绿豆清蛋白Osborne分级提取工艺优化及亚基组成分析

以绿豆为原料,采用Osborne分级法从绿豆中提取清蛋白,在单因素试验基础上,用L9(34)正交试验,研究提取温度、提取时间和料液比对绿豆清蛋白提取率的影响,并采用SDS-PAGE电泳分析绿豆清蛋白的亚基组成。结果表明,绿豆清蛋白的最佳提取工艺为料液比110(g/mL)、提取温度45℃、提取时间150min,该条件下绿豆清蛋白的提取率为(86.79±0.31)%,清蛋白纯度为88.33%。提取的绿豆清蛋白中有4条亚基条带,分子量分别为56.2,46.8,26.3,21.9kD。     

Osborne分级法提取藜麦糠清蛋白及功能性质研究

以藜麦糠为研究对象,采取超声辅助Osborne分级法对藜麦糠中清蛋白进行提取。在单因素实验基础上,应用Box-Behnken方法选取料液比、提取温度、提取时间3个因素,以清蛋白提取率为响应值进行优化,确定藜麦糠清蛋白的最优提取条件为:料液比1∶37（g/m L）、提取温度46℃、提取时间25 min,在此条件下藜麦糠清蛋白提取率为43.21%,与理论预测值43.76%相比,其相对误差约为1.25%。说明通过响应面分析优化后得到的回归方程在实践指导方面具有一定的意义。对藜麦糠清蛋白功能（溶解性、持水力、乳化性、起泡性）特性进行了测定,结果表明p H为2.5即等电点时,清蛋白的溶解度最低,持水力最小达到1.33 g/g,乳化性最低,乳化稳定性反而最好,而起泡性和起泡稳定性在等电点附近均最差。      

葛根蛋白组分提取、抗氧化活性及功能特性研究

以葛根为原料,提取葛根蛋白组分,对其进行体外抗氧化活性研究,采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy, FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析,对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明,谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基及·OH清除率均可达90%以上,其IC₅₀值分别为0.118、0.089、0.217 mg/mL,还原能力也较高,为1.33;亚基分析结果显示,葛根醇溶蛋白无条带,葛根清蛋白在10～55 kDa均有分布,葛根球蛋白主要分布于10～25 kDa,葛根谷蛋白主要分布于33～25 kDa;氨基酸分析结果显示,4种葛根分级蛋白的氨基酸含量不同,其中葛根谷蛋白的氨基酸含量最高。FT-IR显示蛋白组分均有典型的蛋白吸收峰。谷蛋白的功能特性研究表明,pH值、温度及离子强度对葛根谷蛋白的持水(油)性、乳化及乳化稳定性、起泡及起泡稳定性有明显影响。     

马铃薯分离蛋白的提取工艺

采用盐溶碱提酸沉法制备马铃薯分离蛋白,并对马铃薯分离蛋白提取条件和功能特性进行研究。十二烷基硫酸钠- 聚丙烯酰胺电泳结果表明,马铃薯分离蛋白的亚基相对分子质量较广,其中分子质量低于21.0kD 的亚基较多。马铃薯分离蛋白的最佳提取工艺为料水比1:10(g/mL)、温度40℃、pH8.0、NaCl 浓度0.4mol/L。     

青北五味子多糖的提取及其抗氧化活性

采用水提醇沉法,通过单因素和正交试验研究青北五味子多糖(polysaccharides from immature Schisandrachinensis(Turcz.)Baill,PIS)的提取工艺,并以VC为参照物,考察脱蛋白前后PIS的抗氧化活性。结果表明:从青北五味子中提取多糖的最适宜工艺条件是料液比1:30(g/mL)、提取温度90℃、提取时间2h、提取3次。用Sevag法对PIS进行初步提纯,UV扫描检测表明去蛋白后PIS中基本不含有蛋白质与核酸。利用红外光谱法对纯化PIS进行表征,证明其具备一般多糖类物质的光谱特征。脱蛋白前后PIS对羟自由基和超氧阴离子自由基均具有一定的清除能力,且脱蛋白后的PIS清除自由基的效果更好,其抑制O2ˉ·和·OH的IC50分别为66.03、6.49mg/mL,说明纯化PIS具有优良的清除OH的能力。但它们的抗氧化活性都不如VC。     

五味子糖蛋白的纯化及其抗氧化活性

本文研究了五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件,采用碱提酸沉法提取得到五味子糖蛋白,以蛋白质清除率和多糖损失率作为考察指标,分别考察氯仿与正丁醇的比例、样液与Sevage试剂的比例、振摇时间、脱蛋白次数对除蛋白效果的影响,在单因素实验的基础上采用正交及响应面实验优化工艺条件,得到响应面优化后结果最佳,即氯仿与正丁醇的比例为3:1,样液与Sevage试剂的比例为3:1,振摇时间为14 min,脱蛋白次数为3次,此条件下的蛋白质平均清除率为30.09%,多糖平均损失率为4.71%,综合评分平均值为88.11。体外抗氧化活性结果表明,五味子糖蛋白对于DPPH自由基和超氧阴离子清除能力较强(IC₅₀为1.08 mg/mL和0.80 mg/mL),并具有一定的还原能力。研究表明响应面法优选工艺简便高效;五味子糖蛋白具有体外抗氧化活性,值得进一步研究。     

葛根蛋白提取工艺及其体外抗氧化性研究

以葛根为原料提取葛根蛋白,以葛根蛋白提取率为指标对4种不同提取工艺进行对比,采用Box-Behnken响应面试验设计,优化葛根蛋白提取工艺,对葛根蛋白进行体外抗氧化分析,并以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)测定葛根蛋白分子量。结果表明葛根蛋白最佳提取工艺为:提取温度45℃,提取时间2 h,料液比1∶20(g/mL),pH3.5;测得葛根蛋白提取率为11.73%;抗氧化试验表明,葛根蛋白具有良好的羟基自由基和DPPH自由基清除效果,其清除率分别为(88.62±0.73)%、(51.15±0.32)%,且清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为0.78、1.89 mg/mL,并具有一定的还原能力;SDS-PAGE试验结果可清晰看见葛根蛋白条带,分子量主要分布在14.0 kDa~43.0 kDa。     

蜂胶黄酮的乙醇分级提取及其抗氧化活性比较

为确定粗蜂胶中活性成分所在极性范围,选择乙醇分级提取永州粗蜂胶中的活性成分,以黄酮含量为指标,比较不同提取条件下蜂胶黄酮的含量差异,并测定不同提取条件下获得的提取物的抗氧化活性。结果表明:用40%~60%乙醇提取得到的蜂胶黄酮质量和含量较多;乙醇分级提取的提取物中蜂胶黄酮的含量可达到41.2%,黄酮得率可达25.81%;50%,60%乙醇提取的蜂胶黄酮抗氧化能力较强,活性高于Vc;30%乙醇提取蜂胶黄酮抗氧化能力最差,说明粗蜂胶中含有不同类型的蜂胶黄酮,提取活性较高的蜂胶黄酮,可以选择水提取水溶性黄酮和40%~70%乙醇提取中等极性黄酮。     

油牡丹籽粕蛋白质提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以经超临界CO2萃取提油后的油牡丹籽粕为原料,研究油牡丹籽粕蛋白质提取工艺、氨基酸组成和抗氧化活性。通过Osborne分级法分离出四种蛋白质,并对清蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白及球蛋白提取工艺进行初步优化,采用响应面法分析油牡丹籽粕主要蛋白质清蛋白最佳提取条件,分析四种蛋白质的氨基酸组成。在此基础上,通过DPPH及ABTS自由基清除率评价四种蛋白的抗氧化效果。研究结果表明：油牡丹籽粕清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白的最佳提取条件为粉碎度100目,提取温度依次为45、40、50、30℃,提取时间依次为86、100、100、60 min,清蛋白提取率为47.02%。此外,四种蛋白质均为完全蛋白质具有较强的DPPH自由基清除能力及ABTS自由基清除率能力。油牡丹籽粕蛋白是优质蛋白质资源,本研究为油牡丹籽粕综合利用奠定理论基础。     

小麦胚蛋白分级提取及功能性研究

以小麦胚为原料,首先采用正己烷低温脱脂,然后利用碱法提取麦胚蛋白（WheatGerm Protein,WGP）,采用Osborne法对麦胚蛋白进行分级,得到麦胚清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4种组分,分别占总蛋白的32.5%、15.6%、4.2%和12.6%。在此基础上,对麦胚蛋白、麦胚清蛋白、麦胚球蛋白和麦胚谷蛋白的功能性进行定量分析比较。结果表明,4种蛋白中,麦胚蛋白的吸水性最佳,为3.03g/g;麦胚清蛋白的溶解性、起泡性、乳化性和乳化稳定性最好,分别为71.2%、84.8%、63.6%和62.8%;麦胚谷蛋白的吸油性最强,为2.79g/g。     

超声法提取海南眼树莲总三萜的工艺优化及其抗氧化性

目的:优化眼树莲中总三萜的提取工艺,并研究其抗氧化能力。方法:采用超声方法提取眼树莲中三萜,并利用分光光度法测定其含量。首先利用单因素实验确定最初实验条件,在单因素基础上,使用L₃(3⁴)正交实验优化工艺。用DPPH·法测定优化后提取的总三萜抗氧化性。结果:4个因素对总三萜提取量影响大小为料液比 > 温度 > 超声功率 > 超声时间,最佳提取工艺为采用提取溶剂为乙酸乙酯,超声时间为30 min,料液比为1∶20 (g/mL),超声功率为200 W,温度为55 ℃,眼树莲中总三萜平均提取量为20.82 mg/g。该工艺提取获得的眼树莲总三萜浓度为2.00 mg/mL时,对DPPH·的清除率为26.86%,其抗氧活性低于V_C。结论:与传统溶剂提取、索氏提取相比,优化后的超声提取工艺提取眼树莲总三萜的提取量明显较高,平均提取量为20.82 mg/g,获得的眼树莲总三萜具有一定的抗氧化活性。     

海绵Hyrtios erectus抗氧化产物超声提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为探索海绵动物抗氧化提取物的提取工艺及提取物的抗氧化活性,以H. erectus海绵乙醇提取物的DPPH自由基清除率为响应值,分别考察超声温度、超声时间和超声功率3个影响因素,通过Box-Behnken响应面设计确定最佳超声提取工艺。以该工艺提取物为实验材料,分析其对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH的清除效果,通过构建H₂O₂氧化损伤模型研究提取物对氧化损伤L02细胞的活力和对H₂O₂氧化应激胞内ROS含量的影响。结果表明:可操作的最佳工艺为超声温度57℃,超声时间60 min,超声功率490 W,在此条件下,提取物DPPH自由基清除率为61.98%±1.52%,与预测值62.16%吻合度较好,该提取物对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH具有良好的清除效果,提取物处理组细胞活力均显著高于模型组(P<0.05),且细胞内ROS荧光强度均极显著低于模型组(P<0.01)。总之,该工艺提取物具有较广泛的抗氧化活性,对H₂O...     

枸杞多糖的超声波辅助提取法及其抗氧化研究

以枸杞为原料,考察超声波辅助提取中的料液比、时间、温度对枸杞多糖得率的影响,并采用响应面优化。枸杞多糖超声波辅助提取的最佳工艺条件:料液比为1∶20(g/mL),温度为70℃,提取时间20 min,理论枸杞多糖得率为3.37%,实际枸杞多糖得率为3.35%,近似率达到99.4%。枸杞多糖总抗氧化性达到10.44 U/mL,结果表明:枸杞多糖具有抗氧化作用。     

忧遁草总皂苷的提取工艺及其抗氧化活性研究

为了探究忧遁草中总皂苷的最佳提取工艺条件、组成成分和抗氧化能力,采用单因素和响应面设计实验,优化超声辅助提取忧遁草总皂苷的工艺条件,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS） 分析最佳工艺条件下的总皂苷组成并进行抗氧化活性的检测。结果表明：最佳提取参数为乙醇体积分数92%,料液质量体积比1 g∶44 mL,提取时间0.6 h,温度66 ℃,此时忧遁草总皂苷的提取率为2.30%,并且从中鉴定出5种三萜皂苷;抗氧化实验表明,忧遁草总皂苷具有较强的抗氧化活性,其质量浓度与ABTS+清除率、DPPH+清除率和Fe3+还原力呈现较好的相关性,对应自由基清除率的半抑制质量浓度分别为0.407 mg/mL和0.562 mg/mL。研究结果为进一步开发利用忧遁草皂苷提供了有益的参考信息。     

北五味子多糖提取工艺优化及其对LPS刺激巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用

目的:提取北五味子多糖,研究其体外抗氧化活性及对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用。方法:通过热水浸提法及四因素三水平正交分析法L₉(3⁴)提取北五味子多糖,对比北五味子多糖与维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(V_E-TPGS)的体外抗氧化活性,利用LPS构建巨噬细胞损伤模型,通过活性氧(ROS)、JC-1细胞染色实验研究北五味子多糖对ROS的抑制作用及对细胞线粒体膜电位的保护作用。结果:北五味子多糖提取工艺为:料液比1:40 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,提取温度为90 ℃,在此条件下多糖最高得率为10.72%,北五味子多糖总糖含量为84.28%±2.03%,葡萄糖含量为30.26%±1.12%;北五味子多糖清除DPPH自由基的IC₅₀值为602.52 μg/mL,清除羟自由基的IC₅₀值为34.24 μg/mL,北五味子多糖1600 μg/mL时,总抗氧化能力达到(0.28±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北五味子多糖能够降低LPS诱导巨噬细胞的活性氧的水平,抑制细胞线粒体膜电位下降。结论:北五味子多糖在体外具有较强的抗氧化活性,能够抑制LPS诱导巨噬细胞中活性氧水平进而发挥其对线粒体膜电位的保护作用。     

辣木抗氧化成分提取方法和抗氧化能力研究进展

辣木富含多种营养成分和生物活性物质,其抗氧化作用已成为近年来辣木研究与开发的热点。生物体内的氧化应激会造成衰老、慢性病的产生,辣木可作为天然的抗氧化剂,减缓这种损伤。本文总结了辣木中有抗氧化作用的多糖、多酚和维生素类成分及此类成分的提取方法、含量分布情况、抗氧化作用机制;整理了辣木的体内外抗氧化评价方法,包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法(ABTS)、铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)、总抗氧化能力法(TRAP)、氧自由基吸收能力法(ORAC)等体外自由基清除方法和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)等体内酶活性测定方法。还对辣木的发展趋势进行展望,旨为辣木抗氧化活性成分及方法的深入研究和开发提供参考。     

响应面法优化川芎蛋白提取工艺及抗氧化活性研究

为优化川芎蛋白（Ligusticum chuanxiong protein,LCP）的提取工艺,并考察其抗氧化活性。基于单因素实验,采用Box-Behnken响应面法,以料液比、提取时间、提取溶剂pH为考察因素,LCP得率为指标,优化LCP提取工艺;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定LCP的分子量范围;测定LCP的等电点（pI）及溶解度,并考察LCP的抗氧化活性。结果表明:最佳提取条件为料液比1:15 (g/mL)、提取时间1.5 h、pH6,在优化条件下LCP得率为（2.36%±0.13%）,实测值与理论值较为接近,表明该数学模型可用于优化LCP提取工艺。最优条件下提取的LCP分子量在17~48 kDa,等电点为3.88,pH8时溶解度为96%,羟自由基清除能力IC₅₀为1.18 mg/mL、超氧阴离子自由基清除能力IC₅₀为0.57 mg/mL、1,1-二苯基-2-苦基肼基（DPPH）自由基清除能力IC₅₀为1.31 mg/mL。该法提取的LCP具有较好的抗氧化活性,可为LCP抗氧化活性的进一步研发提供实验思路。     

短梗大参多酚的提取及体外抗氧化性研究

为开发利用短梗大参树皮中的活性成分,本文对影响短梗大参多酚提取量的工艺参数(提取溶剂、乙醇体积分数、料液比、提取温度和提取时间)进行了优化;以DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率为指标,研究了短梗大参多酚的体外抗氧化性能。结果表明:短梗大参多酚提取的最优工艺条件为乙醇体积分数50%、料液比1:40 (g/mL)、提取时间50 min、提取温度45 ℃,在该参数条件下多酚提取量为(0.320±0.02)mEq GA/g;短梗大参多酚对DPPH、羟自由基均具有较好的清除效果,其半清除浓度(EC₅₀)分别为43.4 μg/mL和37.6 μg/mL。短梗大参多酚具有较好的体外抗氧化活性,可作为一种潜在的抗氧化剂进行开发利用。     

蓝刺头多糖提取工艺优化及其抗氧化活性

本试验用水提醇沉法提取蓝刺头多糖(Echinops latifolius tausch polysaccharide,ETP),通过单因素和响应面法对ETP提取工艺进行优化,并对蓝刺头提取物进行体外抗氧化活性的测定。结果表明,蓝刺头多糖的最佳提取条件为:料液比1:20 g/mL、提取时间2 h、提取温度100 ℃。在最优条件下多糖的得率为1.191%。清除自由基结果显示,在一定浓度范围内,蓝刺头多糖对DPPH·清除率最高达93.69%,对·OH清除率最高达97.44%,对O₂^-·清除率最高达67.96%。研究表明,响应面对ETP的提取优化条件合理,同时保留了该多糖良好的抗氧化活性,为其临床应用提供一定的理论依据。