6种活性多糖的结构、性质及其抗氧化活性的比较研究

为研究多糖的结构和性质对其抗氧化活性的影响,从真菌多糖和藻类多糖中共选出6种多糖,分别为地木耳多糖、葛仙米多糖、发菜多糖、螺旋藻多糖、香菇多糖和茯苓多糖。对6种多糖进行分离纯化,共得到8种均一性多糖组分。分别对纯化后多糖的特性黏度、分子量、红外光谱、单糖组成、三股螺旋结构等相关参数进行测定,进一步对比纯化多糖的体外抗氧化能力,并利用最小偏二乘分析（partial least squares,PLS）初步分析纯化后多糖的结构、性质对其体外抗氧化活性的影响。结果表明：多糖溶液特性黏度与分子量大小有关,香菇多糖对DPPH自由基的清除作用、ABTS+自由基的清除能力和还原能力最强,单糖组成（葡萄糖醛酸、半乳糖和葡萄糖）和分子量对多糖体外抗氧化生物活性影响较大。     

紫苏叶多糖分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法得到紫苏叶粗多糖（Perilla frutescens leaf polysaccharides,PFP）,并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化,获得4个多糖组分PFP-1、PFP-2、PFP-3和PFP-4。PFP-1为中性低聚糖,但总糖含量较低;PFP-2重均分子量为4.7 kDa,峰位分子量为2.2 kDa,主要组成单糖为半乳糖醛酸;PFP-3主要由两种分子量段的多糖组成,主要峰位分子量为5.2 kDa和40.0 kDa,为杂多糖,所含单糖种类较多,主要含半乳糖醛酸和半乳糖;PFP-4分子量较小,主要组成单糖为半乳糖和阿拉伯糖。体外抗氧化活性试验表明,PFP的DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除活性和Fe3+还原能力较强,具有良好的抗氧化活性,其中组分PFP-3和PFP-4抗氧化活性与PFP接近,是其发挥抗氧化作用的关键组分。     

夏枯草水溶性酸性多糖的分离及活性分析

采用水提醇沉法提取夏枯草多糖,然后经非极性吸附树脂HZ-820 脱色和脱蛋白后,再用DEAE-SepharoseFast Flow 阴离子交换柱层析进行分离得到酸性多糖。化学法和红外光谱证明该酸性多糖中半乳糖醛酸和硫酸根含量较高,间羟基联苯- 硫酸和氯化钡- 明胶比浊法测定其半乳糖醛酸和硫酸根含量分别为(58.85 ± 0.46)% 和(7 ± 0.52)%。紫外、红外光谱分析结果发现,该酸性杂多糖为非糖蛋白,可能含半乳糖醛酸、木糖、葡萄糖、鼠李糖和半乳糖等单糖。抗氧化活性研究表明该酸性多糖具有显著的DPPH 自由基和羟自由基清除活性。     

不同分子量黑果腺肋花楸叶多糖的单糖组成及抗氧化研究

采用醇沉方法对黑果腺肋花楸叶多糖进行分离,得到HY-40(4.89×10~5)、HY-60(1.17×10~5)、HY-80(8.18×10~4)和HY-90(4.56×10~4)四种不同分子量多糖,对4种不同分子量的多糖进行紫外扫描、单糖组成及抗氧化性能测定。结果表明,4种不同分子量的多糖均不含蛋白质、核酸和多肽;其均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖7种单糖组成,但构成比例不同;4种不同分子量的多糖均具有较好的抗氧化活性,铁还原力、清除DPPH自由基能力和清除羟自由基能力均表现出一定的质量浓度依赖性;其中HY-90多糖抗氧化性能最优,其铁还原力、清除DPPH自由基和清除羟自由基能力的半数有效质量浓度(EC50)分别为0.313g/L、0.444g/L和0.456g/L。     

羊栖菜褐藻糖胶的结构表征及其抗氧化活性

为研究羊栖菜褐藻糖胶的结构及其抗氧化活性,以羊栖菜为原料,经CaCl₂溶液提取、DEAE-Sepharose fast flow分离纯化得到褐藻糖胶组分SFP-2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、化学法、高效液相法(HPLC)以及傅里叶变换红外光谱法(IR)对多糖的纯度、分子量、理化性质、单糖组成以及官能团进行测定,并通过测定DPPH自由基清除活性、超氧阴离子清除活性、ABTS+自由基清除活性、亚硝酸盐清除活性和还原力,对多糖的体外抗氧化活性进行了评价。结果表明,SFP-2分子量均一,为707.0 kDa;总糖含量为66.9%,蛋白含量为3.1%,硫酸基含量为21.2%,不含糖醛酸;SFP-2主要由岩藻糖和半乳糖构成,还含有少量的甘露糖和氨基葡萄糖;红外光谱显示,SFP-2具有硫酸化多糖常见官能团的特征吸收峰;上述结果表明SFP-2是一种不含糖醛酸的硫酸化岩藻聚糖。SFP-2具有良好的清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS+自由基、亚硝酸盐活性,其EC₅₀分别为8.94、8.30、16.04、9.87 mg/mL,且具有一定的还原能力。因此,SFP-2是一种不含糖醛酸的,抗氧化活性良好的羊栖菜褐藻糖胶。     

乌龙茶多糖分离提纯及其组分分析

目的分离提纯乌龙茶多糖,进行组分分析,同时评价多糖清除DPPH自由基能力。方法采用纤维素离子交换层析法从水提乌龙茶粗多糖中分离得到一种多糖组分(WTPS-1),采用苯酚硫酸法测定该乌龙茶多糖的中性糖含量;采用红外光谱测定该多糖的结构组成;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析该多糖的单糖组成;采用清除DPPH自由基能力评价多糖的抗氧化活性。结果乌龙茶多糖WTPS-1含β-糖苷键型吡喃糖,其中性糖含量为71.9%,单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,比例为2.57:3.67:0.57:1:2.16:9.65。乌龙茶粗多糖、脱蛋白多糖和WTPS-1的DPPH自由基清除率分别为91.6%、60.7%和9.20%。结论乌龙茶粗多糖的抗氧化能力强于脱蛋白多糖和WTPS-1,为乌龙茶的进一步开发利用提供参考依据。     

GC-MS分析牛樟芝多糖的单糖组成及其抗氧化活性

研究牛樟芝的单糖组成和多糖的体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取牛樟芝多糖。以葡萄糖为标准品,苯酚硫酸法测定多糖的总糖含量。多糖经三氟乙酸水解后,糖腈乙酸酯法进行衍生化,采用气相色谱法-质谱法联用(GC-MS)分析测定单糖组成。通过DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基的清除能力评价牛樟芝多糖的体外抗氧化能力。结果表明,牛樟芝多糖的得率为3.02%±0.09%,总糖(以葡萄糖计)含量为55.42%±2.13%,单糖组成为半乳糖、葡萄糖、甘露糖,摩尔比为1∶7.14∶0.96。体外抗氧化实验结果表明牛樟芝多糖对DPPH自由基,ABTS自由基和OH自由基清除的IC_(50)分别为(0.584±0.008)、(1.182±0.058)、(1.384±0.133) mg/mL。GC-MS用于检测牛樟芝多糖的单糖组成简单、快速、灵敏,牛樟芝多糖对三种不同自由基具有一定的清除作用。     

五种甘薯多糖体外抗氧化活性比较

研究通过水提醇沉法得到五种甘薯的多糖,采用柱前衍生高效液相色谱法测定了五种甘薯多糖的单糖组成,并且比较了五种甘薯多糖的抗氧化活性,包括DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及铁离子还原能力。结果表明:五种甘薯多糖的单糖组成是一致的,都是由葡萄糖、半乳糖和木糖组成,但单糖的比例存在差异。甘薯多糖都具有良好的抗氧化活性,是一种新的抗氧化物质,其中紫薯宁薯2-2对DPPH自由基及羟自由基清除能力最强;而浙薯255的铁离子还原能力最强。在一定程度上说明甘薯多糖的抗氧化活性的作用机理存在差异,这可能与多糖的单糖组成及结构等有着密切的关系。     

刺梨多糖的理化性质、体外抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性

采用热水提取和分级醇沉技术,从无籽刺梨中制备得到两种主要多糖组分,命名为RSPs-40和RSPs-60,对其化学组成、理化性质、体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了研究。结果表明,RSPs-40和RSPs-60的提取率分别为2.62%和1.81%,总糖含量分别为42.5%±0.91%和45.90%±0.37%,蛋白质含量均为2.89%。高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析表明RSPs-40和RSPs-60的分子量大小分别为228.298 ku和124.144 ku。单糖组成分析表明RSPs-40主要由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为0.24:0.37:3.22:0.27:1.44,而RSPs-60主要由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为1.58:2.06:2.37:1.69。体外抗氧化实验结果表明RSPs-40和RSPs-60较好的DPPH自由基清除活性和ABTS自由基清除活性;体外降血糖实验结果表明RSPs-40和RSPs-60表现出较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,二者均优于阿卡波糖。RSPs-60抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性优于RSPs-40。这些结果表明无籽刺梨多糖可发一种有前途的抗氧化和降血糖膳食补充剂,应用于食品和医药领域。     

乌鳢分泌多糖和黏多糖的提取及其抗氧化活性研究

该研究提取了乌鳢浸养水体中的分泌多糖,制取了乌鳢皮、磷和骨中的黏多糖,并对两类多糖的单糖组成和抗氧化活性等性质进行了分析。结果表明:两类多糖粗提物中分泌多糖含量较高,为66.5%;黏多糖含量为37.9%。分泌多糖主要由半乳糖382.0μg/mg、阿拉伯糖353.0μg/mg和鼠李糖87.7μg/mg组成,此外还含有少量的甘露糖25.3μg/mg。黏多糖的单糖组成较为复杂,可定性和定量的单糖有葡萄糖醛酸88.6μg/mg、葡萄糖胺78.8μg/mg、半乳糖63.9μg/mg、半乳糖醛酸44.3μg/mg、木糖39.4μg/mg、葡萄糖22.0μg/mg、鼠李糖16.4μg/mg、甘露糖7.8μg/mg、阿拉伯糖7.4μg/mg。分泌多糖表现出显著的还原能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、ABTS自由基清除能力,且与浓度显著性正相关(P0.05);黏多糖具有显著的羟自由清除能力,但其还原能力、DPPH自由基清除能力、ABTS·清除效果不明显。     

骏枣多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究

本实验以骏枣为原料,对骏枣多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性进行研究。通过水提醇沉得骏枣粗多糖HZPC,再经DEAE-52阴离子层析柱和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱分离纯化获得精制骏枣多糖组分HZPC-2。利用高效凝胶色谱法(HPGPC)和离子色谱法(IC)测定HZPC-2的分子量及单糖构成,紫外光谱、红外光谱和扫描电镜研究HZPC-2的结构特征,最后对HZPC-2的抗氧化活性进行评估。结果表明：HZPC-2为α-吡喃葡萄苷骨架的中性多糖(JDP-N),分子量为3.25×10⁴ Da,是由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)和半乳糖醛酸(GalA)构成,其摩尔比为0.05:0.34:0.29:0.15:0.08:0.02:0.06。扫描电子显微镜观察结果显示,HZPC-2表面呈沟壑状且朝四面延伸,四周嵌着孔状结构。体外抗氧化试验表明,HZPC-2对三种自由基清除活性的最强的是DPPH自由基,其次是羟自由基,最弱的是ABTS自由基,这可作为潜在抗氧化剂以及为开发具有骏枣多糖功能的食品...     

茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明：该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。     

大果白刺多糖的物理特性及抗氧化活性研究

以新疆野生大果白刺果实为原料,采用水提醇沉法分离大果白刺粗多糖（CNRFP）,并对其单糖组成、物理特性和抗氧化活性进行研究。结果表明,大果白刺多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、甘露糖等组成,单糖组成质量比为葡萄糖:阿拉伯糖:半乳糖=5.43:2.98:1.94。大果白刺多糖在25~125 ℃范围内具有良好的热稳定性;大果白刺多糖溶液是具有剪切变薄的假塑性流体,且有良好的保湿性。此外,还具有良好的发泡能力和乳化能力,当大果白刺多糖浓度为5%时,其发泡率和乳化率分别是42.16%和65.29%。大果白刺多糖对自由基清除能力和总还原能力均随浓度增大而增大。CNRFP的清除DPPH、ABTS和羟基自由基半数清除率浓度（IC₅₀）值分别为是1.14、0.54和1.11 mg/mL,抗氧化活性良好。研究结果为大果白刺多糖在食品添加剂、制药和材料科学行业中的应用提供理论依据。     

响应面法优化中性蛋白酶提取苦竹花多糖及多糖性质分析

目的:采用响应面法优化中性蛋白酶辅助提取苦竹花多糖的最优条件,并对提取得到的粗多糖进行分离纯化、理化性质及体外抗氧化性测定。方法:在单因素试验基础上,考察提取时间、酶添加量、提取温度对苦竹花粗多糖得率的影响。利用响应面试验建立数学模型,确定最佳提取条件。苦竹花粗多糖经分离纯化,获取2个组分,分别命名为SBH-1和SBH-2,其中以SBH-1为主要组分。通过高效凝胶渗透色谱和红外光谱对SBH-1组分进行单糖组成、分子质量及初步的结构研究。通过与VC对比,研究苦竹花粗多糖SBH-1的体外抗氧化活性,即1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率及抗脂质过氧化能力的测定。结果:在中性蛋白酶添加量0.83%,提取温度46.68℃,提取时间115.95 min条件下,粗多糖得率为7.63%。经检测苦竹花粗多糖SBH-1组分分子质量为18.3 k D,主要由甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)3种单糖组成比例为1.3∶2.3∶1.2。SBH-1对DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除EC_(50)分别为2.03 mg/mL和1.038 mg/mL。结论:采用中性蛋白酶辅助提取得到的苦竹花粗多糖简单易行,纯化得到的中性杂多糖SBH-1具有很好的活性,为进一步研究和开发提供理论基础。     

人参果多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

通过水提法得到人参果中的总多糖(WGBP),并通过离子交换层析对WGBP进行分离纯化,得到一个中性糖WGBP-N和三个酸性糖级分(WGBP-1、WGBP-2、WGBP-3)。利用高效液相色谱及分子筛层析法对各个级分的单糖组成、分子量等进行了分析,并对结构特点进行了概括。通过DPPH和羟自由基清除实验分析了各级分的抗氧化活性。结果表明,WGBP主要由鼠李糖(rhamnose,Rha)、半乳糖醛酸(galacturonic acid,GalA)、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖(arabinose,Ara)和葡萄糖(glucose,Glc)组成,分子量分布广泛。WGBP-N主要由Gal、Ara和Glc组成,比例为62.7:17.0:17.1。三个酸性糖主要由不同比例的Rha、GalA、Gal和Ara构成。WGBP具有明显的DPPH·和羟自由基清除活性,且清除率随浓度的升高而逐渐增强。当WGBP浓度为2.0 mg/mL时,DPPH·清除率为62.7%;当浓度为0.2 mg/mL时,羟自由基清除率为81.2%。WGBP对DPPH·和羟自由基清除活性优于四个子级分。     

山茱萸籽多糖分离纯化、结构表征及抗氧化活性

为了对山茱萸籽多糖进行分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究，本实验通过亚临界水萃取、体积分数30% H2O2脱色、Sevag法脱蛋白得到山茱萸籽多糖，并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化得到了5 个多糖组分，即COSP-1、COSP-2、COSP-3、COSP-4和COSP-5，并采用Sephadex G-100凝胶色谱法对主要多糖组分COSP-4进一步纯化。凝胶色谱和单糖组成表明，COSP-4是分子质量约为2.03×104 Da的酸性均相多糖组分，由鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖组成，物质的量之比为0.96∶0.18∶5.48∶0.28∶1∶10.70。甲基化反应和核磁共振表明COSP-4包含14 种甲基化糖，残基同时包含了α构型糖基和β构型糖基，含量最高的单糖结构为1,4,5-三乙酰基-2,3-二甲基木糖。扫描电子显微镜观察表明COSP-4呈不规则碎片结构，松散多孔，类似海绵结构。抗氧化活性实验表明，COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基具有较强的清除能力。COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基的半抑制质量浓度分别为（1.72±0.14）、（1.48±0.17）mg/mL和（2.87±0.27）mg/mL。综上，本实验为进一步研究山茱萸籽多糖的构效关系及促进其应用提供参考。     

超声辅助提取刺梨果渣多糖及其抗氧化活性的研究

目的 采用超声辅助提取刺梨果渣多糖,探究不同超声时间(30, 45, 90 min)对刺梨果渣多糖化学组成、官能团、分子量及抗氧化活性的影响。方法 通过高效凝胶色谱、高效液相、傅里叶红外光谱等方法探究超声对刺梨果渣多糖结构的影响。以还原力及自由基清除率为指标,对刺梨果渣多糖的抗氧化活性进行研究。结果 刺梨果渣多糖是由葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成的酸性多糖。相比传统热水提取,超声对多糖的单糖组成及官能团的特征吸收无明显影响,但可有效降解多糖高分子量的组分。短时间超声辅助提取(30,45 min)可提高刺梨果渣多糖对DPPH?、ABTS+?的清除能力以及对Fe3+的还原能力,这是由于分子量降低,多糖分子中的游离羟基及还原端含量增加,使得多糖抗氧化活性增强。但随着超声时间的增长(90 min),多糖抗氧化活性不再上升,可能是由于多糖双螺旋结构发生改变,供氢能力减弱。结论 超声辅助提取工艺可有效提高多糖提取率,短时间的超声辅助提取可通过降低多糖分子量从而提高其抗氧化活性。本研究可为超声辅助提取技术在刺梨果渣高值化利用中的应用提供理论参考。     

海绵胶煤炱菌(竹燕窝)多糖的组成及体外抗氧化活性

本文研究海绵胶煤炱菌（竹燕窝）多糖的单糖组成及体外抗氧化活性。采用超声波辅助提取方法提取海绵胶煤炱菌多糖,通过高效液相色谱（HPLC）分析单糖组成,并通过DPPH·、ABTS+·和·OH的清除能力评价其抗氧化能力。结果表明,海绵胶煤炱菌多糖得率为9.61%,总糖含量为70.92±1.530 g/100 g,单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为1.35:212:1。体外抗氧化实验表明,海绵胶煤炱菌多糖对DPPH·、ABTS+·和·OH清除能力与多糖浓度成正相关,其IC₅₀分别为（0.796±0.002）、（0.923±0.012）和（1.993±0.026） mg/mL。本实验证明了海绵胶煤炱菌多糖是一种天然的抗氧化资源,可以进一步研究海绵胶煤炱菌多糖的其他生物活性,为深度开发海绵胶煤炱菌多糖在食品、医药和化妆品等领域中的应用提供依据。     

山楂多糖的分离纯化及抗氧化和抗糖化活性研究

本研究以山楂果为原料,热水浸提法提取山楂多糖,脱色和除蛋白后采用DEAE-52纤维素进行分离纯化,在此基础上对各多糖组份的单糖组成以及体外抗氧化和抗糖化活性进行了检测,并对其构效关系进行了简单分析。结果表明,分离纯化分别得到水洗中性多糖(water-washed polysaccharide,WPS)以及盐洗酸性多糖SPS-1(salt-washed polysaccharide 1,SPS-1)、SPS-2和SPS-3,其层析回收产量分别为46.33%、7.86%、37.94%和7.12%。单糖组成分析发现,WPS的主要单糖组成为半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖和葡萄糖,而SPS-2、SPS-1和SPS-3的单糖组成主要为半乳糖醛酸、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖,其中半乳糖醛酸含量依次为25.65%、74.93%和85.77%。结合单糖组成和红外光谱结果,SPS-1、SPS-2和SPS-3可能是果胶。体外活性研究结果表明,盐洗多糖的体外抗氧化和抗糖化活性明显强于水洗多糖,且盐洗多糖中SPS-3的活性最强,其次是SPS-2和SPS-1,这可能与其分子中较高的半乳糖醛酸含量和较低的分枝度有关。本研究结果在食源性天然抗氧化剂和抗糖化剂的开发方面具有重要意义。