牛乳外泌体中miRNA的测序与分析

采用密度梯度离心法提取牛乳外泌体,利用Illumina测序技术对外泌体中非编码小RNA(sRNA)进行测序,探索牛乳microRNA(miRNA)的表达谱。对原始序列进行质量控制,共获得3 899 629条纯净sRNA序列,长度集中于28 nt,与数据库比对后鉴定到61种已知miRNA,346种新miRNA。基因本体论富集结果表明,牛乳外泌体miRNA在细胞过程、单一生物体过程、代谢过程等生物过程发挥作用;主要构成细胞、细胞器等组成;主要参与结合、催化活性、转运蛋白活性等分子功能。京都基因与基因组百科全书通路富集结果表明,已知miRNA与新miRNA靶基因均显著富集在百日咳（ko05133）、趋化因子信号通路（ko04062）、内吞作用（ko04144）、溶酶体（ko04142）等通路,牛乳外泌体miRNA在特定信号通路中发挥重要作用。     

2种不同牛乳外泌体提取方法的比较研究

目的比较研究2种不同的牛乳外泌体提取方法。方法分别采用超速离心法和蔗糖密度梯度离心法从牛乳中提取外泌体,利用透射电镜、动态光散射仪、纳米颗粒追踪仪、免疫印迹等技术对牛乳外泌体进行全面的鉴定表征。结果利用上述2种方法提取获得的牛乳外泌体呈现双层膜的杯托状结构,总体粒径分布在30～200 nm之间且外泌体中常见的特异标记蛋白CD9、CD81、TSG101均存在,不存在污染蛋白Calnexin。结论超速离心法与蔗糖密度梯度离心法均可从牛乳中提取获得结构完整的外泌体,与超速离心法相比,通过蔗糖密度梯度离心法可获取杂质较少、粒径分布更集中的牛乳外泌体,但该法耗时长、外泌体浓度较低。     

牛乳外泌体对动物双歧杆菌F1-3-2生长及益生特性的影响

采用超速离心法从牛乳中分离提取外泌体,通过免疫印迹法、纳米颗粒追踪技术、透射电镜对牛乳外泌体进行鉴定。评价了牛乳外泌体对动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)F1-3-2生长及益生特性的影响。结果表明,牛乳外泌体促进了动物双歧杆菌F1-3-2的生长,提高了其耐酸、耐胆盐等肠胃环境耐受性,增加了菌体的黏附性。此外,牛乳外泌体增强了动物双歧杆菌F1-3-2的抗炎特性,炎症因子TNF-α、IL-1β水平显著下调。该研究为牛乳外泌体作为新型益生元的应用开发奠定了基础。     

植物类外泌体样纳米颗粒特性、成分与功能研究进展

类外泌体样纳米颗粒(exosome-like nanoparticles, ELNs)是细胞所分泌的纳米级小泡,双层磷脂包围的囊泡状结构,携带独特的生物活性物质(如脂质、蛋白质、miRNAs和次级代谢物等)。植物ELNs因其特殊的结构和良好的生理活性,关于其展开的研究受到了广泛关注。文章综述了植物ELNs的分离方法、特性、组成成分及功能作用,重点阐述了多组学技术在植物ELNs中的应用,并对植物ELNs的深入研究提出了建议。     

乳源外泌体的研究进展

乳源外泌体是一种新发现的功能囊泡,直径大约在30~200 nm,为具有膜结构的小囊泡,由动物乳腺上皮细胞分泌。乳源外泌体含有许多蛋白质、脂质、核酸等生物活性物质。最近研究发现乳源外泌体具有介导细胞交流、促进细胞增殖、参与免疫反应等生物学功能,可通过离心、化学、免疫亲和等方法从乳中分离,并对其形态、大小、特异性物质进行鉴定。本文综述了乳源外泌体的生物学功能、分离及鉴定方法、蛋白组学、脂质组学、RNA组学研究,期望对乳源外泌体的研究与开发提供科学参考。     

乳源外泌体对微生物的作用

外泌体是纳米级(直径40~160 nm)的胞外囊泡,在细胞信号转导、免疫应答和抗原递呈过程中发挥作用,并存在于多种体液,包括血清、唾液、尿液、脑脊液和乳液等。乳外泌体携带蛋白质、miRNA等多种功能分子,很多与人体免疫功能相关。摄取乳液后,乳外泌体中的内容物可被人体肠道吸收,从而发挥健康作用。本文总结国内外有关乳源外泌体与微生物关系的研究报道以及本团队的研究成果,阐述外泌体的生物发生过程,主要组成成分,外泌体与病原微生物感染的关系以及乳外泌体对肠道微生物的作用,为研究乳外泌体对人体的营养和健康功效提供参考。     

乳源外泌体的提取及鉴定方法研究进展

乳外泌体是乳中纳米级的胞外囊泡,不仅能够作为药物载体,而且具有促进肠道发育、免疫调节等功能,在婴幼儿配方食品以及功能性食品开发方面具有极大的潜力。外泌体含量低是限制其广泛应用的瓶颈之一。目前,外泌体提取及鉴定的方法尚没有统一的标准,选择合适的乳外泌体提取、鉴定方法对后续的深入研究十分关键。据此,本文综述了目前乳外泌体的提取及鉴定方法,探讨了尚未应用于乳外泌体提取鉴定但理论可行的新方法,期望为乳外泌体的研究与开发提供理论参考。     

驴乳外泌体中miRNA的测序与分析

为探究驴乳外泌体中微小RNA(miRNA)的种类和功能性,利用Illumina测序技术对驴乳外泌体中非编码小RNA(sRNA)进行测序分析,鉴定其中的miRNA并以人乳外泌体miRNA作为对照组进行生物信息学分析。驴乳外泌体中sRNA在质量控制之后,长度主要分布在18～22 nt,在其中共鉴定到212个miRNA,其中包括16种已知miRNA和196种新miRNA。基因本体论富集分析发现,驴乳外泌体miRNA的功能性与人乳相似,构成细胞、细胞器等组分;具有结合和催化活性等功能;参与细胞代谢、生物调节等过程。京都基因与基因组百科全书通路富集分析发现,驴乳外泌体miRNA参与醛固酮的合成与分泌、Hedgehog信号、线粒体调节、癌症等通路。     

沙门氏菌感染肠上皮细胞外泌体宿主蛋白质组学分析

选用人肠上皮细胞Henle-407作为模型,经鼠伤寒沙门氏菌感染后提取其分泌的外泌体,利用Label?free相对定量蛋白质组学方法探究外泌体内宿主细胞蛋白质组的变化.结果表明,在鼠伤寒沙门氏菌感染或未感染的宿主细胞外泌体中共鉴定到宿主蛋白质2490种,其中包括321种差异表达蛋白.在该321种蛋白中,共有蛋白有7种,...     

不同泌乳期人乳外泌体miRNA表达谱的研究

采用超高速离心法从人乳中提取出囊泡结构物质,从粒径、形态和外秘体特异性标记蛋白3个方面来确定提取的物质为外泌体。采用高通量测序得到不同泌乳期外泌体中microRNA(miRNA)的表达谱。对表达谱进行分析,在人乳外泌体中共检出852种miRNA,有283种miRNA在早、中、晚3个泌乳期中均有所表达。其中,表达量排名前10位的miRNA占到总量的50%以上。在外泌体中高表达的miRNA(占总外泌体miRNA表达量2%以上的)并没有受到泌乳期的显著影响;而在外泌体中低表达的一些miRNA(占总外泌体miRNA表达量0.01%以下的)容易受到泌乳期的显著影响。此外,发现在人乳外泌体中有88种miRNA与炎症相关,其中有65种在不同泌乳期均稳定表达。综上,人乳外泌体可能具有调控炎症的功能,本研究为更好地研究不同泌乳期人乳外泌体生理功能提供基础数据。     

乳蛋白生物活性肽的研究概述

对源于乳蛋白的生物活性肽作一介绍,主要包括：阿片样肽,降血压肽,抗血栓肽及免疫促进肽等。这些活性肽的发现为今后进一步利用乳蛋白资源,生产功能食品基料或药品提供了一条新的途径。     

乳中生物活性物质的研究进展

哺乳动物的乳不仅营养物质丰富,而且含有激素、生长因子、酶、抗体和非抗体保护蛋白等多种生物活性物质,乳蛋白中蕴藏着大量生物活性肽。此外乳中还含有活细胞。这些生物活性物质对婴儿或新生幼仔的代谢、生长发育、免疫和抗菌等有非常重要的作用,有些生物活性物质参与乳腺的生长分化和保护。本文综述了乳源激素和生长因子、酶、抗体、非抗体保护蛋白以及生物活性肽等生物活性物质及其研究进展。     

乳蛋白源ACE抑制肽的研究进展

血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)在血压调节方面起着重要作用.目前已从乳蛋白质中分离出多种ACE抑制肽.本文综述了ACE抑制肽的降压原理、结构特点、分离提纯、活性检测方法和乳蛋白源ACE抑制肽的国内外最新研究进展,并对其应用前景进行了展望.     

牛乳中主要过敏原的分离纯化研究进展

牛乳中含有3 种主要的过敏原蛋白：酪蛋白、β- 乳球蛋白和α- 乳白蛋白。本文详细叙述沉淀法、离子交换层析法、凝胶过滤层析法、羟基磷灰石层析法、疏水相互作用层析法、高效液相色谱法以及膜技术等分离纯化技术在牛乳主要过敏原分离纯化中的研究进展。其中,离子交换层析与凝胶层析已被广泛使用,而沉淀法一般作为粗提纯过的步骤。羟基磷灰石层析与疏水相互作用层析法也较为常见,既可单独分离过敏原,又可与其他方法结合来分离过敏原。另外高效液相色谱法与膜技术则是进一步纯化的后续工作,以提高过敏原的纯度。     

羊奶酸奶的生物除膻研究进展

羊奶酸奶营养全面,其酪蛋白与乳清蛋白比例接近人乳,膻味不容易除去,但通过合适的乳酸菌来发酵羊奶酸奶,再利用乳酸菌来进行生物除膻可以达到良好的效果。该文系统的梳理了羊奶酸奶发酵所适合的乳酸菌并用乳酸菌进行生物除膻的研究进展,对羊奶酸奶所适合的乳酸菌种类及其生物除膻现有的研究进行评述和展望。     

食品来源的碳点合成特性及生物应用研究进展

碳点是一种新型碳纳米材料,因其优异的光学特性近年受到国内外学者的广泛关注。目前用于合成碳点的食品主要来自果蔬、动物、加工食品及食品废弃物等,具有取材方便、成本低廉的优势。通过水热合成法、微波辐射法、热解法等方法合成的食品来源碳点,具有粒径小、量子产率高、细胞毒性低等优点。研究发现食品来源合成的碳点在生物传感器、生物成像、药物传送等方面表现出巨大的应用潜力。该文将近年来不同来源的食品合成碳点的特性及其在生物方面的应用进行综述,为更加绿色、高效地利用食品来源合成碳点提供指导,并为其在生物领域的应用提供新思路。     

荷叶成分与生物学功能研究进展

荷叶是多年生挺水植物莲的叶片,具有特殊的质地、风味和功能成分,在食品、医药等领域应用广泛。该文对莲的种类、荷叶活性成分及生物学功能等方面研究进展以及在食品方面的应用进行综述,以期为相关领域的进一步研究提供参考依据。     

基于生物酶解法的牛乳蛋白脱敏技术研究进展

牛乳是婴幼儿主要食物蛋白来源,但也是引起食物过敏的八大类食物之一,研究生产低致敏乳制品对牛乳过敏者具有重要意义。目前,生物酶法是研发低致敏乳制品的主要技术途径。本文详细列举了牛乳过敏蛋白及其能够被识别的致敏表位,介绍了应用生物酶法处理得到低抗原性牛乳蛋白水解产物的技术及其作用效果,并提出了一些对后续研究的思考,为低致敏乳制品研究和未来实现定向水解提供理论依据。     

母乳的生物学功能研究进展

母乳中含有的营养物质、促生长因子、免疫因子和其他活性物质,对新生动物具有提供营养、促进生长、增强免疫力和调控微生物区系等重要作用。本文综述母乳中这些生物活性物质的含量以及它们所发挥的具体功能。同时通过比较母乳喂养和配方奶粉喂养的效果来探讨母乳特定的一种或几种活性因子的缺乏对新生动物的影响以及作用。现阶段,由于母乳中很多物质还未被人们所发现,因此其对机体的影响也无从得知,本文期望可以指导消费者树立正确的母乳喂养观念。