柱前衍生-HPLC法测定五指毛桃中16种游离氨基酸含量

目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法同时测定不同产地、不同叶形五指毛桃Ficus hirta Vahl根中16种氨基酸含量,评价其质量差异。方法:采用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,采用Ultimate Amino Acid色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以0.1 mol/L乙酸钠-乙腈为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温为40 ℃,检测波长为254 nm。结果:9个产地12份五指毛桃根中16种氨基酸线性关系良好,相关系数均大于0.9992,平均加样回收率介于98.1%~105.9%之间,RSD为0.67%~2.11%,L-天门冬氨酸、L-谷氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、L-甲硫氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-苯丙氨酸和L-赖氨酸的平均含量分别为3.308、3.424、2.750、2.978、1.302、4.549、2.778、3.989、3.818、1.327、3.732、0.395、2.925、4.549、2.873、3.305 mg/g。产地为漳州卫生职业学院的四种叶形五指毛桃根中氨基酸总含量由高到低为,三指浅裂>七指深裂>五指深裂>全缘;其余8个产地的五指毛桃根中16种氨基酸总含量也存在差异,含量最高的为广西钦州灵山县,其次为广东河源源城区源南镇,含量最低的为福建漳州龙海区程溪镇。结论:该方法能使16种氨基酸很好地进行分离,可靠准确,且加样回收率较高,可作为五指毛桃根中氨基酸含量的测定方法,并可以用氨基酸含量来评价五指毛桃质量。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC法同时测定莲雾中15种游离氨基酸的含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定莲雾果实中15种游离氨基酸含量的方法。采用Atlantis T3柱为固定相,以0.1 mol/L乙酸钠缓冲液(pH6.5,含0.5%三乙胺)和乙腈-水(4:1)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35 ℃,紫外检测器波长254 nm。各氨基酸组分在2.0~500 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.99,检出限为0.08~0.35 mg/L,定量限为0.35~1.25 mg/L,加标回收率为85.61%~106.68%,相对标准偏差RSD均小于5%。该方法使得15种氨基酸很好的分离,且准确度和精密度好,灵敏度和回收率高,适用于莲雾果实游离氨基酸含量的分析。

     

响应面法优化浙贝母氨基酸提取工艺及含量测定

采用响应面法优化浙贝母氨基酸提取条件,建立柱前衍生-超高效液相色谱法(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)测定浙贝母鳞茎中14种氨基酸含量方法,比较不同产地栽前与栽后浙贝母鳞茎氨基酸含量差异性.采用6 mol/L HCl 8 mL,超声30 min,在110℃下水解...     

酱油中游离氨基酸成分分析

采用高效液相色谱柱前衍生法对酱油中氨基酸的组成进行分析,结果表明市售酱油中氨基酸的组成与酿造酱油中氨基酸组成存在一定的差异,这是因为人为添加了鲜味剂,或者是使用植物蛋白水解液所致。经研究表明通过对酱油中氨基酸组成成分分析可以作为酿造酱油品质评价体系提供新思路。     

葡萄酒中游离氨基酸的HPLC测定方法

近年来,人民饮食消费水平日益提高,营养保健意识也不断增强,要求饮食能促进身体健康,吃要注意三低一高食品,喝酒要选择三低三丰富的酒种。所谓三丰富中有丰富的氨基酸一项,而好的葡萄酒中就含有丰富的氨基酸,因此如何准确快速测定葡萄酒中的氨基酸就显得十分重要。氨基酸的分析方法很多,仅液相色谱法就有柱前衍生法,柱后衍生法两种。柱后衍生法需用离子交换柱及多种试剂,且分析时间长,费用较高。本实验采用柱前衍生法进行。该法具有快速、准确、费用低、易于操作等优点。1 材料与方法1.1 仪器及材料仪器:日本岛津LC-6A高效液相色谱仪,SP…     

HPLC法测定梵净山不同品种茶叶氨基酸含量比较分析

以梵净山绿茶、红茶、翠峰和白茶为原料,采用反向高效液相色谱法分析不同品种茶叶中水解和游离氨基酸含量。该方法色谱条件为:Agiln100高效液相色谱系统Agilcnt Hypcrsil ODS柱(5μm,40 mm×250 mm);流动相A (pH 7.2) 27.6 mm/L醋酸钠-三乙胺-四氢呋喃(500:0.11:2.5,V/V);流动相B (pH 7.2) 80.9 mmol/L醋酸钠一甲醇-乙睛(1:2:2,V/V);采用梯度洗脱,洗脱程序为0 min,8%B;17 min,50%B;20 min,100%B;24 min,0%B;流速1.0mL/min;柱温40℃;紫外检测器(VWD)检测波长338 nm,脯氨酸以262 nm检测;氨基酸含量以外标法定量测定。结果表明,4种茶叶的游离氨基酸含量显示,必需氨基酸含量最高的是白茶中Phe*(0.131 g/100 g),非必需氨基酸含量最高的是白茶中Asp (0.435 g/100 g),半必需氨基酸含量最高的为白茶中Arg (1.148 g/100 g)。4种茶叶中游离氨基酸必需氨基酸、半必需氨基酸和非必需氨基酸含量最高的均为白...     

柱前衍生HPLC法测定烟叶中20种游离氨基酸含量

建立了以2,4-二硝基氟苯(DNFB)作衍生化试剂,0.015 mol/L磷酸氢二钠和磷酸二氢钾缓冲液和50%乙腈水溶液为流动相,采用反相HPLC法测定烟叶中20种游离氨基酸含量的方法,并采用该法测定了7个烟叶样品.结果表明:①20种氨基酸的平均回收率在94.2%～118.4%之间;相对偏差小于3%;②4个烤烟样品中均未检出甲硫氨酸和异亮氨酸,均是脯氨酸含量最高,且2个上部烟叶样品中的游离氨基酸总量都大于2个中部烟叶样品;③7个烟叶样品中,唯有巴西白肋烟BCRA总氨基酸含量最高,其天门冬氨酸的含量显著地高于其他烟叶样品;④马里兰烟苯丙氨酸的含量在7个烟叶样品中是最高的,且其天门冬酰胺和脯氨酸含量显著地高于其它6个烟叶样品;希腊香料烟样品中的脯氨酸略低于马里兰烟.     

煮制对鸡肉及汤汁中游离氨基酸的影响

本文采用柱前衍生-反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对95℃条件下不同煮制时间,不同部位的鸡肉及鸡汤中游离氨基酸(FAA)含量进行测定,研究煮制时间对鸡肉及鸡汤游离氨基酸含量的影响规律。结果表明:95℃煮制不同时间,蛋白质发生不同程度的降解。因FAA形成量与降解量的比率及溶于汤中量的差异,鸡肉表层的FAA含量先升高后降低,在40min时达到最大值;鸡肉中心的FAA含量呈现升高趋势,在120min时达到最大值。鸡汤中的FAA含量因肉样中FAA溶于其中而随煮制延长呈显著升高趋势,煮制120min时的含量约是10min的5倍。因此加热120min内,随煮制时间延长鸡汤会更加鲜美可口,且营养价值高。     

煮制对鸡肉及汤汁中游离氨基酸的影响

本文采用柱前衍生-反相高效液相色谱法（RP-HPLC）对95℃条件下不同煮制时间,不同部位的鸡肉及鸡汤中游离氨基酸（FAA）含量进行测定,研究煮制时间对鸡肉及鸡汤游离氨基酸含量的影响规律。结果表明:95℃煮制不同时间,蛋白质发生不同程度的降解。因FAA形成量与降解量的比率及溶于汤中量的差异,鸡肉表层的FAA含量先升高后降低,在40min时达到最大值;鸡肉中心的FAA含量呈现升高趋势,在120min时达到最大值。鸡汤中的FAA含量因肉样中FAA溶于其中而随煮制延长呈显著升高趋势,煮制120min时的含量约是10min的5倍。因此加热120min内,随煮制时间延长鸡汤会更加鲜美可口,且营养价值高。      

HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸

分析检测不同茶叶(绿茶,红茶,乌龙茶)中游离氨基酸的组成。称取0.25 g的茶叶于10mL 90℃纯净水中浸提20 min后过0.45μm纤维素膜,滤液通过固相萃取(solid phase extraction cartridges,SPE)柱预处理后得到茶汤样品。取70μL的样品与10μL的邻苯二甲醛(OPA)衍生液在25℃水浴中反应2 min后通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定,色谱条件为C18柱,DAD检测器,338 nm检测波长,流动相A为甲醇-乙腈-水溶液,流动相B为磷酸盐缓冲液。试验表明:通过SPE柱能有效去除影响色谱出峰的杂质,HPLC方法能有效地分离测定茶叶中的17种不同氨基酸,绿茶中的氨基酸含量要比发酵茶高,尤其是天冬氨酸、谷氨酸,而茶氨酸在3种茶叶中的含量显著不同。     

采用氨基酸自动分析仪测定黄酒中的游离氨基酸

<正> 前言 黄酒是中国的一种传统的饮料酒,已有数千年历史,它的酿造用料及发酵工艺与国外酒类不同。众所周知,发酵制品含有多种营养成份,黄酒也不例外,它含有人体必需的氨基酸,具有很高的营养价值。然而,有关黄酒中各种氨基酸含量与酒质优劣和营养价值高低之间的关系等,国内尚未见到系统报道。为配合工艺试验,我们开展了这项方法研究。     

腐竹生产过程中豆浆游离氨基酸的HPLC法测定

建立一种测定豆浆中游离氨基酸的反相高效液相色谱法。优化条件为:Eclipse XDB—C_(18)反相柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇和0.05mol/L醋酸钠的体积比线性梯度(T,B%)=0,0%;20,20%;50,90%,流速:1.0mL/min,检测波长:338nm。在此条件下得到各游离氨基酸的直线回归方程,相关系数都在0.9900以上。豆浆煮制过程中游高氨基酸含量逐步增加,回收率在90.86%～106.05%之间。     

高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量

以邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯联合柱前衍生,反相C18短柱分离,二元梯度洗脱,二极管阵列检测器（用于检测胱氨酸和赖氨酸）和荧光检测器（用于检测其他氨基酸）联合检测,建立了反相高效液相色谱法测定大豆种质资源中20种游离氨基酸含量。各氨基酸浓度在5～900μmol／L范围内线性良好,相关系数为0．9991以上。检出限低,灵敏度高。以5％三氯乙酸为提取溶剂,游离氨基酸的提取效果好,标准添加回收率为96．32％～102．25％,相对标准偏差为1．56％～4．30％（n=6）。本方法可用于大豆及其它谷物中游离氨基酸含量的测定。     

OPA-FMOC柱前衍生化HPLC法测定两种常用食用菌中蛋白氨基酸和非蛋白氨基酸的含量

本文研究了两种常用食用菌-香菇、金针菇中蛋白氨基酸(PPA)及非蛋白氨基酸(NPPA)的组成及含量,并对其进行营养、呈味评价。采用OPA-FMOC柱前衍生化法确定香菇、金针菇中PAA及NPAA的组成及含量。测定结果表明香菇中含有15种PAA,其含量为10.99 mg/g,含有2种NPAA,其含量为2.37 mg/g,其中必需氨基酸(EAA)含量为4.39 mg/g、呈味氨基酸(FAA)含量为5.40 mg/g;金针菇中含有14种PAA,其含量为16.79 mg/g,含有2种NPAA,其含量为3.99 mg/g,其中EAA含量为5.98 mg/g、FAA含量为9.96 mg/g。本文建立的方法准确可行,可用于两种菌类中的PAA和NPAA测定。香菇中PAA种类多于金针菇,其中EAA种类多于金针菇,金针菇中的PAA、NPAA含量均高于香菇。金针菇营养价值高,味道鲜美,香菇营养价值均衡,为两种常用食用菌的产品再次开发提供依据。     

烟草中游离氨基酸的自动分析仪测定

以茚三酮为显色剂(溶液流速:0.30mL/min),柠檬酸钠水溶液为缓冲液(流速:0.45/min),在柱温53℃、反应温度138℃及570nm和440nm检测波长下利用氨基酸自动分析仪测定了国产和进口18种白肋烟烟叶和11种混合型卷烟中的游离氨基酸含量。结果表明:①进口白肋烟烟叶的游离氨基酸总量明显高于国产烟叶;②进口白肋烟中的天冬氨酸、谷氨酸含量高于国产烟叶,而国产白肋烟中的脯氨酸含量高于进口烟叶;③进口混合型卷烟的游离氨基酸总量明显高于国产卷烟,尤其是天冬氨酸、白氨酸、酪氨酸和脯氨酸。     

超高效液相色谱-质谱测定牛乳中游离氨基酸

建立牛乳中未衍生游离氨基酸的超高效液相色谱串联质谱的测定方法。样品采用酸化乙腈沉淀蛋白,正己烷脱脂,氮吹至近干后初始流动相复溶,超声溶解离心过膜后检测。结果显示:在14 min内所分析目标物得到较好的分离,浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数在0.991 2~0.999 8之间,回收率在76%~124%,相对标准偏差1.0%~12.9%。     

HPLC内标法测定啤酒中氨基酸含量的研究

采用邻苯二甲醛 (OPA) - 9-芴甲基氯甲酸酯 (FMOC)进行氨基酸柱前衍生 ,反相高效液相色谱测定氨基酸含量。并采用正缬氨酸 (NVAL)和肌氨酸 (SAR)分别作为一级氨基酸和二级氨基酸的内标物 ,从而校准和消除了由于操作条件的波动而对分析结果产生的系统误差。结果表明 :三个不同浓度梯度的氨基酸标准溶液线性关系良好 ;样品保留时间绝对误差小于 0 .1min ,重现性RSD值低于 4 % ;加标回收率均在 90 %～110 %之间 ,说明该分析方法准确、可信并具有较高的灵敏度