正交试验法优选复方金钗石斛保健酒渗漉工艺

该试验以金钗石斛、人参、蒙古黄芪、五味子、茯苓为原料制作保健酒,以总黄酮含量、石斛碱含量、浸膏得率和感官评分的综合评价为考察指标,通过单因素及正交试验筛选复方金钗石斛保健酒的最佳渗漉工艺。结果表明,复方金钗石斛保健酒最佳渗漉工艺为加入9倍52%vol白酒浸润18 h,以5 mL/（min·kg）流速渗漉。在此优化条件下,渗漉液石斛碱含量、总黄酮含量、浸膏得率及感官评分别为183.37 mg/L、219.74 mg/L、24.81%、75分。该方法可作为复方金钗石斛保健酒的提取工艺。     

金钗石斛功能性成分及保健食品开发研究现状

金钗石斛是名贵的中药,为兰科石斛属多年生附生草本植物,含有丰富的生物碱、酚类、多糖类等功能性成分,现已成为现代医疗、保健食品等领域的研究热点。本文综述了金钗石斛功能性成分的提取、检测、结构鉴定及功能作用等研究进展,以及石斛类保健食品的开发现状和深度开发的前景。     

3种石斛药材中奇数碳脂肪酸组成差异

目的:研究3种石斛奇数碳脂肪酸(OCFA)成分及其含量。方法:采用气相色谱—质谱法(GC-MS)分析不同地区的金钗石斛、铁皮石斛、鼓槌石斛3种石斛的脂肪酸组成。结果:OCFA占细胞中总脂肪酸的8%,占总脂肪酸的相对丰度百分比从高到低依次为C_15:0、C_17:0、C_23:0、C_19:0、C_21:0。金钗石斛和铁皮石斛中C_15:0和C_17:0相对丰度的比值(C_15:0/C_17:0)分别<1.6,>1.8,表明含有系列OCFA是兰科植物的共性。结论:植物中OCFA的存在可能与其药物活性具有相关性。     

金钗石斛保健酒增强机体免疫力的筛选研究

优选金钗石斛保健酒的最佳制备工艺,筛选增强机体免疫力的最佳配制样品。以3种制备工艺配制金钗石斛酒样品A、B、C,考察收膏率、指标成分含量和感官3个指标,优选其最佳制备工艺。通过测定小鼠体重、免疫器官重量和血清溶血素,筛选增强机体免疫力的最佳配制样品。结果表明,3种方法制得的A、B和C保健酒收膏率分别为32.3%、34.4%和32.1%,石斛碱含量分别为0.018 mg/m L、0.069 mg/m L和0.076 mg/m L,总皂苷含量分别为0.39 mg/m L、0.33 mg/m L和0.23 mg/m L。样品A、B、C低剂量(1.16 g生药/kg)、高剂量(2.32 g生药/kg)组均能升高免疫器官脾与胸腺指数,提高血清溶血素水平,对小鼠的免疫功能具有显著的调节作用(P0.05),其中以样品B作用最强(P0.01)。金钗石斛保健酒能增强机体免疫力,样品B为其最佳配制样品。     

体外模拟消化液对金钗石斛的作用

采用体外模拟消化液,分别对金钗石斛超微/普通粉、水/醇提物、粗石斛碱和多糖进行实验,探究实 验组模拟消化液中化学成分的变化。实验测定石斛碱、多糖溶出率;运用高效液相色谱、3,5-二硝基水杨酸法 和阴离子色谱对多糖消化产物的分子质量、还原糖质量浓度和单糖组成进行分析;采用液相色谱-质谱联用仪对 多酚类化合物成分进行分析。结果表明：消化组中石斛碱溶出率不断增大,超微粉肠道消化液组溶出率最高达 （21.46±0.52）%,粗石斛碱消化液最低为（8.74±0.50）%;水提物组多糖溶出率高,在口腔和胃消化液中,超 微粉多糖溶出率比普通粉高;肠道消化液中的情况与之相反;多糖在消化过程中分子质量降低,还原糖质量浓度上 升,无单糖检出;多酚类物质的质量浓度普遍在模拟胃液中升高,在模拟肠液中降低。     

金钗石斛多糖对小鼠抗疲劳能力的作用

目的：研究金钗石斛水溶性、碱溶性和酸溶性多糖对小鼠抗疲劳能力的影响。方法：对照组每天以蒸馏水灌胃,实验组以500mg/(kg·d)金钗石斛多糖灌胃,连续4周后进行强迫性游泳实验,测定小鼠游泳时间和游泳后甘油三酯、血糖、血乳酸、血氨和糖原等生化指标变化。结果：与蒸馏水相比,金钗石斛多糖,特别是碱溶性多糖可显著廷长游泳时间,提高血糖和甘油三酯含量并降低血乳酸和血氨含量,降低游泳后肝糖原及肌糖原的消耗。结论：金钗石斛多糖通过增加脂肪利用以及延缓乳酸和氨的积累达到抗疲劳作用。     

微波辅助提取金钗石斛多糖及体外抗氧化研究

采用微波辅助提取金钗石斛多糖,通过单因素正交试验法考察料液比、提取功率、粉碎程度和辐射时间对金钗石斛多糖提取率的影响,确定其最佳提取条件;通过金钗石斛多糖对ABTS+自由基清除作用测定其体外抗氧化活性。结果表明:微波辅助提取金钗石斛多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1∶20(g/m L),提取功率为400 W,粉碎程度60目,辐射时间为30 min,在此条件下多糖得率为3.16%。金钗石斛精制多糖对ABTS+自由基的清除率可达81.9%,表明其具有良好体外抗氧化作用。     

铁皮石斛抗肿瘤活性成分的探究

为了探究铁皮石斛中的抗肿瘤活性成分,本研究采用乙酸乙酯、95%乙醇、水三种不同极性的溶剂依次对铁皮石斛茎的干燥粉末进行了提取,初步得到了三种提取物;初提取物在MTT细胞增殖检测结果的指引下,结合硅胶柱层析、TLC薄层分析和凝胶柱层析进行分离纯化,最终筛选出具有强抗肿瘤活性的组分。结果显示乙酸乙酯提取物经分离纯化后得到了最强抗肿瘤活性成分,其对肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901和乳腺癌细胞MCF-7的增殖都有明显的抑制效果,半抑制浓度IC50依次为:0.45μg/mL、0.36μg/mL、0.34μg/mL,经波谱学数据鉴定,该化合物为金钗石斛菲醌。金钗石斛菲醌首次分离自金钗石斛,其抗肿瘤功效已经得到证实,并引起了广泛的关注,本研究成果对以铁皮石斛为原料的药品和保健食品的开发具有重要的指导意义。     

液相色谱-串联质谱法测定植物来源保健食品中去甲乌药碱

目的 建立一种植物来源保健食品中去甲乌药碱的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法 样品经甲醇溶液超声提取,采用0.1%甲酸(A)和甲醇(B)作为流动相进行梯度洗脱。质谱(ESI+)采用多离子监测模式(MRM)。结果 去甲乌药碱在上述色谱条件下能完全分离;去甲乌药碱线性范围为5.34~106.8 ng/mL;平均回收率91.4~99.2%,RSD＜3.0%。结论 该方法操作简便,能测定植物来源保健食品中去甲乌药碱,精密度和回收率高,重复性好,结果符合要求。     

金钗石斛多糖提取工艺研究

以金钗石斛为原料,经粉碎、脱脂、打浆和超声波破壁等处理后采取水提取法,通过单因素和正交试验试验,研究了水提温度、超声波时间、水提时间、料液比对超声辅助提取金钗石斛中多糖的影响。结果表明,影响金钗石斛多糖提取因素的主次关系为:料液比超声波时间水提温度水提时间,金钗石斛多糖提取的最佳条件为:料液比1∶25(g/mL)、超声波时间40min、水提时间120min、水提温度80℃。     

大孔树脂对金钗石斛粗多糖脱色的研究

选取金钗石斛粗多糖脱色率和保留率为评价指标,采用5种大孔树脂AB-8、LSA700、LSD762、D101和D900对金钗石斛粗多糖色素脱除进行比较,得出D900树脂对金钗石斛粗多糖的脱色效果最好;应用响应面法优化金钗石斛粗多糖的脱色条件,发现脱色温度对金钗石斛粗多糖脱色率的影响最大,脱色时间与温度、树脂用量的交互影响对脱色率具有显著影响。金钗石斛脱色的最佳工艺为:脱色时间3.7 h,温度40℃,树脂用量0.33 g/m L。在上述条件下金钗石斛多糖脱色率及保留率分别为82.7%和76.5%。     

GC-MS/MS测定不同食品中氨基甲酸甲酯及氨基甲酸乙酯的含量

建立内标法同时测定固体半固体及液体基质中氨基甲酸甲酯及氨基甲酸乙酯含量的气相-质谱/质谱(Gaschromatography-Mass/Mass,GC-MS/MS)方法。以D5-氨基甲酸乙酯为内标,采用GC-MS/MS多反应监测模式(Multiple Reaction Monitoring,MRM模式);毛细管色谱柱:DB-INNOWAX,30 m×0.25 mm(内径)×0.25μm(膜厚);进样方式:脉冲不分流;进样量:1μL;柱温:80℃保持2 min,以10℃/min至180℃保持3 min,240℃后运行6 min;流速1.0 mL/min。氨基甲酸甲酯在20 ng/mL~1 000 ng/mL,氨基甲酸乙酯在10 ng/mL~500 ng/mL范围内线性关系良好。相关系数分别为0.998 7和0.999 9。液体基质平均回收率为78.4%及100.20%。固体及半固体基质平均回收率为62.48%及100.49%,检出限分别为6μg/kg及3μg/kg。本方法灵敏度高,专属性强,稳定性好,准确度高。     

LC-MS/MS法同时测定刺五加制剂中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的含量

目的建立一种液相色谱-串联四级杆质谱(LC-MS/MS)法同时测定两种刺五加制剂中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的含量。方法 LC采用内标法,MS采用电喷雾离子源,多反应监测模式,正负离子同时检测。3种被测成分的监测离子对分别为395.0/232.0(紫丁香苷),765.2/765.2(刺五加苷E),223.0/162.0(异嗪皮啶),内标化合物的监测离子对为431.0/311.1(牡荆苷)。色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为甲醇,流动相B为0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.6 mL/min,分析时间12 min。结果刺五加注射液、刺五加片中紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶的线性范围分别为6.00~2000 ng/mL(r=0.9979),6.00~2000 ng/mL(r=0.9951),2.00~600 ng/mL(r=0.9931);刺五加注射液的平均加样回收率(n=9)分别为104.13%,95.16%,102.64%;刺五加片的平均加样回收率(n=9)分别为102.51%,99.60%,99.15%。结论采用LC-MS/MS方法测定刺五加注射液、刺五加片中3个有效成分含量,该方法快速、简便、灵敏度高、专属性好,可作为刺五加制剂的一种质量控制评价方法。     

石斛粉葛咀嚼片的制备及其抗氧化活性

以石斛和粉葛为原料,经超微粉碎、配料、湿法造粒、干燥、整粒、压片等工序制成咀嚼片。考察了原料比、辅料比、乙醇浓度、60%乙醇添加量、硬脂酸镁添加量对咀嚼片感官品质的影响,在单因素实验基础上,采用L₁₆(45)正交试验优化咀嚼片配方;以DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力、总抗氧化能力为模型评价咀嚼片抗氧化活性。结果表明,石斛粉葛咀嚼片最佳工艺配方为:原料中石斛:粉葛为1:4,原辅料比[(石斛+粉葛):辅料(玉米淀粉+菊粉+木糖醇+甘露醇)]为1:1.5,辅料配比(玉米淀粉:菊粉:木糖醇:甘露醇)为4:3:1:1,润湿剂60%乙醇的添加量为0.4 mL/g,硬脂酸镁1.5%,咀嚼片感官评分为93.7±0.03分。石斛粉葛咀嚼片水提液、石斛粉葛咀嚼片醇提液与抗坏血酸(V_C)的清除DPPH·的IC₅₀值分别为(3.067±0.1095)、(3.512±0.0945)、(0.06337±0.0286) mg/mL;石斛粉葛咀嚼片水提液、石斛粉葛咀嚼片醇提液与V_C的清除ABTS+·的IC₅₀值分别为(5.529±0.8175)、(5.380±0.7915)、(0.2772±0.0345) mg/mL;石斛粉葛咀嚼片水提液、醇提液、V_C在浓度为2 mg/mL时,总抗氧化能力分别为0.258、0.188、0.494。石斛粉葛咀嚼片有一定的抗氧化活性,石斛与粉葛有协同抗氧化作用。     

铁皮石斛配制酒制备工艺优化及其体外抗氧化活性研究

利用超声波细胞破碎技术和响应面法研究铁皮石斛配制酒（DBL）的最佳制备工艺,并对DBL及其提取物（DBLE）的抗氧化活性进行评价。结果表明,DBL的最佳制备工艺条件为超声时间2 h,超声功率504 W,石斛粉添加量10 g/100 mL,酒精度51%vol。在此优化条件下,DBL中的石斛多糖、石斛多酚、石斛总黄酮和石斛碱含量分别为20.71 mg/mL、391.8 μg/mL、205.9 μg/mL和11.5 μg/mL,功效成分加权得分为80.6分,感官得分为81.4分。体外抗氧化试验结果显示,DBL和DBLE对DPPH、ABTS自由基的半抑制浓度（IC50）值分别为944 μg/mL和1 239 μg/mL、240 μg/mL和642 μg/mL;DBL对DPPH、ABTS自由基清除率及铁氰化钾还原能力（A700 nm值）分别为84.15%、94.05%和1.37。结果表明石斛酒具有一定的体外抗氧化活性。     

铁皮石斛泡腾片的制备及其抗氧化活性研究

以铁皮石斛为原料,蓝莓提取物为辅料,对铁皮石斛泡腾片的制备工艺及其抗氧化活性进行研究。铁皮石斛泡腾片采用湿法制粒,以外观状态、崩解时限、pH值及溶解后口感为指标,通过单因素及正交实验确定铁皮石斛泡腾片的配方,选出最优组合:铁皮石斛提取物速溶粉10%(质量分数,下同),蓝莓提取物5%,崩解剂51%(柠檬酸33%,小苏打18%),PVP(聚乙烯吡咯烷酮)K30 2.5%,甜菊糖2%,麦芽糊精29.5%。该工艺下所得铁皮石斛泡腾片呈弱酸性,可在3 min内崩解,发泡量为14.5 mL(一片溶于20℃±5℃的100 mL水中),溶解后溶液呈淡粉紫色,pH值为4.6。铁皮石斛泡腾片中铁皮石斛多糖含量为0.3843 g/片,总抗氧化能力及抑制羟自由基能力、DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)半数清除率(IC_(50))分别为206.4、139.7U/mL及10mg/mL,同等条件下测定的Trolox(水溶性维生素)标准品的总抗氧化能力及抑制羟自由基能力、DPPH半数清除率(IC_(50))分别为507.3、391.23 U/mL及25.01μg/mL。     

超高压提取铁皮石斛多糖工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化超高压提取铁皮石斛多糖工艺条件,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法:以铁皮石斛干粉为原料,优化超高压技术提取铁皮石斛多糖工艺条件,分析传统热水浸提法、超高压法两种提取方法下的铁皮石斛多糖的相对分子量与单糖组成,并比较其体外抗氧化活性。结果:超高压提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为超高压压力200 MPa,料液比1:25 (g/mL),保压时间5 min,此时铁皮石斛多糖得率为33.3%,比传统热水浸提法提高了128%,且超高压法提取的多糖蛋白含量和相对分子量下降,甘露糖含量提高,对DPPH自由基的清除能力提高。结论:超高压提取的铁皮石斛多糖得率高,体外抗氧化活性较好。     

超高效液相色谱-四极杆/飞行时间高分辨质谱测定保健食品及其原料中洛伐他汀及类似物的含量

目的利用超高效液相色谱-四极杆/飞行时间高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole/time-of-flight high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/TOF HRMS),建立同时鉴别和定量测定保健食品及其原料中的洛伐他汀及其类似物的分析方法。方法样品用Agilent Eclipse Plus C_(18)(50mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式离子化,全扫描模式检测。结果当称样量为1 g时,酸式洛伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、辛伐他汀、去羟基洛伐他汀和洛伐他汀羟酸钠盐的检出限分别为40、25、25、25、25和50 ng/g;洛伐他汀、美伐他汀、辛伐他汀、去羟基洛伐他汀在25~200μg/L范围、洛伐他汀羟酸钠盐在100~800μg/L范围内线性关系良好(R≥0.99);5种成分在保健食品及原料中均有较好的回收率和稳定性。结论该方法简便、快速、灵敏、准确,适合于保健食品及原料中的洛伐他汀及其类似物的鉴别和定量测定。     

高效液相色谱-质谱联用测定婴幼儿配方食品中叶酸的含量

建立了婴幼儿配方食品中叶酸含量的高效液相色谱-质谱联用测定方法。采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)进行分离,以5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量20μL,柱后分流比为1∶3,质谱采用多离子反应监测(MRM)方式进行检测,正离子模式,定量离子为m/z442.0→295.2。叶酸在0.001~2.500μg/mL的范围内线性关系良好(r=0.9989),该方法相对标准偏差(RSD)为2.6%~6.0%,回收率为83.9%~104.0%,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为1.0 ng/mL、3.3 ng/mL。该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,可用于婴幼儿配方食品中叶酸的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定保健食品中非法添加的18种镇静催眠类药物

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定保健食品中非法添加的18种镇静催眠类药物的分析方法。方法样品经甲醇超声提取,采用C18(2.1mm×50 mm, 1.8μm)色谱柱, 0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL/min;质谱检测器为ESI源(正离子)多反应监测模式进行定性、定量检测。结果 18种被测组分在5～100 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。5、20、50ng/mL3种添加浓度的平均回收率在77.6%～98.5%之间,相对标准偏差为1.1%～5.5%。方法学检出限均低于0.2μg/g。结论该方法专属性强、灵敏度高、操作简便、测定快速,可用于保健食品中非法添加的18种镇静催眠类药物的质量监控。