MALDI质谱成像技术在非小细胞肺

采用基质辅助激光解吸电离时间飞行质谱成像技术分析组织切片已在基础与临床医学研究中迅速发展。质谱成像技术通过对冰冻组织切片表面的质谱扫描可以快速直观地得到组织中的分子,如蛋白、多肽等分布信息。采用质谱成像技术对人的非小细胞肺癌组织切片及癌旁组织切片进行研究,对基质覆盖方式和质谱条件进行了优化,初步建立了以质谱成像法寻找非小细胞肺癌中生物标志物的方法。在-20℃制备10μm的冰冻组织切片,用15g.L-1的α-腈基-4-羟基肉桂酸(含0.1%三氟乙酸)的50%乙腈水溶液,以气流辅助喷洒的方式覆盖在组织切片表面,循环10次,置于干燥器中待干后,用正离子反射式和线性模式分别进行质谱扫描。通过对来自3位患者的10对肺癌/癌旁组织研究,结果表明,癌组织中有m/z3000~3500范围内的特征性簇峰出现。质谱成像技术用于非小细胞肺癌能够直观地在分子水平上反映出癌组织和正常组织间的差异,有望进一步提高肺癌临床诊断的准确度。     

MALDI-TOF MS磷脂质组学快速分析三文鱼肌肉组织

建立了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速分析三文鱼肌肉组织磷脂质组学的方法。以非自然磷脂酰胆碱DMPC(14∶0/14∶0)和磷脂酰乙醇胺DPPE(15∶0/15∶0)为标准品,分析其在正离子模式下的主要分子峰与干扰峰,并进行方法学验证。实验结果表明,各化合物平均加标回收率在74%~83%之间,相对标准偏差小于7%,日内和日间精密度的相对标准偏差均低于8.5%。将三文鱼磷脂提取物进样分析,共鉴定出28种磷脂分子,其中m/z806.40([PC38:6+H]~+和[PE38:4+K]~+)信号最强。三文鱼中多不饱和磷脂种类丰富,如m/z 824.38([PC38:8+Na]~+和[PE42:5+H]~+),m/z832.41([PC40:7+H]~+,[PC38:4+Na]~+和[PE40:5+H]~+),部分磷脂分子的脂肪酸链达到了满不饱和,如[PC42:11+H]~+,其sn-1和sn-2上两条脂肪酸链分别为二十碳五烯酸链(EPA-)和二十二碳六烯酸链(DHA-)。该方法稳定可靠,可用于鉴定三文鱼肌肉组织中的磷脂分子结构,并从脂质组学角度为三文鱼营养评价提供理论依据。     

利用MALDI-TOF质谱技术研究胰岛素水解和酶切过程

利用海牛卵制备的模拟微量混合内切酶体系，用基质辅助激光解吸电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术研究了胰岛素在不同酸碱度和还原条件下的水解和酶解过程。实验结果为研制具有高生物利用度的胰岛素纳米粒口服制剂及选择具有适当耐酸碱及还原特性的包装材料提供了科学依据。     

一类阳离子性卟啉化合物的MALDI-TOF-MS快速分析

This paper reports the analytical results of cationic porphyins by MALDI-TOF-MS method and the attribution of characteristic peaks of cationic porphyins with variant side chains. Research results indicate it is effective that cationic porphyins are analyzed by using MALDI-TOF-MS method.     

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱在糖类化合物研究中的应用

综述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的发展、在糖类化合物结构研究时常选用的基质,以及在不同类型糖化合物分析中的应用。MALDI-TOF-MS在糖类分析中通常采用的是N2激光源,基质多为有机小分子如2,5-二羟基苯甲酸、2,4,5-三羟基苯乙酮、1-羟基异喹啉或2-羟基-5-甲氧基苯甲酸、α-氰基-4-羟基-苯丙烯酸等,基质类型的选择则要取决于糖类的存在形式。糖类化合物如中性糖、酸性糖、硫酸化糖、糖蛋白、蛋白聚糖及糖脂等均可利用适合的基质而进行MALDI-TOF-MS分析。     

兴奋剂生长激素的MALDI-TOF质谱研究

采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI TOF MS）法对生长激素（GH）标准品和国产GH制剂进行比对研究。在完整分子的相对分子质量测定中,GH的精确分子质量为22 124 u,检测灵敏度达74 fmol。实验还发现1种GH制剂的相对分子质量为22 254 u,质量数比理论质量多131 u,经胰蛋白酶解产物的二级质谱测序证实是N端多一甲硫酸残基(Met)的GH。GH酶解后的肽段样品可以鉴定出8个GH肽段,覆盖率为45.5%,Mascot蛋白谱库检索蛋白质评分值为132,蛋白质置信区间为100%。测序结果说明,N端的甲硫酸残基可以作为鉴定外源GH的分子标记。     

MALDI-TOF MS分析研究合成高分子的综述

扼要介绍了基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱,在分析合成高分子中的发展历程、基本原理、主要优点及存在的困难;详细分析了基质、溶剂、盐（阳离子）和样品制样方法等关键因素对实验结果的影响及造成质量歧视的原因;阐明了这一分析技术在均聚物、混合物、共聚物等合成高分子研究中的应用及展望。     

MALDI-TOF分析多肽指纹图谱的进展与应用

蛋白组学研究是目前生命科学研究领域中的一大热点，蛋白组学研究中的关键技术之一是如何得到准确的多酞指纹谱图，以保证蛋白质的准确定性。基于方便、快速、简捷的要求，基体辅助激光解吸电离一飞行时间质谱(MAlLDI-TOF)技术是目前分析多肽指纹谱图中最常用的方法。     

以低浓度异甘草素为基质的MALDI-TOF MS用于小分子的检测研究

以低浓度异甘草素(ISL,0.05 mmol/L)为基质,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对精氨酸、甘露醇和苏氨酸-亮氨酸二肽等小分子物质进行分析检测。实验结果表明,以低浓度异甘草素作为MALDI-TOF MS分析小分子物质的有机基质,所获得的斑点均匀性和重复性、耐盐能力、分辨率等均显著优于常用基质2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)。本实验可为有机基质在小分子分析中的应用开辟新的窗口。     

合成高分子的定量分析

采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MLADI—TOFMS)技术进行合成高分子的定量分析。通过引入合适的内标物以及对实验条件的优化，取得了良好的实验结果。结果表明，高分子的质谱信号与高分子使用量呈现一定的比例关系。这只是合成高分子定量分析的初步探索，并为将来的深入研究奠定了必要的实验基础。     

含二硫键的蛋白质/多肽的MALDI-TOF MS源内裂解研究

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法研究含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解(ISD)。比较了不同基质种类及不同结晶状态对含二硫键的人胰岛素与甘精胰岛素酶解液的源内裂解的影响。结果表明,含二硫键的蛋白质的ISD发生受激光点照射位置的影响,在不同基质与结晶形态的条件下,含二硫键的蛋白质的ISD碎片信息不同。通过分析比较,含二硫键的蛋白质的ISD较容易控制,并且其基质的种类及结晶状态作用很关键。需要获得大量碎片时,使激光照射在样品和阿魏酸(FA)基质形成的大结晶处;不希望出现碎片时,可使用2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)为基质,或使激光照射在样品和其他基质形成的细小均匀结晶处。     

GC／MS分析催化裂化柴油中的酚类化合物

催化裂化柴油经碱液萃取,分离出其中的酚类化合物,用ＧＣ／ＭＳ分析酚类化合物的结构。在一定的色谱条件下,分离出酚类化合物近４００余外,除苯酚类、二环酚类化合物外,还鉴定出少量的三环酚类化合物及微量四环酚,本文分析了酚类化合物的质谱特征,对部分单体酚进行了结构鉴定。     

自来水中非挥发性氯化产物的GC／MS分析

本文采用ＸＡＤ－２和ＸＡＤ－８（１：１）混合树脂现场富集采样，循环提取器提取，毛细管ＧＣ／ＭＳ定性的方法，通过对冬夏两季的采样分析，初步分析了某地自来（饮用）水中非挥发性有机氯化产物。从夏天自来水中检测出了２８种有机氯化合物，从冬天自来水中只检出了１种有机氯化合物。     

MALDI-TOF MS与16SrDNA方法对肠杆菌科微生物鉴定比较分析

为了研究基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法鉴定肠杆菌科微生物及其对微生物系统分类学相关分析的准确性,采用MALDI-TOF MS对金桔表面分离的10种肠杆菌科微生物进行蛋白质图谱收集,通过比对图谱特征峰实现微生物的鉴定与系统进化学分析;同时对10种微生物进行16SrDNA提取与测序,得到分子生物化学水平鉴定,并采用邻近连接法对16SrDNA序列做系统进化树分析。结果表明:MALDI-TOF MS与16SrDNA测序对10种肠杆菌科微生物鉴定结果中,克雷伯菌属2株菌鉴定种级有偏差,其他8种一致;MALDI-TOF MS与16SrDNA测得的数据都可计算微生物相关性,从而得到微生物系统发育树,两株系统发育树中同属级微生物归类的亲缘位置与方向一致,但不同属肠杆菌科微生物的亲缘距离与位置差异较大。MALDI-TOF MS法鉴定农产品表面微生物具有快速、准确的特点,但准确建立系统发育相关性还需要扩大数据库和优化算法。     

3-氨基喹啉基体在MALDI-TOF/MS分析中对环状多糖分子的特殊解吸电离作用

This paper reports the special desorption/ionization effect of matrix 3-aminoquinoline(3-AQ) and binary matrix 2,5-dihydroxybenzoic acid/3-aminoquinoline(DHB/3-AQ) on the cyclic polysaccharide molecules in MALDI-TOF/MS analysis.     

9—蒽活性基取代物的GC／MS测定

采用GC／MS对9-蒽活性基取代物进行分析比较。此类9-蒽活性基取代物可作为荧光探针应用于某些高效药物的光学仪器检测中，并因其取代基的不同而表现出不同的反应活性和稳定性。     

固相微萃取-气相色谱-质谱法快速

用固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC/MS)法测定了丙纤滤棒粘合剂的挥发性成分,并对加工好的滤棒进行跟踪对比分析。探讨了不同纤维头取样、不同温度平衡样品等条件对分析检测结果的影响。从而形成一套分析烟用滤棒粘合剂挥发性物质的简便方法,对粘合剂的整体质量评价提供了有益的参考。     

REFLEXⅢ基质辅助激光解析电离时间飞行(MALDI-TOF)质谱仪的特点及应用

REFLEAⅢ基质辅助激光解析电离时间飞行(MALDI-TOF)质谱仪(图1)是布鲁克公司推出的世界上最灵敏的MALDI-TOF质谱仪。该仪器配有自动制样机,无网离子的延迟引出技术,无网双聚焦反射器,除可测各种分子的分子量外,还可通过源后分解谱(Post Source decomposition,PSD)得到结构信息,是当前研究蛋白质组必不可少的质谱仪。本文对该仪器的主要优点,结构特点,仪器主要配置及应用等作了简要介绍。