的80%饱和硫酸铵沉淀物抑菌活性最强,抑菌圈直径达(22.8±1.9)mm;特性分析显示,其与茚三酮水溶液反应呈红色,且对高温、酸碱、蛋白酶、有机溶剂、紫外线均不敏感,符合脂肽类物质的特性;经凝胶柱层析后抑菌最强组分的最小抑菌浓度(MIC)为3.2μg/mL;MALDI-TOF-MS分析显示,其脂肽含有伊枯菌素(Iturin)、杆菌霉素(Bacillomycin)、表面活性素(Surfactin)、芬荠素(Fengycin)等。研究表明,枯草芽孢杆菌BA015及其去菌体发酵液对鱼类无乳链球菌病的防治存在潜在应用价值。     

枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂对肉鸡生长性能、盲肠肠道菌群的影响

为研究枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂对肉鸡生长性能、盲肠肠道菌群的影响,将3日龄AA肉鸡1 200只随机分为6组,每组200只,试验1~4组饮水中分别添加枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾粉、枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾颗粒、枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾片、枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂各1 kg·t~(-1),试验5组在全价基础日粮中额外添加15%杆菌肽锌预混剂266 g·t~(-1)。结果表明,枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂可以提高AA肉鸡平均日增重、提高平均日采食量、降低料肉比、降低死淘率、降低腹泻率,优于枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂,优于或与杆菌肽锌预混剂相当。极显著增加21日龄、42日龄AA肉鸡盲肠中芽孢杆菌数量(P<0.01)、双歧杆菌数量(P<0.05或P<0.01)、乳酸菌数量(P<0.05),显著降低大肠杆菌数量(P<0.05)、沙门氏菌数量(P<0.05),优于枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂,优于或与杆菌肽锌预混剂相当。     

抗菌豆豉发酵菌株的筛选及其脂肽组分鉴定和特性研究

目的:从豆豉中分离广谱抗菌活性菌株,并鉴定其发酵产物中的抗菌成分。方法:采用生理生化实验结合16SrRNA序列测定法鉴定目标分离株,通过LC-MS和ESI/CID技术对其抗菌组分进行鉴定。结果:从8个豆豉样品中分离出7株具有抗菌活性菌株,其中抗菌活性较强的分离株NT-6为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其发酵液抗菌提取物的主要成分是抗菌脂肽类物质iturin、fengycin、surfactin同系物的混合物。该提取物对供试革兰氏阳性、阴性细菌、霉菌等指示菌具有广谱的抗菌活性,在pH 2～12、121℃条件下加热30min活性不丧失,说明具有广泛的pH适应范围和良好的耐热性。结论:该菌株产生多组分抗菌脂肽,其抑菌谱宽,适应性好,显示了在食品、农业、医药等领域具有良好的应用前景。     

鸡肠道枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究

为研究和开发动物新型微生态制剂,最大程度的提高经济效益,改变抗生素滥用、药物残留等现状,从健康鸡肠道中分离出1株芽孢杆菌,并命名为W,且对其进行形态观察、生化试验鉴定和16S rRNA序列分析及同源性比较。结果表明,本菌株与Bacillus subtilis strain CICC 10023(GU980947.1)的同源性达99.5%,最终确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该菌株进行药敏试验和安全性试验。结果表明,该菌对青霉素、杆菌肽耐药,对小鼠无致病性。     

衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分子特征

目的了解衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分离株的分子特征。方法收集衡阳市3家教学医院的女性生殖道分泌物棉签拭子样本,对其中的无乳链球菌进行分离、鉴定和药敏分析,并对分离株的耐药基因、血清型、菌毛岛类型进行分析。结果无乳链球菌的检出率为0.88%(3/339)。1株分离株保存失败,另外2株分离株HY66和HY9-2均对四环素和红霉素耐药,并携带ermB和tetO耐药基因。此外,HY9-2对克林霉素、左氧氟沙星、加替沙星耐药,还携带tetM和tetL耐药基因。2株分离株的血清型为Ⅲ型,同时携带PI-1和PI-2a菌毛岛。结论衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌率低。分离株都对红霉素和四环素耐药,并出现了多重耐药菌株。为防治无乳链球菌的感染,应加强无乳链球菌的流行及耐药情况监测。     

复合枯草芽孢杆菌制剂对肉鸡生长性能的影响

本试验旨在评估复合枯草芽孢杆菌制剂对肉仔鸡生长性能的影响。216只1日龄AA肉公鸡分成3组,包括:Ⅰ组,饲喂基础饲粮;Ⅱ组,在基础饲粮中添加300 g·t~(-1)枯草芽孢杆菌-Ⅰ(1×10~(10)cfu·g~(-1));Ⅲ组,在基础饲粮中添加300 g·t~(-1)复合枯草芽孢杆菌制剂(5×10~9cfu·g~(-1)枯草芽孢杆菌-I、5×10~9cfu·g~(-1)枯草芽孢杆菌-Ⅱ)。枯草芽孢杆菌-Ⅰ有较强的蛋白酶分泌能力,但无明显的抑菌作用;枯草芽孢杆菌-Ⅱ对鸡肠道有害菌有较强的抑制作用。饲喂试验周期21 d,结果显示,Ⅲ组肉鸡的料重比显著低于(P<0.05)Ⅰ和Ⅱ组。末重、平均日增重、平均日采食量等指标,3组之间差异不显著(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的腹泻率分别为8.3%、16.7%、9.7%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的死淘率分别为4.2%、8.3%、1.4%。本研究表明,添加含有抑菌功能的复合枯草芽孢杆菌制剂能改善肉仔鸡生长性能与健康状况。     

一株具有抑菌活性的凝结芽孢杆菌的筛选、鉴定及其抗逆性研究

研究采用MRS培养基平板钙溶圈法结合琼脂扩散牛津杯法进行抑菌性能评估,获得一株具有产酸和抑菌活性的芽孢杆菌菌株CA04121。该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均具有明显抑制作用,在模拟胃液中处理180 min存活率达到72.7%,在0.6%的胆盐溶液中处理6 h存活率达到54.5%。通过形态特征、生理生化特征以及gyrB基因进化分析结果,鉴定为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans),该菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏编号为CGMCC NO.16244。     

水葫芦内生菌分离及真菌代谢产物初探

从水葫芦的根茎叶器官中分离纯化出7株内生菌（6株细菌,1株真菌）,经分子生物学鉴定,内生真菌为毛霉科匍枝根霉属中的匍枝根霉;并对7株内生菌粗提物以4株细菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏杆菌、苏云金芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌）和5株农业病原菌（苹果腐烂菌、葡萄白腐真菌、白菜黑斑病菌、棉花枯萎病菌、高粱炭疽病菌）为指示菌株,采用滤纸片法进行抑菌活性测定.结果发现只有内生真菌对4株细菌有一定的抑菌活性,对5株农业病原菌中的葡萄白腐真菌有微弱的抑制活性,而细菌没有表现出明显的抑菌活性.通过对分离获得的内生真菌进行发酵、分离和纯化的研究,并根据质谱和核磁共振等谱学数据鉴定了一个过氧化麦角甾醇的化学结构.     

山药腐烂微生物的分离、鉴定及抑制研究

为研究山药储藏过程中腐烂问题,以4个山药品种为试材,分离出采后山药腐烂病原微生物,通过形态学、18S rRNA序列测序和构建系统进化树的方法对分离菌株进行生物学鉴定。结果表明,引起山药腐烂的微生物与青霉菌家族Penicillium sclerotigenum亲缘关系最近,确定该菌株为Penicillium sclerotigenum。利用不同pH值(3、5、7、9、11)和不同生防剂(EM原液、多粘芽孢杆菌、哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌)对山药青霉菌生长特性进行研究,结果表明,青霉菌生长最适pH 5～7,培养42 h最适pH 5;枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌对山药腐烂微生物青霉菌有较好的抑菌效果。     

枯草芽孢杆菌固体发酵条件优化

为研究初始pH、蛋白胨浓度和不同发酵底物对枯草芽孢杆菌生长的影响,对不同发酵底物进行液态和固态发酵试验,结果发现,pH为6.5~7.0时,细菌生长最快,pH为7.5~8.0时,蛋白酶的活性最强;蛋白胨1.6g·L-1的LB培养基,枯草芽孢杆菌的生长状况最好,蛋白酶的活力也最强;豆粕是优质氮源,能显著促进枯草芽孢杆菌的生长和蛋白酶活性,豆粕20%、豆渣10%、麸皮60%和玉米粉30%作为固态发酵底物,枯草芽孢杆菌的生长速度最快,豆粕10%、豆渣10%、麸皮50%和玉米粉10%为固态发酵底物,枯草芽孢杆菌分泌的蛋白酶活力最强。