雌激素受体α基因多态性与性早熟女童骨龄指数的关系

目的探讨性早熟女童雌激素受体α（ERα）基因多态性与骨龄指数（BAI）的关系。方法选取200例性早熟女童为病例组（其中骨龄超前113例,骨龄正常87例）,对照组为同期体检无器质性疾患的200例健康女童（骨龄均正常）。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,分析2组ERα基因多态性与BAI的关系。结果 ERα基因PvuⅡ基因型在病例组BAI正常者和对照组中的分布差异无统计学意义（P〉0.05）,XbaⅠ基因型在病例组BAI正常者和对照组中的分布差异无统计学意义（P〉0.05）,ERα基因PvuⅡ基因型在BAI超前者与对照组中的分布差异无统计学意义（P〉0.05）,BAI超前者的ERα基因XbaⅠ存在多态性,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ERα基因XbaⅠ基因型与性早熟女童骨龄超前有关,而PvuⅡ基因型与性早熟女童骨龄超前无关。通过ER基因检测可为性早熟诊断和早期及时治疗提供分子靶点和理论依据。     

HSP90α/β蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的观察热休克蛋白90α/β(heat shock protein 90α/β,HSP90α/β)在胃癌组织中的表达及临床意义,为胃癌的早期诊断与分子病理分型提供有价值的实验资料。方法采用免疫组织化学染色结合组织芯片,观察HSP90α/β蛋白质在正常胃黏膜组织、癌旁组织及胃癌组织中的表达;然后分析HSP90α/β蛋白质在胃癌组织中表达的临床意义。结果免疫组织化学染色结果显示,胃癌组织中HSP90α/β蛋白质表达的阳性率高于正常胃黏膜组织和癌旁组织(P<0.05);癌旁组织中表达的阳性率高于正常胃黏膜组织(P<0.05);淋巴结转移患者组织中表达的阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者组织中表达的阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。结论 HSP90α/β蛋白质的表达与胃癌组织的发生、分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,即随着胃癌组织分化程度的降低、淋巴结转移的发生及TNM分期的增加而表达升高。     

雌激素受体α基因与乙型肝炎后肝硬化、原发性肝癌关系的研究进展

我国是原发性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的高发国家,每年新发HCC的病例占全世界的45％。引起HCC的最主要原因是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染,大约85％～90％的HCC是由乙型肝炎、肝硬化发展而来。     

雌激素受体α基因多态性与子宫内膜增生症的相关性研究

目的探讨雌激素受体α（ERα）基因多态性与子宫内膜增生症的关系。方法选择江西地区100例子宫内膜增生症患者为实验组,100例子宫内膜正常者为对照组。应用分子生物学的方法分析ERα基因1号内含子内切酶XbaⅠ和PvuⅡ限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）,观察ERα基因多态性基因型在2组中的基因型分布。RFLP用PP、Pp、pp（PvuⅡ）和XX、Xx、xx（XbaⅠ）来表示。结果 X基因型频率实验组为35.0%,对照组为24.5%（OR=1.659,P=0.022）;P基因型频率实验组为23.0%,对照组为34.5%（OR=0.567,P=0.011）;XbaⅠ和PvuⅡ限制性片度长度多态性在2组中均呈多态性分布。结论 ERα基因多态性与子宫内膜增生症有关,X等位基因可能是其危险因素;P等位基因可能是其保护因素。     

海水青鳉雌激素受体基因的克隆、组织表达特性及环境雌激素EE2对其表达的影响

为了获得海水青鳉Oryzias melastigma雌激素受体的基因信息及其表达特性,采用RACE-PCR技术和实时荧光定量PCR方法,进行了雌激素受体基因的克隆、表达特性分析及其在17α-炔雌醇(EE2)暴露下的基因响应研究。结果表明:海水青鳉雌激素受体基因与其他脊椎动物雌激素受体基因同源性较高,特别是DNA结合结构域(DBD)在进化上高度保守,配体结合结构域(LBD)次之;OM-ERα/β1/β2在所检测的10种组织中均有表达,其中在青鳉肝脏、性腺、脾脏和肠中表达量较高;OM-ERα在肝脏中的表达和OM-ERβ1/β2在性腺中的表达,雌雄间存在显著性差异(P<0.05);在EE2浓度为5、50、500ng/L的水体中暴露96 h后,海水青鳉仔鱼中的分子标志物卵黄蛋白原基因(vtg1)被显著诱导(P<0.05),且呈浓度依赖关系;中浓度(50 ng/L)的EE2诱导仔鱼OM-ERβ1基因表达,OM-ERβ2对EE2暴露呈现低浓度诱导、高浓度抑制的趋势;攻毒试验结果表明,OM-ERα和vtg1之间存在一种正相关关系,暗示EE2可能主要通过ERα调控vtg1基因的表达;EE2攻毒下,β亚型存在一种倒U型的剂量-反应关系。研究表明:克隆获得的海水青鳉3个雌激素受体亚型基因OM-ERα/β1/β2,为后续开展海水模式鱼类雌激素受体相关研究提供了基础信息;OM-ERα/β1/β2的组织表达特性及EE2对仔鱼OM-ERα/β1/β2表达的不同调控,显示出海水青鳉3种ER亚型基因存在着不同的生理功能,且其对环境污染物的应答模式不同。     

刺参4个功能基因的表达分析

为研究刺参Apostichopus japonicus的生长发育,采用实时定量PCR方法,对刺参腱生蛋白基因、胶原蛋白α2基因、整合蛋白αV基因和整合蛋白βL基因等4个候选功能基因不同月龄的组织表达进行了分析。结果表明:刺参12、13、14月龄时,腱生蛋白基因在刺参肠、管足、呼吸树、皮肤、体壁、体腔液细胞、疣足和纵肌等8个组织中均有不同程度的表达,其中在体腔液细胞和呼吸树组织中的表达量较高(P<0.05);胶原蛋白α2基因在刺参管足、呼吸树、体壁、疣足和纵肌组织中的表达量随月龄的增加而逐渐增加,其中在呼吸树组织中表达量最高,在纵肌、疣足、体壁、肠和体腔液细胞等组织中的表达量逐渐降低;整合蛋白αV基因在纵肌组织中的表达量随月龄的增加而逐渐增加;整合蛋白βL基因在皮肤、体壁、疣足和管足组织中的表达量较低。本研究结果为深入研究刺参这4个功能基因提供了参考。     

牦牛Caspase-3克隆、序列分析与组织表达研究

半胱天冬酶3(Aspartate-specific cysteinyl proteinase 3,Caspase-3)是哺乳动物最重要的细胞凋亡执行者,为探究Caspase-3基因在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础,试验对牦牛Caspase-3编码区进行克隆和生物信息学分析,并比较牦牛和黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫等组织的表达差异.结果表明:牦牛Caspase-3基因编码区全长834 bp,编码277个氨基酸,与黄牛Caspase-3基因相比同源性最高(99. 52%)且遗传距离最近,发生4个碱基突变;与鸡同源性最低(71. 32%)且遗传距离最远,保守且符合动物进化进程.q PCR结果显示Caspase-3在牦牛生殖轴中的表达量均高于黄牛,其中,在下丘脑、输卵管中达到P <0. 01水平,在子宫中达到P <0. 05水平.推测极端环境应激引起Caspase-3基因的高表达可能影响母牦牛的繁殖性能.     

乳腺癌ER、PgR及人类表皮生长因子受体2的表达与化疗疗效的关系

目的探讨乳腺癌雌性激素受体（etrogen receptor,ER）、孕激素受体（pogesterone receptor,PgR）及人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor-2,HER-2）的表达与化疗疗效的关系。方法 46例女性晚期乳腺癌患者中,ER阴性（-）者（ER阴性组）14例,ER弱阳性（＋）者8例、ER阳性（＋＋）者5例、ER强阳性（＋＋＋）者5例（ER弱阳性＋阳性＋强阳性组）,ER不详者（ER不详组）14例。PgR阴性（-）者（PgR阴性组）9例,PgR弱阳性（＋）者10例、PgR阳性（＋＋）者9例、PgR强阳性（＋＋＋）者4例（PgR弱阳性＋阳性＋强阳性组）,PgR不详者（PgR不详组）14例。HER-2阴性（-）者（HER-2阴性组）8例,HER-2弱阳性者（＋）6例、HER-2阳性（＋＋）者9例、HER-2强阳性（＋＋＋）者6例（HER-2弱阳性＋阳性＋强阳性组）,HER-2不详者（HER-2不详组）17例。46例患者分别采用泰素联合吡柔比星、多西他赛联合吡柔比星和多西他赛联合顺铂化疗。观察46例患者治疗后临床疗效及不良反应等情况。结果有43例可评价疗效者中,完全缓解（CR）4例,部分缓解（PR）21例,稳定SD（12）例,进展（PD）6例。ER弱阳性＋阳性＋强阳性组病例的有效率为55.6%,ER阴性组病例的有效率为41.7%;PgR弱阳性＋阳性＋强阳性组病例的有效率为50.0%,PgR阴性组病例的有效率为50.0%;HER-2弱阳性＋阳性＋强阳性组病例的有效率为50.0%,HER-2阴性组病例的有效率为42.9%。各弱阳性＋阳性＋强阳性组有效率与阴性组比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）。Ⅲ-Ⅳ度的不良反应有：白细胞下降Ⅲ度5例,Ⅳ度3例;脱发Ⅲ度12例;恶心呕吐Ⅲ度9例。结论乳腺癌ER、PgR及HER-2不同表达的化疗疗效无明显差异。     

胸腺瘤组织中c-myc和PTEN基因的表达

目的:探讨c-myc、PTEN基因在胸腺瘤中的表达及其与胸腺瘤临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测45例胸腺瘤(胸腺瘤组)和16例非肿瘤(对照组)胸腺组织中c-myc、PTEN基因的表达。结果:胸腺瘤组c-myc基因阳性表达率高于对照组,PTEN基因阳性表达率低于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.01);恶性组c-myc基因阳性表达率高于良性组,PTEN基因阳性表达率低于良性组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);侵袭性组c-myc基因阳性表达率高于非侵袭性组,PTEN基因阳性表达率低于非侵袭性组,比较差异均有统计学意义(P<0.01);PTEN基因表达与c-myc表达呈负相关(P<0.01)。结论:c-myc、PTEN共同参与胸腺瘤的发生、发展,与胸腺瘤的恶性程度及侵袭性呈正相关,二者存在协同作用。     

基于mtDNA COⅠ基因的西藏牦牛遗传多样性及系统进化研究

为从分子水平上探讨西藏牦牛的序列多态性、群体遗传多样性和系统进化关系,本研究对17个西藏牦牛类群170个个体的mtDNA COⅠ全序列进行测序,用MEGA5.0、DNASP5.0等软件分析核苷酸组成、单倍型多样性和核苷酸多样性.基于Kimura-2-Parameter双参数模型,分别采用邻近法(NJ)和最大似然法(UPGMA)构建系统进化树,分析不同牦牛类群的亲缘关系和分类.结果表明:①西藏17个牦牛类群的mtDNA COⅠ全序列长度均为1 545 bp,个体间无长度差异,无内含子,起始密码子为AUG(ATG),终止密码子为UAA(TAA),共编码514个氨基酸.T、C、A和G 4种碱基的平均含量分别为29.5%(29.3%²9.8%)、25.5%(25.2%29.8%)、25.5%(25.2%²5.6%)、28.7%(28.6%25.6%)、28.7%(28.6%²8.9%)和16.3%(16.2%28.9%)和16.3%(16.2%¹6.5%);A+T的平均含量为58.2%,存在一定的碱基偏倚性.②在17个西藏牦牛类群的170头牦牛中,共发现mtDNA COⅠ有25种单倍型,单倍型多样性值在016.5%);A+T的平均含量为58.2%,存在一定的碱基偏倚性.②在17个西藏牦牛类群的170头牦牛中,共发现mtDNA COⅠ有25种单倍型,单倍型多样性值在0⁰.978之间,平均单倍型多样性和核苷酸多样性值分别为0.566、0.00326,表明西藏牦牛具有较丰富的遗传多样性.③西藏牦牛mtDNA COⅠ中亮氨酸平均含量最多(11.496%),半胱氨酸平均含量最少(0.1946%).碱性氨基酸、酸性氨基酸的含量分别为6.6171%、4.8627%;亲水性氨基酸、疏水性氨基酸分别为57.39%、42.61%.④基于mtDNA COⅠ,西藏17个牦牛类群可分为2大类,即类乌齐(LWQ)牦牛单独成一类,其它牦牛类群聚为一类.     

RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达

目的探讨RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达特点。方法采用http：//www.ncbi.nl m.nih.gov/及DNAstar软件对80例胃癌（胃癌组）及相对应的癌旁组织（对照组）标本RASSF1-A基因和RASSF1-C基因进行生物信息学分析。采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测2组组织及胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中RASSF1-A mRNA、RASSF1-C mRNA相对表达量。结果经RT-PCR扩增后,RASSF1-C mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.62±0.07、0.66±0.08RASSF1-A mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.23±0.10、0.58±0.07,二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。RASSF1-A mRNA在对照组组织中相对表达量为0.81±0.07,显著高于胃癌组0.31±0.03,差异有统计学意义（P〈0.05）。RASSF1-C mRNA在胃癌组组织中相对表达量为0.87±0.04,对照组组织中相对表达量为0.84±0.03,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 RASSF1-A、RASSF1-C基因在胃癌组织中的表达下调。     

牙周康泰对慢性牙周炎患者龈沟液中TNF-α及IL-1β表达的影响

目的:观察牙周康泰方治疗慢性牙周炎患者肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)及白细胞介素-1β(interleukin-1,IL-1β)表达的影响。方法:将46例慢性牙周炎患者随机分为治疗组和对照组,每组各23例。两组患者均接受龈上洁治和龈下刮治等牙周基础治疗,对照组采用基础治疗,治疗组在对照组基础上连续口服牙周康泰方8周。于用药前及用药第0周、第2周、第4周、第8周采用滤纸条法收集两组患者龈沟液,采用夹心ELISA法检测龈沟液中TNF-α及IL-1β水平,比较两组间及治疗前后的差异。结果:两组患者均在牙周基础治疗后患牙龈沟液中TNF-α及IL-1β水平显著低于治疗前(P<0.01)。用药第4周和第8周时治疗组TNF-α和IL-1β水平均明显低于同期对照组(P<0.05)。结论:牙周康泰方能降低TNF-α及IL-1β水平,减轻牙周炎症反应。     

α石膏、β石膏、铁尾矿砂制备自流平砂浆及其性能研究

以α、β石膏、铁尾矿砂为主要原材料,掺加适量外加剂,设计正交实验,研究α石膏、β石膏、铁尾矿砂、减水剂掺量对砂浆凝结时间、流动度、用水量、收缩率、强度的影响,试配出符合JC/T 1023—2007要求的石膏基自流平砂浆,考虑经济因素,确定砂浆最优配比(g)为:m(α石膏)∶m(β石膏)∶m(铁尾矿砂)∶m(减水剂)∶m(缓凝剂)∶m(保水剂)∶m(可再分散乳胶粉)∶m(消泡剂)=640∶320∶220∶2.12∶4.8∶2.88∶14.4∶0.96。微观分析表明,厚片状和短柱状水化产物数量增加和紧密结构增多使得自流平砂浆强度提高。     

山羊Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

对单胎藏山羊和多胎金堂黑山羊Apaf-3基因cDNA克隆、序列分析及组织表达特性研究.采集5只多胎金堂黑山羊和5只单胎藏山羊在发情期的卵巢、垂体等组织样,进行Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析,并采用定量PCR技术对其mRNA进行组织表达量研究.结果,克隆出山羊Apaf-3基因长度为1731bp编码区全长为1245bp,编码414个氨基酸.Apaf-3基因在两种山羊中序列相同,且在5种组织中的表达均无差异.同源性分析表明凋亡基因Apaf-3在动物的进化中保守性低,与山羊多羔性状的相关性需要进一步研究.     

黑龙江省肇源县现代乡村民居建筑基因特征演化研究

本研究针对肇源县现代乡村民居展开研究,引入景观基因理论并加以转换应用,分析该地区不同时期的现代乡村民居典例,识别民居建筑类型、特征,了解其演变机制及影响因素,尝试在空间布局和材料建构等层面构建其特征演化图谱,试图为相关研究与实践提供类型积淀和模式参考.     

ZNF451和TGF-β在胃癌中的表达及其与临床病理特征及预后的相关性研究

目的:探讨锌指转录因子451(ZNF451)在胃癌发生、发展过程中的作用及其与血管内皮生长因子(TGF-β)的相关性。方法:用组织芯片和免疫组织化学法检测144例胃癌组织及对应癌旁组织中ZNF451、TGF-β的表达。结果:ZNF451在胃癌中阳性表达率为71.5%,高于癌旁组织的18.8%(P<0.01);TGF-β在胃癌中阳性表达率为79.9%,高于癌旁组织的9.1%(P<0.01)。ZNF451和TGF-β表达均与胃癌分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05);胃癌组织中ZNF451表达和TGF-β表达正相关(P<0.05)。单因素生存分析显示,ZNF451和TGF-β高表达均与生存时间呈负相关(P<0.05)。Cox多元回归分析提示,ZNF451阳性胃癌和TGF-β阳性胃癌的预后更差(P<0.05)。结论:ZNF451在胃癌组织中高表达,并可能与TGF-β在胃癌的发生和发展过程中起协同作用,ZNF451结合TGF-β可作为胃癌预后的预测因子。     

食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及细胞骨架蛋白(Fascin蛋白)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化SP法检测80例食管鳞癌及癌旁组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达,分析其与食管鳞癌病理特征的关系。结果:食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的总阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.05),在食管鳞癌组织中HIF-1α的表达与Fascin蛋白的表达呈正相关(r=0.252,P=0.024);HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌组织中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P<0.05),但均与年龄、性别等因素无关(P>0.05)。结论:高表达HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,且高表达的HIF-1α蛋白与Fascin蛋白存在相关性。     

难治性癫痫患者脑内HIF-1α与多药耐药基因1表达的相关性及其意义

目的:探讨难治性癫痫患者脑内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与多药耐药基因1(MDR1)的表达情况、相关性及其意义。方法:收集9例难治性癫痫组手术切除脑组织标本及7例对照组脑组织标本,采用免疫组织化学染色方法检测HIF-1α和MDR1的表达情况,并分析HIF-1α与MDR1表达阳性率的相关性。结果:HIF-1α在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率77.8%(7/9)明显高于对照组的14.3%(1/7);MDR1在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率66.7%(6/9)明显高于对照组的14.3%(1/7),比较差异均有统计学意义(P<0.05);难治性癫痫组脑组织中HIF-1α与MDR1的表达呈正相关(r=0.76,P<0.05)。结论:难治性癫痫患者脑内HIF-1α和MDR1表达升高,且两者呈正相关。HIF-1α可能通过调控MDR1基因表达而参与难治性癫痫的形成。     

雌激素受体基因多态性与上海市汉族女性月经初潮及绝经年龄的关系

目的探讨雌激素受体α(ER-α)基因XbaⅠ、PvuⅡ位点多态性与上海部分女性月经初潮及绝经年龄的关系。方法 401名无血缘关系的中青年女性,平均年龄(31.3±5.9)岁;571名绝经后女性,平均年龄(59.6±5.9)岁为研究对象,均为居住在上海>30年的汉族人。采用双能X线测量仪测量腰椎、股骨颈骨密度(BMD),用PCR-RFLP方法分析受试者ER-α基因XbaⅠ、PvuⅡ位点多态性。采用Haploview及PLINK遗传分析软件对XbaⅠ、PvuⅡ位点连锁不平衡及单倍体进行分析。结果受试者的各基因型频率分布符合Hardy-weinberg平衡定律。携带XbaⅠ及PvuⅡ单个位点各基因型者间年龄、身高、体重、BMD和月经初潮及闭经年龄的差异均无统计学意义(均P>0.05)。XbaⅠ及PvuⅡ单个位点各基因型与月经初潮及绝经年龄无相关关系。XbaⅠ、PvuⅡ2个位点之间具有较强的连锁不平衡,存在4种频率>1%的单倍型PX、Px、px、pX。经校正身高、体重、体重指数(BMI)的影响后,协方差分析结果显示单倍型Px与绝经后女性闭经年龄相关(P=0.044),携带Px纯合子(PxPx)女性闭经年龄[(47.5±3.6)岁]早于携带Px杂合子者[(49.4±3.8)岁](P=0.040)及未携带单倍型人群[(49.8±3.9)岁](P=0.015)。结论 ER-α基因XbaⅠ、PvuⅡ位点多态性与中国汉族妇女绝经年龄相关,但与初潮年龄无明显相关。     

HIF-1α因子标记在卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达及与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学技术检测56例卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织和38例正常卵巢组织中HIF-1α的表达因子。结果:HIF-1α在卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中表达率为64.3%,明显高于正常卵巢组织的23.7%,比较差异有统计学意义(字2=4.224,P<0.01)。结论:HIF-1α在缺氧环境下可促使肿瘤发生与发展,维持肿瘤生长,可作为临床监控卵巢恶性生殖细胞肿瘤发生、发展的一个生物学标志和基因治疗靶点。