超声辅助酶解大米多肽对酵母细胞活性及耐冻性的影响

将超声辅助酶解制取的大米多肽、酪蛋白胨、酵母氮源3种不同氮源加入培养基培养酵母细胞,比较酵母的生长曲线、细胞湿质量、面团发酵和冷冻后面团发酵及细胞存活率,评价大米多肽对酵母细胞活性及耐冻能力的影响。结果表明,与相同量的其他氮源相比, 25 g/L大米多肽作为培养基氮源得到的酵母细胞在冷冻后发酵活力更好,能够促进酵母细胞增殖、增强酵母细胞的耐冻性、提高面团的发酵效果。     

超声辅助酶解制备红豆多肽及其抗氧化性的研究

采用超声辅助酶解法制备红豆多肽,并对其抗氧化性进行研究。在单因素实验基础上,采用响应面分析法对超声辅助酶解制备红豆多肽工艺进行优化,确定最优超声辅助酶解工艺为:碱性蛋白酶添加量3.5%,超声功率346 W,反应温度60℃,反应时间92 min,反应p H8.4。在最优工艺条件下,红豆多肽得率为85.84%。体系的抗氧化能力随着多肽浓度的增加而增强,当多肽达到一定浓度后,多肽浓度不再是抗氧化能力的主要影响因素。     

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽及其活性评定

采用超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽,以得率和抗氧化性为评价指标,研究超声时间、超声功率、超声温度、固液比、酶解时间等因素的影响,并通过响应面法优化工艺参数。结果表明:超声处理的水解度和得率大于水浴处理的水解度和得率,超声辅助酶解的最优条件为超声时间42min、超声温度40℃、超声功率320W、酶解时间3.3h,此条件下肽的得率为1.13%。超声辅助酶解法制备的多肽具有较强的抗脂质过氧化能力和清除DPPH自由基能力,其IC50值分别为0.55mg/m L和0.69mg/m L。     

基于超声预处理的大米降血压多肽的制备及其功能评价

采用酶法制备大米降血压肽。本文研究大米降血压肽制备中底物蛋白的超声预处理、酶解产物的超滤提取纯化、大米降血压肽的抗消化道酶降解及原发性高血压大鼠(SHR)一次性灌胃试验等。试验结果表明,最优超声预处理的参数为每升处理液施加超声功率250 W、超声时间10 min、工作间歇比1:2、循环转速30 r/s。经过超声预处理,酶解产物对ACE的抑制率由未经超声预处理的69.8%提高到92.8%。5 kDa为最佳的超滤提取纯化截流分子质量。经过超滤,滤液的IC50值随大米多肽分子质量的降低而降至1.71 mg/mL。大米降血压多肽具有良好的抗消化道酶降解能力,对SHR大鼠具有明显的降血压效果。     

超声辅助酶解制备麦麸抗氧化肽工艺的研究

采用超声辅助酶解法制备麦麸抗氧化肽,研究了木瓜蛋白酶添加量、超声功率、反应温度、反应时间和反应pH对麦麸多肽抗氧化性的影响。在单因素试验的基础上,通过响应面分析法对超声辅助酶解制备麦麸抗氧化肽工艺进行优化,确定最优超声辅助酶解工艺为:木瓜蛋白酶添加量2.6%,超声功率350 W,反应温度50℃,反应时间79 min,反应p H5.8。在最优工艺条件下,麦麸多肽的OH自由基清除能力为83.13%,DPPH自由基清除能力为78.86%,还原力为0.511,具有较高的抗氧化性。     

超声辅助半仿生酶法制备大豆多肽及其抗氧化活性研究

以大豆分离蛋白为原料，采用超声辅助半仿生酶法制备大豆多肽。以多肽得率为指标，在单因素试验的基础上通过响应面法优化制备工艺，并评价其抗氧化活性。结果表明：最优工艺为大豆分离蛋白1 g、胃蛋白酶量2.5 g、胃蛋白酶酶解时间85 min、胃蛋白酶酶解温度35℃、胃蛋白酶反应pH3.3,在此条件下，多肽得率为13.18%±0.38%;多肽对DPPH·和·OH清除率的EC₅₀分别为26.14、13.22 mg/mL;多肽对洋葱细胞氧化损伤的保护效果优于维生素C。     

超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽工艺研究

采用超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽,超声辅助酶解最佳工艺为复合酶添加量3%,酶解温度50℃,酶解p H 7.5,酶解时间70 min,超声功率150 W。利用混料设计对复合酶配比进行优化,确定复合酶质量比为1.42∶1∶2.66。在最优工艺条件下制备的核桃多肽DPPH自由基清除率为84.94%,其抗氧化能力低于维生素C,与维生素E接近。     

超声波辅助酶法分离提取葡萄酒泥酵母SOD工艺条件的优化

以葡萄酒泥酵母为试材,超氧化物歧化酶（SOD）比活力为指标,在超声功率、超声时间、蜗牛酶质量浓 度、酶解pH值和酶解温度等单因素试验基础上,采用正交试验优化超声波辅助蜗牛酶法提取SOD的工艺条件。结果 表明：提取工艺因素对SOD比活力影响大小顺序为超声时间＞蜗牛酶质量浓度＞超声功率＞酶解pH值＞酶解温度, 1 g湿酵母悬浮于5 mL 0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液,其提取SOD最佳工艺条件为超声功率400W、超声时间12 min、 2.0 mg/100 mL蜗牛酶液1 mL、pH 6.6、温度37 ℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力达192.27 U/mg。结果表 明超声波辅助酶法在葡萄酒泥酵母SOD的提取中具有较高的应用价值。     

杏鲍菇多肽的制备及体外活性研究

目的制备杏鲍菇多肽,并研究其体外活性。方法以杏鲍菇菇脚为原料,采用超声辅助的碱提酸沉法提取出杏鲍菇蛋白,比较3种蛋白酶酶解后的多肽得率,选定水解酶。基于单因素实验、正交实验确定多肽最优酶解工艺,并依托体外抗氧化活性实验实现对多肽体外活性的测定。结果杏鲍菇多肽液在分子量为5~10 kD、1~5 kD及低于1 kD的3种情况下均可成功还原铁离子,具备抗氧化能力,同时可清除·OH与DPPH·自由基,多肽溶液浓度越高、清除效果越好。结论本研究可充分利用杏鲍菇菇脚,形成高效的杏鲍菇蛋白提取、酶解以及多肽制备工艺,有助于进一步提升杏鲍菇的利用价值与经济效益,并且能够为多肽保健品的制备工艺研究提供重要借鉴意义。     

逆流超声辅助酶解法制备大米ACE抑制肽

研究逆流超声预处理大米蛋白对其碱性蛋白酶酶解制备血管紧张素转换酶(Angiotensin-I Converting Enzyme,ACE)抑制肽的影响。首先从米渣中提取大米蛋白,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、时间、温度、加酶量和pH进行参数优化,在此基础上筛选逆流超声模式的最佳超声参数。结果表明最佳酶解参数为底物浓度30 g/L、加酶量(E/S)7.5%、温度50 ℃、pH8.5和酶解时间60 min,此时酶解产物ACE抑制率为45.59%,水解度为21.49%。最佳超声参数为超声频率20 kHz、功率密度170 W/L、时间12.5 min。此时酶解液ACE抑制率达72.24%,水解度为21.64%,相较于未超声组ACE抑制率提高了57.42%,相较于传统超声组,ACE抑制率提高了11.36%。结果表明逆流超声波辅助酶解法能有效提高酶解效率、减少能耗、促进ACE抑制肽制备。     

酶解十二烷基硫酸钠预处理面筋蛋白工艺优化

为提高小麦面筋蛋白的酶解效率,采用碱性蛋白酶酶解十二烷基硫酸钠(SDS)预处理的小麦面筋蛋白,以水解度(DH)、多肽得率为指标,研究酶解时间、SDS添加量、底物浓度、酶浓度、pH对酶解效率的影响.在单因素试验的基础上进行L9(34)正交试验,结果表明:SDS能显著提高酶解效率,酶解小麦面筋蛋白制备多肽的最优工艺条件为:酶解时间4h,SDS添加量4 mg/mL,底物浓度8 g/100 mL,酶浓度9 mg/mL,此时,DH、多肽得率分别为12.36％、57.24％.     

响应面法优化超声辅助酶解制备大豆降血糖肽的研究

超声预处理大豆蛋白,响应面分析(RSA)试验优化酶法制备新型降血糖肽。以酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为评价指标,筛选蛋白酶;在单因素试验的基础上,对超声预处理工艺及酶解过程进行RSA试验。实验结果表明,最佳蛋白水解酶为胰蛋白酶;经过RSA优化得到最佳条件为:酶解时间22.0min,加酶量6 416.61 U/g,酶解底物浓度2.10%;超声预处理时间20.9 min,超声功率245.9 W,超声底物浓度6.27%,在此条件下大豆蛋白源多肽的抑制率64.79%,多肽质量浓度4.15 mg/m L。RSA试验优化后,多肽的α-葡萄糖苷酶抑制率比相同条件未使用超声预处理的提高了19.01%。     

碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。     

亚硫酸钠辅助酶解蛋壳膜制备抗氧化多肽的工艺

禽蛋壳膜蛋白含量丰富,蛋白质约占蛋壳膜干重的90%,然而蛋壳膜在食品工业中通常被作为废弃物丢弃,造成了资源浪费和环境污染,因此高效地利用蛋壳膜资源是极为必要的。本研究使用亚硫酸钠辅助酶解法制备禽蛋壳膜抗氧化肽,研究了酶种类、酶添加量、亚硫酸钠浓度和酶解时间对禽蛋壳膜多肽抗氧化性和水解度的影响。结果表明,亚硫酸钠辅助下碱性蛋白酶酶解禽蛋壳膜,效果优于其他四种酶;亚硫酸钠辅助碱性蛋白酶酶解禽蛋壳膜的最佳条件是:碱性蛋白酶添加量12 U/mg,亚硫酸钠浓度40 mM,时间4 h。在最优工艺条件下,禽蛋壳膜多肽的总抗氧化能力为245.88μg/m L,水解度为8.58%,表明禽蛋壳膜的亚硫酸钠辅助碱性蛋白酶酶解产物具有很好的体外抗氧化活性。SDS-PAGE表明禽蛋壳膜多肽的分子量主要在3.3~14.4 ku之间。     

混合蛋白酶制备麦麸多肽酶解工艺的研究

采用碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)、中性蛋白酶(Protex 7L)和木瓜蛋白酶(Papain)复配成混合蛋白酶,应用于麦麸多肽的制备。在单因素试验基础上,利用混料设计法对混合蛋白酶制备麦麸多肽的酶解工艺进行优化,确定最优酶解工艺为:混合蛋白酶添加量为3%,Alcalase2.4L﹕Protex 7L﹕Papain为1.77﹕1﹕2.23,酶解温度60℃,酶解时间1.5h,酶解pH 8。在最优酶解工艺条件下,水解度为28.24%,多肽得率为33.07%。     

超声辅助二次酶解对大豆乳状液破乳工艺研究

在超声辅助作用下,采用磷脂酶A_1对碱性蛋白酶Alcalase 2.4L酶解膨化大豆制备大豆油过程中产生的乳状液进行二次酶解破乳。在单因素试验基础上,采用响应面分析法对超声辅助二次酶解破乳工艺条件进行优化,确定最优破乳工艺条件为:加酶量1 530 U/g,乳水体积比1∶2.17,反应时间63 min,超声功率204 W。在最优工艺条件下,破乳率为91.14%,总提油率为88.48%。     

大球盖菇风味肽高效制备及其ACE抑制活性

以基料呈味特性和肽产量为指标，通过响应面工艺优化，获得大球盖菇风味肽高效制备酶解工艺，即酶解时间51.62 min，碱性蛋白酶加酶量0.99%(酶活力200 000 U/g)，酶解温度42.03 ℃，底物质量浓度48.45 g/L。在传统酶解最优制备工艺基础上，采用同步超声辅助定向酶解技术制备大球盖菇富肽风味基料，平板超声辅助酶解30 min时，基料中肽含量(469.21 mg/g干重)可达到传统酶解最优条件下的产肽量，基料制备时间显著缩短；辅助酶解40 min时的产肽量(492.87 mg/g干重)较传统酶解产肽量提升了6.5%。同步超声定向酶解制备的富肽基料，在咸味和鲜味呈味特性上，分别较传统酶解基料提升了1.1~1.8倍和1.1~1.3倍。所有制备工艺得到的富肽基料均具有较优的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性，半抑制浓度(IC50)分别为0.071，0.074，0.122 mg/mL和0.123 mg/mL。通过对大球盖菇风味肽氨基酸序列分析发现，肽链中存在天冬氨酸(D)、缬氨酸(V)、谷氨酸(E)、亮氨酸(L)、甘氨酸(G)、精氨酸(R)、脯氨酸(P)、丙氨酸(A)的氨基酸组合肽段DD、VV、EL、VG、VE、RP、RA、RV、VR时，多肽呈现咸鲜味呈味特性。上述氨基酸组合占比较高，可能是基料呈咸鲜味的主要原因。计算机模拟分子对接技术对大球盖菇风味肽体外抑制ACE活性的预测结果显示，风味肽可与ACE活性口袋氨基酸残基形成氢键，推测这是风味肽发挥ACE抑制作用的主要原因。本研究结果为大球盖菇风味富肽基料的高效制备及开发应用提供理论依据，为制备减盐增鲜调味品、降血压功能食品或食品添加剂提供参考。     

酶解蚕豆蛋白制备多肽酒及其抗氧化性研究

以蚕豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶酶解、酒精发酵制备蚕豆多肽酒,并对其抗氧化性进行了研究.结果表明:蚕豆蛋白酶解优化工艺为底物浓度32 g/L,水解温度43.2℃,酶用量9 821.12 U/g,pH 9.50,在此条件下酶解2h,蚕豆蛋白的水解度达到19.64％.以蚕豆酶解液为原料制备多肽酒的发酵工艺为加糖量20％,酵母接种量0.22％,发酵温度28℃,发酵时间6d,在此条件下制得的蚕豆多肽酒的酒精含量为9.6％,呈透明的棕黄色,口感醇正、鲜爽、具有发酵酒的醇香.本试验条件下制备的蚕豆多肽酒具有较强的抗氧化性.     

超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽工艺的优化

以大豆分离蛋白为原料,采用超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽,以单因素实验为基础,选择复合酶添加量、酶解时间、酶解温度以及酶解p H为自变量,大豆多肽得率为响应值,采用响应面分析法研究各自变量及其交互作用对大豆多肽得率的影响,并对大豆多肽的相对分子质量分布进行测定。结果表明,影响大豆多肽得率的各因素强弱顺序为:酶解温度复合酶添加量酶解时间酶解p H;超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽的最佳工艺条件为超声功率180 W、超声时间10 min、超声温度35℃、碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比3∶1、复合酶添加量2.04%、酶解时间4.0 h、酶解温度59℃、酶解p H 8.0,在此条件下大豆多肽得率为63.27%,相对分子质量大部分集中在1 000以下。