酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

酶解制备菜籽蛋白肽条件的优化

选用碱性蛋白酶Alcalase对菜籽蛋白进行水解。在单因素试验研究不同处理条件对菜籽蛋白水解度和菜籽蛋白肽得率的影响的基础上,建立单因素对菜籽蛋白肽水解度影响的数学模型,通过响应面分析对酶解条件进行优化。确定菜籽蛋白酶解最佳工艺条件为:底物质量分数为4.49%、pH8.45、温度55℃、酶解时间180min、加酶量5000U/g pro,在该优化条件下,菜籽蛋白水解度理论值可达15.00%,实际值为14.71%。     

酶解玉米黄粉蛋白制备可溶性肽

本文研究了碱性蛋白酶水解玉米黄粉蛋白的反应过程。得到了相应的动力学参数：Ｖｍａｘ＝０．０１４ｍｇＮ／ｍｌ／ｍｉｎ,Ｋｍ＝０．２６％（ｗｔ／ｖｏｌ）。分析了ｐＨ、温度、玉米黄粉蛋白浓度、酶浓度和前处理对水解的影响。     

核桃蛋白的酶解工艺优化及产物特性研究

将核桃饼脱脂、碱溶酸沉制备核桃蛋白,再利用碱性蛋白酶对核桃蛋白酶解,采用单因素实验研究底物质量分数、酶解pH、酶用量、酶解温度、酶解时间对水解度的影响,在此基础上采用正交实验对酶解工艺条件进行优化,同时测定了酶解产物的溶解特性、乳化特性和起泡特性。结果表明：碱性蛋白酶酶解核桃蛋白最优酶解条件为底物质量分数5.0%、酶解pH 9.0、碱性蛋白酶（活性为10 000 U/g）用量4.0%、酶解温度50 ℃、酶解时间2 h;相较核桃蛋白,不同水解度的核桃蛋白酶解产物的表面疏水性下降,溶解特性、乳化特性和起泡特性提高。     

碱性蛋白酶酶解芝麻粕制备蛋白肽的工艺优化

芝麻在食物与人类健康方面备受关注,富含蛋白质、油脂等营养组分,传统加工主要利用其油脂成分,在植物基蛋白广受青睐的今天,对其蛋白质的相关研究成为热点.以亚临界芝麻粕(SSM)为原料,采用碱性蛋白酶酶解法制备芝麻蛋白肽,并对其进行工艺优化.结果 表明,在单因素试验基础上,采用Box-behnken分析对其工艺参数进行优化,...     

Alcalase酶解高底物浓度玉米蛋白工艺优化

以玉米蛋白粉为原料,研究底物浓度、加酶量、水解液pH值和水解温度对酶解产物水解度、可溶性蛋白含量、抗氧化活力和蛋白转换率的影响.首先将玉米蛋白粉顺次进行碱洗、α-淀粉酶去淀粉和高温蒸煮预处理,以破坏蛋白高级结构和去除淀粉,然后以碱性蛋白酶Alcalase为生物催化剂进行玉米蛋白(10％～15％,m∶V)的限制性水解.结果表明,最适酶解条件:底物浓度13.5％(m∶V),加酶量2％,水解温度68℃,反应体系pH值7.7,总水解时间210min.在上述条件下,蛋白水解度为28.81％,水解液的可溶性蛋白含量为31.69mg/mL,水解物抗氧化活性为547.83U/mL,蛋白转化率为36.92％.获得的玉米蛋白水解物的溶解性显著增加,具有良好的抗氧化活性,显示了其在食品和药品等行业应用的潜力和前景.     

中心组合设计优化高温菜籽粕中蛋白的酶解工艺

蛋白肽具有一定的生物活性且容易吸收,广泛应用在食品、医药和化妆品等领域,显示出了诱人的应用前景。研究以超声波法从热榨春油菜菜籽粕中提取的蛋白为原料,利用碱性蛋白酶进行酶解制备菜籽蛋白肽。通过单因素试验及中心组合设计试验研究了底物浓度、酶解温度、酶用量、pH等因素对菜籽蛋白水解度的影响,确定了碱性蛋白酶酶解菜籽蛋白的最佳工艺条件,建立了回归数学模型。结果表明:在底物浓度为3%,酶解温度为46℃,酶用量为12000U/g,pH为9.57的条件下酶解3h,菜籽蛋白的水解度达23.96%。为进一步酶解打下良好的基础,是一条经济可行的工艺路线。     

菜籽清蛋白双酶分步酶解的工艺研究

以菜籽清蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和未瓜蛋白酶对其进行双酶分步水解.在单因素实验的基础上,采用正交实验对水解条件进行优化.结果表明:在最适底物浓度3.5%条件下,先用4000U/g碱性蛋白酶于pH8.0、55%下水解3h后.再用3000U/g木瓜蛋白酶于pH5.5、50%下水解3h,菜籽清蛋白的水解度达到加.17%,氮溶解指数为90.89%.     

菜籽清蛋白双酶分步酶解的工艺研究

以菜籽清蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对其进行双酶分步水解。在单因素实验的基础上,采用正交实验对水解条件进行优化。结果表明:在最适底物浓度3.5%条件下,先用4000U/g碱性蛋白酶于pH8.0、55℃下水解3h后,再用3000U/g木瓜蛋白酶于pH5.5、50℃下水解3h,菜籽清蛋白的水解度达到40.17%,氮溶解指数为90.89%。      

碱性电解水耦合酶提取茶渣蛋白工艺优化

茶渣蛋白具有很好的抗氧化活性,本文以茶渣为原料,研究了碱性电解水耦合酶提取茶渣蛋白的工艺。在单因素实验的基础上,采用正交实验设计优化了碱性电解水提取茶渣蛋白工艺,并优化碱性蛋白酶耦合碱性电解水提取茶渣蛋白工艺。正交结果表明,碱性电解水提取的最佳条件为:pH12.5,提取温度120 ℃,液固比40:1 (mL/g),提取时间40 min,茶渣蛋白提取率为48.3%。耦合酶提取结果表明:碱性蛋白酶添加量为2500 IU/g茶渣,酶解pH为9,酶解时间32 h,茶渣蛋白提取率提高至83%,较单一碱性电解水提取提高34.7%,同时蛋白质总抗氧化能力较高。本研究结果为茶渣的综合利用及蛋白资源的有效开发提供了一定的理论依据。     

双酶水解玉米醇溶蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

为了制备抗氧化活性肽,利用Alcalase碱性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解玉米醇溶蛋白。在单因素的基础上,以1.1-二苯基苦基苯肼（DPPH·）自由基清除率、羟基自由基清除率和水解度（DH）为响应值,采用响应面（RSM）中心组合实验,选取Alcalase碱性蛋白酶加酶量、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比、底物浓度为自变量,探讨最佳酶解工艺条件。采用Design-Expert软件,通过响应面优化确定修正后各因素的最佳工艺条件为:Alcalase碱性蛋白酶加酶量12880 U/（g底物）、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比为1∶4,底物浓度为3.4%。在此修正条件下,DPPH·自由基清除率为42.98%,水解度为32.18%,与预测值的相对误差为1.04%。浓度为20 mg/m L时,玉米醇溶蛋白的DPPH·自由基清除率和羟基自由基清除率分别为同浓度VC的85.8%和67.0%。      

酸性蛋白酶制备花椒籽蛋白抗菌肽的研究

利用酸性蛋白酶酶解花椒籽蛋白制备抗菌肽,以底物质量浓度、酶与底物比、pH值、酶解温度、酶解时间为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Box-Behnken方法进行三因素三水平的试验设计,以对大肠杆菌的抑菌率为响应值,应用响应面法对花椒籽蛋白制备抗菌肽工艺进行优化。其最佳工艺条件为：底物质量浓度30 mg/mL、酶与底物比3.0%、酶解pH 4.0、酶解温度51.2 ℃、酶解时间4.7 h,此条件下酶解产生的抗菌肽复合物的水解度为9.05%,对大肠杆菌的抑菌率为56.98%。     

酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的研究

探讨利用碱性蛋白酶酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。以丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶的体外抑制活性和水解度(DH)为主要评价指标,通过正交试验优化了ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。结果表明,在最佳工艺条件为温度60℃、反应pH8.5、底物质量浓度5%、加酶量为1200 U/g、反应时间100 min下测得丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶具有较高抑制率,为44.90%,此时DH为16.80%。其抑制活性与浓度有较大的依赖关系,而作用时间控制在40 min即可。此外,通过对丝素蛋白肽蔗糖和葡萄糖含量的检测,结果表明,尽管丝素肽中含有微量的葡萄糖,但抑制干扰作用甚微。     

超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽及其活性研究

海带是一种食药两用的海生褐藻植物,营养丰富,其蛋白质含量高、氨基酸种类齐全、比例适当,是酶法制备生物活性肽的理想蛋白原料。实验以海带蛋白为原料,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用单因素试验和响应面试验优化超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺,探讨酶种类,超声时间、酶底比、酶解温度、pH和超声功率对制备抗氧化肽的影响,并采用Box-Behnken试验设计的响应面（response surface methodology,RSM）分析方法优化工艺。结果表明,中性蛋白酶为最佳酶,酶解海带蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶底比2.3%、超声时间91min、超声功率240、酶解温度44℃,所得的DPPH自由基清除率为84.25%。对所得抗氧化肽DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、还原能力、羟基自由基清除率测定,结果表明其具有较好的抗氧化活性。本实验为酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺优化及海带蛋白抗氧化肽在抗氧化保健食品中的开发应用提供了依据。     

酶解米糠蛋白制备米糠营养液的工艺研究

研究酶解米糠蛋白制备米糠营养液的最佳工艺条件.以脱脂米糠为原料,将米糠磨浆后用α-淀粉酶进行预处理,考察在碱性蛋白酶酶解条件下的蛋白质提取率,通过单因素试验和正交试验确定最佳酶解条件:固液比1:5(W:V)、温度50℃、pH值8.5、蛋白酶用量750 U/g、时间3 h,在此条件下的蛋白质提取率可达45.1%.     

碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。     

Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究

以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽.采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件.考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响.测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术(LC-MS)考察酶解得到的小肽的分子量分布范围.结果表明:绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20 min.酶解最佳条件为:65℃、pH8.5、底物浓度9%、加酶量6 000 U/g、酶解240 min,水解度可达35.86%.经液质联用(HPLC-MS)分析证明水解产物的分子量集中在1 000 u以下.绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求.     

鸡肉蛋白的酶解特性及酶解产物的抗氧化性研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)酶解鸡肉蛋白,在单因素的基础上,运用响应面(RSM)以水解度为响应值对最佳工艺进行分析,探讨最佳酶解条件。结果表明:各因素对提高水解度的重要性依次为酶的添加量>酶解温度>酶解时间>液固比;最佳实验条件为:酶的添加量5μL/g(鸡肉)、反应时间5h、温度47.3℃、pH=8.5、液固比=5,此时水解度为25.53%。对不同水解度的酶解液进行羟自由基(.OH)清除能力和抗氧化能力(AOV)研究,发现酶解产物具有明显的清除羟自由基(.OH)活性和较大的抗氧化能力(AOV),且在一定范围内抗氧化活性随着水解度的增加而增大。      

calase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究

以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽。采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响,测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术（LC-MS）考察酶解得到的小肽的分子量分布范围。结果表明：绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20rain,酶解最佳条件为：65℃、pH8．5、底物浓度9％、加酶量6000U／g、酶解240min,水解度可达35．86％。经液质联用（HPLC-MS）分析证明水解产物的分子量集中在1000u以下,绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求。     

碱性蛋白酶酶解红花籽蛋白制备抗氧化肽工艺的研究

以红花籽蛋白为原料,2709碱性蛋白酶为实验用酶,红花籽抗氧化肽液吸光度为指标,研究酶解温度、酶解时间、酶添加量、酶解pH、底物质量分数对红花籽抗氧化肽还原能力的影响,并通过响应面分析对酶解工艺条件进行了优化。得到红花籽蛋白酶解的最佳工艺条件为:酶解pH 8.6,酶解温度49℃,酶添加量7 700 U/g(以底物质量计),底物质量分数5.0%,酶解时间2 h。在最佳条件下,红花籽蛋白水解度为6.389%,红花籽抗氧化肽液吸光度为1.017,还原能力较强。