营养变迁模型体脂变化及与骨密度的关系

目的观察能量限制后不同饮食模式重饲的营养变迁模型体脂的改变以及与骨密度(bone mineral density,BMD)的关系。方法 8周龄雄性SD大鼠分为正常饮食(normal chow for 4/12 weeks,NC4/NC12)组、限制饮食(calorie restriction for 4 weeks,R4)组、限食后普通饮食重饲(RN)组、限食后高脂饮食重饲(high-fat diet after calorie restriction,RH)组、高脂饮食(high-fat diet,HF)组。实验4周、12周检测大鼠四肢、躯干及全身的体脂含量及BMD。结果 (1)与同期NC组相比,大鼠各部位脂肪含量在热卡限制期变化不明显(P>0. 05),但四肢/躯干脂肪比例显著下降(分别为0. 418和0. 327),差异有统计学意义(P<0. 05)。重饲后,RN及RH组除上肢外,其他部位脂肪含量(大腿、躯干及全身脂肪含量RN组为22. 80、15. 77、16. 17,RH组为23. 80、18. 55、20. 90)均明显升高(NC12组3部位脂肪含量分别为20. 32、10. 93、12. 47),同时躯干/全身脂肪比例显著增加(P<0. 05),尤以RH组为著(NC12、RN及RH组分别为0. 720、0. 753及0. 765,P<0. 01),达到HF组(0. 768)水平。大腿/全身脂肪比例在重饲后呈下降趋势,其中RH组(0. 115)差异有统计学意义(NC12为0. 150,P<0. 05)。四肢/躯干脂肪比例在RN (0. 237)、RH(0. 205)及HF (0. 210)组均明显降低(NC12为0. 320),但3组间比较,差异无统计学意义。(2)热卡限制使全身(0. 111 g/cm2)、躯干(0. 094 g/cm2)及大腿(0. 098 g/cm2) BMD呈显著下降趋势(NC4分别为0. 120、0. 109及0. 107 g/cm2,P<0. 05)。恢复饮食后,RN及RH组的BMD均有不同程度的提升,RN组3个部位的BMD均恢复至正常水平(P>0. 05),RH组全身(0. 145 g/cm2)、躯干(0. 127 g/cm2)及大腿(0. 121 g/cm2)3个部位的BMD仍明显低于NC12组(3个部位BMD分别为0. 150、0. 136及0. 130 g/cm2)。HF组躯干(0. 141g/cm2)及全身BMD (0. 153 g/cm2)均明显高于NC12组(P<0. 01)。(3)多元逐步回归结果显示,体质量是影响全身、大腿及躯干BMD的最重要因素,r值分别为0. 894,0. 754,0. 914 (P<0. 001);除体质量外,大腿/全身脂肪比例是影响全身BMD (r=-0. 583,P<0. 001)、躯干脂肪含量是影响躯干BMD (r=-0. 675,P<0. 001)的另一重要因素。结论营养变迁可导致全身不同部位脂质含量增加,躯干部脂肪堆积明显,以限食后开放高脂饮食为著;各部位骨密度在营养变迁过程中,呈现先降低后升高的动态改变,高脂饮食重饲骨密度恢复程度较正常饮食重饲为差;体质量、大腿/全身脂肪比例及躯干脂肪含量是影响全身及局部骨密度的重要因素。     

有氧运动对2型糖尿病大鼠骨代谢的影响

目的观察有氧运动对2型糖尿病大鼠骨表型的影响。方法以50只6周龄雄性SD大鼠为研究对象,通过给大鼠喂饲高脂高糖饲料、注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,经过跑台运动后分为正常对照(control,C)组、糖尿病对照(diabetes mellitus,DM)组和糖尿病运动(diabetes mellitus with exercise,EDM)组。后micro-CT检测大鼠股骨骨密度和骨微含量,real-time PCR定量检测大鼠胫骨成骨、成脂、破骨相关基因的表达量。结果建模成功后DM组、EDM组大鼠的体质量显著低于C组(P<0. 05),第1周到第4周DM组和EDM组大鼠的体质量较之于C组均显著偏低(P<0. 01),第3周EDM组大鼠体质量低于DM组(P<0. 05)。C组、DM组和EDM组大鼠左腿股骨骨密度无差异; EDM组大鼠股骨骨小梁相对体积(trabecular volume,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb. Th)、骨小梁数量(trabecular number,Tb. N)都显著低于C组(P<0. 05)。DM组Runx2 mRNA表达低于C组(P<0. 05); EDM组碱性磷酸酶(alkaline Phosphatase,ALP) mRNA表达高于C组和DM组(P<0. 05),Osterix mRNA表达高于C组(P<0. 05)且显著高于DM组(P<0. 01),RANKL mRNA表达低于C组(P<0. 05)。各组大鼠胫骨中CEBP、Ctsk、OPG、RANK mRNA表达均未出现差异。结论 4周的跑台运动可以促进2型糖尿病大鼠骨形成、有效地抑制骨吸收和脂肪形成,但并没有明显反映在骨量上。     

仙灵脾益源胶囊增加骨密度的原料配伍合理性实验研究

目的:观察仙灵脾益源胶囊不同组成原料的配伍对维甲酸大鼠骨质疏松模型的影响,为中药保健食品原料配伍合理性提供实验依据。方法:雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、全方组(A+B+C)、中药组(A)、天然产物组(B)、营养成分组(C)、A+B组、A+C组、B+C组。采用70 mg·kg-1维甲酸灌胃法建立大鼠骨质疏松模型,造模同时开始灌胃给药,连续4周。给药结束后,左侧股骨经骨密度仪测量骨密度;右侧股骨置105℃烘箱中16 h至质量恒定,游标卡尺测量股骨中点直径,原子吸收法测定骨钙含量;放免法测定血清中骨钙素水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠骨密度与股骨中点直径显著降低(P<0.05),血清骨钙素水平显著升高(P<0.05),股骨钙含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,A+B+C全方组可显著升高大鼠骨密度(P<0.05),降低血清骨钙素水平(P<0.05),提高股骨骨钙含量(P<0.01);C组可显著降低血清骨钙素水平(P<0.05),A+B组和A+C组则可显著升高大鼠股骨骨钙含量(P<0.01,P<0.05)。与A+B+C全方组比较,A组股骨中点直径增加明显,B+C组、B组、C组股骨骨钙含量显著降低(P<0.05)。结论:仙灵脾益源胶囊能够改善骨质疏松大鼠的骨密度、降低骨转换水平及增加骨钙含量,其原料两两配伍或单独应用在各指标虽有一定作用趋势,但均不如三者联合配伍作用显著。     

雷洛昔芬对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体α表达水平的调节

目的探讨雷洛昔分对雌激素受体α(ER-α)mRNA基因表达的调节作用及其与骨密度(BMD)之间的关系。方法将50只3.5月龄雌性Wistar大鼠分为5组,每组10只。分别为假手术组(S组);双侧卵巢切除(OVX)组(O组);双侧卵巢切除+雌激素治疗组(E组);双侧卵巢切除+雷洛昔芬低剂量组(1.0mg/100g体质量RL组);双侧卵巢切除+雷洛昔芬高剂量组(10mg/100g体质量RH组)。采用灌胃给药。12周后处死动物,提取胫骨骨组织总RNA,以β-actin为内参,RT-PCR扩增检测OVX大鼠ER-α mRNA表达水平,并用双能X线骨密度仪(DEXA)测定股骨BMD。结果手术后12周与O组比较,E组、RL组股骨BMD升高,差异有统计学意义(均P<0.01),与S组比较,O组、RH组股骨BMD降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。S组、E组和RL组大鼠骨组织ER-αmRNA表达水平较O组明显增高(P<0.01),术后S组、E组和RL组表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论雷洛昔芬可能通过上调ER-α mRNA基因表达抑制破骨细胞骨吸收,减少骨量丢失。     

葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松的防治作用

目的探讨葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松模型的防治作用。方法将30只2月龄Wistar雌性大鼠采用数字表法随机分为3组:对照组(Control组,n=10)、尾吊组(HLS组,n=10)、尾吊+葛根素组(HLS+Pur组,n=10)。HLS+Pur组给予15. 4 mg/(kg·d)葛根素配制成的混悬液灌胃,Control组和HLS组灌同等体积的蒸馏水,每周测1次体质量,根据体质量调整灌胃剂量。4周后腹主动脉采血处死,检测大鼠离体左侧股骨骨密度(bone mineral density,BMD)和椎骨BMD、骨生物力学和骨形态计量学参数、血清骨代谢生化指标改变。结果与Control组相比,HLS组股骨(0. 110±0. 002)、椎骨离体BMD (0. 124±0. 004),骨生物力学参数均下降,差异有统计学意义(P<0. 01),骨形态计量学参数中,标记后荧光间距明显较小(32. 790±6. 698),VG (Van. Gieson法)色示骨小梁数目减少(2. 873±0. 353)、骨小梁厚度变薄(70. 604±4. 012)、骨小梁分离度变大(433. 493±26. 047),差异均有统计学意义(P<0. 01)。此外,血清骨形成指标1型前胶原氨基末端肽(procollagen 1 N-terminal peptide,P1NP)含量降低(166. 259±66. 065)(P<0. 05),骨吸收指标1型胶原C端肽(collagn 1 C-terminal peptide,CTX-1)含量增加(61. 805±19. 930)(P<0. 01);与HLS组相比,HLS+Pur组股骨BMD (0. 117±0. 004)、椎骨BMD (0. 131±0. 003)、骨生物力学、骨形态计量学均有不同程度改善(P<0. 01)。结论葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松具有良好的防治作用,可为开发葛根类抗废用性骨质疏松药物奠定基础。     

阿仑膦酸钠联合阿托伐他汀对糖尿病合并骨质疏松患者骨密度及骨代谢指标的影响

目的:探讨阿仑膦酸钠联合阿托伐他汀对糖尿病合并骨质疏松患者骨密度及骨代谢指标的影响。方法:选取2016年3月-2018年3月本院收治的糖尿病合并骨质疏松40例,应用随机数字表法将患者分为对照组和研究组,各20例。对照组使用阿仑膦酸钠治疗,研究组使用阿仑膦酸钠联合阿托伐他汀治疗。比较两组患者股骨粗隆、腰椎正位、股骨颈、前臂骨密度、血清谷钙素、血磷、血钙含量、骨源性碱性磷酸酶、骨钙素N端中分子、骨保护素含量以及腹胀、恶心、腹痛等不良反应。结果:研究组股骨粗隆、腰椎正位、股骨颈、前臂骨密度均高于对照组(P<0.05);研究组血清谷钙素含量高于对照组(P<0.05);研究组血磷、血钙含量与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);研究组骨源性碱性磷酸酶、骨钙素N端中分子、骨保护素含量均高于对照组(P<0.05);研究组腹胀、恶心、腹痛不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:治疗糖尿病合并骨质疏松期间,将阿仑膦酸钠与阿托伐他汀联合疗效更佳,值得在临床上应用与推广。     

亚临床甲状腺功能减退大鼠骨代谢改变及左旋甲状腺素疗效

目的探讨亚临床甲状腺功能减退(SCH)模型大鼠骨代谢改变及应用左旋甲状腺素(L-T4)治疗后的疗效。方法健康Wistar雄性大鼠60只,随机分为3组:亚临床甲减组(SCH组)、L-T4替代治疗组(SCH+T4组)、对照组(C组),每组20只。测定不同组别大鼠血清血脂、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)和骨密度(BMD)。比较不同组别大鼠甲状腺功能、骨代谢指标、骨密度及血脂相关指标的改变。结果 SCH组大鼠TRACP-5b(F=301.214,P<0.05)、BALP(F=16.432,P<0.05)、BMD(F=8.112,P<0.05)明显低于对照组。胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于对照组(P<0.05)。L-T4组大鼠促甲状腺激素(TSH)恢复至正常范围,TRACP-5b、BALP有所升高(P<0.01),TC、LDL-C有不同程度下降(均P<0.05)。相关分析显示,TSH水平与TC(R=0.425,P<0.05)、LDL-C(R=0.228,P<0.05)呈正相关,与BALP(R=-0.297,P<0.05)和TRACP-5b(R=-0.265,P<0.05)呈负相关。结论 SCH是骨质疏松的重要危险因素,可能通过升高TSH抑制骨细胞活性而降低骨密度,L-T4可部分改善实验大鼠骨代谢异常。     

槟榔碱对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的探讨槟榔碱对去卵巢骨质疏松(OP)大鼠骨代谢的影响。方法 50只健康SD雌性大鼠随机分为对照组、模型组、低、中和高剂量槟榔碱组(1、5、20 mg/kg,每天灌胃1次)。12周后检测尿钙和尿脱氧吡啶啉(Dpd)及血清钙、血清磷、血碱性磷酸酶(ALP)和雌二醇(E2)水平。采用双能X射线吸收法测量大鼠右侧股骨的骨密度(BMD)。取股骨进行3点弯曲生物力学试验。结果与对照组比较,模型组大鼠血清E2水平和BMD显著降低(P<0.05),尿钙、尿Dpd、血清钙、血清磷和ALP水平均显著增加(均P<0.05),左侧股骨的生物力学指标包括最大载荷、最大挠度、弹性载荷和弯曲能量均显著降低(均P<0.05)。与模型组比较,中和高剂量槟榔碱组大鼠股骨的BMD显著增加(P<0.05),尿钙、尿Dpd、血清钙、血清磷和ALP水平显著降低(均P<0.05),左侧股骨的最大载荷、最大挠度、弹性载荷和弯曲能量均显著增加(均P<0.05)。结论槟榔碱改善了去卵巢OP大鼠的骨代谢,增强其骨密度,改善骨生物力学指标。     

杜仲叶醇提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢生化指标、骨密度、IL-6及TNF-α的影响

目的:观察杜仲叶醇提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢生化指标、骨密度、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法:90只清洁级SD雌性大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、雌激素组和杜仲叶组各18只。模型组、雌激素组和杜仲叶组大鼠做去卵巢处理,假手术组同样手术但不切除卵巢。术后4周,对照组、假手术组和模型组大鼠给予蒸馏水灌胃;雌激素组大鼠给予戊酸雌二醇灌胃(0.6 mg·kg~(-1));杜仲叶组大鼠给予杜仲叶醇提取物灌胃(6 g·kg~(-1)),1次·d~(-1),连续8周。检测所有大鼠血清钙、磷,尿钙、磷,骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP),骨钙素,雌二醇,IL-6和TNF-α水平,并测定骨密度。结果:与对照组和假手术组比较,模型组大鼠尿Ca/Cr、P/Cr、BALP、骨钙素、IL-6、TNF-α均显著升高,血清雌二醇含量和骨密度显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,雌激素组和杜仲叶组大鼠尿Ca/Cr、P/Cr、BALP、骨钙素、IL-6、TNF-α均显著降低,血清雌二醇含量和骨密度显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:杜仲叶醇提取物对去卵巢骨质疏松大鼠具有较好的疗效,其作用机制可能与降低血清IL-6、TNF-α含量,调节骨代谢平衡,提高骨密度有关。     

骨细胞GLP-1受体表达对2型糖尿病大鼠骨微结构的影响

目的观察2型糖尿病大鼠股骨颈骨细胞表达胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)阳性细胞百分数的变化,探讨骨组织GLP-1R变化对骨微结构的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为实验组(30只)和对照组(30只),实验组采用高糖高脂饲料喂养至12周时加小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型,对照组采用普通饲料喂养。分别于造模成功时和成模后第12周,处死10只大鼠作为糖尿病0周组(DM0w组,n=10)和糖尿病12周组(DM12w组,n=10),对照组分别于同期各处死10只大鼠作为正常对照(NGT0w组,n=10;NGT12w组,n=10)。经腹主动脉采血测定空腹血糖(FBG)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)。取近端股骨颈,制备脱钙和不脱钙骨切片,备免疫组化检测GLP-1R阳性的骨细胞,采用Simple软件分析骨小梁形态计量学指标:骨小梁占骨髓腔体积百分比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)。采用单因素方差分析比较各组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性的骨细胞百分数,BV/TV、Tb.Th、Tb.N的变化,采用Pearson行相关分析。结果与同期对照组相比,DM0w组、DM12w组大鼠FBG、TC、TG升高(均P<0.05);与同期对照组相比,DM0w组、DM12w组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性骨细胞百分数和BV/TV、Tb.Th均减少(均P<0.05);与DM0组相比,DM12组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性的骨细胞百分数、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均减少(均P<0.05);Pearson相关分析显示大鼠股骨颈GLP-1R阳性骨细胞百分数与股骨颈BV/TV、Tb.Th、Tb.N均呈正相关,相关系数分别为r=0.803,P<0.05;r=0.545,P<0.05;r=0.771,P<0.05。结论糖尿病大鼠股骨颈骨细胞GLP-1R的表达减少,同时BV/TV、Tb.N减少,Tb.Th变薄,骨细胞GLP-1R的表达可能是影响2型糖尿病骨微结构的因素之一。