地拉罗司对小鼠成肌细胞C2C12生物活性的影响

目的模拟体内肌少症病理环境,观察铁螯合剂地拉罗司(deferasirox,DFS)对小鼠成肌细胞C2C12生物学活性的影响。方法构建模拟体内骨骼肌营养缺乏的细胞培养模型:体外培养小鼠成肌细胞C2C12,细胞分为3组:对照组、无血清培养基组和无血清培养基加DFS (10μmol/L)共孵育组,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡; C2C12细胞在马血清作用下诱导分化,镜下观察细胞形态并计数骨骼肌肌管数目;构建模拟体内骨骼肌炎性损伤的细胞培养模型:C2C12细胞在马血清诱导下分化后分为3组:对照组、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor,TNF-α,10 ng/m L)干预组和TNF-α(10 ng/m L)加DFS (10μmol/L)共孵育组,丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒分别检测细胞MDA和GSH-Px水平,实时定量PCR法检测细胞肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC) mRNA和肌细胞生成素(myogenin,MyOG) mRNA的表达水平,镜下观察细胞形态并计数骨骼肌肌管数目。结果对照组、无血清培养基组和无血清培养基加DFS共孵育组细胞增殖最终OD值分比为2. 74±0. 01、0. 43±0. 01和0. 83±0. 01,细胞凋亡率分别为(7. 45±1. 73)%、(37. 82±2. 30)%和(25. 73±1. 42)%,肌管计数分别为9. 10±1. 45、1. 00±0. 33和3. 80±1. 14。C2C12细胞在无血清培养条件下增殖下降、凋亡率增加、细胞肌管形成减少,DFS干预后细胞增殖升高、凋亡率下降、肌管形成增加,均P<0. 05。对照组、TNF-α干预组和TNF-α加DFS共孵育组细胞内MDA含量分别为(1. 57±0. 01)、(3. 33±0. 14)和(2. 01±0. 19) nmol/L,GSH-Px含量分别为85. 44±7. 92、36. 26±7. 48和118. 50±17. 89,MyHC mRNA的表达量分别为1、0. 60±0. 14和1. 36±0. 13,MyOG mRNA的表达量分别为1、0. 88±0. 06和1. 57±0. 16,肌管计数分别为4. 30±1. 50、3. 30±0. 67和5. 30±2. 26。C2C12细胞诱导分化后,在TNF-α干预下,细胞MDA含量增加(P<0. 05)、GSH-Px含量下降(P<0. 05); DFS干预后细胞MDA含量下降(P<0. 05)、GSH-Px含量增加(P<0. 05),MyHC和MyOG mRNA表达上升(P<0. 05),肌管数目形成增加(P<0. 05)。结论 DFS可逆转C2C12细胞在营养缺乏和炎性损伤状态下的部分生物学活性指标的下降。     

PGC-1α对C2C12成肌细胞增殖的影响

PGC-1α(Peroxisome Proliferators Activated Receptor gamma coactivator 1 alpha)是一种核受体转录辅助激活因子,广泛参与机体的生物氧化和能量代谢活动.本实验以小鼠C2C12成肌细胞为材料,通过转染pc DNA3.1-flag-PGC-1α真核表达载体,并且与转染空载体的实验对照组比较,利用荧光定量PCR检测转染效果,利用MTT比色法检测PGC-1α对成肌细胞增殖的影响;结果显示,PGC-1α在C2C12成肌细胞中被成功超表达,在转染后的2-5 d,转染真核表达载体组与转染空载体组相比,显著抑制细胞增殖(P<0.05),但在第6 d差异不显著.     

miR-30a抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化

目的:确认miR-30a在BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:首先用Ad-BMP9处理间充质干细胞C3H10T1/2,通过碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测早期成骨指标ALP、Western blot和PCR检测晚期成骨指标OPN,茜素红S染色检测钙盐沉积了解BMP9对C3H10T1/2细胞的成骨分化作用,同时用Real-time PCR检测miR-30a在该成骨分化中的变化。然后用BMP9条件培养基分别作用Ad-mmu-miR-30a和Ad-RFP预处理10h的C3H10T1/2细胞,检测早期成骨指标ALP、晚期成骨指标钙盐沉积和骨钙素OPN的表达。最后探讨miR-30a在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中的可能作用机制。结果:Ad-BMP9处理C3H10T1/2细胞5d,7d后,ALP的活性的表达增高;第9d后,OPN的表达增加;第14d后,钙盐的沉积明显增多。而miR-30a过表达后,抑制了这一现象。同时发现过表达miR-30a后,Runx2蛋白水平较对照组下降而mRNA水平基本没有变化。结论:miR-30a可以抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化,其作用机理可能和Runx2相关。     

小柴胡汤对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的:观察小柴胡汤对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法:用MTT法检测小柴胡汤对C6细胞生长的最佳作用浓度和时间。定量PCR检测miR-34a表达,并用Western blot检测p53、剪切后的caspase3、caspase9、Bcl-2及Bax表达。结果:小柴胡汤对C6抑制作用的最适宜质量浓度和时间为100 mg·L~(-1),36 h。miR-34a表达水平随着作用时间的延长而增高,作用8 h时的miR-34a表达量最高,显著高于作用0 h、4 h的表达量(P<0.05)。小柴胡汤对Bcl-2蛋白表达有明显的抑制作用,在4 h、8 h和12 h的表达量显著低于0 h表达量(P<0.05),而在8 h和12 h的表达量显著低于0 h和4 h表达量(P<0.05)。而对p53、剪切后caspase3、caspase9、Bcl-2及Bax的表达则为促进作用,在4 h、8 h和12 h的表达量显著高于0 h的表达量(P<0.05)。结论:小柴胡汤能通过p53/caspase途径抑制C6细胞生长。     

DLX1对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响

目的:分析和确认转录因子DLX1在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:首先,BMP9腺病毒感染C3H10T1/2细胞,RT-PCR和Western blot检测DLX1表达变化;随后,利用重组腺病毒技术分别过表达DLX1和RNA干扰(RNA Intenference,RNAi)抑制DLX1的表达,并利用碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)染色、钙盐沉积实验(茜素红染色),免疫细胞化学检测骨钙素(osteocalcin,OCN)表达和裸鼠皮下异位成骨实验分析DLX1对于BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的影响。荧光素酶报告基因实验和Western blot分析DLX1对于BMP9诱导的C3H10T1/2细胞Smad1/5/8信号途径的影响。结果:BMP9可以促进C3H10T1/2细胞中DLX1基因和蛋白表达水平;过表达DLX1在体外可进一步促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积以及OCN的表达,过表达DLX1亦可促进BMP9诱导的裸鼠皮下异位成骨;反之,RNAi抑制DLX1表达后,由BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积、OCN表达和裸鼠皮下异位成骨均相应受到抑制。过表达DLX1可进一步增强BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中Smad/1/5/8的转录调控活性,RNAi降低DLX1表达则可抑制BMP9诱导Smad/1/5/8的转录调控活性。但是,无论过表达DLX1和RNAi降低DLX1表达均不会对BMP9诱导的Smad/1/5/8磷酸化造成影响。结论:DLX1可以调节BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化,其调节作用可能是通过影响Smad1/5/8信号的转录调控活性而实现的。     

黄瓜花叶病毒2b蛋白C末端无抑制局部RNA沉默的活性

目的:黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子的功能,其C末端氨基酸序列非常保守。为了明确2b蛋白C末端保守序列在RNA沉默抑制中的作用,构建了CMV Q株系野生型2b及其C末端缺失突变体2bdelC的植物瞬时表达载体。通过农杆菌共渗滤法对野生型2b及其C末端突变体的沉默抑制子活性进行了分析。结果与结论:烟草接种叶片中野生型2b及其C末端突变体的Western blot检测表明,野生型2b蛋白与其C末端突变体在植物中积累水平变化不大,说明2b蛋白C末端氨基酸残基在维持2b蛋白在植物细胞中的稳定性方面无作用。在整株、细胞和分子水平上分别比较了野生型2b及其突变体2bdelC对共表达GFP的表达量影响,结果表明在所有的测定结果中二者均无明显地差异,说明2b蛋白C末端94-111位氨基酸在抑制局部RNA沉默上无生物学活性,讨论推测C末端应不存在与小RNA结合的结构域。     

溶藻弧菌感染对剑尾鱼HSP70基因表达的影响

用溶藻弧菌Vibrio alginolyticus感染剑尾鱼Xiphophorus helleri,取感染后第0、2、5、8、11 d的活鱼及感染后第2 d濒死鱼,采用半定量RT-PCR方法分别检测HSP70基因在肝胰脏、脾脏、头肾和心脏组织中的表达。结果表明:正常条件下,HSP70在检测的剑尾鱼组织中均不表达;在用溶藻弧菌感染第8 d的剑尾鱼肝胰脏内,HSP70基因被诱导强烈表达,HSP70/β-actin的值为1.80±0.03;在感染第2、5 d的剑尾鱼头肾内,HSP70基因被诱导表达,第8 d HSP70基因强烈表达,感染濒死鱼头肾内也检测到HSP70基因的强烈表达,HSP70/β-actin的值分别为0.35±0.02、0.15±0.01、2.00±0.06和0.95±0.05;在剑尾鱼被感染第2、5、8 d,在脾脏内均检测到HSP70基因的表达,感染濒死鱼脾脏内也检测到HSP70基因的强烈表达,HSP70/β-actin的值分别为0.30±0.02、0.15±0.01、0.45±0.03和1.55±0.04;仅在感染濒死鱼的心脏中检测到HSP70基因的表达,HSP70/β-actin的值为0.30±0.02;到第11 d HSP70基因表达消失。     

妊娠早期感染犬弓首线虫对仔鼠免疫状态的影响

目的研究母体妊娠早期感染犬弓首线虫,是否影响仔鼠的体液免疫功能。方法取犬弓首线虫子宫段虫卵培养至感染期,不同剂量(生理盐水、1×10~3个、3×10~3个虫卵)感染受孕三天的雌鼠,待仔鼠6周龄时攻击感染(0.5×10~3个虫卵、生理盐水),实验共分6组,动态检测各组仔鼠血清细胞因子(IL-2,IL-4,IL-10,IFN-γ)的表达。结果各组仔鼠血清细胞因子有差异,具有统计学意义(P<0.05);各细胞因子之间变化规律不同:Th1细胞产生的细胞因子IL-2在攻击感染早期呈上升趋势,4周达到高峰,以后逐渐下降;IFN-γ在攻击感染早期呈上升趋势,第2周达到高峰后逐渐下降。Th2细胞产生的细胞因子IL-4和IL-10攻击后呈下降趋势,且下降趋势在早期下降明显,后期逐渐放缓。结论妊娠早期感染孕鼠会影响仔鼠的体液免疫调节能力,且可诱导仔鼠对后天感染产生明显保护性免疫记忆;仔鼠的获得性免疫,在攻击感染的早期可能以Th2免疫占优势。     

不同养护条件下混凝土早期内部相对湿度变化的研究(二)

(接上期 )2 .2　水养护 2 8d条件下混凝土IRH的变化图 2给出了不同水灰比的混凝土在水养护 2 8d条件下 ,距干燥面不同距离处IRH随龄期的变化曲线。自干燥引起的IRH下降主要表现在早期 ,因此 ,混凝土在水养护 2 8d条件下 ,IRH的下降主要由水分扩散引起 ,自干燥的影响可以忽略不计。图 2　水养护 2 8d条件下IRH随龄期的变化曲线从图 2中可以看出 ,水灰比W/C越小 ,IRH下降越快。当W /C <0 .3时 ,初始的相对湿度均 <10 0% ,0～ 7d相对湿度值下降较大 ,后期下降比较缓慢 ;当W /C >0 .4时 ,0～ 2 8d内IRH几乎不变 ,2 8d后才开始缓慢下…     

维生素C对大口黑鲈生长与非特异性免疫的影响

用添加不同剂量维生素C(分别为0、0.5、1、2、4 g/kg)的饲料喂养初始体重为19 g左右的大口黑鲈Micropterus salmoides2个月,研究维生素C对大口黑鲈生长及非特异性免疫的影响。结果显示:饲料中添加维生素C>1 g/kg,能显著促进大口黑鲈的生长,提高其脾体指数(P<0.05),然而对大口黑鲈的饲料系数、成活率、肥满度、内脏比指数以及肝体指数等的影响均不显著(P>0.05);试验前50 d,饲料中添加维生素C能显著提高大口黑鲈血清中溶菌酶的活力(P<0.05),第60 d,饲料中添加维生素C为2g/kg以上时,能显著提高大口黑鲈血清中溶菌酶活力(P<0.05);试验前30 d,饲料中添加维生素C能显著提高大口黑鲈血清中超氧化物歧化酶活力(P<0.05),后30 d大口黑鲈血清中超氧化物歧化酶活力下降;随着饲料中维生素C添加水平的提高,大口黑鲈肝脏中维生素C的积累量显著升高(P<0.05)。试验证明,维生素C能有效地提高大口黑鲈的生长与非特异性免疫能力。     

共生形态创意总部

正空间,是对建筑物的一种延伸,这种延伸是物质的,有时也是情感的。我们常在不同的空间中工作、学习和思考,空间因我们而存在,也因我们而变幻。这是设计师自己的办公室,其创意总部坐落在美丽的东方红艺术公社大院园区内。建筑由一栋六十年代的红砖厂房改造而成,出于对建筑现状和历史记忆的保护,室内装修尽可能地避免对原建筑的破坏,4.9米的室内层高也让我们有了更多发挥的空间。进入办公室,首先看到的是一个由杉木和竹子装饰的前厅,有层次的竖线条和低位光源的设置让人马上体会到空间的细腻和宁静,犹如在丛林间漫步一般。两个相对设置的木盒子让连接空间的通道变得不再简单乏味。通过木盒子达到空间与空间相连接和转换,构思巧妙。用作墙面装饰所剩的竹子被巧妙作为走廊天花装置,这象征设计师的团队,整齐团结又各具个性。在聚光灯的照射下,竹子的影子投射在水泥的墙面和地上,在视觉上     

C宅

我们的目标是建立一个作为延长田园生活的建筑。土地是一种柔软的物质,覆盖整个陆地表层。自古以来,人类通过推、捏、烧等共生共存而来,凝视着土地、触摸着它。我们想要在建筑中体现这种不刻意且无价的行为。地块被包围在大海与峭崖之间,周围汽艇交错在优美的水平线、海岸及山崖中,辽阔无际的野花摇曳在草原上。居住在城市中心高层公寓的业主,希望周末能与大自然接触,通过体验农耕作业享受田园生活。一家三口一致提出充分享受丰富的大自然环境的需求,以及房子做成不受地震影响的RC结构,临面大海有一个铺着木地板的阳台,并且全家人在一个巨大宽敞的空间内生活。首先,结构按照业主要求采用RC结构,为了切断左邻右舍的视线的同时,确保从海边至山体侧之间的视线与通风不受阻碍,特意采用了门型框架。屋顶铺了阻     

且听风吟

House C这栋‘泥巴屋’,更像个园艺小品。NAP事务所的设计师中村高淑娓娓而来,它建在一片质地均匀、手感细腻的土壤之上,当地的百姓几百年前就将这种土和成泥,捏出形,烧成瓷器。这种瓷泥颇具魅力,看着就很舒服。用手触摸起来,更有一种     

C住宅

住宅的几何形状、建筑表皮以及神奇的切割效果均会让你窥见内部的开口。空间、三维连续性。无立面图、平面图或剖面图。这是一个内置于实体物中的空间,外墙由黑色玄武岩厚片组成,并且像采矿场、矿山隧道和走廊地带中一样在上面装了渗透层,使其与外部世界相连通,渗透晨光、午后阳光和夜晚的星光。     

空间的情感 共生形态创意总部

<正>空间,它总是对建筑外观的一种延伸,这种延伸是物质的,当然有时也是情感的。我们常在不同的空间中工作、学习和思考,空间因我们而存在,也因我们而变幻。而对于我们而言,空间若即若离。有时我们希望得到空间的包裹与庇护;但有时我们也希望摆脱空间的束缚,任由思绪驰骋……共生形态是广州的一家年轻新锐的设计团队,团队新的创意总部坐落在美丽的     

C70、C80高性能混凝土的研究

介绍了C70、C80高性能混凝土(HPC)的配制和性能.C70、C80HPC主要是通过充分调动水泥、活性细掺合料和混凝土外加剂的协同作用而研制成的,其强度保证率为98%,低水胶比恰当、水泥和复合胶凝材料总量低.     

基于C1C2C3彩色不变特征的阴影检测与辐射恢复研究

阴影是遥感影像的基本特征之一,它将干扰图像匹配、图象变化检测或图像中信息的提取,而去除阴影则是遥感图像处理的难题。本文利用C1C2C3彩色不变特征中的C3将阴影与黑色区域分解开来;用方差作纹理滤波来提取阴影区边界;参考非阴影区相同地物像素亮度值来恢复阴影区像素的亮度值。并且用IKONOS城市区域影像进行了实验,实验表明该方法可真实再现阴影区地物特征,增加影像信息量,提高数据质量。     

台北C Space接待中心

正基地紧临25米的主要道路,在规划初期希望能留出友善的开放空间,所以将建筑主体退缩至基地底部,并利用曲型的量体围塑出都市中的虚空间,与来往的人群共享绿意盎然的草地,而接待中心成为空间中的端景。设计师希望利用圆形纸管单元挑战弧形空间在材料上的运用及可能     

C+Architects

正C+Architects是一个年轻的且具有国际背景和竞争力的建筑设计事务所,由主持建筑师程艳春与合伙人李楠于2014年在北京共同建立。事务所关注当下城市和乡村在发展、转型中所面临的种种问题。以建筑作为人与自然对话的媒介,通过独立思考和专业解答,努力实现人、建筑和环境三者间在新时代背景下的和谐共生。C+Architects实践的项目类型丰富多样,涉及城市更新、乡村复兴、各类学校、博物馆、美术馆、办公、酒店、住宅以及旧厂房改造等众多领域,并在不同的项目合作中做出了新的拓展和突破、提升了项目自身价值。除此以外,事务所积极参与了一系列和城市、乡村建设相关的艺术和公益活动。     

利用地方材料配制C70、C80高性能混凝土

经过对重庆市地方材料的选择,在对材料性能进行检测的基础上,通过混凝土试配和性能检验,使用重庆市地方材料,可以配制出高强、高性能混凝土。