切除眼柄与触角对波纹龙虾存活、蜕壳、摄食和生长的影响

为了探讨切除眼柄或第二触角对波纹龙虾Panulirus homarus幼虾存活、蜕壳、摄食和生长的影响,以体质量为(18.15±1.85)g的波纹龙虾为研究对象,试验设置对照组(无任何处理)、眼柄切除组和触角切除组,每组设3个平行,每个平行放15尾虾,共养殖120 d,试验结束后分析测定波纹龙虾的存活、蜕壳和生长变化情况。结果表明:眼柄切除组波纹龙虾存活率显著高于其他组(P<0.05),而触角切除组与对照组间存活率无显著性差异(P>0.05);切除眼柄对波纹龙虾的蜕壳周期无显著性影响(P>0.05),而切除触角则显著延长了波纹龙虾第1次蜕壳的时间(P<0.05),切除的触角经过2次蜕壳后再生,前后两次蜕壳对整体的蜕壳周期无显著性影响(P>0.05),但切除触角的波纹龙虾平均蜕壳周期显著大于其他两组(P<0.05);与对照组相比,切除眼柄显著提高了波纹龙虾的摄食率(P<0.05),并显著降低了饵料系数(P<0.05),而切除触角则显著提高了波纹龙虾的摄食率和饵料系数(P<0.05);切除眼柄显著促进了龙虾的生长,眼柄切除组龙虾各时间点的体质量增长率、体长增长率和特定生长率均显著高于其他组(P<0.05),而切除触角对上述各项指标均无显著性影响(P>0.05)。研究表明,波纹龙虾眼柄的切除有助于提高养殖存活率,促进其摄食和生长,在养殖生产上值得借鉴和推广,而触角的切除对其生长无益处,还可能因病原入侵而导致龙虾死亡,因此,在养殖生产中应谨慎捕捉波纹龙虾,以保持其触角完整。     

光周期对红鳍东方鲀脑组织中GH和SS基因表达水平和昼夜表达模式的影响

为研究光周期对红鳍东方鲀Takifugu rubripes脑组织中生长激素(Growth hormone,GH)基因、生长激素抑制素(Somatostatin,SS)基因表达水平和昼夜表达模式的影响,采用初始体质量为(7.89±0.42)g的红鳍东方鲀幼鱼为研究对象,养殖在试验桶(直径80 cm、深50 cm)中,海水温度为19～23℃,盐度为31～32,共设置5种光周期8L∶16D、12L∶12D、16L∶8D、20L∶4D、24L∶0D,每个处理组设3个平行,每桶放60尾鱼,试验周期为30 d,试验结束后全天取样,测定脑组织中GH、SS基因表达水平。结果表明:8L∶16D光周期处理组红鳍东方鲀脑组织中GH基因相对表达量显著高于其他光周期处理组(P<0.05);8L∶16D光周期处理组SS基因相对表达量显著高于24L∶0D组(P<0.05),其他处理组SS基因相对表达量无显著性差异(P>0.05);GH和SS基因表达水平分别在12L∶12D和8L∶16D光照条件下呈现昼低夜高的特点。研究表明,结合GH和SS基因在不同光周期下的表达量及昼夜表达特点,长时间光照(16～24 h/d)并不利于红鳍东方鲀幼鱼生理节律的维持,本试验条件下最佳光照时长为8～12 h/d。     

红鳍东方鲀卵巢与精巢的蛋白质组比较分析

为研究红鳍东方鲀Takifugu rubripes性腺发生的相关机制,选择3龄体质量约2.0 kg的红鳍东方鲀成熟卵巢与精巢组织,利用非标记定量技术(Lable-free)对卵巢与精巢两种组织蛋白质组进行定性与定量分析,并运用GO、KEGG分析等方法对差异表达的蛋白进行富集分析。结果表明:非标记定量显示,在两组织间卵巢中特有的蛋白为150个,精巢中特有的蛋白为132个,有172个在卵巢中表达较高的蛋白及161个在精巢中表达较高的蛋白,在卵巢中存在与卵巢发育相关的高表达蛋白ELAVL2、RNA helicase、LSM4和FRUYP1,而在精巢中特异表达蛋白GSDF影响精巢发育;经GO分析发现,RNA结合(RNA binding)可能影响卵巢发育,两组织差异蛋白在膜组成部分(Integral component of membrane)具有最大差值;GO功能显著性富集分析得出,转移酶活性(Transferase activity)在两组织之间差异最显著;KEGG通路分析显示,核糖体通路(Ribosome)在两组织间差异蛋白最多,该通路也可能与性腺发育相关,通路中核糖体蛋白L10A被证实与一些物种性别发育相关,并发现吞噬体(Phagosome)、溶酶体(Lysosome)及鞘脂代谢通路(Sphingolipid signaling pathway)可能与精子成熟相关。研究表明,红鳍东方鲀卵巢与精巢蛋白质组差异较大,与卵巢发育相关的蛋白有ELAVL2和RNA helicase及核糖体通路等,与精巢发育相关的蛋白有GSDF及吞噬体通路等,本研究结果可为红鳍东方鲀性腺组织发育研究提供参考。     

斑马鱼CYP11a1基因在不同性腺发育时期的表达

采用实时荧光定量PCR技术,分析了斑马鱼Danio rerio的CYP11a1基因在成鱼4个组织和性腺发育3个时期的表达情况。结果表明:CYP11a1基因在卵巢、精巢、肌肉和脑组织中均有表达且存在差异,在脑中表达量最低(P<0.05),在卵巢、精巢、肌肉中的表达量分别为脑中表达量的204.7倍、38.9倍、17.0倍;CYP11a1基因在3个卵巢发育时期的表达量表现为先降低后升高的趋势,其在卵巢成熟期的表达量最低(P>0.05),在卵巢成熟前期、卵巢成熟后期的表达量分别为卵巢成熟期表达量的1.7倍、1.5倍;CYP11a1基因在3个精巢发育时期的表达量表现为先升高后降低的趋势,在精巢成熟期表达量最高(P<0.05),分别为精巢成熟前期、精巢成熟后期表达量的6.5倍、13.4倍。研究表明,尽管CYP11a1基因在卵巢和精巢发育过程中的表达规律不同,但CYP11a1基因在一定程度上与斑马鱼的性腺发育相关,其可能在促进斑马鱼精子成熟中发挥一定作用。     

内分泌调节基因在三倍体雌性虹鳟不同发育阶段的表达分析

为探究内分泌关键调节基因在不同倍性雌性虹鳟Oncorhynchus mykiss早期和后期发育不同阶段的表达模式,采用Real-time PCR方法,分别对二、三倍体雌性虹鳟早期发育阶段(31～68 days post fertilization, dpf)脑组织和不同发育阶段(160～450 dpf)性腺组织中促性腺激素释放激素(GnRH1)、促性腺激素释放激素受体(GnRHr)和促性腺激素α亚基(GTHa)基因的表达模式进行研究。结果表明:在早期发育阶段,三倍体雌性虹鳟脑中gnrh1和gnrhr的表达在某些时期呈显著上升(P<0.05),而gtha基因的表达显著降低(P<0.05),且始终维持在较低水平;三倍体雌性虹鳟在180～270 dpf时期,性腺组织中这3个基因的表达量均较检测初期(160 dpf)出现了显著下降(P<0.05),在发育后期360～450 dpf,这3个基因的表达量均较检测初期(160 dpf)下降了90%以上(P<0.05)。研究表明,三倍体雌性虹鳟腺垂体在早期发育阶段分泌促性腺激素的能力出现障碍,在三倍体雌性虹鳟的发育过程中内分泌生殖轴下丘脑—腺垂体—性腺受到阻断,这是导致其性腺发育异常的关键原因之一。     

内分泌调节基因在三倍体雌性虹鳟不同发育阶段的表达分析

为探究内分泌关键调节基因在不同倍性雌性虹鳟Oncorhynchus mykiss早期和后期发育不同阶段的表达模式,采用Real-time PCR方法,分别对二、三倍体雌性虹鳟早期发育阶段(31～68 days post fertilization, dpf)脑组织和不同发育阶段(160～450 dpf)性腺组织中促性腺激素释放激素(GnRH1)、促性腺激素释放激素受体(GnRHr)和促性腺激素α亚基(GTHa)基因的表达模式进行研究。结果表明:在早期发育阶段,三倍体雌性虹鳟脑中gnrh1和gnrhr的表达在某些时期呈显著上升(P<0.05),而gtha基因的表达显著降低(P<0.05),且始终维持在较低水平;三倍体雌性虹鳟在180～270 dpf时期,性腺组织中这3个基因的表达量均较检测初期(160 dpf)出现了显著下降(P<0.05),在发育后期360～450 dpf,这3个基因的表达量均较检测初期(160 dpf)下降了90%以上(P<0.05)。研究表明,三倍体雌性虹鳟腺垂体在早期发育阶段分泌促性腺激素的能力出现障碍,在三倍体雌性虹鳟的发育过程中内分泌生殖轴下丘脑—腺垂体—性腺受到阻断,这是导致其性腺发育异常的关键原因之一。     

黑边石斑鱼卵巢周年发育及血清中性激素含量的变化

为了解黑边石斑鱼Epinephelus fasciatus卵巢周年发育及血清中性激素含量的变化,于2016年8月—2017年9月,在日本长崎市东中国海海域每月对其采样,共计获得样本数量140尾,测定所获样本的体长、体质量、性腺指数(GSI)和性腺发育状态,以及血清中性激素雌二醇(E_2)、性成熟激素17α、 20β双羟孕酮(DHP)和17α、 20β、21-三羟孕酮(20β-S)含量的变化。结果表明:黑边石斑鱼卵巢发育成熟的适宜水温为25～27℃,其GSI在2017年7—8月达到最大值,且性腺发育成熟和产卵时期也出现在此时间段;黑边石斑鱼血清中E_2浓度在2017年8月显著增加(P<0.05),这表明E_2对其性腺发育成熟和产卵具有重要的作用;血清中DHP浓度在2017年7—8月有增加的趋势,而20β-S浓度在2017年1月呈现峰值,此后逐渐降低,这表明在成熟时期DHP较20β-S更具有诱导性腺发育的功能。研究表明,黑边石斑鱼性腺于2017年7—8月发育成熟并产卵,可能是由于水温及性激素E_2和性成熟激素DHP共同调节所致。     

水温和光照调节对五条鰤性成熟及脑垂体促性腺激素fshβ和lhβ基因表达的影响

为了解环境因子对五条鰤Seriola quinqueradiata内分泌系统的影响，分析综合运用水温和光照调节对其性腺发育成熟度及与繁殖相关的促卵泡激素基因(fshβ)和黄体生成素基因(lhβ)表达的影响，试验设置对照组和处理组(每组水槽放置20尾鱼),对照组为自然水温和光照饲养，处理组在水温恒定20℃和光照10L∶14D条件下饲养，试验时间为2018年1月20日—3月20日，每月采样一次，比较各阶段试验鱼的性腺指数(GSI)、性腺发育成熟度、脑垂体中fshβ和lhβ基因含量，以及血清中类固醇激素雌二醇(E_2)和睾酮(T)含量的差异。结果表明：对照组鱼在各采样阶段其GSI均无显著性差异(P>0.05),且性腺发育为未成熟阶段，处理组鱼在试验进行1个月和2个月后，其GSI均显著高于对照组(P<0.05),且性腺发育为成熟阶段；试验进行1个月和2个月后，对照组鱼脑垂体中fshβ和lhβ基因含量均无显著性变化(P>0.05),但处理组鱼脑垂体中fshβ基因含量均显著高于对照组(P<0.05),试验进行2个月后，处理组鱼脑垂体中lhβ基因含量显著高于对照组(P<0.05);试验进行1个月和2个月后，对照组鱼血清中E_2和T含量均无显著性变化(P>0.05),但处理组鱼血清中E_2和T含量均显著高于对照组(P<0.05)。研究表明，综合运用水温和光照调节有利于促进五条鰤脑垂体中fshβ和lhβ含量的增加，从而促进其血清中E_2和T浓度的上升，最终诱导其性腺发育成熟。     

雌二醇对中间球海胆生长、性腺发育及胆固醇代谢的影响

为探讨雌二醇(estradiol)对体质量为(13.58±0.79)g的中间球海胆Strongylocentrotus intermedius性腺发育的调控机制,在室内水槽(200 L)中进行为期60 d的注射试验。试验分对照组、雌二醇(5μg/m L)注射组和他莫昔芬(tamoxifen)(25μg/m L)注射组,每3 d注射1次,并于第30天和第60天时两次取样测定海胆增重率(WGR)、性腺指数(GSI)、性类固醇激素含量和胆固醇合成相关基因的表达量。结果表明:注射雌二醇或他莫昔芬并未显著影响海胆的生长速率,却显著影响试验末期海胆的性腺指数,雌二醇组海胆性腺指数显著高于对照组和他莫昔芬组(P<0.05);试验结束时,雌二醇组和他莫昔芬组海胆体腔液中雌二醇含量和性腺中胆固醇含量均显著高于对照组(P<0.05),雌二醇组海胆性腺中雌二醇含量最高,显著高于对照组和他莫昔芬组(P<0.05);雌二醇组海胆性腺和消化道中主要卵黄蛋白(MYP)基因均高于对照组,但均未有显著性差异(P>0.05);雌二醇组和他莫昔芬组海胆性腺和消化道中性类固醇激素合成关键基因CYP17和胆固醇合成关键基因CYP51表达量均显著高于对照组(P<0.05);他莫昔芬组海胆性腺中CYP17和CYP51基因表达量均低于雌二醇组(P>0.05)。研究表明,注射雌二醇显著提高了中间球海胆性腺指数、体内雌二醇含量和雌二醇合成相关基因的表达量,这可能是雌二醇促进海胆性腺发育的调控机制。