蛋白质组学技术筛选与鉴定DMP胁迫下蚯蚓表皮组织的差异蛋白

蚯蚓在DMP质量浓度为200mg/kg和600mg/kg的自然土壤中污染胁迫7,14,21d,采用蛋白质双向电泳技术筛选出表皮组织差异表达的140个蛋白质斑点,并用肽质量指纹图谱技术和数据库比对法初步鉴定出5种差异蛋白质,分别为假定蛋白(BRAFLDRAFT_58397),α微管蛋白,ATP合酶β亚基,β微管蛋白,假定蛋白(FAEPRAM212_03570),这些蛋白质可能参与邻苯二甲酸二甲酯代谢并与蚯蚓解毒功能有关,有望成为土壤生态毒性评价、监测和开展毒理学研究的生物标记物.     

西施舌肠蛋白质双向电泳图谱的建立

以西施舌的肠组织为研究对象,经破碎、裂解、离心等抽提方法提取肠组织蛋白样品,利用Bradford蛋白定量试剂盒作蛋白定量后,进行一向等电聚焦电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后的凝胶用考马斯亮蓝染色,利用ImageScannerⅢ扫描仪扫描凝胶,获得凝胶图像。首次得到西施舌肠蛋白质双向电泳图谱,构建了西施舌肠蛋白质组的双向电泳技术体系。图谱分析显示,所获得的肠蛋白质等电点介于pH4～7,大部分蛋白为酸性蛋白,高分子质量及高等电点蛋白含量相对较少。     

棉籽蛋白质提取工艺的研究

采用盐提酸沉方法,用六偏磷酸钠和阳离子交换树脂来提取棉籽蛋白.考察提取温度、提取时间、质量浓度、酸沉pH和液粕比等因素对提取率的影响,还进一步考察了提取原料粒径大小、超声功率对提取率的影响.当提取条件为温度50℃、时间120 min、质量浓度55 g/L、酸沉pH为4. 7、液粕比20∶1、超声功率为60 W、粒径大小为180μm时,棉籽蛋白质的提取率相对较高.     

油菜磷脂中溶剂残留检测

建立用气相色谱（GC）测定油菜磷脂中残留溶剂乙醇和丙酮的方法.采用玻璃毛细管色谱柱（30 m×250μm×0.25μm）,N₂为载气,FID检测器,正丙醇为溶剂,顶空进样,外标法计算残留溶剂的含量.顶空进样条件为平衡温度70℃;平衡时间45 min;溶剂体积比30%;进样量为10 mL.乙醇、丙酮、正丙醇、均完全分离;乙醇和丙酮在25～500μg/mL的范围内线性关系良好,R²分别为0.9997和0.9994;平均加样回收率乙醇为95.8%（n=5）,丙酮为98.5%（n=5）;检测限分别为乙醇17.0μg/mL,丙酮2.3μg/mL.实验方法方便简便、重复性好,结果准确.     

番茄红素提取开发研究

对番茄红素提取过程的影响因素如:温度、pH值、提取时间、溶剂量进行了研究,初步确定了较优的溶剂及最佳工艺条件.用 (34)正交表设计了实验,优化了以丙酮、正己烷、氯仿为溶剂的最佳提取条件.结果表明:丙酮作为溶剂时提取效果最好,其最佳工艺条件为:pH值为6、温度45 ℃、时间为3 h、溶剂量为1∶10(番茄粉末质量 g∶溶剂体积 mL).     

反胶束体系萃取油莎豆蛋白的研究

对AOT/异辛烷反胶束体系萃取油莎豆蛋白的前萃工艺进行了研究,考察了加料量、萃取温度、时间、AOT质量浓度、W0、KCl浓度、pH对蛋白质前萃率的影响,通过单因素试验和均匀设计试验,得到前萃的最佳工艺条件为:加料量0.05 g/mL,AOT质量浓度0.12 g/mL,W0为16,KCl浓度0.02 mol/L,pH7,萃取温度40℃,萃取时间86 min.     

猪肉盐溶蛋白提取条件的优化研究

为提高猪肉盐溶蛋白的提取率,分别对NaCl溶液浓度、MgCl2溶液浓度、NaH2PO4添加量和pH值4个因素进行单因素实验和正交试验.利用考马斯亮蓝法测定猪肉盐溶液中的蛋白含量.按L9（3）4正交表进行正交试验,利用SPSS16.0软件进行正交分析,结果表明,猪肉盐溶蛋白的优化提取条件为：NaCl溶液浓度0.8 mol/L,MgCl2溶液浓度0.04 mol/L,NaH2PO4添加量4 g/kg,pH值7.0.     

不同溶剂酒花多酚提取物清除羟自由基活性的研究

分别用70%丙酮水溶液和50%乙醇水溶液对酒花中的多酚类化合物进行提取,并采用福林酚法测定提取液中总多酚的含量,发现70%丙酮对酒花多酚提取量(40.15 mg/g酒花)比50%乙醇对酒花多酚提取量(31.18 mg/g酒花)高出11%。选用水杨酸法测定了以上两种酒花多酚提取物对羟自由基的清除率,并以抗坏血酸和茶多酚做阳性对照。结果表明,酒花多酚对羟自由基具有较强的清除作用,其清除率在0~100μg/mL的多酚浓度范围内随浓度的增加而增大,呈现明显的线性关系,各试样对羟自由基清除力大小顺序依次为:50%乙醇酒花多酚(IC50值为11.8μg/mL)>抗坏血酸(IC50值为33.5μg/mL)>茶多酚(IC50值为42.0μg/mL)>70%丙酮酒花多酚(IC50值为58.4μg/mL)。当试样浓度达到0.2 mg/mL时,50%乙醇酒花多酚对羟自由基清除率为99.7%,与Vc和茶多酚没有显著差异,但显著高于70%丙酮酒花多酚(清除率为93.8%)。结论:极性大的酒花多酚组分其抗氧化活性高于极性小的酒花多酚组分。     

棉籽蛋白提取工艺的研究

采用碱提取和盐提取法提取棉籽蛋白,通过单因素实验和正交实验对提取工艺参数进行优化,并从蛋白提取率及纯度等方面对蛋白提取方法进行比较.得出采用亚硫酸钠提取棉籽蛋白最佳,其工艺条件为：温度40℃,质量浓度20 g/L,液粕比10∶1,提取时间70 min.此时蛋白质提取率为32.15%,蛋白质纯度99.6%.     

响应面法优化黑米花色苷提取工艺及其抗氧化活性研究

采用响应面法优化黑米花色苷的提取工艺，以黑米花色苷提取量为衡量指标，在单因素试验的基础上采用pH示差法分析提取时间、提取温度、料液比、乙醇浓度等因素对黑米花色苷提取量的影响。在此基础上，采用响应面试验优化提取条件。结果表明：料液比对黑米花色苷提取效果的影响最大，其次为提取时间、乙醇浓度和提取温度，当提取时间设定为60 min、提取温度为50℃、料液比为1∶10 g/mL、乙醇浓度为50%时，提取所得黑米花色苷含量为最大，为2.31 mg/g。通过抗氧化能力测定，得黑米花色苷对DPPH自由基和羟基自由基的清除率随浓度增大而增强，具备较好的抗氧化活性。