富硒荷叶离褶伞菌丝体中蛋白质提取工艺优化及氨基酸组成分析

以20 L生物发酵罐培养的富硒荷叶离褶伞菌丝体为原料,对菌丝体中蛋白提取工艺进行优化,并分析硒的富集对荷叶离褶伞菌丝体中氨基酸种类和含量的影响。利用单因素实验和Box-Benhnken中心组合响应面试验法,优化了荷叶离褶伞菌丝体中硒蛋白提取工艺,采用3,3’-二氨基联苯胺分光光度法测定蛋白质中硒的含量,并通过氨基酸测定仪分析测定富硒前后的菌丝体蛋白中氨基酸量的变化。结果表明,荷叶离褶伞菌丝体中硒蛋白的最适提取条件为：提取温度64℃、提取时间60 min、液料比200:1 mL/g、提取次数2次,经过验证性试验,测得蛋白提取率为75.13%,菌丝体中富硒量达到63.87μg/g。采用氨基酸测定仪分析氨基酸的组成,并通过氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）指标对富硒荷叶离褶伞菌丝体蛋白质进行初步营养价值评价。富硒荷叶离褶伞菌丝体中蛋白质中氨基酸种类齐全,人体必需氨基酸含量为17.20 g/100 g,较未富硒的高出19.75%,必需氨基酸/非必需氨基酸（EAA/NEAA）为0.51,接近WHO提出的推荐值,AAS和CS的值接近于模式蛋白。说明经过工艺优化可以提高蛋白质提取率,在富硒菌丝体...     

紫阳富硒茶中硒蛋白的提取

为了优化碱法提取硒蛋白的工艺条件,在单因素试验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合试验设计及响应面分析方法,考察了碱液浓度、提取温度以及料液比三因素对蛋白质提取率的影响,得出了硒蛋白提取效果的回归模型。结果表明,最佳工艺参数为碱液浓度0.09 mol/L,提取温度66.81℃,料液比1∶54.98(g:mL),每次提取3 h,提取2次,在此基础上硒蛋白提取率为56.52%,硒含量为4.89μg/g,占茶叶总硒含量的41.0%。     

超声-微波协同提取富硒米糠蛋白的工艺优化及其抗氧化活性评价

为解决富硒米糠蛋白提取率低、提取时间长及提取后功能特性下降等问题,以脱脂富硒米糠粉为原料,通过单因素试验和正交试验对超声-微波协同提取富硒米糠蛋白的工艺进行优化,通过与超声辅助法、微波辅助法和碱提法比较,探究该提取方法对富硒米糠蛋白的提取效果、抗氧化活性以及提取后米糠颗粒表面形貌变化的影响。结果表明,超声-微波协同提取富硒米糠蛋白的最佳工艺条件为超声功率600 W、微波功率500 W、提取时间20 min、料液比1∶40,在此条件下富硒米糠蛋白的提取率为86.94%,与超声辅助法、微波辅助法、碱提法相比富硒米糠蛋白提取率分别提高了40.96%、48.00%、53.50%,并且提取的富硒米糠蛋白抗氧化能力和硒含量更高。扫描电镜结果显示,超声-微波协同提取后米糠颗粒表面疏松卷曲,完整皮层结构消失,说明超声-微波协同能通过强烈破坏米糠颗粒结构增加富硒米糠蛋白的提取率,并提高其抗氧化活性。综上,超声-微波协同提取技术能够促进富硒米糠蛋白的提取并提高其抗氧化活性。     

正交设计法优化富硒发芽糙米中硒蛋白提取工艺

目的优化硒蛋白的分离提取技术。方法以富硒发芽糙米为原料,采用碱提酸沉法提取硒蛋白,研究NaOH溶液浓度、料液比、浸提时间、pH值、(NH_4)_2SO_4饱和度5个因素对硒蛋白产量的影响,并通过正交试验确定硒蛋白分离提取的最优工艺。结果硒蛋白分离提取的最佳条件为:NaOH溶液浓度0.12 mol/L、料液比1:10(g:mL)、浸提时间4 h、pH 4.5、(NH_4)_2SO_4饱和度50%。在此条件下,10 g富硒发芽糙米中硒蛋白产量为327.56 mg,即硒蛋白得率约为3.28%,硒含量为0.73μg,换算成硒得率为48%。结论本方法简便快捷且硒蛋白及硒得率较高,可作为富硒发芽糙米中硒蛋白的分离提取方法。     

富硒酵母发酵工艺的优化

以富硒酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）SY2为发酵菌种,利用5 L发酵罐培养富硒酵母。以富硒酵母生长及硒转化率为评价指标,优化其发酵工艺条件,比较溶氧反馈补料与拟指数补料两种方式对富硒酵母生长、硒转化率等的影响。结果表明,富硒酵母最适发酵条件为：初始pH 5.0,发酵温度30℃,接种量8%,硒添加量30 mg/L,发酵时间24 h。在此优化条件下,富硒酵母生物量为9.8 g/L,硒转化率为77.5%。在拟指数补料方式下,培养周期为34 h,富硒酵母得率为0.252 g/g,硒含量为1 920.5μg/g,硒的转化率为82.7%;在溶氧反馈补料方式下,培养周期为46 h,富硒酵母得率为0.317 g/g,硒含量为1 759.5μg/g,硒转化率为90.1%。结果显示,拟指数补料培养周期短,生产强度、酵母硒含量较高,是适宜补料方式。     

超声辅助碱法对含硒酒糟中硒蛋白提取工艺条件的优化

以富硒水稻酿酒产生的含硒酒糟为原料,采用单因素正交试验设计,探究超声辅助碱法对酒糟硒蛋白提取工艺条件的优化。结果表明：酿酒前后,含硒酒糟的蛋白质含量相较于原料提高了4.09%,总硒含量下降0.005 mg/kg,有机硒含量占比由73.47%降低至52.27%。含硒酒糟硒蛋白碱溶酸沉的最佳等电点为4.0,通过单因素正交试验得出含硒酒糟硒蛋白超声辅助碱法的最佳工艺条件为：超声时间40 min、碱液浓度0.12 mol/L、提取时间3 h、料液比1:9,在此条件下,硒蛋白的提取率达到最大值为54.26%,并且硒蛋白的硒含量为(0.075±0.0036)mg/kg。     

响应面法优化富硒酵母的营养条件优化

试验所用酵母菌种是经过诱变在实验室保存的富硒酵母的菌种,经过活化,对富硒酵母的营养条件优化进行优化,选取了3个主要因素,采用响应面法,以富硒酵母生物量和其富硒能力为响应值,经过优化后富硒酵母的培养基组成及比例为:碳源选用蔗糖,浓度为6.07%,氮源选用等比例的牛肉膏和蛋白胨作为复合氮源,浓度为2.03%,无机盐选用硫酸亚铁,浓度为0.137%。经培养验证,最终获得的酵母生物量为17.534 2 g/L,富硒能力为1 420μg/g。比原始菌株生物量提高23.4%,富硒能力提高41.3%。     

肠杆菌富硒蛋白的提取工艺优化及其体外抗肿瘤与抗氧化作用研究

课题组前期分离的肠杆菌H1 (Enterobacter sp. H1)可以高效转化无机硒为有机硒。该试验在前期研究的基础上，通过单因素试验结合响应面法优化富硒蛋白的盐提法提取条件，以期获得优质的富硒蛋白。同时，探究该富硒蛋白的抗氧化能力及对肝癌细胞Hep G2杀伤的影响。结果表明，盐提法提取肠杆菌富硒蛋白的最佳提取条件为：Na Cl浓度0.78 mol/L、料液比1:20.22(g:m L)、提取时间4.05 h，在此条件下，肠杆菌富硒蛋白的提取率可达到(55.56±0.05)%，所提取的富硒蛋白中硒含量为(2.55±0.004)mg/g。同时，该富硒蛋白对肝癌细胞的增殖有一定的抑制作用，当蛋白浓度为400μg/m L、孵育时间为24 h时，细胞增殖抑制率可达17.41%。以蛋白质清除羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基及总还原力的能力为指标，发现该富硒蛋白有较强的抗氧化性，且蛋白浓度与抗氧化能力呈正相关。以上结果可为开发具有抗氧化及抗肿瘤功效的硒蛋白产品提供依据，为硒蛋白资源的综合利用提供参考。     

大米源硒代多肽的制备及其抗氧化活性的研究

以富硒碎米为原料,研究了大米含硒蛋白提取条件、硒代多肽的酶法制备及其抗氧化活性.结果表明:NaOH浓度为0.07 mol/L、料液比1∶20 (m/V)、40℃下提取3h时可获得蛋白含量、硒含量分别为80.18％和0.583mg/kg的大米含硒蛋白.相对于木瓜蛋白酶和胃蛋白酶,胰蛋白酶水解大米含硒蛋白可获得具有更高抗氧化活性的多肽.在胰蛋白酶与底物浓度比1∶10,底物质量浓度60g/L,pH9.0,温度50℃的最佳酶解工艺条件下,所得大米硒代多肽的DPPH自由基清除率可达78.19％.因此,碱法提取是一种比较有效的大米含硒蛋白的提取方法,胰蛋白酶水解可获得较高抗氧化活性的大米硒代多肽.     

碱提酸沉法提取薏仁碎米中蛋白质的研究

采用贵州兴仁县产纯种小薏仁碎米作为研究对象,采用碱提酸沉法提取薏仁碎米中的蛋白质。通过单因素试验,确定各个因 素对薏仁碎米蛋白提取率的影响,然后用响应面法优化薏仁碎米蛋白的提取工艺,确定碱提酸沉法提取蛋白质的最佳工艺条件为 料液比1∶12（g∶mL）、碱提pH 10.1、碱提温度47.2 ℃、碱提时间4 h,理论蛋白提取率最大41.11%,验证此条件下薏仁碎米蛋白平均提取 率为38.75%,蛋白纯度为57.38%。     

弱碱平台下啤酒废酵母加工工艺的研究

研究了啤酒废酵母中核糖核酸（RNA）、β-葡聚糖、蛋白质的综合加工工艺。以干燥啤酒废酵母为原料,采用弱碱工艺加工平台,最佳提取RNA条件为NaOH0.4%、碱料比150∶10、醇料比100∶10;提取β-葡聚糖条件为NaOH3%,碱料比150∶10、碱性蛋白酶600U/g;提取蛋白质条件为：第一次等电点pH值4.5,第二次pH值3.7。结果表明,RNA提取率为5.25%;β-葡聚糖提取率13.8%;蛋白质提取率13.2%。     

碱性电解水耦合酶提取茶渣蛋白工艺优化

茶渣蛋白具有很好的抗氧化活性,本文以茶渣为原料,研究了碱性电解水耦合酶提取茶渣蛋白的工艺。在单因素实验的基础上,采用正交实验设计优化了碱性电解水提取茶渣蛋白工艺,并优化碱性蛋白酶耦合碱性电解水提取茶渣蛋白工艺。正交结果表明,碱性电解水提取的最佳条件为:pH12.5,提取温度120 ℃,液固比40:1 (mL/g),提取时间40 min,茶渣蛋白提取率为48.3%。耦合酶提取结果表明:碱性蛋白酶添加量为2500 IU/g茶渣,酶解pH为9,酶解时间32 h,茶渣蛋白提取率提高至83%,较单一碱性电解水提取提高34.7%,同时蛋白质总抗氧化能力较高。本研究结果为茶渣的综合利用及蛋白资源的有效开发提供了一定的理论依据。     

富硒酵母的分离鉴定及富硒条件的优化

富硒酵母生产发酵食品是补充硒元素的有效方法,以实验室保存的酵母菌为材料,通过选择培养基平板稀释法,分离纯化得 到四株富硒酵母,经形态学和分子生物学鉴定,初步鉴定菌株Z4、Z5、Z7、Z9均为库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）。 通过对比四株菌 的生长曲线及富硒能力,发现Z5菌株生长状况最好,选取接种量、碳源（葡萄糖）和氮源（蛋白胨）添加量作为单一因素,通过单因素 试验和正交试验,探究各影响因素对菌株Z5富硒能力的影响。 结果表明,Z5菌株的最佳富硒发酵条件为接种量10%,葡萄糖2.4%,蛋 白胨1.8%。 在此最佳条件下,菌株Z5生物量为9.63 g/L,总硒含量可达到862 μg/g。     

发酵型富硒茶酒的研制

以富硒绿茶和脐橙果汁为主要原料,探究发酵型富硒茶酒的最佳加工工艺,拟开发一款兼具绿茶风味和果香味的营养保健型茶酒。在前人对糯米酒发酵条件研究的基础上,采用正交试验的方法探究酵母接种量、果汁添加量、茶水比和发酵时间最佳发酵条件。在此发酵条件下对酵母接种量、果汁添加量、茶水比进行单因素试验和正交优化试验,探讨其对富硒茶酒品质风味的影响,并对成品的各项质量指标进行检测。通过正交优化确定工艺参数:茶水比例1∶50(g/mL),果汁添加量10%,酵母菌接种量0.4%,发酵温度28℃,发酵时间6 d,加糖量19%。经测定,该配方所制得的富硒茶酒的理化指标为酒精度9.6%±0.5%vol、总糖度≤3.0 g/L、总酸度4.5±0.5 g/L、茶多酚含量704.6 mg/kg,卫生指标符合发酵酒国家安全标准。该参数条件下生产的富硒茶酒色泽橙黄明亮,口感清冽甘甜,酒味与茶味协调,有明显果香,冷藏后饮用更佳。     

响应面优化火龙果皮中水不溶性膳食纤维提取工艺

以火龙果皮为原料,采用酸碱结合法提取水不溶性膳食纤维(IDF),通过单因素实验和响应面分析,探讨Na OH质量分数、碱提时间、碱提温度、碱提液料比、酸提温度、酸提时间、酸提液料比七个因素对火龙果皮中水不溶性膳食纤维得率和纯度的影响,并对提取工艺条件进行优化。结果表明,酸碱结合法提取火龙果IDF的最佳工艺条件为Na OH质量分数4.3%、碱提温度46.5℃、碱提时间60 min、碱提液料比15∶1(m L/g)、酸提温度77.4℃、酸提时间1.5 h、酸提液料比15∶1(m L/g),在此工艺条件下,IDF得率30.29%,纯度达到94.78%,表明该工艺可行。      

花椰菜废弃茎叶中叶蛋白提取工艺的研究

为了充分利用花椰菜废弃物,以花椰菜废弃茎叶为原料,分别采用直接加热法、酸沉淀法、碱沉淀法、酸热沉淀法、碱热沉淀法、酸絮凝剂法提取叶蛋白,得到花椰菜废弃茎叶叶蛋白提取最佳方法为酸絮凝剂法。在此基础上设计了料水比、pH、壳聚糖添加量三个因素进行酸絮凝剂法实验,并在单因素的基础上进一步设计正交实验。正交实验结果表明,酸絮凝剂法的最佳工艺条件为:料水比1∶4(g/mL),pH4.0,壳聚糖添加量0.4g/L。在此工艺条件下叶蛋白得率为14.79%,提取率为39.01%。该研究确定了花椰菜废弃茎叶叶蛋白提取的最佳工艺,为花椰菜废弃物的开发和利用提供了科学依据。      

酶法水解富硒平菇蛋白工艺优化

研究碱性蛋白酶对富硒平菇蛋白的水解作用,并优化其工艺条件。以恩施产地的富硒平菇粉为原料,选取碱性蛋白酶进行试验,研究料液比、加酶量、温度、pH、水解时间五个因素对碱性蛋白酶水解富硒平菇蛋白的影响。以水解度和蛋白质溶出率为评价指标,在单因素试验的基础上进行正交试验,优化碱性蛋白酶水解富硒平菇的工艺条件。结果表明,酶法水解富硒平菇蛋白的最佳工艺条件为:料液比1:30,碱性蛋白酶添加量为4200 U/g,水解温度55 ℃,pH为10.5,水解反应时间为4 h。在此条件下,富硒平菇蛋白水解度可达到28.46%,蛋白质溶出率为82.85%,水解所得蛋白肽中硒含量为2739.78 μg/g。本研究确定了碱性蛋白酶水解富硒平菇蛋白工艺的最佳条件。     

多酶法提取高温菜籽粕中蛋白质的工艺及其优化

通过比较菜籽蛋白的各种提取方法,设计了以高温压榨菜籽粕为原料,采用多酶解法与碱提酸沉法相结合的新工艺提取菜籽粕蛋白质。在单因素试验的基础上,着重研究酶解过程,并用L9(34)正交优化试验得到了多酶酶解最佳工艺条件为:pH为9.0,温度为50℃,料液比为1∶10,多酶以α-淀粉酶+纤维素酶为宜,且加入量为α-淀粉酶90 U/g粕、纤维素酶45 U/g粕;在此最优条件下的验证实验所得蛋白质提取率为98.96%,菜籽蛋白产品的蛋白质含量为99.04%,产品为无特殊气味浅黄色的细晶粒和粉末固体。     

基于因素最少化的槟榔多酚错流提取条件研究

有效提高槟榔多酚提取率,采用多种溶剂体系进行提取,探讨最佳提取溶剂。根据错流浸取工艺理论设计了料液比与浸取级数,并在单因素试验的基础上进行正交优化设计,最终确定了槟榔中多酚提取的最佳工艺条件。结果表明,最佳提取剂为混合溶剂（甲醇∶丙酮∶水=1∶2∶2）（V∶V）,料液比为1:20（g:mL）,pH值为4.0,在70 ℃下提取100 min,提取次数为2,槟榔多酚提取率达到34.46 mg/g。