大豆皂甙对肝癌H22小鼠的抗肿瘤研究

以肝癌H22荷瘤小鼠为模型,观察大豆皂甙级分SS Ⅱ对H22抑瘤率、细胞免疫以及抗氧化水平的影响.结果表明,大豆皂甙能显著抑制移植性肿瘤H22的生长,同时能显著提高迟发型超敏反应强度,促进T淋巴细胞增殖和NK细胞活性.抑制H22生长的同时能降低荷瘤小鼠肝中MDA含量,升高SOD活性.大豆皂甙增强H22荷瘤小鼠细胞免疫功能和提高机体抗氧化能力是其抑制肿瘤效应的机制.     

软骨多糖抑制H22肝癌细胞生长的作用及机制研究

探讨软骨多糖(CA)在体内抑制H22肝癌细胞生长的作用及其机制.以H22细胞腹水瘤模型为研究对象,设对照组﹑CA组两组,分别考察CA对各组小鼠的生活状态的影响.并且应用苏木素伊红(HE)染色、原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、流式细胞术(FCM)及免疫荧光法对肿瘤细胞的生长和凋亡进行研究.CA可以在一定程度上促进H22细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的生长,延长小鼠的生存时间.并且,随着用药时间的延长,CA组的P21表达增强,而CyclinD1表达水平降低.软骨多糖有促进肿瘤细胞凋亡的作用,是一种新型的抗癌药物,具有广泛的应用前景.     

龙须菜酸性多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

本文主要研究龙须菜酸性多糖(GLSPs)对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用。通过流式细胞术检测GLSPs对小鼠体内肿瘤细胞的细胞凋亡和细胞周期的影响;MTT法检测GLSPs对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性的影响;组织病理学方法检测GLSPs对荷瘤小鼠肿瘤和免疫器官(脾脏、胸腺)的影响。结果显示,GLSPs能够促进荷瘤小鼠体内H22肝癌细胞凋亡,显著抑制肿瘤生长。以200 mg/(kg?d)和600 mg/(kg?d)GLSPs灌胃管理荷瘤小鼠28 d,小鼠的平均体积抑瘤率分别为84.65%和94.58%。免疫学试验显示,GLSPs能够明显改善荷瘤小鼠脾脏肿大和胸腺萎缩的组织病变情况,增强荷瘤小鼠免疫器官的免疫功能,同时能够有效调节荷瘤小鼠白细胞和淋巴细胞的激增,显著增强荷瘤小鼠由ConA和LPS诱导的T、B细胞的增殖能力,提高脾NK细胞的杀伤活性,多方面提高荷瘤小鼠机体的免疫水平,提示GLSPs通过免疫调节作用达到体内抗肿瘤效果。     

Stereospecificity of Ginsenoside Rg3 in the Promotion of Cellular Immunity in Hepatoma H22‐Bearing Mice

Previous investigations have demonstrated that ginsenoside Rg3 (Rg3) has many actions including antitumor, antioxidative, and immunomodulatory effects. However, Rg3 exists as 2 stereoisomeric pairs, 20(S)‐ginsenoside Rg3 [20(S)‐Rg3] and 20(R)‐ginsenoside Rg3 [20(R)‐Rg3], which have disparate pharmacological actions because of their different chemical structures. In this study, the 2 epimers were compared for their effects on the growth of hepatocellular carcinoma H22 transplanted tumors and the immune function of H22‐bearing mice. In vivo efficacy study showed that the growth of H22 transplanted tumors was significantly inhibited when treated with 20(S)‐Rg3 and 20(R)‐Rg3 (P < 0.05), and the inhibition rate of tumor growth was 23.6% and 40.9%, respectively. Furthermore, the cellular immunity of H22‐bearing mice was remarkably enhanced after Rg3 treatment (P < 0.05), which may be due to stimulation of ConA‐induced lymphocyte proliferation and augmentation of Th1‐type cytokines interleukin‐2 and interferon‐γ levels in mice. Interestingly, the effects of 20(R)‐Rg3 were significantly greater than those of the S‐form (P < 0.05). Taken together, these results indicate that Rg3 inhibits H22 tumor growth in vivo at least partly by improving the host's cellular immunity in a stereospecific manner, and 20(R)‐Rg3 is more potent for treating cancers or other immune‐mediated diseases clinically.     

硒酸软骨多糖抑制荷瘤小鼠肝癌细胞Hca-F生长的初步研究

本文以615近交系小鼠右脚垫皮下注射肝癌细胞Hca-F建立实体瘤动物模型,设空白组、模型组、治疗组和预防组,检测小鼠抑瘤率、脾指数及胸腺指数,进行瘤组织的石蜡切片HE染色及免疫组化SP法检测肿瘤组织Fas和PCNA蛋白表达,研究了硒酸软骨多糖抑制荷瘤小鼠肝癌细胞Hca-F生长的作用。结果表明:硒酸软骨多糖能够明显的抑制肝癌细胞Hca-F的生长,且预防组的抑瘤率显著高于治疗组;通过比较模型组、治疗组和预防组的瘤组织的石蜡切片HE染色,治疗组和预防组的瘤组织大量坏死,且预防组的情况更好于治疗组;治疗组和预防组肿瘤组织的Fas蛋白阳性表达率较模型组Fas阳性表达率明显增高,而治疗组和预防组的PCNA蛋白阳性表达率较模型组明显降低。因此,硒酸软骨多糖一定程度上能够抑制肝癌细胞Hca-F的生长,且在一定程度上预防肝癌的发生,为开发治疗恶性肿瘤的药物提供了选择。     

猴头菌多糖对小鼠H22 肝癌移植瘤的抑制作用

目的：观察猴头菌多糖对小鼠移植性实体瘤H22的影响,并初步探讨其作用机制。方法：将H22瘤株接种于小鼠,制备移植性实体瘤模型。将70只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、猴头菌多糖低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg,以体质量计),正常组10只,其余各组12只,连续灌胃10d。阳性对照组以20mg/kg隔日腹腔注射环磷酰胺,末次给药后次日处死,计算肿瘤抑制率、胸腺及脾脏指数,检测荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平;测定白细胞数和白蛋白含量。结果：不同剂量的猴头菌多糖抑瘤率均高于26%,显著提高胸腺指数,提高血中TNF-α和IL-2的水平,降低实体瘤组织VEGF的水平;不同程度的提高白蛋白水平;猴头菌多糖组白细胞数与模型组比较无明显差异,显著高于阳性对照组。结论：猴头菌多糖对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其机制可能是通过调节免疫功能和抑制肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

大豆皂甙对H22荷瘤小鼠抗肿瘤研究

研究大豆皂甙对小鼠H22肝癌细胞的影响.以HB22荷瘤小鼠为模型,灌胃10、20、30 mg/kg·d的SS-Ⅱ20 d后均可显著抑制HB22B移植瘤的生长;摄入适量的SS-Ⅱ能降低HB22B荷瘤小鼠肝脏中MDA含量,并增强SOD活性;肿瘤组织切片病理学观察也表明SS-Ⅱ有明显的抗肿瘤生物学效应.结果表明,SS-Ⅱ能够抑制HB22B移植瘤的生长,提高B荷瘤小鼠抗氧化能力是其抗肿瘤的作用机制之一.     

冷溶性琼脂多糖抗肿瘤作用的研究

以琼脂中的冷溶性琼脂多糖为研究对象,探讨其体内抗肿瘤作用及机理。10～15℃下水浸提琼脂中的多糖,并对其进行了组分分析。小鼠腋下接种H22肝癌细胞建立动物模型,以1000mg/kg·d灌胃给药。通过瘤重、抑瘤率、脏器指数、免疫器官切片HE染色、脾细胞增殖能力、NK细胞杀伤活性测定、吞噬细胞吞噬能力测定等研究其抗肿瘤作用和机理。测得其总糖含量为76.74%,抑瘤率为77.81%,小鼠免疫系统得到保护,增强了抗肿瘤作用。冷溶性琼脂多糖有显著的抗肿瘤作用,在保护免疫系统,提高免疫力方面有很好的作用。     

PDTC antagonized polysaccharide-induced apoptosis in MCF-7 cells through a caspase-8 mediated Fas pathway

Cartilage polysaccharide (PS) was extracted from porcine cartilage to investigate its anti-tumor effect. In this study, we showed that PS induced apoptosis in MCF-7 breast cancer cells by activating the caspase-8 mediated Fas signaling pathway. The PS inhibited MCF-7 cell proliferation in a dose-dependent and time-dependent manner, and had no toxic effect on normal cells such as NIH-3T3 cells. An increase of Fas protein expression was first located on the nuclear membrane and then on the outside membrane. Cleaved caspase-8 was activated after PS treatment. NF-κB activation was not involved in the PS induced apoptosis, but the NF-κB inhibitor PDTC may act as a PS antagonist to reduce the apoptosis rate and Fas protein expression in PS-induced apoptosis in MCF-7 cells.     

红毛藻多糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP）对H2O2诱导的人结肠腺癌（Caco-2）细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢（H2O2）诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：BFP可明显提高H2O2诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。     

胡萝卜素降解物诱导小鼠肝癌细胞H22产生免疫活性的研究

本文研究了以胡萝卜素降解物作为免疫诱导剂的H22全细胞免疫物对小鼠H22肝癌的抑制作用,通过用胡萝卜素降解物与H22细胞共培养后对小鼠进行免疫,同时设立模型组和空白组,试验期间,测定小鼠生长曲线、脏器指数、抑瘤率、巨噬细胞吞噬能力、NK细胞杀伤活性、免疫器官HE染色等.结果表明:胡萝卜素降解物对小鼠没有毒性作用,免疫组小鼠抑瘤率为93％、巨噬细胞吞噬指数和廓清指数分别为5.42±0.19、0.39±0.002,NK细胞杀伤活性为0.93,总体各个指标均与模型组小鼠呈显著性差异,说明H22全细胞免疫物能够增强小鼠的免疫能力,有效保护免疫器官.     

麒麟菜多糖体内抗肿瘤机理研究

本文对麒麟菜多糖抑制小鼠体内H22肝癌细胞增殖的作用机理进行了研究。构建动物肿瘤模型,观察实验期内各组小鼠肿瘤体积及脏器指数的变化,并通过Elisa实验确定各组小鼠血清中肿瘤特异性抗体含量,流式细胞术检测小鼠胸腺、脾脏、外周血及实体肿瘤内T细胞亚群比例,HE染色和PI单染分析小鼠实体肿瘤内细胞状态。结果表明,灌喂600 mg/(kg?d)麒麟菜多糖可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,有效保护其胸腺和脾脏,并可显著增强胸腺发育分化CD4~+T细胞的能力(p0.05),提高小鼠血液中肿瘤特异性抗体的含量(p0.05)和T细胞亚群比例(p0.05);模型组和多糖组小鼠实体肿瘤浸润淋巴细胞中均主要是CD8~+T细胞,但多糖组小鼠实体瘤内细胞凋亡率显著升高(p0.05)。因此初步断定麒麟菜多糖可显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫水平,使CD8~+T细胞在CD4~+T细胞和肿瘤特异性抗体的辅助下有效抑制H22细胞体内增殖。     

玛咖生物碱对人肝癌细胞Bel-7402和H22荷瘤小鼠的抑制作用

探究玛咖生物碱对Bel-7402细胞体外抗肝癌活性及体内抗H22肝癌活性的影响。通过0.5%的盐酸95%乙醇溶液提取获得玛咖生物碱粗提物,并通过进一步的酸溶碱沉方法纯化获得玛咖生物碱,通过MTT法测定不同剂量玛咖生物碱对Bel-7402细胞抑制率的影响,并进一步通过体内抗肝癌H22荷瘤小鼠试验,考察不同剂量玛咖生物碱体内抗肝癌活性影响。细胞实验表明,不同剂量组玛咖生物碱对Bel-7402细胞有一定的抗肝癌活性,其抗癌活性高低顺序为:玛咖生物碱高剂量组玛咖生物碱中剂量组玛咖生物碱低剂量组。体内抗肝癌试验表明,玛咖生物碱高、中剂量组具有显著的抗肝癌活性。可见,玛咖生物碱具有一定的抗肝癌活性,这为玛咖生物碱活性的研究提供新的方向。     

熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及肠道细菌群落结构多样性的影响

研究熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及肠道细菌的影响。皮下接种H22肝癌细胞构建移植瘤小鼠模型,设正常组、模型组、阳性对照组（环磷酰胺）和熊果酸组（低、中、高剂量）,连续给药3周后,计算抑瘤率和肝脾指数,检测血清T淋巴细胞亚群、白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度,采用高通量测序技术分析熊果酸对H22荷瘤肠道细菌群落结构多样性的影响。结果显示,与模型组相比,熊果酸各剂量组均能显著减少移植瘤质量（P<0.05）,其中熊果酸中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠血清中T细胞亚群、IL-2和TNF-α的含量（P<0.05）。主成分分析（Principal Component Analysis,PCA）显示,与正常组比较,模型组和熊果酸低剂量组小鼠肠道细菌相似性差异显著（P<0.05）,而熊果酸中剂量组和高剂量组小鼠肠道细菌相似性差异不显著（P>0.05）。熊果酸各剂量组肠道细菌在门水平和科水平的比例和分布均比模型组更接近正常组。与模型组比较,熊果酸小鼠肠道Akkermansia和Lactobacillus丰度显著增加（P<0.05）,而Muribaculum显著减少（P<0.05）。表明熊果酸可抑制肿瘤生长,增强H22荷瘤小鼠免疫力,对肿瘤小鼠肠道细菌菌群紊乱具有一定恢复作用。     

猪软骨多糖对滚瓶培养MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其差异表达蛋白的初步研究

本文研究了人乳腺癌细胞MCF-7在滚瓶培养形成大量细胞聚集体时,猪软骨多糖对MCF-7的诱导凋亡作用,并初步研究了其凋亡前后的差异表达蛋白。采用Hoechst 33342/PI染色于共聚焦显微镜下观察细胞的凋亡特征;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;并提取MCF-7细胞的全蛋白,利用二维凝胶电泳(2-DE)结合MALDI-TOF质谱技术检测差异表达蛋白。结果表明:MCF-7细胞在猪软骨多糖作用后出现典型的凋亡现象,通过流式细胞仪检测发现在猪软骨多糖作用12 h,24 h的MCF-7凋亡率分别为20.23%和44.7%;同时发现MCF-7细胞在猪软骨多糖作用后,细胞周期被阻滞在了S期;初步鉴定出2个差异表达蛋白,其中一个为肌动蛋白actin,另一个为抗氧化类蛋白PRDX6。     

软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠免疫功能的初步研究

目的:研究软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠的免疫功能及灭活S180细胞对小鼠免疫功能的影响,分析其免疫机制.方法:用MTT法测定软骨多糖治愈的S180腹水瘤小鼠的血清、脾细胞及胸腺细胞对S180细胞和MCF-7乳腺癌细胞的生长影响,并以灭活的S180细胞对健康小鼠免疫,观察其对小鼠免疫功能的影响.结果:软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠的血清、脾细胞及胸腺细胞对肿瘤生长均有一定抑制效果.其中在不含胎牛血清的RPMI 1640培养基培养下,治愈小鼠10 %的血清对S180细胞和MCF-7乳腺癌细胞的抑制率分别为64.09 %、73.48 %,而其20 %血清对两种肿瘤细胞的抑制率则分别为88.70 %、96.80 %.结论:软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠对肿瘤有一定的免疫能力.     

藻蓝蛋白对非小细胞肺癌H1299生长、迁移和凋亡的功能影响

藻蓝蛋白(C-phycocyanin,C-PC)是一种从顿顶螺旋藻中提取的天然水溶性无毒的活性蛋白。采用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验等探究不同浓度的藻蓝蛋白对人类非小细胞肺癌H1299细胞活力、凋亡、迁移等的影响。结果表明:藻蓝蛋白能显著(p<0.05)降低H1299细胞存活率,通过下调周期蛋白cyclinA、CDK2,上调周期抑制因子P21使细胞周期阻滞在S期;藻蓝蛋白处理使细胞形态发生改变,同时通过调控bad、bax、bcl-xL、bcl-2等凋亡相关基因的表达促进细胞凋亡;体外划痕实验表明藻蓝蛋白通过调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)抑制细胞迁移。研究结果表明藻蓝蛋白能够通过细胞周期S期阻滞,调控细胞周期、凋亡和迁移相关基因的表达而抑制非小细胞肺癌H1299细胞的生长和迁移,进而诱导细胞凋亡,为进一步开发功能食品奠定坚实的理论基础。     

Diosmin induces cell apoptosis through protein phosphatase 2A activation in HA22T human hepatocellular carcinoma cells and blocks tumour growth in xenografted nude mice

This study investigated the diosmin effect on HA22T human hepatocellular carcinoma cells in vitro and in an invivo mouse xenograft model. HA22T cells were treated with different concentrations of diosmin and analysed with Western blot analysis, TUNEL, JC-1 staining and siRNA transfection assays. Additionally, the HA22T-implanted xenograft nude mice model was applied to confirm the cellular effects. Diosmin induced apoptosis, up-regulated death receptor apoptotic pathway markers as well as mitochondrial proteins. Pro-survival Bcl-2 family proteins were inhibited and the pro-apoptotic ones were increased. Protein phosphatase 2A (PP2A) siRNA or okadaic acid reversed the diosmin effects, confirming the role of PP2A in diosmin-induced HA22T apoptosis. The HA22T-implanted nude mice model revealed that diosmin inhibited tumour cell proliferation and enhanced tumour cell apoptosis. All our experimental evidence indicates that diosmin significantly promotes HA22T apoptosis and reduces tumour sizes in xenograft nude mice via PP2A in a dose-dependent manner.     

麒麟菜多糖对H22肝癌移植瘤的抑制作用研究

以常温稀碱法提取的麒麟菜多糖(Eucheuma gelatinae polysaccharides,EGP)饲喂H22荷瘤小鼠,探讨其对小鼠移植性实体瘤的抑制作用。实验考察了肿瘤抑制率和免疫器官指数,分析荷瘤小鼠的脾淋巴细胞(T淋巴细胞与B淋巴细胞)增殖能力、脾NK细胞杀伤活性和腹腔巨噬细胞吞噬能力等免疫指标,并对外周血淋巴细胞亚群进行流式(FCM)检测。研究结果表明,以麒麟菜多糖灌胃荷瘤小鼠能够显著抑制小鼠体内肿瘤的生长,至实验期结束时,麒麟菜多糖低剂量组[300 mg/(kg·d)]及高剂量组[600mg/(kg·d)]的抑瘤率分别达到31.17%及59.67%。与模型组相比,麒麟菜多糖还能够显著增强荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和NK细胞的杀伤活性,并显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬活性。此外,麒麟菜多糖高剂量组能显著提高荷瘤小鼠CD3+和CD8+细胞比例(p0.05)。麒麟菜多糖能够改善荷瘤小鼠机体的免疫水平,具有显著的抗肿瘤作用。     

酵母免疫多糖对黄河鲤鱼生长和非特异性免疫力的影响

在黄河鲤鱼基础饲料中添加酵母免疫多糖,探讨对其生长和非特异性免疫力的影响.结果表明:添加0.20%、0.30%和0.40%酵母免疫多糖组生长性能显著高于对照组.试验组黄河鲤鱼血液白细胞吞噬活性和血清溶茵酶活性显著高于对照组,0.05%、0.10%和0.20%三组间溶茵酶活性差异不显著,0.30%和0.40%两组间溶茵酶活性差异不显著,0.05%和0.10%两组间白细胞吞噬活性差异不显著,0.20%、0.30%和0.4%三组间白细胞吞噬活性差异不显著.酵母免疫多糖的适宜添加水平为0.30%.