副干酪乳杆菌FZU103对小鼠酒精性肝损伤的防控作用

目的：探究副干酪乳杆菌FZU103(Lactobacillus paracasei FZU103,LP-FZU103)对酒精性肝损伤（alcoholic liver injury,ALI）的防控作用。方法：选取36只SPF级ICR小鼠,随机分为空白组、模型组、实验组（LP-FZU103干预）,实验6周后测定体质量及脏器系数、血清及肝脏生化、肝组织病理学及炎症因子、肝功能相关基因转录和肠道菌群组成。结果：与模型组相比,LP-FZU103干预可改善ALI小鼠的脏器系数和肝组织病理损伤程度,显著降低血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇浓度以及谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性,提高血清高密度脂蛋白胆固醇浓度;显著提高肝脏中过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性以及谷胱甘肽含量,降低肝脏中丙二醛含量和白细胞介素6、干扰素γ水平;显著上调脂质代谢相关基因Ldlr及下调Acc1、Hmgcr和Cd36的mRNA水平;显著增加小鼠肠道中约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）、罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paraca...     

副干酪乳杆菌L9对小鼠肠道短链脂肪酸含量的影响

目的:评价副干酪乳杆菌L9对健康小鼠肠道内短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)含量的影响。方法:选取3周龄BALB/c雄性小鼠50只,随机分为副干酪乳杆菌L9高、中、低剂量组、阳性对照组(商业菌株Lactobacillus casei strain Shirota)、阴性对照(生理盐水)组共5组,以0.2 m L/d的剂量连续灌胃小鼠21 d并收集第0、21天小鼠粪便。第21天处死小鼠后搜集收集盲肠内容物,利用气相色谱仪观察内容物中SCFAs的变化,并且利用实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析肠道菌群数量的变化。结果:与第0天相比,第21天小鼠粪便中SCFAs中乙酸、丙酸含量极显著上升(P0.01),Bifidobaceterium spp.、Lactobacillus属数量和丁酰辅酶A转移酶(butyryl-Co A:acetate Co A-transferase,CoAT)基因的表达量显著升高(P0.05);盲肠内容物中,低剂量组和高剂量组中的Bifidobaceterium spp.数量和CoAT基因表达量分别与第0天和阴性对照组相比有显著差异(P0.05)。实验结果表明:副干酪乳杆菌L9可以调节肠道菌群,促进健康小鼠肠道中SCFAs的产生,并且与商业菌株Lactobacillus casei strain Shirota相比,副干酪乳杆菌L9对肠道内丙酸、丁酸的含量和肠道中Bifidobaceterium spp.的数量有更好的促进作用。     

副干酪乳杆菌N1115发酵乳对小鼠便秘的改善作用

本研究基于盐酸咯哌丁胺建模制造小鼠便秘模型,考察副干酪乳杆菌 N1115发酵乳对治疗小鼠便秘的 作用。低、中、高剂量副干酪乳杆菌N1115发酵乳（活菌含量分别为1×107、1×108、1×109 CFU/mL）连续灌胃 15 d后,与对照组相比小鼠的排便量及粪便含水量均显著升高（P＜0.05）;肠道推进率分别为57.3%、67.3%和 71.3%,显著高于对照组（P＜0.05）。气相色谱仪分析小鼠粪便中的短链脂肪酸发现,灌胃副干酪乳杆菌N1115 发酵乳后,小鼠粪便中的乙酸、丙酸、丁酸、戊酸含量显著升高（P＜0.05）,且短链脂肪酸种类较模型组更为丰 富。对小鼠远端结肠的组织形态观察发现,灌胃副干酪乳杆菌N1115发酵乳的小鼠结肠黏膜完整,细胞排列整齐, 而对照组的肠黏膜厚度降低,凹窝变浅。通过c-kit抗体对小鼠结肠中的肠间质细胞（interstitial cells of Cajal,ICC）进 行免疫组化分析,结果显示,灌胃副干酪乳杆菌N1115发酵乳后小鼠的ICC含量显著增加,表明副干酪乳杆菌N1115发 酵乳通过提高ICC活性,促进肠道蠕动。综上,副干酪乳杆菌N1115发酵乳能够有效缓解小鼠的便秘症状。     

副干酪乳杆菌副干酪亚种L1的培养条件及絮凝活性研究

酸浆是我国传统的鲜薯（或绿豆）淀粉生产工艺中用于淀粉分离净化的生物絮凝剂。本实验对从自然发酵的甘薯酸浆中分离的、对甘薯淀粉具有高絮凝活性的副干酪乳杆菌副干酪亚种L1的培养条件和絮凝活性进行了研究。结果表明,副干酪乳杆菌副干酪亚种L1为兼性厌氧菌,在改良TJA培养基初始pH为7.0,在25℃培养48～60h时,菌体的生长状况和絮凝活性最好;Na+、K+对L1的絮凝活性有显著的增强作用,但对高温和胰蛋白酶敏感。      

副干酪乳杆菌副干酪亚种L1的培养条件及絮凝活性研究

酸浆是我国传统的鲜薯(或绿豆)淀粉生产工艺中用于淀粉分离净化的生物絮凝剂。本实验对从自然发酵的甘薯酸浆中分离的、对甘薯淀粉具有高絮凝活性的副干酪乳杆菌副干酪亚种L1的培养条件和絮凝活性进行了研究。结果表明,副干酪乳杆菌副干酪亚种L1为兼性厌氧菌,在改良TJA培养基初始pH为7.0,在25℃培养48～60h时,菌体的生长状况和絮凝活性最好;Na+、K+对L1的絮凝活性有显著的增强作用,但对高温和胰蛋白酶敏感。     

氧气对干酪乳杆菌生长和活力的影响

以静置培养为对照,通过振荡培养制造有氧环境,对干酪乳杆菌的生长曲线、菌体活力进行分析。研究发现在有氧条件下菌体生长受到抑制,菌体密度小于静置发酵,在4℃保存时的活力迅速下降,另外,有氧生长菌体对热、胆汁等条件的耐受性较差,在50℃处理4h导致菌体迅速死亡,在含有胆汁的培养基中,菌体生长几乎停滞。通过透射电镜观察发现有氧条件下菌体细胞壁发生破裂,菌体细胞质成分溶出,导致菌体死亡。因此,氧气对干酪乳杆菌的生长具有抑制作用,造成细胞损伤,导致菌体活力降低。     

副干酪乳杆菌乳酸脱氢酶的生物信息学分析

目的：分析和预测副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)基因及其编码蛋白的结构和特性,以指导其生物学功能的实验研究。方法：利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其他生物信息学分析软件,如ClustalX、VMD,从数据库中得到乳酸脱氢酶基因,分析、预测该基因编码的蛋白理化性质、翻译后的修饰位点、拓扑结构、二级结构、三级结构和功能域。并与其他微生物的乳酸脱氢酶蛋白序列进行比对,得出它们的保守序列。结果：该基因编码335个氨基酸,其蛋白理论分子质量为36608.8u,预测该蛋白有3个跨膜区。与干酪乳杆菌的乳酸脱氢酶进化关系最近。结论：应用生物信息方法可预测得到副干酪乳杆菌的乳酸脱氢酶的结构与功能方面的信息。     

副干酪乳杆菌海藻酸钠微胶囊包埋工艺

研究副干酪乳杆菌海藻酸钠微胶囊的包埋效果,副干酪乳杆菌在冻干、贮藏及模拟胃胀道环境中的存活情况,并优化包埋工艺参数。结果表明,大豆蛋白分离物(SPI)是适宜的内层壁材,低聚异麦芽糖对副干酪乳杆菌的冷冻保护效果最佳。当SPI用量为3%,低聚异麦芽糖添加量5%,海藻酸钠浓度2%、氯化钙浓度为0.2 mo L/L,副干酪乳杆菌的包埋率可达93.31%,冷冻干燥后微胶囊4℃储存28 d的副干酪乳杆菌存活率达58.97%,微胶囊副干酪乳杆菌在模拟胃液中3 h存活率达67.52%,模拟肠液中45 min基本得到释放。由于挤压法制备的副干酪乳杆菌微胶囊较高的存活率,操作简便、经济,因此有较为广阔的工业化前景。     

干酪乳杆菌对便秘小鼠肠道菌群的影响

该试验探讨了从健康儿童肠道分离的干酪乳杆菌对便秘小鼠肠道粪便菌群组成的影响.选择体重为(20±2)g的小鼠72只,随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、干酪乳杆菌低剂量组、中剂量组和高剂量组.用复方地芬诺酯灌胃小鼠,建立便秘模型.正常对照组小鼠灌胃生理盐水,模型对照组小鼠灌胃复方地芬诺酯和生理盐水...     

副干酪乳杆菌在绿豆淀粉生产中的应用

为解决传统酸浆法生产绿豆淀粉存在的提取率和质量不稳定的问题,以从甘薯酸浆中分离出来的副干酪乳杆菌的发酵液代替传统的绿豆酸浆来分离绿豆淀粉。通过单因素和正交试验证明,影响副干酪乳杆菌作用效果的主要因素有pH值、温度、磨浆时的料液比和副干酪乳杆菌菌液添加量,各因素之间的显著程度依次为:磨浆时的料液比>温度>菌液添加量>pH值。最佳参数组合为菌液的添加量33%,pH值7.5,温度60℃,料液比1∶3。     

植物乳杆菌LP1001缓解小鼠酒精性肝损伤的研究

植物乳杆菌LP1001是一株从泡菜中分离得到的具有良好抗氧化功能的乳酸菌,通过动物实验探讨其对急性和慢性酒精性肝损伤的干预作用。将40只小鼠分成空白组、模型组、低、中、高剂量组5组,比较两种肝损伤模型中各组小鼠的肝指数,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和肝匀浆中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)的浓度,并观察肝脏的病理学变化。结果表明,不同剂量的LP1001可在不同程度上抑制酒精引起的ALT、AST、TG和MDA浓度的升高以及GSH的降低,其中高剂量组的作用尤其显著,可使各指标基本恢复到正常水平;并且LP1001对慢性酒精性肝损伤的缓解更为明显,与病理学观察结果相互印证。综上,植物乳杆菌LP1001对小鼠的急慢性酒精性肝损伤均能起到一定的保护作用。     

副干酪乳杆菌缓解由洛哌丁胺诱导的小鼠便秘的差异

该研究对4株副干酪乳杆菌LC2、LC3、LC38、FJSWX33-L2缓解便秘的效果进行了评价,并分析了其差异性效果的可能途径。将36只Balb/c雄性小鼠随机分成6组,空白组、模型组灌胃3%蔗糖溶液,其余各组灌胃副干酪乳杆菌,共14 d(10⁹CFU/(d·只))。第15天到第30天,除继续前14 d的操作外,在此之前先灌胃洛哌丁胺悬液进行便秘模型建立。实验期间及实验结束后测定小鼠粪便含水量、排首粒黑便时间及小肠推进率;测定血清中酪酪肽、胃动素水平;测定结肠中5-羟色胺、结肠中神经营养因子-3水平;测定结肠中Aqp4、c-kit基因转录水平;测定粪便中短链脂肪酸的含量。结果表明,4株副干酪乳杆菌均有缓解便秘的功能,但4株菌在缓解便秘的途径中存在着差异。其中LC2能通过改善胃肠调节肽、神经营养因子、神经递质、短链脂肪酸水平、Aqp4和c-kit基因的转录水平缓解便秘症状,而其余3株菌缓解便秘的途径各有侧重。副干酪乳杆菌具有缓解便秘的潜力,但其缓解便秘的效果以及途径可能存在显著的菌株差异。     

副干酪乳酸菌L1产淀粉酶条件优化及温度、pH对淀粉酶酶活力的影响

从酸浆中分离得到的副干酪乳酸菌L1能够与淀粉结合,产生淀粉酶,分解淀粉。本实验研究不同培养条件对副干酪乳酸菌产淀粉酶量以及温度、pH对淀粉酶活力的影响。通过单因素和正交实验对产酶条件进行优化。结果表明:培养基初始pH为4.0、培养温度为42℃、以6%马铃薯淀粉作为碳源、接种量为8%、培养96h时副干酪乳酸菌L1产淀粉酶量最高。副干酪乳酸菌L1产生的淀粉酶在酸性条件下具有较高活性,在pH4.0时淀粉酶活力最高,淀粉酶最适反应温度为40℃,在此条件下淀粉酶活力最高可达102.95U/mL。其中副干酪乳酸菌L1利用不经过糊化淀粉比利用经过糊化淀粉产淀粉酶量高,说明副干酪乳酸菌L1能利用生淀粉产淀粉酶。      

藏灵菇源副干酪乳杆菌KL1对蛋鸡脂质过氧化的研究

利用筛选自藏灵菇中的产胆盐水解酶的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1,制备冻干菌粉作为受试物进行蛋鸡动物实验,探讨其对蛋鸡脂质过氧化的影响。将120只农大3号矮小鸡随机分为低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组和对照组,对照组饲喂基础日粮,低、中、高实验组在此基础上,分别摄入活菌剂量为10~5、10~6、10~7 CFU/(只·d)KL1活菌制剂,连续11周,期间测定血清抗氧化指标,屠宰后测定肝脏脂肪含量并观察组织切片。结果表明,中、高剂量实验组与对照组相比,肝脏组织中粗脂肪含量极显著降低(P0.01),分别降低了32.4%、48.2%;低剂量实验组与对照组相比降低了9.4%;肝脏组织切片油红O染色结果显示,随菌株KL1剂量的增加肝脏脂滴堆积现象逐渐减轻,其中高剂量实验组抑制脂肪肝的作用最强;抗氧化指标结果显示,与对照组相比,低、中、高实验组血清总抗氧化能力均显著提高(P0.05),分别为16.3%、13.9%、14.8%,中剂量实验组超氧化物歧化酶活力显著提高19.4%(P0.05),低剂量和高剂量实验组分别提高11.3%、16.4%,丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活力无显著差异(P0.05)。说明藏灵菇源副干酪乳杆菌KL1具有较强的抑制脂肪肝形成能力,并具有较好的脂质抗氧化能力。     

PH值及底物对副干酪乳杆菌发酵生产苯乳酸的影响

在7.5 L发酵罐中研究pH值及流加苯丙酮酸和葡萄糖对副干酪乳杆菌W2分批发酵产苯乳酸（phenyllacticacid,PLA）的影响。结果表明：发酵液初始pH值、底物葡萄糖和苯丙酮酸对菌体生长和产物产量都有影响。控制发酵液pH值为6.5,采用间歇流加苯丙酮酸及连续流加苯丙酮酸和葡萄糖,发酵36 h后PLA产量分别达到1.148 g/L和2.121 g/L,苯丙酮酸的转化率分别为62.19%和47.2%,与分批发酵相比分别提高41.72%和161.53%。     

拟干酪乳杆菌胞内代谢产物的GC-MS分析方法的建立

用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术建立了拟干酪乳杆菌发酵过程中胞内代谢物的代谢组学研究方法。考察了不同溶解剂（吡啶、四氢呋喃、二甲基甲酰胺）和衍生化试剂（N-甲基叔丁基二甲基硅基三氟乙酰胺（MTBDSTFA）、N,O-双（三甲基硅烷基）三氟乙酰+三甲基氯硅烷（BSTFA+TMCS）、N-甲基-N-三甲基硅烷基三氟乙酰胺（MSTFA））,对质谱峰的信号强度和个数的影响,确定使用吡啶作为溶解剂、BSTFA+TMCS作为衍生剂的两步衍生法效果最佳。以拟干酪乳杆菌为分析对象,共鉴定出38种胞内中间代谢物。方法学考察结果表明,该方法具有良好的精密度、稳定性和重现性。本方法已成功地应用于拟干酪乳杆菌发酵过程研究,并且发现了发酵过程中可能的生物标志物。      

副干酪乳杆菌ET-22对金黄地鼠口腔溃疡的预防作用及机制

副干酪乳酸杆菌ET-22是一种具有缓解炎症、调节免疫功能的益生菌,为探究其对口腔疾病的改善作用及机制,采用甲基紫精颊膜注射法建立金黄地鼠口腔溃疡模型,在造模前,分别以灌胃的方式连续给予金黄地鼠剂量为1×10⁹ CFU·mL^-1·d^-1的ET-22活菌以及对应的ET-22灭活菌和ET-22发酵液,研究ET-22对地鼠口腔黏膜结构形态和炎性因子表达水平影响。口腔黏膜的组织病理切片观察和评分结果表明,ET-22活菌、灭活菌及其发酵液均能改善地鼠口腔黏膜的上皮完整性和炎性细胞浸润,ET-22活菌预防口腔溃疡的效果最佳,ET-22灭活菌及其发酵液的预防效果次之,但它们的预防效果均优于维生素C。机制研究发现：ET-22可通过下调NF-κB的表达抑制促炎细胞因子IL-6和IL-1β的分泌,降低基质金属蛋白酶MMP-9的表达,减轻口腔黏膜的炎症浸润与转移;ET-22可以调节口腔的菌群组成,抑制口腔疾病相关的有害菌。研究表明,ET-22可降低口腔溃疡的发病风险,对预防口腔溃疡具有积极作用。