鹰嘴豆蛋白酶解动力学研究

从酶解反应机理出发,应用数学推导的方法,以鹰嘴豆蛋白为原料,考察底物浓度、酶浓度对鹰嘴豆蛋白水解度（DH）的影 响,将水解试验结果用推导的动力学模型方程进行拟合,建立酶解动力学模型。 结果表明：鹰嘴豆蛋白水解度随着初始底物浓度（S0） 的上升而下降,随着初始蛋白酶浓度（E0）的增加而上升,碱性蛋白酶水解鹰嘴豆蛋白的速率动力学模型：R=(39.522E0-0.080 4S0)exp [-0.148(DH)],水解度-水解时间的动力学模型：DH=6.76ln[1+(5.85E0/S0-0.011 9)t],酶解反应速率常数k2为39.522 min-1,酶失活常数为 6.371 min-1,该动力学模型对试验结果有很好的拟合度,对实际酶解过程具有一定的指导作用。     

鳕鱼皮胶原蛋白碱性蛋白酶Properase E控制水解动力学模型

在假设碱性蛋白酶Properase E恒温控制水解动力学遵循内切酶限制水解动力学历程的前提下,通过实验方法求出了碱性蛋白酶Properase E恒温控制水解动力学模型.结果表明,碱性蛋白酶Properase E对鳕鱼皮胶原蛋白进行控制水解的动力学模型为:反应速率(R)=(18.19E0-0.4341S0)exp[-0.714(DH)],水解度(DH)=1.401ln[1 (12.988E0/S0-0.31)t],并求得该体系反应速率常数K2=18.19min-1,酶失活常数Kd= 12.518min-1.验证实验证明,根据碱性蛋白酶Properase E恒温控制水解动力学模型得到的理论水解度与实际水解度基本吻合,所建模型可用于胶原蛋白酶解反应过程的模拟和酶解反应条件的优化设计.     

鳕鱼皮胶原蛋白胰蛋白酶控制水解动力学模型

研究蛋白酶酶促水解制备生物活性肽的反应机理与动力学行为,并在假设胰蛋白酶恒温控制水解动力学遵循内切酶限制水解动力学历程的前提下,通过实验方法求出了胰蛋白酶恒温控制水解动力学模型.结果表明.胰蛋白酶对鳕鱼皮胶原蛋白进行控制水解的动力学模型为:反应速率(R)=(14.231E0-1.745S0)exp[-0.514(DH)],水解度(DH)=1.946ln[1 (7.315E0/S0-0.897)t],并求得该体系反应速率常数 K2=14.231 min-1,酶失活常数 Kd=18.809 min-1.验证实验证明,根据胰蛋白酶恒温控制水解动力学模型得到的理论水解度与实际水解度基本吻合,所建模型可用于胶原蛋白酶解反应过程的模拟和酶解反应条件的优化设计.     

风味酶酶解小麦面筋蛋白动力学研究

研究Flavourzyme风味蛋白酶水解小麦面筋蛋白的酶解效率和反应动力学特性,调控和优化面筋蛋白的酶解工艺。研究结果表明,在该酶的最适作用条件(pH 6.0,55℃)下,10%底物,1%加酶量(酶与底物比),酶解12 h,可获得较高水解度(DH30%)和蛋白回收率(30%)。通过数学推导结合试验研究,建立了该水解反应的动力学模型。水解度(DH)和水解时间(t)的关系:DH=12.35ln[1+(2.923E0/S0-0.015)t],酶失活常数Kd约3 min-1。与试验结果相比,模型计算值与试验值吻合较好,说明该模型具有很好的实际应用价值。     

碱性蛋白酶水解米糠蛋白动力学特性研究

研究蛋白酶水解制备生物活性多肽反应机制与动力学行为,基于经典的米氏方程理论,应用数学推导结合试验研究的方法,以米糠蛋白为原料,对米糠蛋白-碱性蛋白酶体系进行酶解动力学研究.考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活的机理模型,构建动力学模型R=aexp[-b(DH)],其中对参数a值和b值进行确定.利用Origin 8.0软件,对推导出的公式进行拟合得到水解速率动力学模型为R=(94.754e0-0.0597s0)exp[-0.157(DH)],水解度-水解时间的动力学模型:DH =6.37ln[1+(14.88e0/s0-0.009)t].对于米糠蛋白-碱性蛋白酶模型体系,经试验拟合,并求得该体系动力学常数:酶失活常数K4为16.144 min-1,酶解反应速率常数k2为94.754 min-1.     

碱性蛋白酶酶解梭子蟹蛋白动力学模型研究

对梭子蟹蛋白的酶解动力学机制进行研究,建立碱性蛋白酶酶解梭子蟹蛋白的动力学模型。结果表明：在温度55℃、pH8.5 条件下,水解度随着初始酶浓度的增加而上升,随着初始底物浓度的上升而下降;水解动力学模型为：水解度(DH)＝ 3.558ln[1 ＋(2.553E0/S0+0.116)t],验证实验证明,模型得到的理论DH 值与实际DH 值基本吻合,该动力学模型具有一定的实用价值。     

酶法水解紫菜蛋白动力学研究

为阐明酶法水解紫菜蛋白的动力学特性,研究了酶解时间、初始pH值、温度、酶浓度、底物浓度对紫菜蛋白水解度的影响,建立紫菜蛋白水解动力学方程.结果表明:酶解温度50℃、初始pH 9.0为最适水解条件.紫菜蛋白的水解度随着酶浓度的升高而增强,随底物浓度的增加而减弱.在此条件下,碱性蛋白酶水解紫菜蛋白的动力学方程:X=3.597ln[1+(82.788E0/S0-3.058)t],总水解速率方程:am=297.8×(E0-11S0/297.8)×exp(-0.278x),为合理确定酶解反应实验的各种参数提供理论依据.     

青鳞鱼蛋白木瓜蛋白酶控制水解动力学模型的研究

在假设木瓜蛋白酶恒温控制水解动力学遵循外切酶限制水解动力学历程的前提下,采用实验方法求出了木瓜蛋白酶恒温控制水解动力学模型.结果表明,木瓜蛋白酶对青鳞鱼蛋白进行控制水解的动力学模型为:R=(92.16e0-0.00005s0)exp(-0.115DH),DH=8.696 ln[1 (10.923e0/s0-0.0008)t];其酶失活常数Kd=10.923 min-1;水解反应能够顺利进行的条件是:e0/s0＞c0,常数c0=5.4×10-7.验证实验证明,根据木瓜蛋白酶恒温控制水解动力学模型得到的理论DH与实际DH基本吻合,该动力学模型具有很强的实用价值.     

海洋鱼蛋白可控酶解动力学模型的研究

应用数学推导结合实验研究的方法，以沙丁鱼蛋白为底物．研究胰蛋白酶可控酶解过程的动力学模型及其相关参数，结果如下：DH=9.804ln[1 (1．701E0／S0-0．00367)]和R=(16．678E0-0．036S0)exp[-0．102(DH)]，动力学常数k2=16．678／min和Kd=1.7015／min，最低临界初始蛋白酶浓度E0=c0S0，最大临界底物初始浓度S0=E0／c0，c0=2.159x10^-3。与实验结果相比较，证实动力学模型与实验结果非常吻合，说明它具有很好的实际应用价值。     

酶法制取大豆油脂过程中的蛋白酶解动力学

通过数学方法推导和对Alcalase碱性蛋白酶酶解大豆中蛋白实验的系统研究,得到Alcalase碱性蛋白酶酶解大豆中蛋白的动力学模型为：R＝（18.294 0E0＋0.273 4ρ0）exp（－0.256 2DH）,式中：E0为初始蛋白酶质量浓度,ρ0为初始底物质量浓度,DH为水解度。通过数学推导和对大豆蛋白酶解反应过程中Alcalase碱性蛋白酶失活的系统研究,得到膨化大豆蛋白的酶解反应过程中Alcalase碱性蛋白酶失活的动力学常数K＝4.920 4 min－1。通过拟合实验证明,建立的动力学模型与实验结果具有较好的拟合效果,证明所建立的动力学模型具有较高的实际应用价值。     

复合酶水解牡蛎蛋白的动力学研究

对太平洋牡蛎蛋白进行复合酶(风味蛋白酶、胰蛋白酶的酶活力比为2.3:1)水解特性研究,探讨了底物浓度和酶浓度对水解度(DH)的影响。建立了复合酶水解牡蛎蛋白的动力学模型,确定了模型常数,并分析了多肽的平均链长、相对分子质量与酶解时间的关系。验证实验证实模型预测结果与实际测得的结果一致,表明该动力学模型具有一定的实用价值。     

高温花生粕功能肽的酶法制备

以高温花生粕为原料,制备兼具界面活性和抗氧化性的肽,研究酶种类对水解度、蛋白质提取率、起泡性、乳化性、抗氧化性的影响,筛选最适用酶;建立最适酶水解高温花生粕的动力学模型。结果表明,碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶水解产物的蛋白质回收率均在60%以上;碱性蛋白酶水解物的水解度最高,木瓜蛋白酶水解物在120 min时,水解度达到最大;酶解物的分子量随着水解度的增大逐渐减小,木瓜蛋白酶水解物大分子量组分和小分子量组分含量相当;木瓜蛋白酶水解物的起泡性为216.24%、泡沫稳定性为67.19%、乳化活性为39.70 m2/g、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率最高（IC50为0.72 mg/mL）,优于其他酶解物。木瓜蛋白酶为制备界面活性兼抗氧化性肽的最适用酶,其水解动力学模型为DH=0.839ln[1+（1 826.859E0/S0-78.772）t]。     

复合酶水解鲢鱼蛋白体系动力学模型探讨

在单因素试验确定最佳酶解条件前提下,通过测定不同反应过程中水解度的变化规律来验证复合酶水解鲢鱼体系水解动力学模型。结果表明,复合酶水解鲢鱼蛋白体系水解度与时间关系符合模型:DH=1/b×In(1+abt)。通过几组试验以及数据拟合可以求出该动力学模型的参数a=1.134e/s-0.337 9,b=0.235 1。     

蛋白酶水解啤酒糟蛋白动力学研究

为了研究蛋白酶水解啤酒糟蛋白的动力学性质,采用pH-stat法,以蛋白酶对啤酒糟中提取的蛋白进行水解处理.探讨了底物浓度[S]、酶与底物浓度比[E]/[S]和反应时间t对产物水解度DH的影响.建立了[S]及t同DH间的数学模型.通过不同底物浓度加碱量随水解时间的变化速度,测定出蛋白酶水解啤酒糟蛋白的K_m值.     

碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白动力学研究

以加工罗非鱼片废弃的下脚料蛋白和碱性蛋白酶为原料,以水解度为指标,考察温度、底物质量浓度、酶用量及pH等因素对碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白水解度的影响。得到碱性蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白的适宜工艺条件为：酶解温度50℃、底物质量浓度20g/L、酶用量为0.067g/L、pH9.50、反应时间180min,此时水解度为22.00%。同时得到50℃条件下酶失活常数Kd为37.9min-1,反应速率常数K2为244.2min-1、米氏常数KM为29.27g/L、最大反应速度Vmax为28.41g/(min·L);并建立了相应的水解动力学模型。验证实验表明：建立的水解动力学模型与实际水解过程基本吻合。     

Alcalase 2.4L FG酶解米渣蛋白动力学特性研究

采用pH-stat法对Alcalase2.4L FG酶水解米渣蛋白的动力学特性进行了比较系统探讨：（1）探讨了温度、酶浓度（[E]／[S]）、底物浓度、pH值和水解时间对水解度的影响，并确定了比较理想的工艺参数：（2）探讨了该酶催化水解米渣蛋白反应的动力学参数：Km=0．6598mol／L，Vmax=0．00351mol／min·L；（3）探讨了该酶催化水解米渣蛋白反应的初级阶段的动力学特性，为米渣的进一步开发提供理论依据。     

脂肪酶水解椰子油动力学研究

为了探究脂肪酶水解椰子油的动力学过程在研究了底物质量浓度、酶添加量、酶解温度及酶解时间对脂肪酶水解椰子油反应速率影响的基础上,本试验采用Lineweaver-Burk法和Wilkinson统计法两种方法对酶解过程进行拟合,计算酶解过程的动力学常数k_m和V_m,并求解脂肪酶水解椰子油动力学方程。结果表明:在酶添加量为1%、温度为50℃的条件下,动力学常数k_m为1.2739[mg/(g·mL)],V_m为0.969 6[mg/(g·mL·min)],米氏方程为v=1.2739+[S]/0.9696[S]。经过试验验证得出米氏方程的拟合度大于0.99,说明方程的预测值与测定值基本吻合,米氏方程适合脂肪酶水解椰子油动力学研究,为油脂酶解过程提供理论模型。     

双酶法制备葵花籽肽的工艺研究

利用双酶法水解葵花籽分离蛋白（SPI）制备葵花蛋白肽,探讨各因素对水解度（Degree of hydrolysis,DH）和肽含量的影响,目的在于确定葵花蛋白肽制备的最佳酶解条件。结果表明：最佳酶解条件为底物浓度5.0?10-2 g/mL,温度为53.5 ℃,pH 8.5,按照[E/S]为1.0?10-2 g/g加Alcalase 2.4 L,酶解104 min,调整pH为7.5,按照[E/S]为0.44?10-2 g/g添加Flavourzyme酶解120 min。此工艺得到水解液中肽含量为4.25 mg/mL,DH为30.97%,与单酶法相比,肽含量显著提高。     

碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。     

Bacillus cereus MBL13-U胶原蛋白酶的分离纯化及其降解动力学分析

胶原蛋白酶是特异性水解天然胶原蛋白或明胶的酶类。为制备新型的骨胶原蛋白酶并探讨其降解胶原蛋白的能力,通过采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-100凝胶层析等分离纯化步骤,从Bacillus cereus MBL13-U菌株的粗酶液中分离纯化出一种特异性降解牛骨胶原蛋白的胶原蛋白酶(bone-specific collagenase,BSC),对该酶的分子质量、底物特异性和降解能力进行了分析,并构建出其降解牛骨胶原蛋白的动力学模型。结果表明:分离纯化的BSC比活力为5.57×103U/mg,纯化倍数达到42.85倍,分子质量约为52.0 k Da。经特异性分析该酶为骨胶原蛋白酶,且有显著的水解I型胶原蛋白的能力。其水解能力优于其他常用的蛋白酶。构建出该酶降解牛骨胶原蛋白的动力学模型为:降解速率R=(583.813 6E_0+1.296 7S_0)exp(-0.119 0DH),水解度DH=8.403 4ln(1+69.473 8(E_0/S_0)t+0.154 3)t,酶的失活常数K4为64.115 7/h。