HPLC法同时测定保健食品中维生素A和维生素E

建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定保健食品中VA、VE的方法。样品预处理采用经二甲亚砜和正己烷的混合溶液于60℃剧烈振摇提取30min,离心后吸取正己烷层,合并3次提取的溶液后直接进行液相色谱测定。方法采用Inertsil氨基柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以含0.1%异丙醇的正己烷为流动相进行等度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为280nm,柱温为25℃。结果表明,VA、VE分别在5~25μg/m L、100~500μg/m L范围内线性关系良好,相关系数分别达0.9997和0.9998,保留时间和峰面积的日内和日间精密度均较好,平均加标回收率在97.53%~100.67%之间,相对标准偏差(RSD)均小于2.0%。与相应的检验标准测定结果比较,相对偏差均小于1.0%,无明显差异。该方法快速、准确、可靠,适用于不同厂家、不同配方的保健食品中添加合成VA、VE的同时定量测定。     

高效液相色谱法测定牦牛乳曲拉中的脂溶性维生素

建立了同时测定由拉中脂溶性维生素A.D3,E的高效液相色谱法.样品经超声波提取后,采用反相高效液相色谱一紫外可见检测器进行测定.色谱柱为Agilent Eclipse XDB C-18柱(4.6 mm×150mm,i.d.5 μm),甲醇为流动相,流速1.0 mL/min,二极管阵列检测器(DAD)在325,265和290 nm三波长下同时检测.结果表明,维生素A和D,在0.5～20.0mg/L质量浓度范围内;雏生素E在1.0～20.0mg/L质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.9993～1.0000.该方法的回收率:VA为88.7%～96.9%;VD3为86.1%～8.2%;VE为89.6%～94.8%.KSD(n=3):VA为1.40%～2.38%;VD3为0.31%～3.39%;VE为0.55%～4.02%.检出限:VA为0.3187 ms/kg;VD3为0.2382 mg/kg;VE为0.6465 mg/kg.     

辅酶Q_（10）软胶囊中的辅酶Q_（10）与V_E高效液相色谱法研究

本研究建立了含天然VE的辅酶Q10软胶囊中的辅酶Q10与天然维生素E同时测定的方法。该方法采用高效液相色谱法,以Agilent TC-C18（2）色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）为分析柱;以甲醇：乙醇（75：25）为流动相;检测波长为290nm。结果表明,本方法测定辅酶Q10的平均回收率为：98.40%,RSD为：0.86%（n=6）;天然VE的平均回收率为：101.69%,RSD为：0.58%（n=6）。该方法简单、方便、准确、可靠、可用于同时测定同一制剂中共存的辅酶Q10与VE。     

稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素

目的 建立稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素(VA、VD2、VD3、VE和VK1)的分析方法。方法 样品经皂化, 正己烷提取, 甲醇定容, 经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7 μm)分离, 以0.2%甲酸水溶液和甲醇-乙腈(4:6, V:V)为流动相, 梯度洗脱, 采用正离子源电喷雾电离, 多反应监测模式测定, 同位素内标法定量。结果 VA、VD2、VD3、VE和VK1在一定浓度范围内具有良好的线性关系, 相关系数(r2)大于0.99, 检出限为0.2~5 ?g/100 g, 定量限为0.6~15 ?g/100 g。5种维生素的加标回收率为89.3%~109.2%, 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD) 为3.82%~8.72% (n=6)。结论 本研究建立的方法在很大程度上简化了婴幼儿配方奶粉中脂溶性维生素的检测流程, 提高了实验效率和检测结果的准确性。     

辅酶Q10软胶囊中的辅酶Q10与VE高效液相色谱法研究

本研究建立了含天然VE的辅酶Q10软胶囊中的辅酶Q10与天然维生素E同时测定的方法。该方法采用高效液相色谱法,以Agilent TC-C18（2）色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）为分析柱;以甲醇：乙醇（75：25）为流动相;检测波长为290nm。结果表明,本方法测定辅酶Q10的平均回收率为：98.40%,RSD为：0.86%（n=6）;天然VE的平均回收率为：101.69%,RSD为：0.58%（n=6）。该方法简单、方便、准确、可靠、可用于同时测定同一制剂中共存的辅酶Q10与VE。     

HPLC法测定饲料原料中脂溶性维生素含量

本文建立HPLC法同时测定米糠、麦麸、油枯以及玉米粉等粮油产品中脂溶性维生素含量的方法。色谱条件：色谱柱为Hyperclone BDS C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,柱温为30℃,流动相：甲醇：乙酸乙酯（V：V）=95：5,流速为1mL/min,紫外检测波长为275nm。结果表明：维生素标样的线性相关系数均在0.9995～0.9999之间,线性关系良好;VD2、VD3、VE（α-生育酚）、VK1最小检测限分别为0.35、8.82、0.08、0.12μg/mL;重复性试验VE（α-生育酚）,VK1的含量的RSD分别为8.74、3.06%。VE（α-生育酚）,VK1的平均回收率分别为86.18、107.16%,RSD值分别为13.03%,2.37%。本法可用于同时测定米糠、麦麸、油枯以及玉米粉等饲料原料中脂溶性维生素的含量。     

固相萃取-梯度高效液相色谱法同时测定婴幼儿食品中维生素A、D、E的含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定婴幼儿食品中的VA、VD、VE含量的方法。方法:在已有研究基础上对样品前处理方法进行了优化和改进,皂化后利用正己烷∶甲基叔丁基醚(v∶v=1∶1)进行提取,PLS小柱萃取分离,50%丙酮正己烷洗脱,甲醇定容后高效液相色谱仪梯度洗脱检测。结果 VA、VD、VE在0.1¹0μg/m L浓度范围内相关系数均为0.999以上,回收率均在90%以上,相对标准偏差小于4%。结论:方法快速、灵敏、准确,前处理简单易行,可用于婴幼儿食品中VA、VD、VE的同时测定。     

青藏地区青稞中VE 的高效液相色谱测定

采用高效液相色谱法对青藏高原的16 种不同地区和品种的青稞中δ-VE、γ- VE 和α- VE 同时进行了含量的测定,为青稞的质量评价和综合利用提供依据。采用Symmetry C18(4.6mm × 250mm,5μm)色谱柱;甲醇:水=98:2(V/V)为流动相;检测波长295nm;柱温25℃;流速1ml/min。结果表明,青藏地区的青稞中VE 总含量在0.3～0.8mg/100g,其中青海地区青稞中VE 的平均总含量比西藏地区低约10%。     

高效液相色谱法测定乳粉中维生素A,D

研究了高效液相色谱法,同时测定牛乳中维生素A,D。乳粉样品通过皂化、萃取,提取液通过aminocyano色谱柱净化、silica色谱柱分离,紫外检测器,外标定量法,同时测定出样品中维生素A,D。本法最低检出限VA为1.1×10-8g,VD为2.5×10-8g;变异系数VA为1.917%,VD为5.518%;平均回收率VA为96.3%,VD为90.2%。     

HPLC法测定鱼腥草中11种维生素的含量

目的测定鱼腥草中维生素的种类和含量,比较不同鱼腥草资源间的差异以及新鲜鱼腥草地上和地下部分的差异.方法脂溶性维生素VA、δ-VE、VD2、VD3、α-VE和VK1采用Hyperclone BDS C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙酸乙酯(体积比955)为流动相,于275 nm处测定;水溶性维生素VB1、VB2、VB6、烟酸和VC采用Luna C18(2)100 (A)(200mm×4.6mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以0.005mol/mL己烷磺酸钠(pH3.2)-甲醇(两者体积比73)为流动相,于254 nm处测定.结果鱼腥草中含有较多的α-VE和VC,含少量的VD3、VK1及烟酸,而其余6种维生素均未检出;鱼腥草地上部分维生素种类和含量比地下部分丰富.结论鱼腥草资源间维生素种类差异很小,但维生素含量差异显著;其地上部分维生素的营养价值高于地下部分.     

液相色谱-串联质谱法测定食品中喹啉黄、酸性绿S和专利蓝V

目的:建立一种快速、准确的食品中喹啉黄、酸性绿S和专利蓝V的高效液相色谱-串联三重四级杆质谱测定方法。方法:样品经提取、聚酰胺小柱净化、解析处理后,采用XDB-C18色谱柱,以乙腈和0.02mol/L乙酸铵为流动相,梯度洗脱分离后,在负离子和多反应监测(MRM)模式下进行定性和定量分析。结果:在优化的条件下,喹啉黄、酸性绿S和专利蓝V的检出限为1～10ng/mL;在5～1000ng/mL质量浓度范围线性良好,相关系数均大于0.99;平均回收率在85%以上,相对标准偏差均小于10%。结论:该方法简单、灵敏度高,适用于食品中喹啉黄、酸性绿S和专利蓝V3种着色剂的同时定性和定量分析。     

OPA柱前自动衍生HPLC-FLD法测定玉米低聚肽中AY的含量

研究建立了反相高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定玉米低聚肽中丙氨酸-酪氨酸(AY)的方法。色谱柱选为Agilent Hypersil ODS柱(125 mm×4.6 mm×5μm);荧光检测激发波长为340 nm,发射波长为450 nm;洗脱程序为梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。玉米低聚肽样品经邻苯二甲醛(OPA)柱前自动衍生,能使AY与样品中游离氨基酸、小肽等在30 min内得到良好分离,并且AY浓度在0.1～1 000.0 mg/L时其浓度与相应峰面积有良好的线性关系,最低检测限(以信噪比为3计)为0.005 mg/L。样品加标各AY的回收率为97.8%。该法快速准确,简便灵敏,分离度高,能够满足玉米低聚肽中AY的检测要求。     

高效液相色谱法测定食品中番泻苷A和番泻苷B的含量

建立高效液相色谱法测定食品中番泻苷A和番泻苷B的方法。样品经过0.2%碳酸氢钠溶液超声提取,采用Agilent ZORBAX SB-C₈(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)色谱柱分离,以四氢呋喃-水-乙酸为流动相洗脱,DAD检测器,检测波长:340 nm。番泻苷A、番泻苷B在1～100 μg/mL范围线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限(S/N=3)为15 mg/kg,定量限(S/N≥10)为50 mg/kg。以空白样品进行添加回收试验,番泻苷A的回收率为80.88%～96.34%,相对标准偏差(Relative Standard Deviation)为3.07%～7.73%,番泻苷B的回收率为81.32%～102.2%,相对标准偏差(RSD)为2.62%～9.62%。该方法前处理简单、灵敏度高、操作简便、准确性良好。在市售的果冻类食品中,检出阳性样品。     

高效液相色谱-串联质谱联用法与高效液相色谱法同步测定白玉菇麦角固醇和VD2方法比较

建立高效液相色谱-串联质谱（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLCMS/MS）联用法与HPLC法同步检测白玉菇样品中麦角固醇和VD2含量方法,经方法学评价确定两种检测方法的线性范围、灵敏度与精确性。通过对经醇碱皂化回流法提取样品中麦角固醇和VD2的分析验证,阐述两种检测方法的差异性,为白玉菇有效生物活性成分与相关产品的质量检测和对白玉菇中麦角固醇与VD2之间转化关系的研究提供技术支持。HPLC-MS/MS法中,采用色谱分离柱Agilent SB-C8 Rapid Res柱（2.1 mm×50 mm,3.5 μm）及在优化的色谱条件下,麦角固醇与VD2之间色谱峰保留时间分别为4.303 min和4.22 min。电喷雾离子源正离子模式下采用多反应选择离子监测模式,分别选择m/z 379.3/125.3与m/z 397.3/125.3离子对麦角固醇与VD2进行定量,结果表明麦角固醇在0.15～6 mg/L、VD2在0.01～1 mg/L范围内与峰面积线性关系良好,平均加标回收率分别为93.51%、90.56%,日内和日间相对标准偏差均小于7%。HPLC法采用COSMOSIL Column 5C18-MS-II（4.6 mm×250 mm,5 μm）柱分离体系,麦角固醇和VD2色谱峰保留时间分别为12.891 min和9.919 min,方法学评价结果显示,麦角固醇在15～750 mg/L、VD2在0.5～50 mg/L范围内与峰面积线性关系良好,两者的平均回收率分别为98.51%、94.05%,日内和日间相对标准偏差均小于1%。采集的样品采用HPLC-MS/MS联用法和HPLC法分别检测实验结果有一定的差异,与HPLC法相比,HPLC-MS/MS联用法具有快速检测时间短、检出限低、更灵敏的优势。     

胀果甘草悬浮细胞中黄酮类化合物HPLC分析

用HPLC法建立野生胀果甘草与悬浮培养的胀果甘草细胞中黄酮类化合物的HPLC指纹图谱,并采用LC-MS技术推测HPLC共有峰中主要指纹峰的化学结构。采用Agilent EclipseXDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈:0.1%冰醋酸,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长310 nm。Agilent1100LC/MSD液质联用系统,ESI源。在设定的色谱条件下,分别得到的野生甘草与甘草细胞中黄酮类化合物指纹图谱,用中国药典相似度评价系统软件进行评价相似度为75.2%,根据LC-MS结果推断了HPLC共有峰中2个主要指纹峰分别为甘草苷和甘草素。结果表明野生甘草中绝大部分黄酮类化合物在甘草细胞中均有合成,使利用细胞悬浮培养生产的甘草黄酮类化合物成为可行的途径。     

免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8种霉菌毒素

目的:建立免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定水产品中8种霉菌毒素残留。方法:样品经乙腈水溶液(84:16,V:V)提取,多毒素免疫亲和柱净化。色谱柱为Agilent Proshell 120 SB·C₁₈(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相为甲醇-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为40℃。采用电喷雾离子源正负离子同时扫描,多反应监测模式(MRM)进行质谱检测。结果:8种霉菌毒素在1.0～50.0 ng/mL范围内线性关系良好(R²>0.992),方法检出限在0.05～0.50μg/kg之间,定量限在0.17～1.65μg/kg之间;8种霉菌毒素加标回收率在75.6%～106.3%之间,相对标准偏差(RSD)为3.5%～9.3%。结论:该方法操作便捷、灵敏度高、准确可靠,能满足水产品中多种霉菌毒素残留快速检测需求。     

高效液相色谱法测定红茶菌中的功能因子

建立了一种利用高效液相色谱法同时分析红茶菌中2种主要功能因子(D-葡萄糖二酸1,4内酯和D-葡萄糖二酸)的方法。采用AgilentSB-Aq色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),色谱条件:流动相为0.025mol/LKH2PO4(pH2.5),流速0.5mL/min,柱温30℃,进样量10μL,紫外检测波长为210nm。在此检测条件下,红茶菌中的2种主要功能因子能够得到较好分离,回收率为99.7%～102.3%,RSD<3%,精密度较高,重现性较好。     

HPLC测定米力农注射液中的乳酸含量

目的 建立测定米力农注射液中乳酸含量的HPLC方法.方法 采用Agilent SB-Aq （4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,甲酸-二环己铵-水（0.1：0.1：100）为流动相,流速：1mL/min,检测波长210nm,柱温：25℃,进样量：20μL.结果 乳酸在0.5～5.0mg/mL的浓度范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为99.7％（RSD=0.37％,n=6）.结论 此法准确、简便、快速,适用于米力农注射液中乳酸的含量测定.     

HPLC法同时测定金银花等样品中6种绿原酸异构体的含量

目的:建立HPLC法同时测定茶叶、枸杞叶、地瓜叶、咖啡、金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C的含有量。方法:采用50%甲醇溶液为提取剂,超声波辅助提取30 min,提取液的分析采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,进样量10μL,检测波长327nm,柱温30℃。结果:6种绿原酸异构体在0.50~50 mg/L范围内线性关系良好(r>0.9995),检出限1.1~1.5 mg/kg,定量限3.7~5.0 mg/kg;在不同植物样品基质中平均加样回收率93.5%~102%,RSD>3.17%。结论:该方法简便,重复性好,准确度高,可用于植物样品中绿原酸及其异构体的含量测定及产品质量控制。     

高效液相色谱法测定成熟龙眼各部位游离鞣花酸含量

采用高效液相色谱法测定石峡、储量两个品种成熟龙眼各部位游离鞣花酸含量。鞣花酸提取条件为80%甲醇溶液,70℃回流2h。色谱条件为:C18色谱柱(250mm×4.5mm,5μm)、柱温35℃、进样体积10μL、检测波长254nm、流速1mL/min,流动相为甲醇-水-冰乙酸(50:49.7:0.3,V/V)。鞣花酸在1～200μg/mL范围内与峰面积呈线性关系,相关系数为0.999。取5个样品瓶分别进样,得到样品保留时间相对标准偏差(RSD)值为1.0%,峰面积RSD值为0.8%。对同一瓶样品连续进样10次,保留时间和峰面积的RSD值分别为0.15%和0.2%。加标回收结果表明平均加标回收率为95.97%～101.9%。测定结果表明石峡和储量各部位鞣花酸的含量大小顺序均为果核>果皮>果肉,其中果皮和果核中鞣花酸远大于已报道的其他水果中的含量。