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目的:旨在应用响应曲面实验优化挤压豌豆蛋白的酶解条件,以期得到最优的抗氧化肽和准确的酶解预测模型。方法:以O2-·清除率为评价指标,利用响应曲面实验优化中性蛋白酶对含水量为25%的豌豆蛋白挤出物的酶解条件,通过透析纯化酶解物,得到抗氧化肽,并采用高效液相测定其分子量。结果:酶解最佳条件:加酶量11.80%、温度37.50 ℃、pH6.90、底物浓度8.00%,此条件下,O2-·清除率为55.29%±0.20%。透析发现分子量小于1 ku的酶解液抗氧化活性最强,达60.18%,其分子量集中在200~800 u左右,为2~8肽。结论:经验证,所建预测模型准确可靠,酶解产物抗氧化性高,可为相关生产和工艺产品开发提供参考价值。且经显著性分析发现透析可显著提高肽的自由基清除率。 相似文献
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目的:旨在应用响应曲面实验优化挤压豌豆蛋白的酶解条件,以期得到最优的抗氧化肽和准确的酶解预测模型。方法:以O_2~-·清除率为评价指标,利用响应曲面实验优化中性蛋白酶对含水量为25%的豌豆蛋白挤出物的酶解条件,通过透析纯化酶解物,得到抗氧化肽,并采用高效液相测定其分子量。结果:酶解最佳条件:加酶量11.80%、温度37.50℃、pH6.90、底物浓度8.00%,此条件下,O_2~-·清除率为55.29%±0.20%。透析发现分子量小于1 ku的酶解液抗氧化活性最强,达60.18%,其分子量集中在200~800 u左右,为2~8肽。结论:经验证,所建预测模型准确可靠,酶解产物抗氧化性高,可为相关生产和工艺产品开发提供参考价值。且经显著性分析发现透析可显著提高肽的自由基清除率。 相似文献
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《食品工业》2018,(12)
以豌豆为原料,利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,经超滤后得到豌豆低聚肽,对其水分、灰分、蛋白质含量、氨基酸构成和分子量分布情况进行测定,以DPPH自由基、OH自由基和还原能力为指标,评价豌豆低聚肽的体外抗氧化作用。结果表明,水分为4.46%±0.02%,灰分为5.04%±0.03%,总氮含量(以干基计)为88.30%±2.25%,酸溶蛋白含量(以干基计)为84.20%±2.04%。氨基酸含量丰富,谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸比例高,分子量有92.95%分布在1 000 Da之下,清除DPPH自由基、OH自由基的IC50值分别为3.39±0.02 mg/mL和23.72±0.10mg/mL,同时也具有较高的还原能力。 相似文献
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高活性豌豆抗氧化肽的分离纯化方法 总被引:1,自引:0,他引:1
以酶解豌豆蛋白获得的抗氧化肽粗品为原料,采用葡聚糖凝胶G-25、膜分离和模拟移动床色谱进行分离纯化,利用RP-HPLC对纯化样品的相对分子质量分布进行分析,并测定纯化样品的TBARS值、DPPH·清除能力。结果表明,豌豆肽粗品中分子质量1 ku的肽级分所占比重较大,并具有较高的抗氧化活性。用葡聚糖凝胶G-25纯化后得到5个肽级分,其高活性抗氧化肽级分的相对分子质量在700 u左右;膜分离纯化后分子质量1 ku的肽级分抗氧化活性较高,尤其是DPPH·清除能力较其他级分高;模拟移动床(Simulated Moving Bed,SMB)色谱纯化的高活性抗氧化肽级分分子质量约700 u,其抗氧化活性高,分离效率高,可达到产业化分离水平。 相似文献
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研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。 相似文献
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天然抗氧化肽研究进展 总被引:10,自引:0,他引:10
天然抗氧化肽具有安全和高效特点,已成为国内外研究热点。肌肽和谷胱甘肽是目前研究较为深入两类低分子肽,并在食品和医药领域得到一定应用。此外,在实验中发现还有很多来自于动植物蛋白提取物,也具有较强抗氧化活性;深入研究并推广使用天然抗氧化物,是解决食品安全问题一条重要途径。 相似文献
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目的 探究豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化机制。方法 利用量子化学理论计算构建抗氧化肽的优势构象,前线轨道分布及能级差(ΔE)和福井函数(Fukui)中的f0(r)对二者活性位点进行了推测;分子对接技术对抗氧化肽与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2-diazo-di(3-ethyl-benzothiazol-6-sulfonic acid)diamiammonium salt,ABTS]自由基的清除作用机制进行了探究,并通过体外自由基清除实验验证肽的活性,将理论计算和实验测定进行分析比对。结果 前线分子轨道中的最高占据分子轨道(highest occupied molecular orbital, HOMO)及轨道能级确定酪氨酸(Tyr)残基是肽YLVN、TFY重要的活性位点,与Fukui函数f0(r)推断肽YLVN中Tyr的酚羟基O14-H47和肽TFY中Tyr的酚羟基O26-H52... 相似文献
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以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料,经螯合工艺制得豌豆低聚肽硒螯合物,研究其水分、粗蛋白、酸溶蛋白、分子质量分布情况,然后从DPPH自由基、OH自由基清除能力和还原能力3个方面对螯合原料和螯合物进行抗氧化功能评价与对比。结果表明,螯合得率为27.87%,水分含量为(14.17±1.12)%,酸溶蛋白占粗蛋白的比例为97.28%。分子质量分布在1000 u以下的比例占93.45%。螯合原料中亚硒酸钠仅对OH自由基有较强清除能力;豌豆低聚肽对DPPH和OH自由基清除的IC50=(3.39±0.02)mg/mL和(23.55±0.07)mg/mL,并具有一定的Fe3+还原能力。豌豆低聚肽硒螯合物清除DPPH自由基、OH自由基能力及还原能力均比豌豆低聚肽有所提高。 相似文献
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乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。 相似文献