酶解大黄鱼制备咸味增强肽的研究

本文采用木瓜蛋白酶、胰酶对大黄鱼蛋白进行酶解,对酶解产物进行感官咸味评分,并结合味觉传感系统-电子舌进行味觉数值化分析。通过蛋白回收率、水解度以及肽氮回收率研究蛋白酶解过程中氮存在形式的变化规律,结果表明,酶解大黄鱼制备咸味增强肽的最优条件为采用胰酶酶解大黄鱼3 h,此时加酶量为蛋白含量5‰,酶解温度55℃,肉水比1:1,在控制蛋白含量和钠离子含量一致的情况下,感官咸味值和电子舌咸味电信号值均达到最大,具有较好咸味增强作用。抗氧化实验结果表明,3 h时胰酶酶解咸味增强肽还原力可达0.149 mmol TE/mmol,DPPH自由基清除活性可达0.057 mmol TE/mmol。咸味增强肽作为一种生物活性肽,具有重要的营养价值和生物活性,可用于开发高档调味品以及作为功能性食品配料。     

蛋白酶水解龙头鱼产生咸味的研究

咸味是人类主要的味觉之一,是控制机体生理平衡最重要的因素之一。然而由于味觉的需要,人类使用盐普遍高于真正所需的量。为研究水解海洋蛋白产生的咸味肽,以便于开发适合于2型糖尿病,或者高血压病人所需的无钠调味剂,该研究采用木瓜蛋白酶水解龙头鱼蛋白的方法,通过Nacl感官评定标准曲线,对酶解后的咸味肽进行感官评估,结果显示其在3.5h时咸味最佳;用Bradford法分析蛋白质酶解过程,表明其蛋白量变化显示从高到低至趋于稳定;使用SDS-PAGE凝胶电泳迁移结果显示0.1%木瓜蛋白酶30min可把全部蛋白水解到分子量为17和11 k Da以下,1%的木瓜蛋白酶水解则只需5min,而且无进一步的可观察到的消化。经凝胶电泳带灰度值(等同于O.D值)分析表明,蛋白降解的速度与考马斯亮蓝测定结果基本吻合。     

咸味肽的制备技术研究进展

咸味肽作为一种新型的食盐替代物,在食品减盐方面有着至关重要的作用,尤其是需要低钠食品的特殊人群,具有广泛的应用前景。因此,咸味肽的制备和开发成为当前的研究重点。本文以植物源咸味肽为对象,分别对咸味肽的研究必要性及结构特点、ENaC等咸味受体与咸味肽的作用机制、咸味肽结构与呈味特性的构效关系,以及咸味肽分离纯化鉴定技术及在咸味香精、增咸烹饪盐和咸味增强剂等应用等方面进行综述。为促进植物源咸味肽的深入机理研究及产品开发提供理论依据。     

以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽

目的:以波纹巴非蛤为原料,制备海洋生物活性肽,并确定最佳酶解条件。方法:选用木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶为水解酶,以水解度为考察指标,通过正交试验对酶解实验条件进行优化。结果:木瓜蛋白酶在50℃、酶解时间4h、加酶量4%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为40.83%,总氮回收率为89.85%,平均肽链长度为2.20;菠萝蛋白酶在温度55℃、酶解时间4h、加酶量12%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为34.61%,总氮回收率为89.58%,平均肽链长度为2.58。结论:在本实验条件下,木瓜蛋白酶对以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽效果优于菠萝蛋白酶。     

响应面分析优化酶水解小黄鱼(Larimichthys polyactis)蛋白产生的咸味肽及其风味度

由于食盐(Na Cl)用量普遍高于所需,为了减少食盐摄入量,最有效的方法是减少Na+的摄入量,而咸味肽是最为理想的方法之一。为了确定酶水解海洋蛋白产生咸味肽的最佳工艺条件,首先,对酶水解时间,p H及以Na Cl感官评定浓度为指标进行单因素试验,初步确定各因素的最适水平。然后,通过响应面法优化酶解条件。在此基础上,以咸味肽产生最佳风味为响应值,利用二次回归正交旋转组合设计的试验方法建立数学模型,进行响应面分析,最后,探讨p H,酶解时间对咸味的影响。结果:咸味肽的最佳产生工艺在温度50℃,加酶量1.0%时,p H为6.3,酶解时间为3 h,在保证合适风味度的前提下,获得最佳感官评定的咸味浓度为60 m M。结论:实际值与预测值的误差在允许的范围内,模型预测的结果可靠。     

以贝壳为原料制备苹果酸钙的研究

本文采用一次煅烧法,研究并改进了以贝壳为原料制备苹果酸钙的工艺条件,并对产品进行了红外和质量检测.结果表明,制备苹果酸钙的较优条件是:在20mL质量浓度为0.10g/mL DL-苹果酸中,加入1.4g煅烧后的贝壳灰分,于60℃条件下中和反应,所得产品的产率为94.35%,纯度为99.18%,且质量指标符合我国钙添加刺的质量标准.     

以废弃牡蛎壳为原料制备食品级醋酸钙

利用直接法生产食品级醋酸钙是一种将废弃牡蛎壳变废为宝的有效途径。通过单因素实验和主要因素方差分析探讨了壳粉粒径、壳酸比、水壳比、反应时间和p H对醋酸钙产品含量与收率的作用规律和影响大小,并借助多指标正交实验对其工艺条件进行了系统优化。结果表明,壳酸比、水壳比和反应时间这3个关键因素对该反应的影响较为显著,生产醋酸钙的最适宜条件为:壳酸比为0.75∶1,水壳比为21∶1,反应时间为140min,此条件下的醋酸钙含量及收率的平均值可达99.63%、93.72%。由于优化后的产品质量较好且稳定可靠,故本研究具有一定的实际应用价值。      

结合感官评价与电子舌技术优化酶水解养殖暗纹东方鲀肌肉制备呈味肽

国内外关于河豚滋味的研究主要集中在游离氨基酸、无机离子、核苷酸及其关联物上,而对构成其鲜美浓郁和圆润香滑味感的呈味肽研究较少。因此应用酶生物技术挖掘滋味特性突出的暗纹东方鲀肌肉呈味肽,并应用于食品中具有重要的研究意义与潜在的经济价值。以养殖暗纹东方鲀肌肉为原料,采用中性蛋白酶、风味蛋白酶、水解蛋白酶及复合蛋白酶制备呈味肽,以水解度、寡肽含量和电子舌结合感官评价的方法筛选不同酶解条件下的最优酶制剂。结果表明:风味蛋白酶酶解液水解度最大而水解蛋白酶酶解液寡肽含量最高;电子舌能够明确区分出不同蛋白酶酶解液;电子舌分析结果与感官评价结果存在一定的相关性,但电子舌提供的鲜味、咸味和酸味相对强度与感官评定的结果存在一定的差异。最终确定中性蛋白酶为酶解暗纹东方鲀肌肉制备呈味肽最佳酶制剂。     

酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

本文研究了酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,通过水解度与羟自由基（·OH）清除率来综合评价水解产物的抗氧化能力。以·OH清除率为指标,从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适酶。在单因素实验研究酶浓度、底物浓度与水解时间对酶解产物·OH清除率和水解度影响的基础上,通过L₉（4³）正交实验对水解工艺进行优化。结果得出,碱性蛋白酶活力高于其他4种蛋白酶,能使蛋白质充分水解,正交实验各因素对水解产物·OH清除率的影响程度依次为底物浓度>酶浓度>水解时间。其中,碱性蛋白酶的最佳水解工艺条件为:底物浓度3.0%、酶浓度3500 U/g、p H9.0、温度55℃、水解时间3.5 h。在此条件下,水解产物的·OH清除率可达82.7%,水解度为23.1%。碱性蛋白酶水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供技术参考。      

响应面法优化骨素酶解制备可溶性肽工艺研究

利用响应面法分析了酶解骨素制备可溶性肽的工艺,以酶解温度、时间、pH及酶用量为影响因素,酶解液中可溶性肽含量、酶解液的苦味和鲜味为优化指标。结果显示,酶解温度和pH对可溶性肽含量、酶解液鲜味有显著影响(p0.05);拟合模型验证结果表明,所得模型在预测可溶性肽含量时具有一定可靠性;酶解骨素的最优工艺为温度60℃、时间2h、pH6、酶用量10000U/g,此时可溶性肽含量最高,酶解液的鲜味较强,无苦味。     

酶法水解菜籽蛋白制备菜籽肽条件研究

以菜籽蛋白为原料,研究预处理和双酶水解条件对其水解度影响。结果表明,直接采用未经预处理菜籽蛋白和采用双酶分步水解法在不进行任何灭酶处理及先加入水解能力强的蛋白酶再加入其它蛋白酶条件下进行水解,所得菜籽蛋白水解效果较好。     

复合酶解制备核桃多肽工艺条件的优化

采用复合酶酶解核桃蛋白,以水解度为考察指标,研究了底物质量浓度、复合酶配比、加酶量、pH、酶解温度、酶解时间对酶解的影响,并采用响应面法优化了Alcalase2.4L与胰蛋白酶复合酶解核桃蛋白的工艺参数。最佳酶解条件为:底物质量浓度40 g/L,Alcalase2.4L与胰蛋白酶的复合配比3∶1,pH7.4,酶解温度60.46℃,加酶量5.71%,酶解时间5.05 h。最佳条件下核桃蛋白水解度可达14.54%。     

海蜇胶原蛋白肽的酶解制备工艺

以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,以还原力(RP)和水解度(DH)为指标,采用响应面法研究了酶解温度、酶解时间、pH、料液比、酶添加量对还原力和水解度的影响,得到最佳酶解胶原蛋白的工艺条件;并进一步与复合酶水解工艺进行比较,确定海蜇胶原蛋白肽的最优制备工艺。结果表明:胰蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH8.5、料液比0.50 g/mL、酶添加量3.0%和酶解时间4 h;风味蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH7.5、料液比0.56 g/mL、酶添加量4.0%和酶解时间4 h;进一步进行复合酶实验,结果表明采用风味蛋白酶和胰蛋白酶分别在其最适条件下进行先后酶解获得的酶解液的DH和RP最高,分别为(71.56%±0.0076%)和(0.341±0.0101)。     

Investigation of the peptides with calcium chelating capacity in hydrolysate derived from spent hen meat

Calcium peptide chelates are developed as efficient supplements for preventing calcium deficiency. Spent hen meat (SHM) contains a high percentage of proteins but is generally wasted due to the disadvantages such as hard texture. We chose the underutilized SHM to produce peptides to bind calcium by proteolysis and aimed to investigate chelation between calcium and peptides in hydrolysate for a sustainable purpose. The optimized proteolysis conditions calculated from the result of response surface methodology for two-step hydrolysis were 0.30% (w_enzyme/w_meat) for papain with a hydrolysis time of 3.5 h and 0.18% (w_enzyme/w_meat) for flavourzyme with a hydrolysis time of 2.8 h. The enzymatic hydrolysate (EH) showed a binding capacity of 63.8 ± 1.8 mg calcium/g protein. Ethanol separation for EH improved the capacity up to a higher value of 68.6 ± 0.6 mg calcium/g protein with a high association constant of 420 M⁻¹ (25°C) indicating high stability. The separated fraction with a higher amount of Glu, Asp, Lys, and Arg had higher calcium-binding capacity, which was related to the number of ─COOH and ─NH₂ groups in peptide side chains according to the result from amino acid analysis and Fourier transform infrared spectroscopy. Two-step enzymatic hydrolysis and ethanol separation were an efficient combination to produce peptide mixtures derived from SHM with high calcium-binding capacity. The high percentage of hydrophilic amino acids in the separated fraction was concluded to increase calcium-binding capacity. This work provides foundations for increasing spent hen utilization and developing calcium peptide chelates based on underutilized meat.     

酶解蚕豆蛋白制备降胆固醇肽及其响应面优化

为了得到具有较高降胆固醇活性的蚕豆肽,对蚕豆蛋白的酶解条件进行了研究。通过比较6种蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解程度以及降胆固醇能力,选择碱性蛋白酶进一步优化酶解条件。以水解度(DH)与降胆固醇能力为指标,利用单因素试验和响应面试验优化确定了酶解蚕豆蛋白制备降胆固醇肽的工艺参数。结果表明,最佳酶解参数为:酶解温度40℃,p H 9.0,酶解时间60 min,加酶量8 000 U/g,料液比1∶20。验证试验后得到的水解度为14.29%蚕豆多肽产品,其对胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠抑制率分别为52.98%、31.87%、25.17%,与理论模型预测值52.49%、31.44%、24.76%基本相符。     

酶解豆清液制备生物活性多肽工艺优化及抗氧化能力研究

目的 探究木瓜蛋白酶酶解豆清液制备生物活性多肽的最佳工艺条件,评价该生物活性多肽的抗氧化能力。方法 以三氯乙酸-双缩脲法测得的多肽产率为参考指标,在单因素实验结果基础上,通过响应面实验确定酶解豆清液的最优酶解条件,并通过测定2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（2,2''-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid,ABTS+·）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率,分析豆清多肽的抗氧化活性。结果 最佳酶解条件：木瓜蛋白酶添加量2.0%、初始pH 5.0、酶解温度53 ℃、酶解时间7 h,在该条件下豆清液的多肽产率为115.50%与预测值范围内。抗氧化实验测得Vc（维生素C, vitamin C）与样品对ABTS自由基清除能力EC50值分别为0.003、1.871 mg/mL,对DPPH自由基清除能力EC50值分别为0.006、6.459 mg/mL,说明样品具有一定的抗氧化能力。结论 木瓜蛋白酶酶解豆清液制备生物活性多肽不仅降低豆清液排放,提高豆清液附加值提供技术支撑,同时为豆清液生物活性多肽的多元化使用提供来源。     

双酶法制备沙丁鱼ACE抑制肽的工艺研究

本实验以广东大宗低值沙丁鱼为原料,采用不同蛋白酶降解沙丁鱼以筛选合适的酶组合,然后对原料的酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的工艺进行研究。结果表明,制备沙丁鱼ACE抑制肽的酶组合为:木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶;酶解的最佳工艺参数为:第一步采用木瓜蛋白酶进行酶解,酶解温度70℃、p H7.5、反应时间2.25 h、酶添加量4000 U/g、料液比30%(w/v);采用碱性蛋白酶进行第二步酶解,酶解温度70℃、p H10.0、反应时间2.0 h、酶添加量5000 U/g。通过工艺优化,沙丁鱼蛋白质的水解度提高到28.44%,并且最终水解蛋白肽的ACE抑制率为73.44%。      

苦瓜渣酶解制备多肽的研究

以苦瓜饮料加工所产生的苦瓜渣为原料酶解制备多肽,通过对比实验确定纤维素酶辅助酶解2h,在单因素实验的基础上,采用正交实验优化得出木瓜蛋白酶酶解条件为:[E/S]=3.0%、温度50℃、pH6.5、时间2.5h。葡聚糖凝胶G-25层析法测定结果显示,酶解液中多肽(<5000Da)主要含有三个组分,分子量分别为:1500、810、430Da。