嗜盐四联球菌SNTH-1产多肽发酵条件优化及其呈味、抗氧化特性

该研究以产多肽能力较强的嗜盐四联球菌（Tetragenococcus halophilus）SNTH-1为试验菌株,大豆蛋白为发酵基质,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken响应面试验对其产多肽培养条件进行优化,并对其呈味及抗氧化特性进行研究。结果表明,嗜盐四联球菌SNTH-1产多肽的最优培养条件为：发酵时间40 h、盐度5.2%、发酵温度37 ℃、接种量3%、初始pH值8.1,在此优化条件下,多肽含量为（32.96±0.02）mg/mL。菌株SNTH-1所产多肽的鲜味、厚味、甜味、咸味、苦味的风味强度较优化前有所提高,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的半抑制浓度（IC50）值为0.22 mg/mL。     

自然发酵黄豆酱中嗜盐乳酸菌的分离、鉴定与筛选

从黑龙江省8个地区采集到11份自然发酵黄豆酱样品并分离出28株嗜盐细菌，经鉴定全部为四联球菌属乳酸菌。通过测定各菌株在不同培养时间和含高浓度21％NaCl培养液的OD直和pH值，从中筛选出一株耐盐性最好、活力旺盛且产酸能力强的菌株（T5），经生理生化鉴定其为嗜盐四联球菌。     

强化嗜盐四联球菌对模拟低盐酱油发酵的影响

通过模拟低盐酱油快速发酵,在添加鲁氏接合酵母（Zygosaccharomyces rouxii）的基础上,考察嗜盐四联球菌（Tetragenococcus halophilus）不同添加量对酱醪理化指标、氨基酸和有机酸含量、挥发性风味物质的影响,揭示嗜盐四联球菌在提高低盐酱油品质方面的应用潜力。结果表明,嗜盐四联球菌对酱油中酵母菌的生长有一定的抑制作用,会使酱醪pH略有下降,总酸和氨基酸态氮含量提高。最适宜提高酱油品质的菌株添加方式是发酵开始接入鲁氏接合酵母,发酵10 d后添加108 CFU/g嗜盐四联球菌,酱油样品中氨基酸和有机酸总量比单独添加酵母菌分别提高43.8%、55.6%,其中鲜味和甜味氨基酸分别提高33.7%、29.9%;挥发性风味物质种类增加43.2%,总量提高2.4倍,其中香气物质愈创木酚和1-辛烯-3-醇含量分别提高11.1倍、8.9倍。     

嗜盐性乳酸菌的生理与分子生物学鉴定

对从酱醅中分离筛选出的耐高渗嗜盐性乳酸细菌, 进行了生理生化鉴定, 结果如下：该菌革兰氏染色呈阳性,过氧化氢酶反应呈阴性,可以在pH 5.0下生长, 在18%或更高的NaCl浓度中能够正常生长代谢, 从葡萄糖主要产L（＋）乳酸,属于四联球菌属的嗜盐性乳酸球菌. 进一步对该菌进行分子生物学鉴定,测得菌株的16S rRNA序列与GenBank登记号为FSB201的嗜盐四联球菌（Tetragenococcus halophilus）具有99%的同源性.再将该16S rRNA序列与乳酸菌分类中17个模式菌株的16S rRNA序列共同创建进化树,发现筛选菌与GenBank登记号为AB106344、AB106343的嗜盐四联球菌亲缘关系最近,证明筛选菌应属四联球菌属中嗜盐四联球菌中的一种。     

产细菌素嗜盐四联球菌的筛选及鉴定

从传统露天酿造工艺的酱油中分离出12株乳球菌,对其进行形态、生理生化特性研究及16S rDNA序列分析,鉴定为嗜盐四联球菌。在排除酸作用后,WZ-3菌株发酵液对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有较好的抑菌活性,经胃蛋白酶、胰蛋白酶处理后,发酵液抑菌活性略有下降。因此初步认为该菌株为产细菌素的嗜盐四联球菌。     

高盐稀态发酵酱油酱醅中耐盐乳酸菌的分离与鉴定

对高盐稀态发酵酱油酱醅中的乳酸菌进行了分离和鉴定,从中筛选得到5株耐盐乳酸菌。经形态学特征、生理生化实验及16SrRNA序列分析鉴定表明:菌株RB1,RB2和RB5为嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus),菌株RB2和RB3为盐水四联球菌(Tetragenococcus muriaticus)。对筛选得到乳酸菌的温度耐受性、盐耐受性及产酸性能研究,结果表明5株乳酸菌的最适生长温度均为35~37℃,能耐受18%NaCl浓度,菌株RB5产酸能力最强。     

鱼露中耐盐菌的分离鉴定及发酵性能比较

该研究从鱼露中筛选不同株耐盐菌进行菌种鉴定,并对其发酵性能进行研究。经筛选获得5株耐盐细菌,编号为JL-B、JL-C、JL-D、JL-E、JL-F,通过形态学和分子生物学鉴定菌株JT-F为表皮葡萄球菌,其余4株均为嗜盐四联球菌。经5株耐盐菌在蓝圆鲹鱼肉水解液中的发酵特性研究结果表明,5株耐盐菌发酵的鱼肉水解液pH值、总酸、菌落总数、氨基酸态氮（AAN）、挥发性盐基氮（TVBN）含量及感官评价均存在显著差异（P＜0.05）,而总可溶性氮（TSN）的含量并无显著差异（P＞0.05）,且均未检出5'-肌苷酸二钠（IMP）、5'-鸟苷酸二钠（GMP）及组胺。样品发酵60 d后感官评价结果表明,接种嗜盐四联球菌JL-B的鱼肉水解液的风味可接受度最高,酱香味及鲜味突出,发酵效果最好。其pH值最低,稳定在4.30左右,氨基态氮含量最大达到0.49 g/100 mL。     

自然发酵豆酱中嗜盐四联球菌的分离筛选及生长特性研究

以采集自不同地区的14份自然发酵豆酱为试材,对其中的嗜盐四联球菌（Tetragenococcus halophilus）进行分离鉴定及益生特性研究,同时进一步探讨优良菌株的最佳生长条件,并通过单因素试验及响应面试验对其增殖培养基进行优化。结果表明,分离鉴定得到10株嗜盐四联球菌。其中,嗜盐四联球菌YSJ-5具有良好的耐酸、耐胆盐特性及抑菌特性,其最适培养条件为接种量3%、NaCl含量5%、培养温度33 ℃、初始pH值8.0。在此最适培养条件下,最适增殖培养基成分为葡萄糖2.70%,蛋白胨2.36%,黄豆浆4.41%,嗜盐四联球菌YSJ-5的活菌数为2.20×109 CFU/mL。     

酱油发酵过程强化嗜盐四联球菌对酱油品质的影响

旨在寻找酱油发酵过程中强化嗜盐四联球菌的方式,揭示嗜盐四联球菌参与酱油发酵的功能。通过在高盐稀态酱油发酵过程中向酱醪添加嗜盐四联球菌R44,成功实现了强化嗜盐四联球菌的酱油发酵。单独添加嗜盐四联球菌,酱醪中嗜盐四联球菌数量比对照高3.0个数量级;在酵母活跃期(25 d)和非活跃期(15、35 d)添加嗜盐四联球菌,酱醪中嗜盐四联球菌数量分别增加了1.9和2.2个数量级。嗜盐四联球菌使酱油中氨基酸态氮含量提高了12.7%,达到7.9 g/L。发酵第15天添加鲁氏接合酵母,第25天添加嗜盐四联球菌,可使鲜味氨基酸和甜味氨基酸分别增加34.0%和27.0%。此外,强化嗜盐四联球菌使酱油中挥发性风味物质含量提高了2.4倍,其中醇类、酸类、酯类和酚类含量最高,分别增加了282.7%、1612.0%、895.4%和123.6%。酱油中风味物质组成受嗜盐四联球菌的添加方式影响较大,先添加酵母菌并在第25天添加嗜盐四联球菌有利于酸类、酚类和杂合类物质含量的提高;先添加酵母菌并在第35天添加嗜盐四联球菌有利于醇类和酯类物质含量的提高。该研究对阐明高盐稀态酱油发酵过程中嗜盐四联球菌的发酵功能具有重要意义,...     

新疆哈族奶酪中产蛋白酶非发酵剂乳酸菌的筛选及其系统发育分析

以采集10份新疆塔城地区哈萨克族牧民自制的奶酪为原料,用改良的ROGOSA和MRS两种培养基对其分离纯化,共筛选出43株菌种,其中球菌32株,杆菌11株。对筛选出的菌株进行产蛋白酶和菌株自溶能力测定,结合生理生化特性和16S rDNA序列同源分析和建立系统发育树分析,对挑选出的10株优势菌进行了菌株分子生物学鉴定,鉴定结果表明：菌株R6-6自溶度最高,为42.32%;而自溶度最低的菌株为R4-4,达到6.21%;菌株R2-2、R4-2、R4-7为表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）;菌株R3-5、R10-6为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）;菌株R3-2为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）;菌株R6-6为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）;菌株R9-5、R9-6为鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）。其中产蛋白酶的最优势非发酵剂乳酸菌（NSLAB）菌株为乳酸片球菌（P. acidilactici）。     

乳酸菌代谢γ-谷氨酰二肽及其对馒头滋味特性的影响

采用不同乳酸菌发酵酸面团,分析比较其γ-谷氨酰二肽合成能力,旨在明确乳酸菌的种间水平差异以及其对馒头滋味特性的影响。研究表明,乳酸菌合成γ-谷氨酰二肽存在底物选择性,不同乳酸菌均优先选择谷氨酸和异亮氨酸作为底物,用于分别合成γ-谷氨酰谷氨酸和γ-谷氨酰异亮氨酸,且不同乳酸菌合成γ-谷氨酰二肽存在显著种间差异性。通过电子舌分析不同乳酸菌发酵制得馒头产品滋味特性可知,γ-谷氨酰二肽与产品咸味强度的提升有直接联系,这也为低钠发酵食品的开发提供了重要理论依据和新的研究方向。     

不同结构改性与美拉德反应前后鲜味二肽(Asn-Pro和Ala-His)呈味特性的对比分析

本文为了探讨不同结构改性(氨基酸顺序改变、增加鲜味氨基酸、串联肽)与美拉德反应对鲜味二肽(Asn-Pro和Ala-His)鲜味与增鲜效果的影响,利用电子舌分析了Asn-Pro和Ala-His及其结构改性后获得的新肽和美拉德反应产物的呈味特性,评价了Asn-Pro和Ala-His结构改性前后以及美拉德反应对味精(MSG)和酱油的增鲜效果。结果表明,Ala-His序列改性后获得的新二肽His-Ala的鲜味评分由4.09分上升到5.08分,对MSG和酱油具有明显的增鲜作用,其鲜味评分分别提高了1.40分和0.48分,而其他结构改性获得的9条新肽(Pro-Asn、Glu-Asn-Pro、Asn-Pro-Glu、Asp-Asn-Pro、Asn-Pro-Asp、Asn-Pro-Asn-Pro、Ala-His-Ala-His、Asn-Pro-Ala-His和Ala-His-Asn-Pro)相对于原二肽的鲜味均有所下降,对MSG和酱油具有明显的鲜味抑制作用。美拉德反应可显著提升Asn-Pro和Ala-His的鲜味特性,其鲜味评分分别由7.65分和4.09分上升到9.48分和6.37分,美拉德反应产物对MSG和酱油具有明显的增鲜作用,MSG的鲜味评分分别提高了3.96分和2.29分,酱油的鲜味评分分别提高了3.77分和1.49分。氨基酸序列改变、增加鲜味氨基酸以及串联肽能显著影响多肽鲜味及增鲜效果,美拉德反应是提升多肽鲜味与增鲜效果的有效途径。     

鲜味肽与增鲜肽及其加工特性研究进展

鲜味肽与增鲜肽是食品中的关键滋味成分,具有风味突出等优势。同时,鲜味肽与增鲜肽种类复杂且常作为反应前体物影响食品的风味特性,对食品风味有重要影响。据统计分析,目前已报道鲜味肽与增鲜肽数量分别为208条和60条,鲜味肽氨基酸组成和空间结构是决定鲜味肽鲜味特性的重要因素,而增鲜肽具有更复杂的增鲜模式和构效关系。在食品加工过程中,鲜味肽与增鲜肽会作为活泼反应底物参与酶促与非酶促反应,并在一定条件下转变为鲜味更强或增鲜特性更优的反应产物,有利于食品风味品质的提升。作者系统分析了鲜味肽与增鲜肽的结构特性,探讨了基于不同加工方式其在食品加工过程中的变化及其对食品呈味特性的有益影响,并阐述了在研究过程中存在的问题和解决方案,旨在对鲜味科学研究及调味品行业的技术发展提供理论指导。     

草菇鲜味肽的分离鉴定及呈味特性分析

通过超滤、凝胶过滤色谱结合电子舌与感官引导对草菇水提物进行初步分离纯化，得到鲜味最佳组分F1，利用反相高效液相色谱结合主成分分析从F1中分离出更接近草菇原始滋味的组分F1-a，进一步采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱从F1-a中鉴定出鲜味肽；并将所鉴定的鲜味肽合成后通过感官评价与电子舌分析对其呈味特性进行研究。结果表明：草菇水提物中含有4 种鲜味肽，分别为Asp-Asp-Cys-Pro-Asp-Lys、Leu-Val-Asp-Lys-Pro-Arg、Gln-Ala-Asp-Lys-Arg-Lys、Asp-Thr-Phe-Asn-Asp-Lys，鲜味阈值分别为0.10、0.33、0.42、0.17 mg/mL；草菇中4 种鲜味肽的呈味特性是氨基酸通过肽键形成特定的结构引起，其中鲜味肽Asp-Asp-Cys-Pro-Asp-Lys对味精溶液的增鲜效果最佳，且最佳添加量为20 mg/mL。     

白玉菇中鲜味肽的分离鉴定及呈味特性分析

采用超滤、凝胶渗透色谱及反相高效液相色谱结合感官引导,从白玉菇水提物中分离纯化出白玉菇鲜味最佳组分,通过超高效液相色谱-质谱联用技术从中鉴定鲜味肽,并将所鉴定的鲜味肽合成后通过人体感官评价对其呈味特性进行研究。结果表明：白玉菇水提物中含有6?种鲜味肽,即ELELQ、ELQSGNTY、NYNGGY、EAKVY、VANGGGFGAA、SLLQPL,鲜味阈值分别为0.16、0.19、0.31、0.38、0.44、0.63?mg/mL,且6?种肽的分子质量皆在1?000?Da以下;同时6?种合成肽具有鲜味增强作用,从其在味精溶液中的剂量-反应曲线可以看出,所鉴定的鲜味肽增鲜能力差异显著（P＜0.05）,其中NYNGGY、ELELQ的增鲜能力突出;6?种合成肽对鸡汤具有鲜味、咸味和甜味增强特性,其中ELELQ、NYNGGY、ELQSGNTY对鸡汤的味感提升效果最好。     

酱油中鲜味二肽的分离鉴定及其呈味特性研究

为了明确酱油中鲜味肽的结构序列,本文对酱油中鲜味肽进行分离鉴定,并系统地研究了其呈味特性。酱油经超滤膜(膜通量:5 ku、3 ku和1 ku)分离获得4个组分(F1,F2,F3和F4),通过感官评定筛选出鲜味最强的组分F4(1 ku)。该组分通过Sephadex G-15凝胶层析色谱继续分离得到8个组分(P1、P2、P3、P4、P5、P6、P7和P8),经感官评定筛选出鲜味最强的组分P2。采用超高压液相色谱串联质谱技术对P2组分进行多肽结构鉴定,通过手动De novo测序得到4条新的鲜味肽,其序列分别是Asn-Pro(230.1135 u)、Ala-His(227.1026 u)、Gly-Pro(173.0929 u)和Gly-Leu(189.1230 u)。然后采用固相合成技术合成四条肽并通过感官评定和电子舌分析,结果表明四条肽均具有明显的鲜味或鲜味增强作用。进一步研究发现,酱油的鲜味不仅来自于谷氨酸和天冬氨酸等鲜味氨基酸,小分子肽类也是构成酱油鲜味的重要成分之一。     

Umami and umami-enhancing peptides from myofibrillar protein hydrolysates in low-sodium dry-cured Spanish mackerel (Scomberomorus niphonius) under the action of Lactobacillus plantarum

Lactobacillus plantarum was involved in producing low-salt (2%, w/w) dry-cured Spanish mackerel, and its effect on the degradation of myofibrillar protein and production of umami peptides was investigated. Results showed that the dominant microbiome of the sample was Lactobacillus plantarum, accounting for 95.7% of the microbial community. The umami peptides in this dry-cured mackerel were extracted and separated by ultra-filtration and gel filtration chromatography and further identified by Nano-LC–MS/MS. Five umami-enhancing peptides, including TFYNELRV (1040 Da), TFYNELR (941 Da), TLFQPSF (838 Da), LYANNVL (805 Da) and FAGDDAPRAVFPS (1348 Da), were identified to be derived from myofibrillar protein, and the percentage of their hydrophobic amino acid were 42.85%, 33.33%, 57.14%, 57.14% and 53.84%, respectively. The synthetic peptides of these five umami peptides showed an umami-enhancing threshold value ranging from 0.34 to 0.45 mg mL⁻¹ through sensory evaluation. The SDS-PAGE analysis exhibited that actin band intensity was decreased during the processing of dry-cured mackerel. Therefore, Lactobacillus plantarum has the potential to improve the hydrolysis of myofibrillar protein to produce umami peptides in dry-cured mackerel.     

基于电子鼻和电子舌技术评价乳酸乳球菌对发酵乳风味品质的影响

目的:探究不同发酵特性的乳酸乳球菌对发酵乳品质的影响.方法:通过电子鼻与电子舌技术,结合多元统计分析对191株乳酸乳球菌所制备的发酵乳进行风味与滋味品质评价.结果:主成分分析表明,具有不同产酸和蛋白水解特性的乳酸乳球菌所制备的发酵乳风味特征呈分离趋势.Mann-Whitney分析结果表明,慢速产酸组的发酵乳芳香成分显著...     

Isolation and identification of two novel umami and umami-enhancing peptides from peanut hydrolysate by consecutive chromatography and MALDI-TOF/TOF MS

Peanut hydrolysate produced by crude protease extract from Aspergillus oryzae HN 3.042 was found to elicit intense umami and umami-enhancing effect. Taste profiles, amino acid and organic acid composition of peanut hydrolysate and its separation fractions by ultrafiltration were evaluated. The results revealed that peanut hydrolysate was mainly low molecular weight compounds. Fractions of 1-3 kDa and below 1 kDa prominently contributed to the umami taste and umami-enhancing effect of the peanut hydrolysate. The two fractions were further purified, using gel filtration chromatography and reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC), in combination with sensory evaluation, to obtain a umami peptide and umami-enhancing peptide. The active peptides were identified as Ser-Ser-Arg-Asn-Glu-Gln-Ser-Arg (SSRNEQSR, 963.9 Da) and Glu-Gly-Ser-Glu-Ala-Pro-Asp-Gly-Ser-Ser-Arg (EGSEAPDGSSR, 1091.1 Da), by MALDI-TOF/TOF MS, respectively.