美洲大蠊脱脂膏中总糖和还原糖含量的测定

目的:采用不同方法测定美洲大蠊脱脂膏中总糖含量,优选出测定美洲大蠊脱脂膏中总糖含量的方法,并建立其还原糖含量测定方法。方法:以葡萄糖为标准品,分别采用苯酚-硫酸法和硫酸-蒽酮法测定总糖含量,采用二硝基水杨酸法测定还原糖含量。结果:苯酚-硫酸法标准品浓度在0.004~0.100 mg/mL范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.7%,RSD为2.0%,R2=0.9996。硫酸-蒽酮法标准品浓度在0.02~0.20 mg/mL范围内有良好的线性关系,平均加样回收率为97.7%,RSD为2.6%,R2=0.9997。二硝基水杨酸法标准品浓度在0.004~0.040 mg/mL范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为96.8%,RSD为1.6%,R2=0.9996。结论:苯酚-硫酸法可用于脱脂膏中总糖含量的测定,二硝基水杨酸法可用于脱脂膏中还原糖含量的测定。     

杜梨叶片多糖的超声-微波协同萃取法提取

采用超声-微波协同萃取法和常规水浴提取杜梨叶片多糖,并用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量.结果表明,超声-微波协同萃取法提取杜梨叶片多糖效果更好,两种方法提取多糖的含量分别是21.52%和10.41%;葡萄糖浓度在25.15～100.6 μg/mL范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.38%.RSD为1.46%(n:5).超声-微波协同萃取法可作为杜梨叶片多糖提取的首选方法,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量的方法准确,重复性好.     

蒽酮-硫酸比色法测定南瓜籽多糖含量

采用蒽酮-硫酸法测定南瓜籽多糖含量并对其测定条件进行研究。结果表明最佳条件为:蒽酮浓度2.0 mg/m L,体积分数80%的硫酸,样品溶液与蒽酮-硫酸试剂加入量的体积比为1∶4,加热时间15 min,冷却后放置10 min、625 nm比色。平均加标回收率为97.3%,RSD 3.98%。测得样品中多糖含量为18.14%。结果表明,该方法适用于南瓜籽多糖含量的测定。     

蛹虫草发酵液活性多糖微量测定方法的建立与评价

为准确、快速检测蛹虫草发酵液中活性多糖的含量,以蒽酮-硫酸法为基础,将常规测试体系缩小10倍,系统研究水浴时间、显色剂质量浓度、葡萄糖质量浓度及其二者浓度比对测定结果的影响;建立并评价蛹虫草发酵液活性多糖微量测定方法。结果表明,常规法在波长624 nm处有最大吸收;微量测定体系波长选择为630nm,与常规法相比相对误差小于2%;在微量测定体系下沸水浴8 min,蒽酮显色剂质量浓度2 mg/m L,葡萄糖标准溶液质量浓度0.1~0.5 mg/m L时,测定结果与常规法测得的数值相关性达到0.999,表明可采用建立的微量法来代替常量法快速检测蛹虫草发酵液活性多糖的含量。     

固态发酵红曲中多糖含量测定方法的比较研究

建立苯酚-硫酸和蒽酮-硫酸显色测定固态发酵红曲中可溶性多糖含量的方法,并进行两种方法的比较研究。固态发酵红曲采用水提取红曲多糖,所得多糖提取液用淀粉酶去除淀粉、Sevag试剂去除蛋白质,并经醇沉得到红曲多糖,再分别考察苯酚-硫酸和蒽酮-硫酸法两种多糖含量测定方法的线性关系、重复性、稳定性、精密度、加样回收率等指标。苯酚-硫酸法在30μg~70μg范围内线性关系良好(R~2=0.998 1),蒽酮-硫酸法在40μg~120μg范围内线性关系良好(R~2=0.999 7)。两种方法学考察结果均较好,且测定红曲多糖的含量苯酚-硫酸法为2.51%,蒽酮-硫酸法为2.52%,两种方法结果相近。苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法均能用于测定固态发酵红曲多糖含量。     

蒽酮-硫酸比色法测定三角帆蚌软体组织多糖含量

目的 测定三角帆蚌动物多糖的含量,为三角帆蚌质量控制及资源开发提供科学依据.方法 以葡萄糖为对照品,采用硫酸-蒽酮比色法测定三角帆蚌多糖的含量.结果 在580 nm波长处有最大吸收峰,葡萄糖在0.02～0.10 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997,回收率100.02％,RSD为0.29％.结论 该方法快速准确重现性好,可用于三角帆蚌多糖的含量测定.     

4种藤茶多糖的检测方法比较

该研究对比探讨了苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、硫酸-紫外法、二硝基水杨酸法测定藤茶中多糖含量的准确性,利用单因素试验对4种方法的关键检测条件进行了优化,并对方法学的精密度、重复性、稳定性、加标回收率进行了比较,再用最佳实验条件检测藤茶样品中多糖的含量。结果表明,用于藤茶多糖测定的最佳方法为苯酚-硫酸法,其最适紫外检测波长为485.5 nm,以葡萄糖为标准在0.1~0.6 mg/mL范围内吸光度具有良好的线性关系。在0.5 mL藤茶粗多糖溶液（质量浓度为0.5 mg/mL）反应体系中,在500 μL浓硫酸、600 μL 5wt%苯酚溶液、60 ℃水浴温度和20 min水浴时间的最佳实验条件下,测得其多糖含量为59.43%,其精密度最高（RSD 0.18%）,稳定性最好（RSD 0.30%）。最后测得藤茶中幼嫩茎叶和粗老茎叶的多糖含量为9.87~10.47 mg/g和29.77~30.47 mg/g。     

蒽酮-硫酸法测定秋葵多糖条件的优化

优化蒽酮-硫酸法测定秋葵多糖的检测条件。考察蒽酮浓度、硫酸浓度、蒽酮硫酸加入量和水浴时间对测定效果的影响,利用正交优化试验确定蒽酮法测定秋葵多糖的最优测定条件。试验得最优测定条为蒽酮浓度3.0g·L~(-1)、硫酸浓度90%、蒽酮硫酸加入量10mL、显色时间10min,在此条件下达到最优效果,精密度RSD为0.73%。结果证明在此条件下,利用蒽酮-硫酸法测定秋葵多糖含量具有操作简便、精密度高可以用于秋葵多糖含量的测定。     

蒽酮-硫酸法测定大蒜多糖含量

为了建立一种快速、准确测定大蒜多糖含量方法,本研究采用蒽酮-硫酸法测定大蒜多糖含量并对其测定条件进行优化.结果表明:蒽酮-硫酸法测定大蒜多糖含量的精密度实验RSD值为2.10%、平均加样回收率为113%、RSD值为1.17%(n=3).用本方法测定大蒜籽中多糖含量为31.46%(W/W).本方法快速、准确、重复性好,完全能满足常规分析要求.     

油樟叶多糖抗油脂氧化作用的研究

采用蒽酮-硫酸法测定油樟叶总多糖含量,采用烘箱贮藏法测定油樟叶总多糖抗猪油和菜籽油氧化作用。结果表明,采用蒽酮-硫酸法测得油樟叶中总多糖含量为24.9 mg/g;油樟叶粗多糖对猪油和菜籽油均具有较好抗氧化作用,且呈浓度依赖性;0.20%添加量的油樟叶粗多糖对猪油的抗氧化作用与0.02%BHT相当;0.50%添加量的油樟叶多糖对菜籽油抗氧化作用相当于0.02%BHT;BHT对油樟叶多糖抗猪油和菜籽油氧化作用均有协同增效作用;油樟叶多糖抗猪油氧化作用强于菜籽油。油樟叶多糖具有抗油脂氧化作用,BHT对其有协同增效作用。     

低共熔溶剂提取的黄精多糖性质分析

为研究低共熔溶剂提取条件对黄精多糖性质及体外抗氧化活性的影响,以鸡头黄精为原料,对不同条件下低共熔溶剂提取得到的黄精多糖进行相对分子量、单糖组成等基本性质和体外抗氧化活性的测定。结果显示,相比于传统水提醇沉法,采用低共熔溶剂法提取黄精多糖,70 ℃时得率为18%,提高了36%,所得多糖的相对分子量变小且半乳糖含量升高;100 ℃提取的多糖相对分子量更小,且主要成分为葡萄糖。羟基自由基与DPPH自由基清除率、总抗氧化能力测定结果均表明,采用低共熔熔剂在70 ℃条件下提取的黄精多糖体外抗氧化能力明显高于传统水提醇沉法和低共熔溶剂法在100 ℃条件下提取的黄精多糖。当浓度为3.0 mg/mL时,采用低共熔熔剂在70 ℃提取的黄精多糖总抗氧化能力为4.5 U/mL,是水提多糖的4.3倍,是100 ℃条件提取黄精多糖的7.4倍。低共熔溶剂对黄精多糖具有降低分子量、提高抗氧化性等效果,研究结果可以为低共熔溶剂在多糖提取方面的应用提供参考。     

红枣多糖的提取工艺及药理活性研究

本研究以红枣多糖得率为指标,在单因素实验的基础上,利用 Design-Expert8.0设计试验,采用响应面分析对红枣多糖超声辅助提取的条件进行了优化,随后以DPPH自由基、羟自由基清除能力为指标评价多糖的抗氧化效果、以α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标证实红枣多糖具有降糖潜力,最后建立体外模型探究其降糖机制。首先对提取过程中主要影响多糖得率的水浴时间、料液比、超声时间和超声功率进行了单因素实验,同时利用响应面法进行优化分析。结果表明,红枣多糖最佳的提取条件为超声时间40 min,料液比1:20,超声功率80 W,水浴时间30 min,多糖得率达6.58%,与理论预测值6.71%一致。同时通过测定DPPH自由基、羟基自由基清除能力及还原力证实红枣多糖具有良好的抗氧化活性。此外,当多糖浓度达14 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为51.56%,而当浓度为4 mg/mL时对α-淀粉酶抑制率为28.43%,证实红枣多糖具有明显的降糖活性。在此基础上采用胰岛素抵抗HepG2细胞模型,以葡萄糖试剂盒测定及MTT法检测不同浓度的红枣多糖的葡萄糖消耗作用,结果表明当加药浓度为1.0 mg/mL时,细胞对葡萄糖的消耗量最大,GT/MTT达到模型组的154.2%。采用免疫印迹法（WB）检测胰岛素抵抗HepG2细胞中PI3K/Akt通路蛋白表达水平,确定红枣多糖可通过激活PI3K/Akt通路缓解胰岛素抵抗,发挥细胞保护作用。本研究对红枣多糖的提取方法进行优化,同时证实红枣多糖在体外具有抗氧化活性及降血糖活性,可作为一种潜在药食同源的抗氧化剂或功能性食品。     

乌贼墨汁多糖的提取及抗氧化作用研究

研究乌贼墨汁多糖的提取工艺和抗氧化能力。采用单因素试验和正交试验对乌贼墨汁多糖提取条件进行优化,同时通过乌贼墨汁多糖对清除DPPH自由基、 ·OH和Fe3＋还原能力的测定考察多糖的抗氧化能力。结果表明,最佳提取条件为加酶量4.5%、料水比1:15(g/mL)、温度50℃、时间4h、pH8,此条件下乌贼墨汁多糖的得率为3.63%。乌贼墨汁多糖具有一定的抗氧化能力,且在一定范围内,墨汁多糖的抗氧化能力与质量浓度呈线性正相关关系,其中对DPPH自由基和 ·OH的半数清除质量浓度分别为3.61mg/mL和8.06mg/mL。     

苦瓜多糖的抗氧化活性与降血糖作用相关性研究

采用DEAE-32及葡聚糖凝胶G-75柱层析获得了具有抗氧化活性的苦瓜多糖组分,通过饲喂四氧嘧啶构建小鼠糖尿病模型,探讨了苦瓜多糖的抗氧化活性与降血糖作用的相关性。结果表明,纯化后的苦瓜多糖在20mg/mL时对羟自由基(.OH)清除率可达82%。随着苦瓜多糖体内抗氧化活性增加,其对小鼠血糖升高抑制作用也显著增强,当多糖浓度达到250mg/kg时,降糖效果与格列本脲相同。     

兰州肉苁蓉多糖的组成分析及抗氧化活性

对兰州肉苁蓉多糖进行组成分析和抗氧化活性研究。采用沙生植物兰州肉苁蓉肉质茎鲜样,使用传统水提醇沉法进行兰州肉苁蓉粗多糖（CLP）的提取,利用DEAE-纤维素阴离子交换色谱柱法对粗多糖CLP进行洗脱,得到中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2。用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）和高效液相色谱法（HPLC）对其分子量和单糖组成进行测定,通过DPPH自由基清除实验和总抗氧化能力实验进行抗氧化活性测定。根据HPGPC对分子量测定得出兰州肉苁蓉多糖有多个洗脱峰,其多糖分子量主要分布在0~10 kDa之间,为不均一的小分子量杂多糖;经过分级得到的中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2的单糖组成差异明显,CLP-1中较明显的单糖及占比分别为:甘露糖2.78%、半乳糖醛酸4.07%、葡萄糖88.62%、半乳糖1.80%、阿拉伯糖2.39%;CLP-2中为:鼠李糖5.79%、半乳糖醛酸7.78%、葡萄糖9.99%、半乳糖13.30%。根据抗氧化实验结果分析,CLP-1的抗氧化效果最好,2.0 mg/mL浓度下对DPPH自由基清除能力高达91.73%,IC₅₀为0.383 mg/mL,且同一浓度下总抗氧化能力高于CLP和CLP-2。本文对兰州肉苁蓉多糖进行初步分析,为兰州肉苁蓉的进一步研究提供基础的数据支撑。     

小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25（g/mL）,超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80 ℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖（Purification of intracellular polysaccharide,SCIP）,主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC₅₀分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。     

不同栽培方式银耳多糖单糖组成分析及体外抗氧化活性比较

对代料和段木两种栽培方式的银耳子实体采用碱式提取其多糖,通过测定多糖的营养成分、单糖组成及体外抗氧化活性,比较两种栽培方式银耳品质的差别。结果表明,脱蛋白后段木和代料银耳多糖中蛋白质残留量分别2.65±0.05、0.45±0.06 mg/mL,两种银耳多糖的单糖都由甘露糖、葡萄糖、木糖和葡萄糖醛酸组成,代料银耳与段木银耳多糖中葡萄糖的质量比为13.62:2.43。不同银耳多糖的体外抗氧化能力均小于维生素C,在两种银耳DPPH清除率趋于稳定时,段木银耳多糖的DPPH自由基清除率比代料银耳高3%,而代料银耳羟自由基清除率比段木银耳高0.25%。     

黄梨渣多糖的提取、分离纯化和结构鉴定

研究黄梨渣中多糖提取、分离纯化的方法,并对其相对分子质量、单糖组成及其基本结构进行初步分析。结果表明：超声辅助提取法的最优条件为料液比1∶13（g/mL）、超声时间60?min、超声功率132?W、超声温度57?℃,此条件下的多糖提取量最高,为62.375?mg/g。Sevag法与木瓜蛋白酶联合去除蛋白的方法效果最佳,蛋白脱除率和多糖损失率分别为75%和24.71%,工艺操作简易、省时,最大限度去除蛋白质的同时可保证多糖得率。H2O2法脱色率最高达78.56%,且多糖损失率最低仅为25.86%。DEAE-52纤维素柱层析纯化后得到梨渣多糖的主要成分为LPB-C组。经测定,LPB-C组的黏均分子质量为8.47×104?g/mol,由甘露糖、葡萄糖、鼠李糖、木糖4?种单糖组成,物质的量比为3.3∶2.3∶10.6∶23.2,是一种含有β糖苷键的吡喃型多糖。该研究为今后黄梨渣的进一步开发和利用提供一定参考。     

栉江珧粗多糖提取工艺优化、组成分析及其抗氧化活性研究

在单因素实验的基础上,采用响应面法优化栉江珧粗多糖的水浸提取工艺,并对优化后提取得到的多糖的组成及其抗氧化活性进行分析。结果表明:栉江珧粗多糖提取的最佳工艺条件为提取温度94 ℃、提取时间215 min、液固比34:1 (mL/g),在此条件下粗多糖得率为18.37%。栉江珧粗多糖中多糖含量为94.39%、蛋白质含量为2.8%、糖醛酸含量为0.63%、硫酸基含量为0.08%;采用红外光谱扫描和气相色谱分析粗多糖的结构和单糖组成,结果表明该多糖由葡萄糖组成。此外该粗多糖的清除超氧自由基和羟基自由基以及金属螯合力的半抑制浓度分别为0.599、1.01和0.29 mg/mL。研究结果可以为栉江珧粗多糖活性研究和功能性产品的开发提供理论基础。     

甘薯渣多糖的提取工艺优化、结构鉴定及其功能活性研究

本研究采用超声波辅助热水浸提法提取甘薯渣粗多糖,经单因素实验和响应面优化提取工艺参数,并通过酶法脱蛋白、H2O2法脱色和Superose 1210/300 GL凝胶柱对多糖进行分离纯化,得到甘薯渣多糖.采用紫外光谱法、红外光谱法和高效液相色谱法对甘薯渣多糖进行结构鉴定,在此基础上进一步对甘薯渣多糖进行抗氧化活性测定以及...