南美白对虾响应急冷与无水暴露双重胁迫的生理变化特征

为揭示南美白对虾响应急冷与无水暴露双重胁迫的生理调节机制，优化南美白对虾无水保活运输管理和提升运输存活质量，本实验模拟南美白对虾无水保活流通环境，探究急冷（acute cold exposure,AC）与无水暴露（waterless duration,WD）双重胁迫（AC+WD）对南美白对虾机体代谢途径及肝胰腺组织结构的影响。结果表明，在胁迫进程中，对虾血清乳酸（lactic acid,LD）浓度、肝胰腺和肌肉中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力上升，血清LDH、己糖激酶（hexokinase,HK）、琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase,SDH）、磷酸果糖激酶（phosphofructokinase,PFK）、丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）、Na+/K+-ATPase活力均先升高后降低，而肌肉三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）和肝胰腺糖原（glycogen,Gn）含量降低。复苏后血清葡萄糖（glucose,Glu）和LD浓度分别为（23.92±0.59）mmol/L和（6.27...     

典型冷链温度下南美白对虾品质劣变规律及 相关性分析

目的探究典型冷链贮藏温度下南美白对虾品质劣变规律及相关性。方法采用感官评价、仪器分析和理化分析的方法对南美白对虾在-23、0、5℃贮藏温度下的感官、色差、挥发性盐基总氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量进行分析与检测,并采用Pearson线性回归分析三者之间的相关性。结果 3种典型冷链贮藏温度下南美白对虾的感官品质变化差异显著,-23℃条件下感官评分一直处于8.0左右;0℃下感官评分在前3 d基本维持在7.0以上,之后快速下降,至第5 d时下降至4.0以下,失去商品价值;5℃条件仅在第1 d维持在7.0以上,第2 d时开始迅速下降。亮度值自贮藏第2 d起不同冷链温度下都有显著性差异(P0.05)。TVB-N值在-23℃条件下第9 d仍在20 mg/100 g以下,而0℃第3 d即发生显著升高(P0.05)。Pearson相关系数表明,TVB-N值与感官评分及亮度变化存在显著相关性。结论与理化检验法相比,感官评价结合色差测定的方法可准确、快速反映对虾鲜度,预测产品货架期。     

无水运输温度和时间对南美白对虾肌肉品质及生理应激的影响

为探讨南美白对虾无水保活运输的适宜温度和时间,本文研究了对虾低温休眠温度,测定了4、10 ℃条件下模拟运输不同时间段的存活率,分析了对照组、休眠组、运输组和运输后复水唤醒30 ?min?,4种状态下对虾肌肉品质以及生理应激指标。结果表明,南美白对虾的休眠温度为（10.0±0.2）℃;模拟运输12 h内,两温度组存活率均为100%,36?h后两组存活率均低于30%。不同运输温度对肉质指标影响不显著（P>0.05）;除蒸煮损失率,相同温度下运输应激对水分、粗蛋白、粗脂肪含量影响均不显著（P>0.05）。生理应激指标中,两种温度下模拟运输24 h后,肌糖原、琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH）、乳酸脱氢酶（lactate?dehydrogenase,LDH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量与对照组相比均发生显著变化（P<0.05）,且复水后也均不能恢复到对照组水平。南美白对虾可以通过低温诱导休眠的方式进行无水保活运输,10 ℃适于18 ?h内短途运输,长途运输则可选用4 ℃。     

饥饿胁迫对南美白对虾冷藏保鲜效果的影响与酶学机制研究

为评价饥饿胁迫对南美白对虾保鲜效果及其内源性酶活力的影响,本实验对南美白对虾进行饥饿胁迫后4℃冷藏,以感官、生化和细菌总数为指标评价其保鲜效果,并检测饥饿胁迫下对虾内源性蛋白酶和酚氧化酶的变化。结果表明:饥饿胁迫处理4d可较好控制对虾因腐败引起的p H与TVB-N值的升高,微生物的生长受到明显抑制,较好地保持了对虾的感官品质。与对照组相比,饥饿胁迫4d可使内源性蛋白酶活力降低41.2%,但对酚氧化酶活力影响无显著性差异（p>0.05）。综合分析,饥饿胁迫处理4d保鲜效果最佳,与对照相比可延长货架期1²d,其作用机理之一是通过抑制内源性蛋白酶活力来延缓对虾品质下降。      

不同冻藏状态下南美白对虾品质与微观结构的变化

本文研究了不同冻藏状态,即玻璃态（T冻藏温度Tm?）：-18 ℃条件下冻藏6个月,对南美白对虾品质与微观结构的影响。结果表明-80 ℃（玻璃态）冻藏下南美白对虾的色差（△E值）、汁液流失率、挥发性盐基氮（TVB-N）含量、以及pH值最小,分别为5.33、4.80%、15.35 mg N/100 g以及7.22;硬度,弹性和咀嚼性、SPP含量和感官评分最高,分别为652.86%,65.76%和184.90、80.04 mg/g和7.40,显著优于部分冻结浓缩态以及橡胶态下冻藏的南美白对虾（p<0.05）,并且-80 ℃冻藏下南美白对虾组织中的冰晶比其他条件尺寸较小、分布更均匀。而-60 ℃和-40 ℃仅在pH值无显著差异（p>0.05）,-18 ℃下南美白对虾品质最差。随着冻藏时间延长,即使在玻璃态下虾的品质也仍在变化,但与其他状态相比,玻璃态下南美白对虾的品质下降最缓慢。本文表明,玻璃态冻藏能有效抑制南美白对虾冻藏过程中的品质劣变,较好地保持冷冻虾的品质。     

南美白对虾肝胰腺蛋白提取方法优化及无水保活环境胁迫对细胞凋亡蛋白的影响

为提高Western Blotting结果的可靠性,以蛋白溶出率和凝胶电泳蛋白条带完整性为指标,比较提取液种类、研磨方式、酶抑制剂种类及其体积分数和提取时间对南美白对虾肝胰腺蛋白提取效果的影响。采用优化后的提取方法获得高质量蛋白样品,并采用Western Blotting法分析无水环境胁迫后南美白对虾肝胰腺组织中细胞凋亡信号通路相关蛋白的表达水平。结果表明：RIPA裂解液作为提取溶剂所得的蛋白溶出率高于水提和磷酸盐缓冲液,电动匀浆和液氮研磨所得蛋白条带更完整,4%蛋白酶磷酸酶混合抑制剂能有效抑制肝胰腺内源酶引起的蛋白降解;采用Western Blotting法分析无水保活期间南美白对虾肝胰腺蛋白,发现低温诱导休眠的同时会引起细胞轻微凋亡,且凋亡水平呈应激时间依赖性增加,环境胁迫解除后有所回调。     

南美白对虾在酸性电解水减菌处理下鲜度品质及挥发性风味物质的变化

该研究就酸性电解水对南美白对虾减菌工艺条件进行了优化,在此基础上,采用GC-IMS技术分析美白对虾的挥发性风味物质,并结合感官评价、微生物指标(菌落总数和优势腐败菌)和理化指标(色度和TVB-N值)共同评价酸性电解水减菌处理对南美白对虾品质特性的影响.研究结果表明,酸性电解水对南美白对虾减菌的最佳处理方式为,电解水液温...     

南美白对虾肉糜低温冻藏过程中蛋白质的特性变化

研究南美白对虾肉糜在冻藏过程中的蛋白质特性变化。以虾仁为对照组,主要考察冻藏第0、20、40、60、80、100、120d时在虾仁和虾糜中的pH值、Ca~(2+)-ATPase酶的活性、疏水键、二硫键、水溶性和盐溶性蛋白含量、离子键和巯基类等指标的变化。随着冻藏时间的延长,虾仁和虾糜的pH值,疏水键和二硫键的值都处于升高状态,但是虾糜组的指标都比虾仁低,冻藏120 d的虾糜组分别比虾仁组低0.18、3.28、2.64mg/g;在水溶性和盐溶性蛋白含量、Ca~(2+)-ATPase活性、总巯基、活性巯基、离子键的含量等方面各组数据都处于下降状态,但是虾糜的下降幅度比虾仁小。虾糜组的离子键、水溶性和盐溶性蛋白含量在冻藏120 d后分别比虾仁组高3.62、12.14、5.73 mg/g。在120 d时虾仁的肌原纤维蛋白含量降至新鲜虾仁的38.21%,而虾糜的含量降至43.36%。这表明在冻藏过程中,虾糜的储存形式比虾仁的储存形式更有利于对虾品质的贮藏。本研究的研究结果为虾糜的蛋白等理化品质鉴定提供了理论基础,同时也为虾类产品的精深加工提供了科学依据。     

基于高通量测序技术分析凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)冷藏过程菌群结构变化

目的揭示凡纳滨对虾(4±1)℃条件下贮藏过程中菌群结构的变化规律,为其贮运保鲜提供参考。方法采用高通量测序技术对不同冷藏期凡纳滨对虾中的细菌种类及其丰度迚行分析。结果凡纳滨对虾初始菌群以鞘脂杆菌属(Sphingobacterium)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)为主;冷藏过程中,Sphingobacterium、Chryseobacterium、Stenotrophomonas比例迅速减少,系统迚化关系上比较接近的交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas)、希瓦氏菌属(Shewanella)和别弧菌属(Aliivibrio)成为优势菌,其中Aliivibrio的比例相对稳定,Shewanella比例呈先增加后减少的趋势,Pseudoalteromonas比例不断增加,可能在凡纳滨对虾腐败过程中起重要作用。结论高通量测序可以更加全面反映凡纳滨对虾中菌群的组成及其丰度信息,Pseudoalteromonas是凡纳滨对虾冷藏过程的优势腐败菌。     

凡纳滨对虾过敏原精氨酸激酶的质谱鉴定及其免疫交叉反应研究

目的：鉴定凡纳滨对虾分子质量40 kD过敏原,并分析其在有壳水产食物中的免疫交叉反应。方法：运用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪（matrix assisted laser desorption ionization/time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS）鉴定凡纳滨对虾40 kD过敏原组分;使用软件BLAST、Clustal X2、MEGA 5.0分析该蛋白氨基酸序列的种间同源性;制备抗凡纳滨对虾过敏原精氨酸激酶的多克隆抗体,并与17 种常见有壳水生动物粗提液进行Western blotting,以分析该过敏原的免疫交叉反应。结果：凡纳滨对虾40 kD过敏原为精氨酸激酶（arginine kinase,AK）;其氨基酸序列同源性分析显示AK在虾类（96%～100%）、蟹类（91%～93%）、贝类（49%～52%）、蟑螂（83%）中具有很高的同源性;Western blotting结果显示抗AK多抗与17 种不同虾类、蟹类、贝类的AK均能发生反应。结论：精氨酸激酶在甲壳类动物、软体动物、甚至昆虫中具有高度保守性,且能引起强免疫交叉反应,是有壳水生动物中的一种泛过敏原。     

南美白对虾即食虾仁加工工艺和贮藏研究

为了获得贮藏期长的即食南美白对虾制品,对其关键加工工艺进行研究,并对其贮藏过程中质构、蛋白质、游离氨基酸、虾青素含量、TBA值以及微观结构的变化进行测定。经蒸汽蒸制加工,腌渍调味,115℃高压蒸汽灭菌处理的虾仁,40℃条件可贮藏30d以上。贮藏过程中虾仁质构下降明显,其质构变化与蛋白质的降解、肌纤维的结构破坏有关,脂肪的氧化引起虾青素的降解和虾仁色泽的变化。     

山梨醇对凡纳滨对虾无水运输中呼吸和能量代谢的影响

将驯化后体质量(12.86±0.80)g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)随机分为两组,分别在13℃的3.5%山梨醇溶液或清水(对照)中浸泡3 min,至全部对虾侧卧水底呈休眠状态后,取30只一组装入聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)袋(220 mm×320 mm),充纯氧后密封,置于15℃的恒温箱中无水运输。10小时后将全部对虾转移至的清水(20℃～25℃)中复苏。测定休眠5、10 h和复苏1 h状态下凡纳滨对虾血清血蓝蛋白、乳酸、葡萄糖浓度、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肝胰腺琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活力和肝糖原含量的变化,以探究山梨醇对凡纳滨对虾无水运输存活率的影响及其作用机理。结果发现,模拟无水运输10小时后,山梨醇组对虾存活率为88.89%,显著高于对照组(71.11%)(P <0.05);休眠状态下,山梨醇组血蓝蛋白、乳酸、血糖浓度和SDH、LDH活力显著高于对照组(P <0.05),肝糖原浓度显著低于对照组(P <0.05);复苏1小时后,两组对虾的乳酸、血糖浓度及对照组SDH活力仍与新鲜状态差异显著(P <0.05),其他参数恢复正常水平。结果表明,3.5%山梨醇可提高对虾有氧和无氧呼吸强度及存活率,缓解低、缺氧和能量不足的胁迫。     

魔芋胶对南美白对虾肌原纤维蛋白凝胶特性的影响

为探究魔芋胶（konjac glucomannan,KGM）对南美白对虾肌原纤维蛋白（shrimp myofibrillar protein,SMP）凝胶性能的影响,将KGM与SMP按不同比例（1∶50、1∶20、1∶10）进行复配制备复合凝胶体系SK50、SK20、SK10,通过测定表面疏水性、内源性荧光、浊度及粒径、流变学、红外光谱、蛋白变化及凝胶微观结构,研究复合体系的凝胶特性变化。结果表明,SMP及SMP-KGM复合体系的表面疏水性、浊度及粒径随着KGM添加量的增大而增大,流变学分析表明SMP及SMP-KGM复合体系均出现剪切稀化现象,且SK20的G’值最高,其凝胶的结构稳定性最好。红外光谱分析表明SMP及SMP-KGM复合体系组的光谱特征带相似,表明无明显的基团生成。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明KGM的加入并没有引起蛋白条带的明显变化,相较于未加热组,加热后样品中肌球蛋白重链、副肌球蛋白以及肌动蛋白的条带明显减弱,说明加热能促使三者发生热聚合反应。扫描电镜与分形维数分析表明,随着KGM添加量的增加,形成了致密有序的凝胶。结果表明,一定量的KGM添加能有效提升虾糜的凝胶特性,提高虾糜类产品品质。     

拉曼光谱法分析凡纳滨对虾冻藏过程蛋白质与水分结构变化

探明冻藏过程中凡纳滨对虾肌肉蛋白质与水分的结构变化有助于揭示蛋白质冷冻变性机理,采用拉曼光谱技术对凡纳滨对虾肌肉蛋白质在不同冻藏温度条件下的二级结构进行分析,并结合重水置换技术表征肌肉蛋白质的氘代动力学,从蛋白质结构和表层水分子角度研究冻藏温度对蛋白质冷冻变性的影响。结果表明：冻藏过程中蛋白质的二级结构由规整转向松散,肽链展开,且－18 ℃冻藏的蛋白质结构松散性比－40 ℃显著;伴随蛋白质结构的展开,表面疏水性增加,蛋白质与表层结合水的相互作用减弱,且冻藏温度越高,相互作用减弱越剧烈,蛋白质结构也越不稳定,水分越容易流失;而冻藏温度越低,蛋白质与水分的相互作用越强,蛋白质结构越稳定,越有利于保持对虾原有品质。