一种利用毛细管电泳间接测定生鲜乳中添加大豆分离蛋白的方法

运用高效区带毛细管电泳法以pH2.7浓度配制为15mmol/L柠檬酸-20mmol/L柠檬酸三钠作电泳缓冲液同时测定了生鲜乳蛋白和大豆分离蛋白。结果显示β-CN峰面积和迁移时间的相对标准偏差(RSD)分别为3.01%和0.62%,κ-CN峰面积和迁移时间的RSD分别为2.03%和0.49%,大豆分离蛋白峰面积和迁移时间的RSD分别小于5.12%和0.48%,均满足定性和定量分析的要求。建立了利用蛋白峰面积比例关系间接测定生鲜乳中大豆分离蛋白的分析方法,其中β-CN和κ-CN检测限分别为0.17mg/L和0.23mg/L,回收率为99.37%和99.23%,大豆分离蛋白检测限和回收率分别为5.73mg/L和87.44%.     

高效液相色谱法测定发酵乳中的乳糖、葡萄糖和半乳糖

利用高效液相色谱法测定发酵乳中乳糖、葡萄糖、半乳糖的含量。样品通过Carrez法处理沉淀蛋白,采用Aminex HPX 87H色谱柱, 5mmol/L H2SO4溶液为流动相,流速0.6mL/min。结果表明：利用该法进行色谱分析各组分达到较好的分离,各糖组分在0.5～12mg/mL范围内呈现良好线性关系,相关系数为0.9986～0.9999(n＝ 5),样品回收率为96.45%～101.78%;精密度实验表明,各组分峰面积RSD在0.62%～4.21%之间(n＝ 5);重现性实验表明,各组分含量测定值RSD为1.86%～3.44%。该法测定样品快速、准确、可靠,为发酵乳贮藏过程中关键糖含量的测定提供参考依据。     

液态乳中胆固醇、7-脱氢胆固醇及25-羟基胆固醇的同步测定方法

试验优化了液态乳胆固醇的皂化条件(皂化时间、温度和皂化试剂添加量),采用高效液相色谱法同时测定乳品中胆固醇、7-脱氢胆固醇和25-羟基胆固醇的含量。结果表明,1 m L液态乳最佳皂化条件:80℃下2.0mL 2 mol/L KOH皂化20 min,液态乳的胆固醇含量为10.824 mg/100g;采用Eclipse plus C18 (4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇为流动相,流速0.8 mL/min,在205 nm和227 nm两个波长下分离3种胆固醇,分离效果较好。胆固醇、7-脱氢胆固醇和25-羟基胆固醇分别在0.0967～0.9959 mg/mL、0.0120～0.2011 mg/mL和0.1237～0.1998 mg/mL范围内呈现良好的线性关系(R2=0.9999,R2=0.9996,R2=0.9992);胆固醇、7-脱氢胆固醇和25-羟基胆固醇的精密度试验RSD分别为0.619%,3.562%,1.696%;稳定性试验RSD分别为0.545%,1.248%,2.798%;重现性试验的RSD为1.105%,1.446%,5.284%;回收率分别为99.5%,67.6%,47.4%。该方法操作简单,试剂用量小,耗时短,结果准确可靠,可用于液态乳中胆固醇的准确测定。此外,本试验应用该方法测定了13种液态乳,发现除了母乳样品中含有少量的7-脱氢胆固醇和25-羟基胆固醇外,其它奶制品中均未检测出。     

毛细管电泳分离啤酒废酵母中4种5''''-核苷酸

研究了毛细管区带电泳法同时测定啤酒酵母RNA的4种5'-核苷酸降解产物的适宜条件。应用57 cm熔融石英毛细管柱、25 kV分离电压、5 s进样,在260 nm检测波长下,以0.008 mol/L Na2HPO4溶液(pH9.79)作运行缓冲溶液,5 min内可实现对AMP、CMP、GMP、UMP的基线分离及定量测定。4种5'-核苷酸的检出范围分别为2 mg/L～180 mg/L、2 mg/L～180 mg/L2、mg/L～200 mg/L、4 mg/L～200mg/L,回收率超过97%。方法重现性高,定量实验的相对标准偏差(RSD)为0.57%～1.09%,保留时间的相对标准偏差为0.18%～0.29%。     

充氮蒸馏-离子色谱法测定香菇中二氧化硫残留量

建立了充氮蒸馏-离子色谱法测定香菇中二氧化硫残留量的分析方法。称取3.00 g样品加入蒸馏瓶后加入150 mL蒸馏水和5 mL盐酸,以20 mL过氧化氢溶液为接收液,经充氮蒸馏(功率300 W,氮气流速200 mL/min)8 min后定容并稀释,采用离子色谱法测定,外标法定量。在此试验方法下,二氧化硫在0～5.00 mg/L范围内呈良好线性关系,线性相关系数r²=0.99978;检出限为0.2 mg/kg,定量限为0.6 mg/kg;在高中低3个加标水平下干香菇中二氧化硫平均回收率为74.0.%～84.1%,相对标准偏差(RSD)为0.9%～3.2%;新鲜香菇的平均回收率为76.0%～110.3%,RSD为0.9%～5.1%。在实际样品测定中,55份香菇样品中二氧化硫检出率为100%,范围为5.24～110.97 mg/kg,超标率为56.7%(鲜香菇)和28.0%(干香菇)。结果表明,该方法精密度高、重现性好,可用于香菇中二氧化硫残留量的测定。     

6 种农业特种养殖动物肉中18 种氨基酸含量分析

针对目前国内新兴的6 种农业特种养殖动物,即蓝孔雀、眼镜蛇、滑鼠蛇、海蛇、海龙和海星,探讨6 种动物肉中18 种氨基酸含量的检测方法。运用全自动氨基酸分析仪法测定上述6 种动物的18 种氨基酸含量,样品经90%乙醇沉淀蛋白质后用6 mol/L盐酸溶液水解22 h后离心,上清液氮吹干,用样品稀释液复溶,过滤膜上机检测。以柠檬酸钠和氢氧化钠溶液为流动相进行梯度洗脱,荧光检测器测定,除脯氨酸（Pro）检测波长为440 nm外,其余17 种氨基酸检测波长均为570 nm。结果表明：除胱氨酸质量浓度范围为1.6～8.0 mg/L、牛磺酸为2.0～10.0 mg/L外,其余16 种氨基酸质量浓度范围为3.2～16.0 mg/L时线性良好（r=0.998 5～0.999 9）;方法检出限为0.04～0.42 mg/L;低质量浓度（16 种氨基酸质量浓度为6.4 mg/L,胱氨酸为3.2 mg/L,牛磺酸为4.0 mg/L）条件下的加标回收率为96.11%～109.76%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.14%～1.62%,高质量浓度（16 种氨基酸质量浓度为12.8 mg/L,胱氨酸为6.4 mg/L,牛磺酸为8.0 mg/L）条件下的加标回收率为96.12%～104.13%,RSD为0.11%～1.88%;精密度RSD为0.08%～0.94%,稳定性RSD为0.16%～0.97%,重复性RSD为0.09%～0.91%。表明该方法快速易行、准确可靠,可用于蓝孔雀、眼镜蛇、滑鼠蛇、海蛇、海龙和海星的检验方法优化。     

高效液相色谱测定生鲜乳及乳制品中三聚氰胺的方法研究

建立用高效液相色谱.二极管阵列法测定生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺的检测方法.本实验参照FDA三聚氰胺检测方法、NY/T 1372-2007,探讨检测三聚氰胺的色谱条件和优化生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺前处理方法.最后确立了有效的检测方法,采用硫酸铵(0.02mol/L):甲醇=94:6(V/V)作为流动相,203nm为检测波长.样品溶液在0.1～150μg/ml之间均具有良好的线性关系,最低检测限为0.5mg/kg,回收率均在91%以上,回归方程式为y=2.37×105x 1.21×104及相关系数r=0.9998.此法操作简便、快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,适于测定生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺.     

分光光度法测定乳与乳制品中硫氰酸钠的含量

研究了硫酸铁铵分光光度法测定乳与乳制品中硫氰酸钠的含量.方法:样品加三氯乙酸溶液和双氧水溶液置60℃水浴进行蛋白沉淀后,过滤,取滤液加硝酸酸化,再用硫酸铁铵溶液进行显色,在465nm处测定其吸光值,用标准曲线法测其含量.结果:本方法的线性范围为1.00mg/L～20.0mg/L,以吸光值0.02作为检出限,则液体的检出限为3mg/L、固体的检出限为6mg/kg,奶粉和鲜奶的相对标准偏差分别为3.80%和2.43%,本方法回收率在98.6%～99.7%之间.检测结果与离子色谱法检测结果比较的相对偏差均在10%以内.鉴于显色稳定性,方法要求标准溶液和样品溶液显色后分别在15min和30min内完成检测.本方法具有操作简便,结果准确等优点,对乳与乳制品中硫氰酸钠的控制具有重要意义.因本方法使用的紫外分光光度仪非常普及,很适合在广大中小企业推广.     

HPLC法快速检测黑糯米酒中有机酸含量

建立了应用高效液相色谱（HPLC）法对黑糯米酒中草酸、酒石酸、丙酮酸、苹果酸、α-酮戊二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、焦谷氨酸和琥珀酸的含量进行快速检测的方法。结果表明,检测器为二极管阵列检测器,ZORBAX SB-Aq色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温35 ℃,检测波长210 nm,流动相为0.03 mol/L的磷酸二氢钠溶液,pH值为2.90,在0～4.00 min,流速为1.0 mL/min;4.00～10.00 min流速为0.30 mL/min;10.00 min后流速为1.0 mL/min。黑糯米酒中10种有机酸均能在10 min内得到很好分离。标准曲线相关系数0.999～1.000,重复性试验相对标准偏差（RSD）为0.15%～0.87%,精密度实验RSD为0.024%～0.543%,检出限为0.015～0.219 mg/L,样品加标回收率为94.39%～104.73%。故此方法适用于快速测定黑糯米酒中10种有机酸含量。     

气相色谱法测定发酵乳中的7种短链脂肪酸

建立了气相色谱法检测发酵乳中7种短链脂肪酸(甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸)的方法。利用衍生化对样品进行前处理,通过色谱柱对样品进行分离,通过保留时间进行定性,峰面积进行定量。7种短链脂肪酸的线性范围是20～2 000 mg/L;方法定量限为20 mg/L;方法检出限为5 mg/L;相关系数(R~2)均大于0. 999,加标回收率范围是93. 57%～108. 20%,结果的相对标准偏差(RSD)为2. 40%～9. 56%。该方法准确,灵敏度高,重现性好,可用于检测发酵乳中短链脂肪酸的含量。     

生鲜牛乳中硫氰酸钠的风险评估研究

采用离子色谱法对上海地区的500批次生鲜牛乳中硫氰酸钠含量进行检测。结果表明：生鲜牛乳中硫氰酸钠含量总体情况符合Pearson5分布（皮尔逊V型分布）,90％的数据分布在0．2—3．71mg／kg之间,最小、最大、平均含量分别为0．2、9．66和1．5mg／kg。基于乳制品中硫氰酸钠的每日摄入量和点评估方法得到硫氰酸钠的膳食暴露量为2．0μg／kg标准人每日,结合相关的硫氰酸钠的风险评估研究,表明本研究中上海地区生鲜牛乳中的硫氰酸钠的含量属于正常的生理浓度,对人体正常膳食无健康影响。     

Determination of methionine by gas–liquid chromatography: Methods for the elimination of an interfering component present in some fish meals

Intact methionine residues in food proteins, including a limited number offish meals, have been determined using gas chromatography to measure methyl thiocyanate released after CNBr reaction. However, methionine values for certain fish products determined by that method have been found to be low and variable compared with those determined by ion-exchange chromatography after performic acid oxidation. This was traced to the presence of a component of many fish meals that, when reacted with CNBr, gave a product which co-eluted with the internal standard, ethyl thiocyanate. A method was developed to eliminate this interference and allow methionine determinations to be carried out using the same gas chromatographic procedure.     

离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量

建立了离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量的方法。采用乙腈沉淀乳制品中蛋白,取上清液稀释10倍,过RP柱去除脂肪后,离子色谱测试,梯度淋洗,外标法定量。在0．1mg／L-2．0mg／L范围内,浓度与其峰面积呈良好的线性关系,回归方程为y=O．53x,相关系数（r^2）0．9996,检出限,为0．1mg,L,方法回收率96．2％-107．7％,RSD〈3．4％。     

基于线扫描拉曼高光谱系统的奶粉中硫氰酸钠无损检测

搭建一套线扫描拉曼高光谱成像系统,探索针对大面积奶粉样本的硫氰酸钠快速无损检测。首先测量硫氰酸钠产生的拉曼信号在脱脂奶粉层中的穿透情况,然后制备10?种不同硫氰酸钠质量分数的奶粉混合样本并采集拉曼高光谱图像,通过高斯窗平滑法和自适应迭代惩罚最小二乘基线校正方法对拉曼光谱进行预处理。预处理后提取2?068.48?cm－1位移处的单波段图像进行分析,结合二值图像最终获得了样本中硫氰酸钠颗粒的含量以及空间分布。结果显示,在2?068.48?cm－1单波段图像中,感兴趣区域内所有像素点的拉曼强度平均值随着硫氰酸钠含量的增加呈线性增长,其决定系数R2达到了0.991?5。二值图像中,感兴趣区域内所有硫氰酸钠检测点之和呈指数增长趋势。在本实验方法中,单次检测奶粉样本的总面积达到80?mm×80?mm,检测时不接触、不破坏样本,无需借助化学试剂。奶粉混合样本中硫氰酸钠颗粒的检测限可达0.01%。研究结果表明,拉曼高光谱成像系统能够快速、无损且大面积地检测出奶粉中的硫氰酸钠,并且可以直观地展示硫氰酸钠颗粒的具体分布,在实际检测应用中该方法具有巨大潜力。     

铁盐法定量检测原料乳中硫氰酸盐

研究原料乳中硫氰酸钠定量检测方法,原料乳样品经过蛋白沉淀后,向滤液中加入铁盐溶液,样液的颜色变化与硫氰酸盐掺入量有关,通过样液的吸光度计算出硫氰酸盐含量。通过对标准溶液线性关系、检出限、回收率、重复性的验证,以及与离子法的对比实验,结果表明,该方法用于检测原料乳中硫氰酸根质量浓度在30mg/L 以下具有良好的线性、回收率、重现性,方法操作简单、结果准确,适用于乳品企业进行原料乳质量检验。     

ETHYL CARBAMATE FORMATION IN GRAIN BASED SPIRITS: PART II THE IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF CYANIDE RELATED SPECIES INVOLVED IN ETHYL CARBAMATE FORMATION IN SCOTCH GRAIN WHISKY

Ion chromatographic procedures are described for the identification and determination of a series of cyanide related precursors involved in ethyl carbamate formation in maturing grain whisky produced by the continuous distillation Coffey still process. These precursors include cyanide and copper cyanide complex anions, lactonitrile and isobutyraldehyde cyanohydrin (collectively determined as “measurable cyanide” or MC) and cyanate and thiocyanate anions. The components comprising MC may be determined individually using a pre-chromatographic separation procedure based on anion exchange resins. These techniques have been shown to be applicable for monitoring precursors involved in post-distillation ethyl carbamate formation in maturing grain whisky. Similar ion chromatographic procedures are described for the detection of a range of copper salts, incorporating cyanide, cyanate and thiocyanate, which are naturally occurring deposits within the copper Coffey still. These results are correlated with those based upon X-ray diffraction and secondary ion mass spectrometric techniques. Species identified included cuprous cyanide, cuprous thiocyanate, cuprous oxide, cuprous and cupric sulphide and copper cyanide cluster ions such as CuCN^?, Cu(CN)₂^?, Cu₂(CN)₃^? and Cu₃(CN)₄^? and mixed species Cu(CN)₂S^?, CuSCN^? and CuCNO⁺. In addition, an ion chromatographic procedure developed to investigate the role of carbamyl phosphate in ethyl carbamate formation, showed that conversion took place by means of its thermal decomposition into cyanate ion.     

乳制品中含硫氰酸根质量分数现状研究

采用气相色谱质谱联用法检测乳制品中硫氰酸根质量分数。结果表明,在定量检测范围为0.02～50.0 mg/kg范围之内,该方法回收率为85%～95%,灵敏度高,准确性与重现性良好。通过该方法对市场上多种产品进行测定,乳制品中硫氰酸根质量分数为0.2～50 mg/kg。     

气相色谱-质谱法测定乳制品中的硫氰酸根

利用气相色谱-质谱联用仪对乳制品(主要指液体乳及乳粉)中硫氰酸根残留量进行测定。根据硫氰酸根能与α-溴-2,3,4,5,6-五氟甲苯(PFB.Br)上的活泼溴发生取代反应的原理,试样采用振荡提取后进行衍生,高速冷冻离心,衍生产物采用选择离子监测质谱扫描,用化合物的保留时间以及质谱碎片的丰度比定性,外标法定量。结果表明:在定量检测范围为0.02～50.0mg/kg范围之内,回收率、灵敏度高,准确性与重现性良好。该方法前处理简单、易操作、成本低、分析周期短,可作为液体乳与乳粉中硫氰酸钠的快速检测方法。     

我国北方地区生鲜牛乳中硫氰酸盐含量调查

目的调查我国北方地区生鲜牛乳中硫氰酸盐含量,提出一个获得生鲜乳中硫氰酸盐本底值的方法,并初步得到一个生鲜牛乳的硫氰酸盐本底值。方法对北方11省市221个奶牛养殖场的生鲜牛乳样品进行SCN-的含量测定。结果统计实验数据发现,所有样品含有SCN~-,含量范围在0.21～6.10 mg/kg之间,平均含量为2.09 mg/kg,数值分布状态为平顶右偏态分布;生鲜乳中硫氰酸盐含量与产地呈显著相关关系(P0.05)。结论虽然不同地区来源的生乳中硫氰酸盐含量差异显著,但并没有造成数值过多的增加,初步评估我国北方地区生鲜牛乳中SCN-本底值为6.10 mg/kg。     

酶标法测定原料乳中硫氰酸根含量

目的 建立酶标法测定原料乳中硫氰酸根含量的分析方法。方法 用三氯乙酸溶液沉淀原料乳中蛋白质和脂肪, 定量滤纸过滤后取上清液, 硫氰酸根与硝酸铁溶液显色后, 用酶标仪在450 nm波长处测吸光度值, 用原料乳做标准曲线, 定量测定原料乳中硫氰酸根的含量。结果 硫氰酸根浓度在0~16 mg/kg线性关系良好, 相关系数r=0.9991, 方法回收率在95.75%~102.83%之间, RSD≤3.25%, 检出限为0.54 mg/L。结论 本研究的检测方法数据可信度高, 操作简便, 一次性上机读取吸光度值, 节约检测时间, 测定成本相对较低, 适用于批量性检测生乳中硫氰酸根的定量分析。